干扰素-λ2对急性病毒性心肌炎小鼠凋亡相关蛋白的研究

目的：干扰素-λ（IFN-λ)广泛存在于人体各组织中,目前研究发现其具有抗病毒、抗肿瘤等作用。但其是否能用于治疗病毒性心肌炎尚缺乏相关报道。探讨IFN-λ2在病毒性心肌炎（VMC）早期的作用,为IFN-λ2 是否能应用于临床治疗或预防VMC提供实验室依据。方法：采用腹腔注射柯萨奇B3（CVB3）病毒的方法制造病毒性心肌炎小鼠模型。实验分3组：空白对照组、病毒组、IFN-λ2 治疗组。空白对照组给予腹腔注射等量的PBS培养液,记为第0天;IFN-λ2治疗组从第1天开始,连续5 d每天经背部皮肤不同点给予小鼠IFN-λ2 400 ng （0.1 mL）,空白对照组和病毒组则每天以同样方法给予等量生理盐水。死亡小鼠从组中剔除。9 d后处死所有存活小鼠。检测各组小鼠心脏的病理改变。采用免疫组织化学技术检测各组小鼠心脏组织中凋亡相关蛋白Bcl-2 及Bax的表达。结果：①病毒组心肌病理评分要高于空白对照组及IFN-λ2治疗组。 ②免疫组化结果显示正常心肌组织有少量Bcl-2及Bax的表达,病毒组较空白对照组Bcl-2表达减少、Bax表达明显增加(P<0.01);IFN-λ2治疗组较病毒组Bcl-2表达增加、Bax表达减少(P<0.01) 。结论：INF-λ2 能减轻柯萨奇病毒所致心肌炎小鼠的心肌病理改变,能抑制小鼠心肌细胞凋亡,对VMC小鼠的心肌细胞具有保护作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（4）：296-300］     

白细胞介素-17对足细胞相关分子和凋亡的影响及其分子机制研究

目的 研究白细胞介素(interleukin,IL)-17对足细胞相关分子及其凋亡的影响,并探讨可能的分子机制.方法 以体外培养的足细胞作为研究对象,流式细胞仪检测不同浓度(1、10、50、100nm/ml)和不同作用时间(12、24、48、72h)IL-17对足细胞凋亡的影响;将足细胞分为空白对照组及100ng/ml IL-17诱导组,Real-time RT PCR法检测IL-17对足细胞相关分子Nephrin、WT1、Synaptopodin及阴离子蛋白Podocylaxin、凋亡受体Fas和FasL mRNA表达的影响;流式细胞仪检测足细胞Fas和FasL蛋白的表达;免疫细胞化学法检测足细胞WT1、Caspase8、Caspase3蛋白的表达.结果 (1)IL-17可促进足细胞凋亡,呈时间、剂量依赖性;同时IL-17可增加足细胞凋亡受体Fas的表达(P<0.01),并且增加其下游分子Caspase8、Caspase3的表达(P<0.01);(2)IL-17减低足细胞阴离子蛋白Podocylaxin的表达(P<0.05),对Nephrin、WT1、Synaptopodin的表达无影响(P>0.05).结论 IL-17可能通过抑制足细胞阴离子蛋白Podocylaxin表达,引起足细胞凋亡的方式来发挥对肾脏的损伤作用.     

α-干扰素对血管瘤血管内皮细胞周期、凋亡的影响

目的 观察α-干扰素对体外培养血管瘤内皮细胞周期、凋亡的影响,探讨干扰素治疗血管瘤的机制.方法 用组织块法培养增生期血管瘤内皮细胞,分别用1×104U,1×105U,1×106Uα-干扰素干预,对照组不加任何药物,继续培养24h后,用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡变化.结果 α-干扰素作用24 h后血管瘤内皮细胞G1期前出现二倍体凋亡峰;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组G1期百分率分别为(63.68±0.66)%、(72.97±1.56)%、(63.27±5.64)%,对照组为(58.75±0.32)%,与对照组比较,P＜0.05;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组S期百分率分别为(32.99±2.01)%、(25.02±1.31)%、(37.93±5.31)%,对照组为(26.46±1.94)%,与对照组比较,P＞0.05;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组G2/M期百分率分别为(0.01±0.05)%、(2.43±0.27)%、(3.99±1.27)%,其百分率随α-干扰素浓度升高而增高.细胞凋亡百分率随α-干扰素浓度增加而增高,1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组凋亡百分率分别为(11.89±0.56)%、(18.88±3.04)%、(31.92±1.92)%,对照组凋亡率为(3.25±0.23)%,与对照组比较,P＜0.01.结论 α-干扰素能导致血管瘤血管内皮细胞G1、G2期阻滞和凋亡,细胞凋亡率与药物浓度存在剂量依赖关系.干扰素可能通过血管内皮细胞G1、G2期阻滞,抑制血管瘤血管内皮细胞的增殖、诱导血管内皮细胞凋亡而达到治疗血管瘤的作用.     

乙型肝炎病毒X蛋白对小鼠足细胞补体调节蛋白CD59和Crry表达的影响

目的 乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)所引起的膜性肾病与原发膜性肾病有所区别,其肾组织中攻膜复合物(C5b-9)阳性率显著低于原发膜性肾病,说明在乙型肝炎病毒相关性膜性肾病(HBV-MN)中补体的活动受到某种抑制,产生这种差异的机制尚不清楚.本研究旨在探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是否影响足细胞补体调节蛋白CD59和Crry表达,从而抑制补体活化.方法 培养的小鼠足细胞分为腺病毒载体乙型肝炎病毒X基因(Ad-HBx)转染组(Ad-X组)、空白足细胞组(B组)和腺病毒空载体转染组(Ad组),P38、PI-3K、ERK1/2通路抑制剂(SB203580,LY294002,U0126)及二甲基亚砜(DMSO)干预组分别标记为SB组、LY组、U0126组和DMSO组.RT-PCR和流式细胞术检测Ad-HBx转染对CD59和Crry基因和蛋白的表达,MTT法检测其对补体激活的影响;观察P38、PI-3K、ERK1/2通路抑制剂及DMSO对足细胞CD59和Crry表达的影响.结果 B组、Ad组和Ad-X组CD59表达率分别为(17.71±3.81)%、(18.29±3.36)%和(45.7±9.01)%;B组、Ad组和Ad-X组Crry蛋白表达率分别为(18.00±2.31)%、(21.78±2.01)%和(47.45±9.95)%,Ad-X组CD59和Crry蛋白表达率显著高于B组和Ad组(P值均＜0.005);Ad-X组CD59和Crry mRNA光密度明显强于B组和Ad组;SB组、LY组、U0126组和DMSO组CD59表达率分别为(17.35±1.24)%,(46.19±9.77)%,(43.03±6.83)%和(40.04±6.39)%;Crry蛋白表达率分别为(18.14±3.56)%,(31.95±1.68)%,(31.95±1.69)%和(37.14±3.92)%,与Ad-X组比较,SB组CD59和Crry蛋白表达率明显降低(P值均＜0.05),MTT法提示在各个血清稀释点上,Ad-X组细胞裂解抑制率均明显高于B组和Ad组(P值均＜0.05).结论 HBx可能通过活化P38MAPK通路上调小鼠足细胞CD59和Crry蛋白和基因的表达,抑制补体介导的足细胞裂解,这可能导致HBV在足细胞潜伏感染,不易被清除,从而在HBV-GN发生中发挥作用.     

急性白血病X连锁凋亡抑制蛋白的表达及意义

目的探讨儿童急性白血病(AL)X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达和XIAP mRNA水平及其临床意义。方法AL患儿49例,其中初诊未治26例,完全缓解(CR)23例。应用免疫组织化学方法检测其骨髓细胞XIAP表达,对其中24例患儿采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其骨髓单个核细胞XIAP mRNA表达水平。对照组分别为10例和8例非恶性血液病患儿。结果XIAP及其mRNA在初诊未治AL患儿骨髓中表达水平高于缓解期(Pa<0.05)和对照组(Pa<0.05),且缓解期仍高于对照组(Pa<0.05);初诊未治AL患儿骨髓XIAP及其mRNA水平在急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓系白血病(AML)组比较无显著性差异(Pa>0.05)。结论XIAP及其mRNA在儿童AL治疗前均呈高表达,提示XIAP可能通过抑制肿瘤细胞凋亡参与儿童AL发生发展。     

干扰素和黄芪对小鼠病毒性心肌炎TNF-α影响的研究

目的 研究病毒性心肌炎（VM）小鼠外周血肿瘤坏死因子仪（TNF-α）的动态变化以及干扰素、黄芪对其的影响,为临床应用干扰素、黄芪治疗病毒性心肌炎提供客观依据。方法 将小鼠随机分为正常对照组（A组）、病毒对照组（B组）、干扰素治疗组（C组）、黄芪治疗组（D组）。腹腔接种柯萨奇B3（CVB3）病毒液建立VM模型。在感染病毒24h后,C组腹腔注射干扰索1万U／（g·d）,D组用灌胃器喂服黄芪30mg／（g·d）。均连用5d;在接种病毒后第7、14、21天时留取血液、心肌标本。分别进行血清TNF-α及心肌病理检查。并分析TNFnd与心肌病理改变的关系。结果 VM小鼠TNF-α水平升高,并与心肌病理损害程度密切相关;干扰素和黄芪治疗VM,均可降低血清TNF—α水平。减轻心肌病理损害程度;干扰索对VM的治疗效果明显优于黄芪。结论 TNF—α参与了病毒性心肌炎的发生发展过程;通过降低血清TNF—α水平,调节免疫反应,可能是干扰索、黄芪治疗VM的作用机制之一。     

地塞米松对脑缺氧缺血新生大鼠细胞凋亡抑制蛋白1 mRNA及Caspase-3活性的影响

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后细胞凋亡抑制蛋白1（cIAP1）基因表达、Caspase-3活性的变化及地塞米松（DEX）对其影响，阐明DEX预处理对HIBD神经保护的可能机制。方法：7日龄SD大鼠24只，随机分成DEX组、9g／L盐水组（NS组）、HIBD组、健康对照组。DEX、NS、HIBD组大鼠采用Rice方法制备HIBD模型。DEX和NS组在缺氧缺血前12h腹腔内分别注射DEX、等量9g／L盐水。取HIBD动物模型实验侧大脑半球，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测cIAP1基因表达，比色法测定Caspase-3活性。结果：与健康对照组比较，HIBD组大鼠cIAP1基因表达明显下降（P〈O．01），Caspase-3活性明显上升（P〈0．01）。与HIBD组比较，DEX组cIAP1基因表达明显上升，而Caspase-3活性明显下降。结论：脑缺氧缺血可导致cIAP1基因表达下调，Caspaes-3活性升高。DEX能通过上调cIAP基因表达，抑制Caspase-3活性，抑制细胞凋亡，起到神经保护作用。     

9-顺式维甲酸协同γ-干扰素诱导神经母细胞瘤分化、凋亡及生长抑制的实验研究

目的 观察9-顺式维甲酸（9-cis retinoic acid，9-cis RA）联合γ干扰素（gammm interferon，γ-IFN）在体外诱导神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）SK-N-SH细胞分化、凋亡过程中细胞形态、周期的变化，探讨其协同作用的效果及其机制。方法 将细胞分为A（对照组）、B（9-cisRA用药组）、C（γ-IFN用药组）和D（9-cisRA和γ-IFN联合用药组）4组，在处理后适当的时间分别观察细胞形态学变化，进行分化神经节细胞计数，用Hoechst-PI荧光染色法观察细胞的凋亡和死亡，四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定NB细胞抑制率，流式细胞仪（flow cytometry，FCM）检测细胞周期分布及其凋亡和死亡。结果 联合用药组细胞形态学分化明显，神经节细胞分化率显著高于其他各组（P〈0．01）；MTT法测定显示联合用药能显著提高NB细胞抑制率并明显优于单独用药；Hoechst-PI荧光染色及FCM钙依赖性磷脂结合蛋白V和碘化丙啶（annexin V／PI）染色法检测一致显示联合用药对于诱导NB细胞早期凋亡和坏死具有显著的协同作用；FCM细胞周期动力学分析发现联合用药组C0-G1期细胞比率增加，S期细胞比率减少。结论 9-cisRA联合γ-IFN在体外对NB细胞的分化、凋亡和生长抑制能产生明显的协同作用，为其联合应用于临床提供理论依据和指导。     

三氧化二砷体内诱导人骨髓增生异常综合征荷瘤小鼠细胞凋亡机制的研究

目的 探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）单用或联合沙利度胺（Thalidomide,THAL）体内诱导人骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）荷瘤小鼠细胞凋亡的可能途径和机制。方法 用人MDS荷瘤小鼠模型作为实验动物,将48只荷瘤小鼠随机分为治疗组32只（ATO单用或联合THAL）和对照组16只。采用免疫组织化学（immunohistoehemistry,HIC）、Westernblot、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、电泳迁移率实验（electrophoretic mobility shiftassay,EMSA）等多参数方法,检测各组荷瘤组织凋亡相关蛋白和基因的表达水平。结果 治疗后2周,（1）IHC检测显示,与对照组比较,治疗组Bcl-2家族促凋亡蛋白Bax表达水平上调（F=1080．150,P＜0．01）;而抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下调（F=2777．978,P＜0．01）,Bax／Bcl-2比值上升。提示ATO诱导细胞凋亡与Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达及表达比有关。（2）Western-blot发现,治疗组线粒体促凋亡蛋白Smac／DIABLO和细胞色素C（IHC）的表达比对照组明显上调;半胱天冬酶（easpase）9、7、6、3及其下游底物聚ADP核糖聚合酶（PARP）蛋白全长被剪切,表达明显下调,可见easpase 9、7、6和PARP激活带表达。提示ATO能通过线粒体介导easpase依赖的途径诱导荷瘤细胞凋亡。（3）治疗组凋亡蛋白抑制因子cIAP蛋白（Western—blot）和SurvivinmRNA（RT-PCR）的表达比对照组明显下调。（4）EMSA实验显示,与对照组比较,治疗组核因子kappaB（NF—κB）活性表达显著下调;而IKB-α仅（NF—KB抑制子）蛋白表达明显上调（Western—blot）,提示ATO诱导荷瘤细胞凋亡涉及NF-κB信号途径。结论 ATO体内诱导人MDS荷瘤小鼠细胞凋亡至少通过两条重要的途径：一是线粒体介导-Caspase依赖途径;二是NF-κB信号途径,这两条途径相对独立,又在一定水平上相互关联。认为ATO体内诱导细胞凋亡过程复杂,是多条途径、多个水平、多个步骤和多种因子之间相互协调的网络效应,并非单一途径。实验为临床治疗MDS提供了新的思路。     

甘草甜素及地塞米松干预嘌呤霉素诱导足细胞损伤的体外研究

目的 观察甘草甜素(GL)及地塞米松(DEX)对受损足细胞凋亡的影响,探讨其细胞学作用机制.方法 建立嘌呤霉素(PAN)致足细胞损伤模型,应用不同水平PAN(12.5mg?L-1“、25.0mg?L-1、50.0 mg?L-1、75.0 mg?L-1、100.0 mg?L-1)作用于足细胞,培养48 h后检测细胞凋亡率,选取合适的PAN作用质量浓度.将体外培养小鼠足细胞(MPC5)分为对照组、PAN组、DEX1组、DEX2组、DEX3组、GL1组、GL2组、GL3组,对照组加入等体积RPMI 1640培养液培养;PAN组加入PAN,终质量浓度50 mg?L-1;DEXL、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50 mg?L-1)和DEX(终浓度分别为0.1μmol?L-1、1.0 μmol?L-1、10.0 mol?L-1);GL1、2、3组同时加入PAN(终质量浓度50.0 mg?L-1)和GL(终质量浓度分别为400 n1g?L-1、600 mg?L-1、800 mg?L-1),培养48 h.流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果 50.0 nmg?L-1 PAN诱导足细胞凋亡较对照组明显升高(P＜0.05),75.0 mg?L-1、100.0 nmg?L-1PAN诱导足细胞凋亡率显著升高,大部分足细胞死亡(Pa＜0.01).DEX1组、2组足细胞凋亡率明显低于PAN组(Pa＜0.05),DEX 3组(10.0 μmol?L-1)干预后足细胞凋亡率显著低于PAN组(P＜0.01).不同质量浓度GL组干预后足细胞凋亡率均显著低于PAN组(Pa＜0.01),随GL质量浓度升高,其抗足细胞凋亡作用降低(P＜0.05).结论 PAN可呈剂量依赖性诱导足细胞损伤,50.0 mg?L-1 PAN为诱导合适的质量浓度.GL及DEX对PAN诱导足细胞损伤均有保护作用,DEX呈剂量依赖方式抑制足细胞凋亡,GL发挥抗足细胞凋亡作用与剂量有关.     

钙神经蛋白及瞬时受体电位阳离子通道蛋白6对足细胞骨架的影响研究进展

原发性肾病综合征蛋白尿的形成是由于肾小球滤过屏障受损所致,足细胞作为滤过屏障的关键部分,目前已被认为是参与尿蛋白产生及病情进展的关键细胞,足细胞骨架的结构和功能完整是其发挥生理功能的前提条件.以肌动蛋白为中心的细胞骨架损伤是各种因素作用于足细胞引起足突融合的“共同的最后道路”.该文对裂孔隔膜蛋白瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)、钙神经蛋白(calcineurin,CaN)及其相互作用关系对细胞骨架的影响进行综述.     

灵芝对小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡的影响

目的 探讨灵芝对病毒性心肌炎(VM)小鼠细胞凋亡及凋亡调控基因Fas、FasL表达的影响,观察灵芝对VM的治疗作用。方法 建立VM动物模型:雄性Balb／c小鼠腹腔内接种0.5 ml柯萨奇病毒B组(CVB3)病毒液,感染后d10处死。采用TUNEL法原位检测细胞凋亡;光镜、电镜观察其病理学改变及凋亡形态改变:免疫组织化学技术检测不同时期Fas、FasL蛋白表达水平。结果 与正常小鼠比较,实验组鼠心肌病变积分、细胞凋亡数及Fas、FasL蛋白表达明显增加;与未治疗组比较,灵芝治疗后上述指标均下降。结论 灵芝可通过下调Fas、FasL蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡而保护心肌。     

三七总皂苷对新生鼠窒息后脑细胞凋亡及凋亡蛋白Bax表达的影响

目的了解三七总皂苷(TPNS)对新生SD大鼠窒息后脑细胞凋亡及凋亡蛋白Bax表达的影响。方法出生7 d的SD大鼠88只,随机分为对照组(n=8),窒息+NS组(n=40),窒息+TPNS组(n=40)。将大鼠放入55 ml的磨口瓶中,瓶中放入5 g钠石灰,待新生鼠安静后,窒息+TPNS组及窒息+NS组塞紧瓶塞30 min,取出后复氧120 min,窒息后即刻分别腹腔注射TPNS 100 mg/kg、同等容积0.9%盐水,q 12 h重复腹腔注射,注射后放回母鼠身边继续喂养,分别于窒息后6 h、24 h、48 h、72 h、7 d处死;对照组放入55 ml的磨口瓶中30 min不塞瓶塞,取出后复氧120 min,放回母鼠身边继续喂养,6 h后全部处死。采用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测脑细胞凋亡率,免疫组织化学法检测Bax蛋白的表达。结果窒息+NS组及窒息+TPNS组均可见凋亡细胞,明显高于对照组,窒息+NS组(除6 h外)凋亡细胞数明显高于窒息+TPNS组,差异均有统计学意义(P均<0.05);窒息+NS组及窒息+TPNS组Bax表达明显高于对照组,窒息+TPNS组Bax表达明显低于窒息+NS组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论细胞凋亡是窒息后脑损伤的主要表现形式,主要是通过凋亡蛋白Bax调节,TPNS可减少脑组织Bax的表达,减少凋亡细胞数目,对窒息所致的脑损伤有保护作用。     

乙型肝炎病毒X蛋白通过激活细胞外蛋白调节激酶转导机制上调大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子-α的表达

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因编码的蛋白(HBx)导致大鼠系膜细胞(MC)增殖及TNF-α高表达的细胞外蛋白调节激酶(ERK)1/2信号转导机制.方法 PCR扩增HBV X基因,然后与真核表达载体PCI-neo质粒连接,构成含有HBV X基因的质粒(PCI-neo-X),采用限制性内切酶法及测序证实.采用脂质体法将PCI-neo-x转染入体外培养的大鼠MC,采用抑制剂U0126阻断ERK1/2通路,观察培养细胞增殖、TNF-α及其mRNA表达,以不加抑制剂作为对照.Western blot检测HBx、ERK1/2及磷酸化ERK(p-ERK)1/2表达.半定量RT-PCR检测TNF-α mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液TNF-α表达.甲基噻唑摹四唑(MTT)法检测MC增殖.结果 无论是否加入UO126,在转染PCI-neo-X 36,48 h后,肾小球系膜细胞(GMC)明显表达HBx,细胞TNF-αmRNA的表达加入U0126较不加入U0126显著下降.不加入U0126组上清液TNF-α水平在转染后36 h和48 h分别为(189.0±18.1)ng/L和(172.3±24.3)ng/L;加入U0126组上清液中TNF-α水平在转染后36、48 h分别为(65.6±11.6)ng/L和(84.0±24.6)ng/L,组间不同时间点比较均有显著性差异(Pa<0.05).加入U0126后MC增殖也显著下降.结论 HBx可促使MC增殖,细胞TNF-α mRNA及上清液TNF-α表达均增高,这一作用可能是通过HBx激活ERK1/2信号通路实现的.实用儿科临床杂志,2009,24(10):738-740     

他克莫司对嘌呤霉素损伤的肾小球足细胞重组人帕金森蛋白7表达的影响

目的 探讨嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)对小鼠肾小球足细胞(mouse podocyte clone 5,MPC-5)凋亡及重组人帕金森蛋白7(Parkinson's disease 7,Park7)表达的影响,以及他克莫司(tacrolimus,FK506)对MPC-5损伤的保...     

X连锁凋亡抑制蛋白和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂对血管瘤演变的作用

目的 探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)在小儿血管瘤消退中的作用.方法 收集未经其他治疗、单纯手术切除并经病理诊断为血管瘤的标本31例,结合Mulliken分类法与增殖细胞核抗原(PCNA)表达对血管瘤进行分类和分期,采用免疫组织化学方法检测XIAP、Smac在血管瘤组织中的表达.结果 18例增殖期血管瘤XIAP、Srnac的积分光密度分别为2421.03±792.91,472.05±182.16;13例退化期血管瘤XIAP、Smac的积分光密度分别为443.24±105.15,2074.10±320.41.血管瘤增殖期Smac的积分光密度明显低于消退期,差异有显著性(P＜0.01);血管瘤增殖期XIAP的积分光密度明显高于消退期,差异有显著性(P＜0.01);XIAP与Smac的表达之间呈负相关关系(r=-0.753,P＜0.01).结论 XIAP、Srmac相互作用可能是导致了血管瘤消退原因之一.

Abstract：

Objective To investigate the role of X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP)and second mitochondria- derived activator of caspase (Smac) in hemagioma regression. Methods Thirty-one hemangioma specimens were categorized according to Mulliken's classification and the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). The expression of XIAP and Smac were assayed with immunohistochemistry method. Results There were 18 proliferating phase specimens and 13 involuting phase specimens. In the proliferating phase specimens, the IOD(integral optical density) of XIAP and Smac expressions were 2421.03 ± 792.91 and 472.05 ± 182.16 respectively. In the involuting phase specimens,the IOD of XIAP and Smac expressed were 443.24 ± 105.15 and 2074.10 ± 320.41 respectively. In the proliferating phase specimens, the IOD of Smac expression was significantly lower than the IOD in the proliferating phase specimens (P＜0.01 ). In the proliferating phase specimens, the IOD of XIAP expression was significantly higher than the IOD in the involuting phase specimens (P＜0.01). XIAP negatively correlates with Smac (r= -0.753,P＜0.01 ). Conclusions The interaction of XIAP and Smac may resulted in hemangioma regression.     

不同时期应用胰岛素样生长因子-1对小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡蛋白表达的影响

目的探讨不同时期应用胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)和BCL-2关联X蛋白(BAX)的影响。方法Balb/c雄性小鼠50只,随机分为对照组、柯萨奇B3病毒感染组(感染组)及病毒感染早期治疗组(0～6d)和急性期治疗组(7～13d),后2组腹腔注射外源性IGF-130μg/(kg.d),连用7d。d14处死动物,留取心肌标本,免疫组织化学法检测其心肌组织BCL-2和BAX蛋白的表达。结果与对照组和治疗组相比,感染组BCL-2表达减少,BAX表达增加(Pa<0.01);感染早期治疗组较急性期治疗组BCL-2表达明显增多、BAX表达明显减少(Pa<0.01)。结论病毒感染早期应用IGF-1对小鼠病毒性心肌炎的疗效优于急性期。     

CD437诱导HepG2细胞凋亡及机制的初步研究

目的 探讨CD437对HepG2细胞凋亡诱导作用及其对线粒体膜电位变化的影响.方法 ①MTT比色法观察CD437对HepG2细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞生长情况.An-nexin V-FITC/PI标记后,流式细胞术检测细胞凋亡.②罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)荧光探针染色后,荧光显微镜下观察活细胞线粒体改变,并经流式细胞仪分析线粒体膜电位变化.结果 ①1 μmol/L CD437干预HepG2细胞24h后,实验组细胞早期凋亡率(18.26±5.31)%高于对照组(P<0.05),实验组细胞继发死亡率(20.31±3.70)%也高于对照组(P<0.05),CD437可导致细胞早期凋亡.②流式细胞仪结果表明CD437诱导HepG2细胞24 h后,实验组荧光强度为4.40±0.09,较对照组荧光强度5.34±0.12变弱(n=12,P<0.05),实验组整个峰向左移动,HepG2细胞线粒体膜电位水平下降.荧光倒置显微镜下观察发现,对照组罗丹明123荧光强度很强,大量细胞发出强烈荧光,实验组HepG2细胞内罗丹明123荧光强度很弱,很少见到强荧光细胞.结论 CD437可能通过降低线粒体膜电位水平而抑制HepG2细胞增殖并且诱导其凋亡.     

CD437诱导HepG2细胞凋亡及机制的初步研究

Objective To investigate the effect of CD437 on apoptosis of human hepatoblastoma cell line HepG2 and the possible role of CD437 on mitochondrial membrane potentials (MMP). Meth-ods The effect of CD437 on the proliferation of HepG2 cells was evaluated with MTT assay. Flow cytometry was performed after HepG2 cells were labeled with Annexin V-FITC/PI double fluores-cence. Mitochondrial membrane stained with Rhodamine 123 probes was detected under fluorescent microscope and the changes of MMP were analyzed with flow cytometry. Results After incubated with 1μmol/L of CD437 for 24 hours, both the earlier and later apoptotic rates of HepG2 cells in the exper-imental group increased significantly compared to those in the control group. The fluorescent intensity detected with flow cytometry in the experimental group was significantly lower than that in the control group (5. 34 ± 0. 12 vs 4. 40 ± 0. 09, P<0. 05). The left peak-shift and decreased MMP were noted in the experimental group. Under the fluorescent microscope, fluorescence of HepG2 stained with Rho-damine 123 probes disappeared after incubated with CD437. Conclusions CD437 can significantly in-hibit the growth of HepG2 and induce the apoptosis by decreasing MMP.     

天麻对病毒性心肌炎实验小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 研究天麻对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及caspase-3蛋白表达的影响,探讨天麻治疗病毒性心肌炎的作用及机制.方法 给Balb/c小鼠接种柯萨奇B3病毒制作病毒性心肌炎模型,感染病毒72 h后将仔活小鼠分为模型组、天麻组、氯沙坦组,并以未感染小鼠为正常对照组.大麻组、氯沙坦组分别予以相应药物干预7 d后,4组小鼠采用原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡及Western blotting法检测caspase-3蛋白表达.结果 正常组未见到心肌细胞凋亡,模型组心肌细胞大量凋亡,凋亡率较正常组显著增加(P＜0.01),天麻组和氯沙坦组凋亡率较模型组显著降低(P＜0.05).模型组caspase-3蛋白表达较正常组显著增多(P＜0.01),天麻组和氯沙坦组较模型组显著降低(P＜0.05).结论 天麻能够抑制病毒性心肌炎心肌细胞的凋亡,通过caspase-3通路的调节,对心肌细胞起到保护作用.