吉西他滨耐药胰腺癌细胞系的耐药机制

目的探讨吉西他滨耐药胰腺癌细胞系的耐药机制。方法应用免疫组织化学方法和逆转录PCR法（RT—PCR）,对吉西他滨耐药细胞系的耐药机制进行了研究。选用沙尔威辛（SAL）进行逆转耐药实验,采用了RT—PCR法、流式细胞仪和MTT法,评估SAL逆转耐药的效果。结果免疫组织化学法显示,耐药细胞SW1990-GEM的P-糖蛋白（P—gP）表达为弱阳性,其亲本细胞SW1990为阴性。多药耐药相关蛋白（MRP）在两细胞系表达均为阴性。SW1990-GEM的多药耐药基因（mdr-1）在mRNA水平上的转录比其亲本细胞系SW1990增强;脱氧胞苷激酶（dCK）基因的转录减少;核苷酸还原酶（RR）基因的转录增强。经过SAL作用后,mdr-1在mRNA水平上的转录减少。流式细胞仪显示,经过4,30,60,90nmol／LSAL作用后,细胞内罗丹明123的蓄积累分别增加1．04,1．16,1．39,1．72倍。用4nmol／LSAL进行逆转吉西他滨耐药实验,未接受SAL处理的对照组对吉西他滨的IC50为203．72μmol／L;经SAL作用1h后再加吉西他滨组的IC50为121．36μmol／L（P=0．219）;经SAL作用24h后再加吉西他滨组的IC59为121．64μmol／L（P=0．167）。结论胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的原因与dCK减少有关,同时也与mdr-1和RR升高相关。SAL能够下调SW1990-GEM耐药细胞的mdr-1和P—gP表达,但低浓度的SAL不能逆转SW1990-GEM对吉西他滨的耐药。     

乌苏酸联合吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响

目的: 探讨乌苏酸联合吉西他滨对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。 方法: 以乌苏酸、吉西他滨单独用药作 用于体外培养的胰腺癌细胞PANC-1细胞,采用细MTT法检测细胞半抑制浓度（IC 50 ）,确定药物给药浓度;以乌苏酸(2 μ mol/L) 、 吉西他滨(0.2 μ mol/L)单独及联合作用于PANC-1细胞,采用锥虫蓝染色法检测PANC-1细胞存活率,PI染色后PANC-1细胞中检 测细胞凋亡,采用细胞划痕实验检测PANC-1细胞迁移和伤口愈合情况,采用Western blotting检测对照组、乌苏酸组与吉西他滨 组单独及联合用药组细胞中P-JNK、Bcl-2、IL-6、P-Stat 3、NF-κB和Cox-2蛋白的表达。 结果: 乌苏酸和吉西他滨对胰腺癌 PANC-1细胞均有较强的抑制作用,其IC 50 分别是13.67和2.78 μ mol/L,据此选择它们的实验浓度分别为2和0.2 μ mol/L。两者联 合用药比分别单独用药能更显著抑制癌细胞的增殖活性[(46.47±5.07)% vs (78.38±8.65)%、(76.12±3.23)%,均P<0.05],能更明显 诱导癌细胞凋亡[(39.78±7.01)% vs (20.35±8.51)%、(20.35±8.51)%,均P<0.01]和抑制细胞迁移能力（P<0.01）,同时更显著抑制凋亡 相关蛋白Bcl-2、IL-6的表达及促进P-JNK的表达。 结论: 乌苏酸和吉西他滨协同增强抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖和迁移以 及促凋亡作用,其机制可能与抑制Bcl-2、IL-6、P-Stat 3和促进P-JNK蛋白表达有关。     

吉西他滨对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的:探讨吉西他滨对肝癌HepG2细胞株增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法:MTT法测定吉西他滨不同浓度和时间作用后肝癌HepG2细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测吉西他滨作用HepG2细胞后细胞周期分布及凋亡情况;免疫细胞化学法、Western blot法分别检测吉西他滨作用后细胞凋亡相关因子Survivin及Bcl-2的表达. 结果:在0.3715-5mg/L 浓度范围内,吉西他滨对HepG2的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性;0.3715mg/L的吉西他滨可导致HepG2细胞G0/G1期阻滞,并引起细胞凋亡;免疫细胞化学和Western blot的结果显示吉西他滨作用后Survivin和Bcl-2的表达下调. 结论: 吉西他滨可抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡,其诱导凋亡的机制与Survivin和Bcl-2的表达下调有关.     

PDCD4促进吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究程序性细胞死亡因子4（programmed cell death 4,PDCD4）在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用。方法:用吉西他滨处理胰腺癌细胞PANC-1,荧光定量PCR和Western blot分别检测胰腺癌细胞中PDCD4的表达变化。PANC-1细胞感染PDCD4-pGC-Fu-GFP重组慢病毒和对照pGC-Fu-GFP重组慢病毒,荧光定量PCR和Western blot检测过表达效果。用吉西他滨处理过表达PDCD4的PANC-1细胞,MTT测定细胞增殖,克隆形成实验测定细胞克隆能力,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测细胞中剪切的Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、剪切的Caspase-9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平和胞浆、线粒体中细胞色素C（Cytochrome C）蛋白水平。结果:吉西他滨处理后的PANC-1细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平均明显升高。吉西他滨处理和过表达PDCD4的PANC-1细胞增殖、克隆形成能力明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平升高,胞浆中Cytochrome C蛋白水平也升高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平降低。吉西他滨处理过表达PDCD4的PANC-1细胞增殖能力、克隆形成能力降低更多,细胞凋亡率更高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平也更高,胞浆中Cytochrome C蛋白水平更高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平更低。结论:吉西他滨通过上调PDCD4表达水平激活线粒体途径诱导胰腺癌细胞凋亡。     

吉西他滨缓释微球间质化疗治疗胰腺癌的实验研究

目的 研究(聚乳酸-乙醇酸共聚物)PLGA-吉西他滨(GEM)缓释微球间质化疗应用于胰腺癌的治疗效果.方法 将80只胰腺癌荷瘤鼠随机分为8组,每组10只.A1、A2、A3组瘤内注射PLGA-GEM缓释微球,给药剂量分别为5mg/kg、2.5mg/kg和1.25mg/kg;B组瘤内注射GEM(5mg/kg)对照;C组腹腔内注射GEM 5mg/kg;D 组瘤内注射PLGA-5-Fu缓释微球5mg/kg;E组为PLGA载体5mg/kg对照;F组不接受任何治疗.于给药前、给药后4、8、12、16、20、24天观察裸鼠生存状况、称体重、测量肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线;24天时处死动物,称瘤重,计算抑瘤率;行免疫组化染色,了解VEGF表达情况.结果 PLGA-GEM缓释微球瘤内给药高、中剂量组(A1、A2组)抑瘤率分别达到了66%和40%,与其他组相比结果 具有统计学差异(P＜0.05);随着PLGA-GEM 缓释微球剂量的增加,VEGF表达降低,A1、A2组与F组相比,结果 具有统计学差异(P＜0.05).各组体重在治疗后各观察点与治疗前比较,没有统计学差异.结论 PLGA-GEM缓释微球能有效抑制胰腺癌移植瘤的VEGF表达,能显著抑制肿瘤的生长,且无明显的毒副作用,该制剂具有一定的潜在临床应用价值.     

Survivin参与胰腺癌PaTu8988细胞对吉西他滨的耐药

目的:探讨凋亡抑制蛋白survivin在胰腺癌细胞株PaTu8988中的表达,及其与吉西他滨(gemcitabine,GEM)耐药的关系。方法:MTT法检测GEM(0.01、0.1、1.0、2.5、5.0、10.0μg/ml)对PaTu8988细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测GEM作用后PaTu8988细胞的凋亡率,RT-PCR检测survivin mRNA在PaTu8988细胞中的表达。结果:高质量浓度GEM(≥1.0μg/ml)可显著抑制PaTu8988细胞的增殖、促进PaTu8988细胞的凋亡;而低质量浓度GEM(0.01、0.1μg/ml)作用不明显。低质量浓度GEM时间依赖性地上调PaTu8988细胞中survivin mRNA的表达;而质量高浓度GEM作用PaTu8988细胞后,sur-vivin mRNA的表达48 h时逐渐下降,而后逐渐上升。结论:胰腺癌PaTu8988细胞中survivin mRNA高表达,可能是其对GEM产生耐药的原因之一。     

缺氧状态下人胰腺癌细胞对吉西他滨反应的实验研究

目的:观察缺氧状态对人胰腺癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响并分析其相关机制。方法:将人胰腺癌细胞SW1990分为常氧组、缺氧组、常氧+吉西他滨组和缺氧+吉西他滨组。MMT法检测各组细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡、Real-time PCR和Western blot分别检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、多药耐药基因(MDR-1)mRNA和蛋白的表达。结果:与常氧+吉西他滨组相比,低氧+吉西他滨组的细胞增殖率明显增加,细胞凋亡率显著下降(P<0.05);低氧组和低氧+吉西他滨组HIF-1α蛋白表达分别显著高于常氧组(P<0.05或P<0.01);与常氧组相比,低氧组和低氧+吉西他滨组的MDR1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:缺氧状态可增加人胰腺癌细胞SW1990对吉西他滨的化疗抵抗,其机制与缺氧环境可诱导HIF-1α和MDR1基因表达有关。     

吉西他滨缓释微球急性毒性实验研究

目的 了解乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)-吉西他滨缓释微球和吉西他滨小鼠皮下给药的急性毒性.方法 采用上下增减剂量法(UDP)分别测定PLGA-吉西他滨缓释微球和吉西他滨小鼠皮下给药对动物的半数致死量(LD50).结果 PLGA-吉西他滨缓释微球皮下给药的小鼠LD50为256.30 mg/kg,吉西他滨小鼠皮下给药时为8.91 mg/kg,相差达28.8倍.结论 PLGA-吉西他滨缓释微球能够显著降低化疗药物对动物的急性毒性.     

siRNA干扰S100A4对人胰腺癌细胞增殖和凋亡及其对吉西他滨敏感性影响的研究

目的 观察利用小干扰RNA（siRNA）手段下调人胰腺癌BxPC-3、AsPC-1细胞中S100A4表达后对细胞凋亡、增殖、吉西他滨化疗敏感性的影响。方法 设计合成针对S100A4特异的siRNA转染人胰腺癌BxPC-3、AsPC-1细胞,以RT_PCR检测转染前后S100A4蛋白表达变化;转染前后BxPC-3细胞生长曲线检测BxPC-3、AsPC-1细胞增殖能力;TUNEL法检测转染前后细胞凋亡变化;MTT检测不同浓度吉西他滨对胰腺癌细胞半数抑制浓度（IC50）。结果：RT_PCR结果显示BxPC-3、AsPC-1细胞转染SlOOA4siRNA48h后,S100A4mRNA表达明显下调;S100A4siRNA转染后BxPC～3、AsPC一1细胞增殖下降;TUNEL结果显示转染后凋亡明显增加;MTT结果显示,BxPC-3细胞对照组吉西他滨IC5。为（9．95士0．34）mmo[／L;阴性转染组吉西他滨IC50为（9．641±0．434）mmoI／L;干扰组吉西他滨IC。o为（1．182±0．175）gmol／L;AsPC一1细胞对照组吉西他滨IC50（64．15±3．41）mmol／L;阴性转染组吉西他滨IC50为（65．19±4．4）mmol／L;干扰组吉西他滨IC50为（1．962±0．113）mmol／L,P〈0．05。结论：S100A4沉默后抑制胰腺癌细胞增殖、促进凋亡并提高吉西他滨化疗敏感性,提示S100A4可能是治疗胰腺癌的有效靶点。     

TRAIL联合吉西他滨对肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察吉西他滨(gemcitabine)联合TNF相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对人肺癌细胞NCI-H460增殖和凋亡的影响。方法:MTT法检测NCI-H460细胞的增殖,流式细胞术检测NCI-H460细胞的凋亡。结果:吉西他滨和TRAIL单用或联用均可浓度(0.001~10μg/ml)和时间(24、48、72 h)依赖性抑制NCI-H460细胞的增殖,两药联用比单用时抑制率更高,3组药物作用72 h时对肿瘤的抑制率分别为14.9%~77.5%、23.4%~74.8%、22.3%~80.5%;作用72 h时两药单用和联用对细胞增殖抑制的IC50分别为0.085 3、0.098 2、0.043 5μg/ml。两药联用对NCI-H460细胞增殖的抑制效果还与用药顺序以及两药比例有关,吉西他滨作用24 h后再加TRAIL比TRAIL作用24 h后再加吉西他滨对NCI-H460的抑制效果更好,吉西他滨与TRAIL联用的比例为1∶0.3时对NCI-H460细胞增殖的抑制率最大。吉西他滨和TRAIL联用时NCI-H460细胞的凋亡率显著高于两药单用的凋亡率(49.04%vs29.33%、25.69%,P<0.01)。结论:吉西他滨与TRAIL联用可协同抑制肺癌细胞NCI-H460的增殖、促进细胞凋亡。     

三苯氧胺对乳腺癌细胞凋亡和耐药性的影响

目的　观察雌激素 (E2 )及三苯氧胺 (tamoxifen ,TAM)对乳腺癌MCF 7细胞凋亡调控基因 (bax、bcl 2 )及多药耐药基因 (mdr 1)的影响。方法　利用免疫组化法及原位杂交法检测MCF 7细胞在E2 和TAM作用后bax、bcl 2及mdr 1基因的变化。结果　E2 可以明显刺激bcl 2和mdr 1基因表达 ,而TAM则可使其降低。首次利用人工合成的bax寡聚脱氧核苷酸探针 ,对肿瘤细胞内baxmRNA进行原位杂交 ,显示baxmRNA可被E2 下调 ,但在TAM作用下明显升高。相关性分析显示 ,bcl 2和mdr 1基因之间在TAM作用后有相关性 (r=0 6 ,P <0 0 5 )。结论　TAM在乳癌内分泌治疗中不仅可调节肿瘤细胞凋亡 ,也可降低肿瘤细胞耐药性 ,抗凋亡基因bcl 2和多药耐药性之间有密切的功能联系 ,对其深入研究将有助于肿瘤内分泌治疗的进展。     

miRNA与乳腺癌发生发展和多药耐药的研究现状

目的:总结近期国内外有关微小RNA(miRNA)在乳腺癌发生发展和多药耐药中作用的研究进展。方法:应用Pubmed和CNKI期刊全文数据库检索系统,以"miRNA、乳腺癌耐药和耐药相关蛋白"为关键词,检索2008-01-2011-03有关miRNA在乳腺癌发生发展和多药耐药中作用的文献。纳入标准:1)miR-NA在乳腺癌发生发展中的作用。2)miRNA通过调控耐药蛋白表达参与乳腺癌多药耐药。根据纳入标准分析33篇文献。结果:多种miRNA与乳腺癌的发生发展及侵袭转移和复发密切相关。其中,能够促进乳腺癌侵袭转移的miRNA少有报道,目前仅有miR-373和miR-21。多种miRNA能够抑制乳腺癌侵袭转移,如:miR-340、miR-1258、miR-520b、miR-206、miR-19、miR-34和miR-199a/b。此外,多种miRNA参与乳腺癌多药耐药的形成过程。其中,miR-519c、miR-328和miR-520h3种miRNA可调控乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达,miRNA-451可调控P糖蛋白(P-gp)表达,miR-326可调控多药耐药相关蛋白(MRP)表达从而参与乳腺癌多药耐药。结论:深入研究miRNA在乳腺癌发生及多药耐药中的作用将为乳腺癌的治疗提供新的有效靶点。     

GSK1838705A对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究胰岛素样生长因子1受体抑制剂GSK1838705A对人胰腺癌细胞的抗肿瘤作用.方法:Cell Counting Kit-8(CCK-8)方法检测不同浓度GSK1838705A对胰腺癌CAPAN-2细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测GSK1838705A对CAPAN-2细胞凋亡的影响;Western blot方法检测GSK1838705A作用于胰腺癌CAPAN-2细胞后Bax和Cytochrome C蛋白表达水平的变化;划痕试验观察GSK1838705A处理CAPAN-2细胞后对细胞生长及迁移的影响.结果:CCK-8检测结果表明不同浓度GSK1838705A能够不同程度抑制胰腺癌CAPAN-2细胞的增殖,当药物浓度达10 μmol/L时,其抑制率可达98.29％;流式结果显示,GSK1838705A可诱导CAPAN-2细胞发生凋亡,随着GSK1838705A浓度的增加,诱导凋亡作用增强;Western blot结果显示,Bax和Cytochrome C蛋白表达水平升高;划痕试验结果表明,不同浓度GSK1838705A能够不同程度抑制CAPAN-2细胞的增殖和迁移.结论:胰岛素样生长因子1受体抑制剂GSK1838705A在体外可显著抑制胰腺癌CAPAN-2细胞的增殖,诱导细胞凋亡并抑制细胞迁移,在胰腺癌细胞中发挥着显著的抗肿瘤作用.     

表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响

目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过Lipofectamine^TM2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出能有效抑制EphB2蛋白表达的干扰序列。构建含有效序列的慢病毒载体pLentiGFP-EphB2,感染CFPAC-1细胞,筛选出稳定干扰EphB2蛋白表达的CFPAC-1细胞系。定量PCR、Western blotting检测CFPAC-1细胞中EphB2mRNA和蛋白的表达,CCK8法和流式细胞术检测EphB2下调对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响。结果:成功构建了EphB2慢病毒干扰载体pLentiGFP-EphB2,获得稳定转染pLentiGFP-EphB2的CFPAC-1细胞（CFPAC-1 EphB2 RNAi）。CFPAC-1EphB2 RNAi细胞中EphB2 mRNA和蛋白表达较空载体组显著降低,EphB2 mRNA的沉默效率为63%。与空载体组和未转染组相比,pLentiGFP-EphB2感染显著促进CFPAC-1细胞的增殖（1.89±0.17vs1.63±0.13、1.71±0.22,P<0.05）,抑制细胞的凋亡[（7.02±1.27）%vs（13.37±1.89）%、（15.71±2.35）%,P<0.05]。结论:pLentiGFP-EphB2可有效下调胰腺癌CFPAC-1细胞中EphB2的表达,促进CFPAC-1细胞增殖和抑制其凋亡。     

siRNA沉默EphB2表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响

目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过LipofectamineTM2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出能有效抑制EphB2蛋白表达的干扰序列.构建含有效序列的慢病毒载体pLentiGFP-EphB2,感染CFPAC-1细胞,筛选出稳定干扰EphB2蛋白表达的CFPAC-1细胞系.定量PCR、Western blotting检测CFPAC-1细胞中EphB2mRNA和蛋白的表达,CCK8法和流式细胞术检测EphB2下调对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.结果:成功构建了EphB2慢病毒干扰载体pLentiGFP-EphB2,获得稳定转染pLentiGFP-EphB2的CFPAC-1细胞(CFPAC-1 EphB2 RNAi).CFPAC-1EphB2 RNAi细胞中EphB2 mRNA和蛋白表达较空载体组显著降低,EphB2 mRNA的沉默效率为63％.与空载体组和未转染组相比,pLentiGFP-EphB2感染显著促进CFPAC-1细胞的增殖(1.89±0.17 vs l.63 ±0.13、1.71 ±0.22,P＜0.05),抑制细胞的凋亡[(7.02±1.27)％vs(13.37±1.89)％、(15.71±2.35)％,P＜0.05].结论:pLentiGFP-EphB2可有效下调胰腺癌CFPAC-1细胞中EphB2的表达,促进CFPAC-1细胞增殖和抑制其凋亡.     

Arsenic trioxide inhibits proliferation and induces apoptosis in pancreatic cancer cells

Because of the poor therapeutic responsiveness of pancreatic cancer patients, new chemotherapeutic agents for pancreatic cancer would be extremely beneficial. The effects of arsenic trioxide in pancreatic cancer have not been explored. To evaluate the anti-pancreatic cancer effects of arsenic trioxide, three human pancreatic cell lines, HPAF, MiaPaCa-2 and PANC-1, were tested. Arsenic trioxide caused dose- and time dependent inhibition of pancreatic cancer cell proliferation. In parallel with inhibition of cell proliferation, arsenic trioxide induced significant morphological changes, including shrunken cytoplasm, membrane blebbing, and nuclear condensation consistent with apoptosis. Propidium iodide DNA staining showed an increase of the sub-G0/G1 cell population. The DNA fragmentation induced by arsenic trioxide in these three cell lines was confirmed by the TUNEL assay. Furthermore, Western blotting analysis indicated that caspase-3 was activated following arsenic trioxide as measured by procaspase-3 cleavage and PARP cleavage. These findings show that arsenic trioxide has potent anti-proliferative effects on human pancreatic cancer cells with induction of apoptosis in vitro.     

Parthenolide induces proliferation inhibition and apoptosis of pancreatic cancer cells in vitro

Background

To explore the anti-tumor effects of parthenolide in human pancreatic cancer.

Methods

BxPC-3 cell, a human pancreatic cancer, was treated with parthenolide at different concentrations. The MTT assay was used to analyze cell viability. Flow cytometry and DNA fragmentation analysis were applied to evaluate apoptosis after parthenolide treatment. The wound closure and cell invasion assay were also employed in the study. Western blotting was used to demonstrate Bad, Bcl-2, Bax, caspase-9 and pro-caspase-3 expression.

Results

The MTT assay indicated that the pancreatic cancer growth could be dose-dependently inhibited by parthenoolide. This phenomenon was confirmed by flow cytometry and DNA fragmentation analysis. The wound closure assay and cell invasion assay showed that BxPC-3 cell was significantly suppressed by parthenolide at 7.5 μM and 15 μM. Western Blotting demonstrated the Bcl-2 and pro-caspase-3 were down-regulated while the Bax and caspase-9 were up-regulated. No alteration in Bad expression was found after treatment.

Conclusions

The parthenolide can inhibit the cell growth, migration, and induce the apoptosis in human pancreatic cancer. These findings may provide a novel approach for pancreatic cancer treatment.     

LRRK2在乳腺癌细胞增殖和耐药中的作用及其机制研究

目的:探讨LRRK2在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及耐药的作用和分子机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测了48例乳腺癌组织及其配对正常组织中LRRK2表达;并检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231、BT-483及阿...     

SKP2 confers resistance of pancreatic cancer cells towards TRAIL-induced apoptosis

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is characterized by a dismal prognosis and no effective conservative therapy exists. Although the F-box protein S-phase kinase associated protein 2 (SKP2) is highly expressed and regulates cell cycle progression in PDAC, alternative SKP2 functions in PDAC are unknown. Using RNA interference we now demonstrate that SKP2 confers resistance of a subset of PDAC cell lines towards the tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL), but not the topoisomerase II inhibitor etoposide. We observed accelerated cleavage of the BH3-only protein Bid and augmented downregulation of cFLIPL, XIAP and MCL1 upon treatment of SKP2-depleted MiaPaCa2 cells with TRAIL. Our data disclose a novel SKP2 function in PDAC cells and therefore define SKP2 as a molecular target.