铜绿假单胞菌对不同抗菌药物的耐药性与碳青霉烯类抗菌药物使用的相关因素分析

目的:分析铜绿假单胞菌对不同抗菌药物的耐药性与碳青霉烯类抗菌药物使用的相关因素。方法:抽取2015年7月—2017年6月间收治的住院患者送检标本检验结果资料,统计其铜绿假单胞菌对不同抗菌药物的耐药率,以及其对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率及碳青霉烯类抗菌药物的使用量、DDDs,分析两者间的相关性。结果:2年间碳青霉烯类抗菌药物的使用量由2015年第3季度DDDs 421.88增至2017年第2季度DDDs788.75,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率也逐年增长,而对美罗培南的耐药率由14.36%增至34.70%,对亚胺培南的耐药率由19.88%增至41.18%;显示铜绿假单胞菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率与美罗培南、碳青霉烯类抗菌药物的使用量之间具有相关性。结论:各碳青霉烯类抗菌药物的使用量与铜绿假单胞菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率呈正相关。     

铜绿假单胞菌对16种抗菌药物的敏感性分析

［摘要］目的了解铜绿假单胞菌对抗菌药物的敏感性,为临床用药提供参考。方法使用16种抗菌药物对临床分离出的172株铜绿假单胞菌进行药敏试验。 结果敏感性最高的前3种药物是多粘菌素、美罗培南、亚胺培南。耐药性有增加趋势的是β 内酰胺类、喹诺酮类、碳青霉烯类药物等。结论应加强对铜绿假单胞菌耐药性的监测,建议联合用药;对碳青霉烯类抗菌药物应限制性使用,以减缓铜绿假单胞菌多重耐药菌株的产生。     

外排泵抑制剂对铜绿假单胞菌耐药性的影响

目的 了解不同外排泵抑制剂(EPIs)在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类、氟喹诺酮类抗菌药物耐药性的影响。方法 用琼脂对倍稀释法检测亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星与两种EPIs(PAβN与奥美拉唑)联合前后对铜绿假单胞菌的MICs值。结果 PAβN浓度为40μg/mL时,能明显增强碳青霉烯类对铜绿假单胞菌的抗菌活性,PAβN浓度为20μg/mL时,即能明显增强氟喹诺酮类对铜绿假单胞菌的抗菌活性。奥美拉唑20μg/mL时,对碳青霉烯类、氟喹诺酮类的抗菌活性影响均较小。结论 适当浓度的外排泵抑制剂对增强碳青霉烯类、氟喹诺酮类的抗菌活性具有增效作用。     

碳青霉烯类异质性耐药铜绿假单胞菌的耐药机制研究

摘要：目的 筛选铜绿假单胞菌临床分离株的碳青霉烯类异质性耐药菌株,并分析相关机制。方法 采用E-test纸条法、 群体分析法(PAP)法对30株铜绿假单胞菌临床分离株进行亚胺培南异质性耐药的初筛和复筛、肉汤微量稀释法测定异质性耐药菌 株对亚胺培南及其他药物的MIC值、全基因组测序分析碳青霉烯类异质性耐药菌株的可能耐药机制。结果 通过E-test纸条法和 PAP法鉴别筛选出8株亚胺培南异质性耐药铜绿假单胞菌,检测发现异质性耐药菌株对多黏菌素B、头孢他啶、美罗培南耐药率 较高,对环丙沙星等更敏感。全基因组测序分析发现碳青霉烯类异质性耐药铜绿假单胞菌无可确证的基因突变,但可能与延伸 因子P基因有关。     

舟山地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及感染危险因素分析

目的:为临床控制耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染提供参考依据。方法:选择2013年2月-2014年2月舟山地区3家三级医院感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌的患者114例,从其临床标本中分离出铜绿假单胞菌共计114株,分析菌株耐药特征及产碳青霉烯酶基因多样性;感染危险因素分析以同期住院的对亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌感染的101例患者作为对照组,通过单因素及Logistic多因素回归分析,探讨耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染的危险因素。结果:114株铜绿假单胞菌均对多黏菌素B敏感,对其他9种抗菌药物均有不同程度耐药;其产碳青霉烯酶基因携带情况以IMP、VIM基因为主。长时间住院、机械通气、之前使用过亚胺培南及早期联合应用抗菌药物是耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染危险因素。结论:舟山地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药现象较为严重,避免长时间住院、早期联合应用抗菌药物等可降低耐亚胺培南铜绿假单胞菌感染率。     

碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌体外抗菌行为比较

目的:比较不同碳青霉烯类药物对临床分离铜绿假单胞菌体外抗菌行为差异,包括体外抗菌活性以及细菌形态学改变.方法:采用纸片法和标准琼脂稀释法测定临床分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南、美洛培南、帕尼培南和头孢他啶的敏感性;电镜观察铜绿假单胞菌在不同浓度的亚胺培南、美洛培南、帕尼培南和头孢他啶中不同时间细菌形态变化.结果:14%的铜绿假单胞菌在美洛培南纸片周围呈"双环"抑菌形态;在MH培基中,帕尼培南的MIC值明显高于亚胺培南和美洛培南,但在MM培养基中,帕尼培南的MIC值是原来的1/8～1/2;亚胺培南和帕尼培南使铜绿假单胞菌细胞呈圆球形改变,头孢他啶使细菌伸长如丝状,低浓度美洛培南的细菌呈纺锤形改变.结论:帕尼培南体外抗菌作用受培养基种类影响大,MH培养基测定结果可能无法准确反映其抗菌活性;美洛培南杀菌作用不完全且诱导细菌呈纺垂体样改变,可能导致内毒素释放增加,影响临床严重感染的预后.     

五种碳青霉烯类抗生素对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的体外抗菌活性比较

目的 观察五种碳青霉烯类抗生素对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的体外抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法检测5种碳青霉烯类抗生素对55株铜绿假单胞菌、49株产ESBLs的大肠埃希菌的最低抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration,MIC).结果 对抗铜绿假单胞菌活性以美洛培南和比阿培南显示最佳,亚胺培南次之,帕尼培南逊于亚胺培南,厄他培南明显逊于其他四种碳青霉烯类抗生素.对产ESBLs的大肠埃希菌厄他培南的活性明显高于其他几种碳青霉烯类抗生素,而其他几种活性基本相当.结论 铜绿假单胞菌对五种碳青霉烯类抗生素耐药性均较高,而五种碳青霉烯类抗生素对产ESBLs的大肠埃希菌均敏感.     

湖北省部分三级医院铜绿假单胞菌耐药性变迁调查分析

目的 调查2002～2005年湖北地区铜绿假单胞菌的耐药性及流行趋势，为临床提供诊疗依据。方法 采用WHONET4,5软件对6 208株铜绿假单胞菌株的耐药率进行统计分析，所有菌株分离自湖北地区17所三级医院成人患者2002～2005年的各类临床标本。结果 4 a中湖北地区铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率总体持平或小幅度上升，2005年铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物亚胺培南和美罗培南耐药率分别为25%和23%，略低于中国CHINET细菌耐药性监测结果。结论 坚持细菌耐药性的监测与公示、合理使用抗菌药物，对控制耐药菌的传播与流行具有重要意义。     

基于多学科诊疗模式的我院肺结核患者碳青霉烯类药物使用管理

目的:为肺结核患者合理使用碳青霉烯类药物提供参考。方法:收集我院12576例住院的肺结核患者,采用多学科诊疗模式(MDT),从政策干预、技术支持和人员培训等方面对碳青霉烯类药物的使用进行管理。比较管理前(2016年3月-2017年3月)与管理后(2017年4月-2019年3月)患者平均住院天数、病死率、医院感染率、碳青霉烯类药物使用情况和耐药率;采用中断时间序列分析法(ITS)对管理前后碳青霉烯类药物使用率、用药频度(DDDs)、其DDDs占抗菌药物DDDs比例、其费用占抗菌药物费用比例进行分析;并对碳青霉烯类药物DDDs与医疗质量指标、耐该类药物的细菌检出率等进行Pearson相关性分析。结果:管理后,患者平均住院日、抗菌药物费用以及碳青霉烯类药物DDDs、该类药物费用占抗菌药物费用比例、该类药物DDDs占抗菌药物DDDs比例、该类药物使用率、部分细菌对该类药物的耐药率均较管理前显著下降(P<0.05)。ITS分析结果显示,管理后碳青霉烯类药物使用率、DDDs、其DDDs占抗菌药物DDDs比例、其费用占抗菌药物费用比例分别下降4.491%、220.276、6.535%、11.747%,差异均有统计学意义(P<0.05);与管理前比较,上述指标平均每月分别下降0.330%、17.625、0.308%、0.304%,其中碳青霉烯类药物使用率、DDDs下降趋势显著(P<0.05)。管理前,肺结核患者铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为21.80%,鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率均为4.60%;管理后,铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为13.00%,鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南的耐药率均为16.30%,管理前后差异均有统计学意义(P<0.05)。而肠杆菌科细菌的耐药率在管理前后差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,碳青霉烯类药物DDDs与患者平均住院日、抗菌药物费用均呈显著正相关(P<0.05);亚胺培南DDDs与铜绿假单胞菌耐药率呈显著正相关(P<0.05)。结论:MDT管理能有效规范肺结核患者的碳青霉烯类药物使用,并可缩短患者的住院时间,降低药物费用、DDDs及部分细菌的耐药率。     

五种碳青霉烯类抗生素对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的体外抗菌活性比较

目的观察五种碳青霉烯类抗生素对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的体外抗菌活性。方法采用琼脂稀释法检测5种碳青霉烯类抗生素对55株铜绿假单胞菌、49株产ESBLs的大肠埃希菌的最低抑菌浓度（minimalinhibitoryconcentration,MIC）。结果对抗铜绿假单胞菌活性以美洛培南和比阿培南显示最佳,亚胺培南次之,帕尼培南逊于亚胺培南,厄他培南明显逊于其他四种碳青霉烯类抗生素。对产ESBLs的大肠埃希菌厄他培南的活性明显高于其他几种碳青霉烯类抗生素,而其他几种活性基本相当。结论铜绿假单胞菌对五种碳青霉烯类抗生素耐药性均较高,而五种碳青霉烯类抗生素对产ESBLs的大肠埃希菌均敏感。     

多尼培南对铜绿假单胞菌生物被膜形成和群体感应系统的影响

目的：探究新型碳青霉烯类抗生素多尼培南（doripenem,DOR）对临床分离铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制作用,及对其群体感应系统相关基因LasR、RhlR、PqsA、PqsE、PqsR表达量的影响。方法：用结晶紫染色法测定30株临床分离铜绿假单胞菌形成生物被膜能力和多尼培南对生物被膜形成的抑制作用;微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最低抑制生物被膜浓度（minimal biofilm inhibitory concentration,MBIC）;活菌计数法绘制多尼培南对生物被膜内细菌的杀菌曲线;采用实时定量荧光PCR （real-time PCR）法测定多尼培南对群体感应（quorum-sensing,QS）系统相关基因表达量的影响。结果：30株铜绿假单胞菌中的29株（97%）形成生物被膜;多尼培南具有较强的抗铜绿假单胞菌浮游菌和生物被膜抑制活性,MICR为0.5～1μg·mL-1,MBICR为1～4μg·mL-1;显著下调LasR、RhlR、PqsA、PqsE、PqsR的表达量。结论：临床分离铜绿假单胞菌具有高生物被膜形成率,多尼培南对铜绿假单胞菌生物被膜具有抑制作用,可能与其下调QS系统相关基因有关。     

Antimicrobial activity of carbapenems and the combined effect with aminoglycoside against recent clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa

The carbapenem susceptibility of 32 strains of Pseudomonas aeruginosa recently isolated in Kakogawa municipal hospital was investigated. The MIC ranges of imipenem, panipenem, and meropenem were 0.25-16 mg/L, 0.5-16 mg/L, and < 0.03-4 mg/L, respectively, and meropenem showed the highest antipseudomonal activity among the three carbapenems tested. In the analysis based on the MIC interpretive standards established by NCCLS, the resistance rates of test strains for imipenem, panipenem, and meropenem were 6.3%, 15.6%, and 0%, respectively. We also investigated the in vitro combined effect of imipenem or meropenem with amikacin against another 20 isolates of P. aeruginosa by checkerboard titration assay. Antagonism (minimum FIC index > 2) was not observed in any combinations against all strains tested. Super-additive effects (minimum FIC index < 1) in the combination of imipenem and amikacin were observed in eight (40%) strains tested. In contrast, in the combination of meropenem and amikacin, super-additive effects were observed in 14 isolates (70%). These results suggested that meropenem is superior to imipenem in combined effect with amikacin against P. aeruginosa. In conclusion, meropenem showed higher antipseudomonal activities than other carbapenems tested in both conditions, alone and in combination with amikacin. With regard to the clinical efficacy and prevention of antibiotic resistance, meropenem monotherapy or combination therapy with aminoglycoside is the most superior treatment for pseudomonal infections, and the findings in this study suggest that meropenem is still clinically very useful.     

08-09年温州地区铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率的分析

目的 了解2008-2009年温州不同医院铜绿假单胞菌(PA)对碳青霉烯类抗生素的耐药性及其变迁,指导临床合理使用.方法 采集2008年-2009年病房临床分离PA共2851株,选择对亚胺培南(IMP)和美罗培南(MEM)进行药敏实验.碳青霉烯类抗生素进行药敏实验.结果 对IMP和MEM的2年总耐药率分别是39.71％...     

Effect of siliconized latex urinary catheters on the activity of carbapenems against Pseudomonas aeruginosa strains with defined mutations in ampC,oprD, and genes coding for efflux systems

The decreased activity of carbapenems against Pseudomonas aeruginosa in the presence of eluates from siliconized latex urinary catheters is related to the loss of OprD and the expression of a new outer membrane protein (OMP). To understand this phenomenon, the activity of carbapenems and quinolones against P. aeruginosa strains, some producing AmpC beta-lactamase (BL), OprD, MexA-MexB-OprM and MexE-MexF-OprN, were determined in Mueller-Hinton broth (MH) and in MH-containing eluates. OMP profiles and BL activities were also studied. Resistance to imipenem in P. aeruginosa grown in eluate is due to both the loss of OprD and expression of BL. For meropenem this phenomenon is related to both the loss of OprD and the integrity of MexA-MexB-OprM.     

Antimicrobial susceptibilities of organisms isolated from patients with urinary tract infections in 2002

Using the agar dilution method, the antibacterial activity of 18 antibiotics inclusive of 4 carbapenems were investigated against 101 strains of urinary pathogens isolated from patients with urinary tract infections who visited the Department of Urology at Kagoshima University Hospital, between January and December 2002. 4 strains of Staphylococcus aureus, 3 strains of Staphylococcus spp. (exclusive of S. aureus), 14 strains of Enterococcus faecalis, 3 strains of Enterococcus spp. (exclusive of E. faecalis), 41 strains of Escherichia coli, 21 strains of Enterobacteriaceae (exclusive of E. coli), 12 strains of Pseudomonas aeruginosa and 3 strains of glucose-nonfermentative Gram-negative rods (exclusive of P. aeruginosa) were examined. 1. Against clinical isolates of Gram-positive bacteria, vancomycin and teicoplanin were active. Additionally, arbekacin was active against S. aureus clinical isolates and ampicillin was active against E. faecalis clinical isolates. Carbapenems were active against clinical isolates of Gram-positive bacteria, except for multi-drug resistant strains of Gram-positive bacteria, such as methicillin-resistant S. aureus. 2. As for clinical isolates of Gram-negative bacteria, meropenem was most active against Enterobacteriaceae among 13 antibiotics tested. Against P. aeruginosa clinical isolates, MIC90 of meropenem was the lowest among 13 antibiotics tested. In addition, resistant rate of meropenem and biapenem against P. aeruginosa clinical isolates was lower than those of the other carbapenems tested. 3. As main urinary pathogens showed no remarkable increase in resistance to carbapenems, it can be stated that carbapenems retain their position as the drug of first choice for severe infection.     

2种培养基对碳青霉烯类药物抗非发酵菌体外药敏检测结果的影响

目的：评估低氨基酸培养基和MH培养基对碳青霉烯类药物抗非发酵菌体外药敏检测结果的区别。方法：采用琼脂稀释法分别使用MH和低氨基酸培养基测定亚胺培南、美罗培南、帕尼培南等10种抗菌药物对我院临床分离60株铜绿假单胞菌和140株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）,比较其结果的差异。结果：使用MH琼脂作为药敏培养基时,60株铜绿假单胞菌和140株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南和帕尼培南的敏感率分别为90%、85%和68.3%和15.7%、23.6%和15%;使用低氨基酸琼脂作为药敏培养基时,它们的敏感性分别上升到100%（P=0.272）、96.7%（P=0.053）、93.3%（P=0.001）和90.7%（P=0.001）、98.6%（P=0.001）和91.4%（P=0.001）,其中铜绿假单胞菌对帕尼培南的敏感率上升有显著差异,而鲍曼不动杆菌对三者的敏感率上升均有显著差异。结论：我院分离的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率较高。碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的抗菌活性高于其它类抗菌药物。低氨基酸培养基,由于其碱性氨基酸浓度降低至与人血清中相近的浓度,适宜用于帕尼培南体外敏感性测定。     

Effect of shear stress on growth, adhesion and biofilm formation of Pseudomonas aeruginosa with antibiotic-induced morphological changes

The aim of this study was to investigate the effect of shear stress and antibiotic-induced morphological changes on the growth, adhesion and biofilm formation ability of Pseudomonas aeruginosa. A modified microtitre plate assay was used to quantify adhesion, biofilm formation and planktonic culture density of P. aeruginosa ATCC 27853 under the effect of 0.5x minimal inhibitory concentrations (MICs) of piperacillin/tazobactam, imipenem and meropenem. Hydrodynamic conditions were achieved by orbital shaking at 250 rpm with the presence of a glass bead in each microtitre well. These conditions decreased adhesion and biofilm formation abilities, increased planktonic culture density over 1h and decreased planktonic culture density over 16 h for bacteria with antibiotic-induced morphological changes in comparison with static conditions. Our results demonstrate the importance of using a high-throughput dynamic model to assess the adhesion and biofilm formation behaviour of P. aeruginosa with antibiotic-induced morphological changes and suggest the possible use of sub-MIC antibiotics in clinical applications to prevent infections acquired by haematogenous spread. This dynamic model provides a better simulation of in vivo conditions of adhesion and biofilm formation of P. aeruginosa with altered morphologies induced by beta-lactam antibiotics.     

Antimicrobial activities of carbapenems and fourth generation cephems against clinically isolated strains]

We determined the antibacterial activities of 4 carbapenems (imipenem, panipenem, meropenem and biapenem) and 2 forth generation cephems (cefozopran and cefepime) against 850 bacterial strains (18 species) isolated during the period from January 1998 through September 2000. The 4 carbapenems showed excellent antibacterial activities against methicillin-susceptible S. aureus (MSSA), S. pneumoniae, E. faecalis, P. aeruginosa, M. (B). catarrhalis, B. fragilis and Peptostreptococcus spp. as compared with the cephems except the activity of panipenem against P. aeruginosa. Meropenem showed the highest antibacterial activity against 10 species of all Gram-negative strains determined. The antibacterial activities of 2 forth generation cephems against 6 species of Enterobacteriaceae were equal to or higher than those of carbapenems except meropenem. All drugs showed low antibacterial activities against methicillin-resistant S. aureus (MRSA).     

定量分析铜绿假单胞菌第一类整合酶基因的表达

目的整合于是具有整合和表达外来耐药性基因盒能力的基因元件。在细菌耐药性基因的积累和传递中起重要作用。本研究通过定量分析第一类整合子整合酶基因（intI1）在细菌不同生存状态的表达水平，探讨整合子的作用机制。方法培养和提取两株第一类整合子阳性铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌、被膜脱落菌等三种生长状态的总RNA，采用竞争RT-PCR方法定量检测菌体在以上三种状态下intI1 mRNA的表达水平。结果铜绿假单胞菌的液相培养菌、生物被膜菌和被膜脱落菌都有intI1 mRNA表达；两株菌在三种状态下intI1 mRNA的表达量不同，其中生物被膜菌表达最高，被膜脱落菌次之，液相培养菌最低；生物被膜菌intI1 mRNA的量较液相培养物高约15倍，较被膜脱落菌高约4倍。结论铜绿假单胞菌intI1在生物被膜中mRNA表达上调，随着菌体从被膜脱落以及菌体持续的液相培养intI1表达下调。提示整合子在生物被膜菌中可进行活跃的基因盒的捕获、移动和积累。有利于细菌耐药性的提高及扩散。     

单宁酸联合氟康唑抑制金黄色葡萄球菌与白念珠菌混合生物膜的作用及机制研究

摘要：目的 分析单宁酸联合氟康唑降低金黄色葡萄球菌与白念珠菌混合生物膜的作用及其机制。方法 收集2019年临床 分离的3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),分别命名为SA1,SA2和SA3;利用分光光度法检测单宁酸单独或联合氟康唑对 金黄色葡萄球菌与白念珠菌DAY185混合菌群生长能力的影响,进一步采用结晶紫染色法测定对混合生物膜形成能力的影响; 扫描电子显微镜观察单宁酸联合氟康唑对混合生物膜结构影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测白念珠菌DAY185生物膜形成 相关基因(ALS1、ALS3和RBT1)和SA1生物膜形成相关基因(icaA、sarA和cidA)的表达量变化。结果 单宁酸可以降低金黄色葡萄 球菌与白念珠菌混合菌群的生长能力和混合生物膜形成能力,当联合氟康唑时抑制作用更加明显;扫描电子显微镜显示单宁酸 联合氟康唑可以明显减少金黄色葡萄球菌在白念珠菌菌丝上的黏附;qRT-PCR结果表明：单宁酸联合氟康唑主要可以降低混合 生物膜中白念珠菌ALS3基因(P＜0.05)和金黄色葡萄球菌icaA和sarA基因(P＜0.05)的表达量。结论 单宁酸联合氟康唑可以降低 金黄色葡萄球菌与白念珠菌混合生物膜的形成,其机制主要通过降低白念珠菌菌丝形成相关基因ALS3和金黄色葡萄球菌黏附相 关基因icaA和sarA的表达水平。