电离辐射对人外周血线粒体编码基因mRNA表达的影响

目的： 观察γ射线对人外周血线粒体编码基因mRNA表达水平的影响,探讨线粒体编码基因用于辐射生物剂量估算的可行性。方法：用不同剂量水平 (0~5 Gy)的60Co γ射线照射3名正常人离体外周血样本,照射6 h后,提取总RNA,应用实时荧光定量PCR技术检测ND1,ND6,细胞色素C氧化酶亚基 (cytochrome C oxidase subunit,COX)I、II、III,三磷酸腺苷酶6 (adenosine triphosphatase,ATPase6),三磷酸腺苷酶8(adenosine triphosphatase,ATPase8) mRNA表达水平的变化,采用Origin 7.5拟合照射剂量与基因表达水平的剂量-效应关系曲线。结果：γ射线照射人外周血后,线粒体编码基因COXI及 ATPase6的相对表达水平在0~5 Gy剂量范围内表达先增加,3 Gy剂量点之后显现下降趋势,对这两个基因在0~3 Gy剂量范围内分别进行拟合,得到COXI 剂量-效应关系方程为Y=0.625 9+0.256 1D (r2=0.916 3,P<0.01); ATPase6基因表达剂量-效应关系方程为Y=0.218 9+ 0.806 0 D (r2=0.912 6,P<0.01),其他5个基因的相对表达水平与照射剂量间不存在明显的剂量-效应关系 (P>0.05)。结论：γ射线对人外周血线粒体编码基因COXI 及 ATPase6的mRNA表达水平具有明显的影响,这两个基因的表达水平与γ射线的照射剂量存在线性关系,有望用于辐射生物剂量的估算。     

γ刀照射对胶质瘤细胞c-myc基因mRNA表达的影响

颅内恶性胶质瘤的γ刀治疗，是胶质瘤综合治疗的一个重要组成部分。关于γ刀照射后胶质瘤细胞凋亡机制的报道越来越多，但在γ刀照射后胶质瘤细胞癌基因mRNA水平表达变化对凋亡过程的调控，国内外报道较少。我们针对体外培养的胶质瘤细胞，在基因水平方面探讨了γ刀的作用机理．为体内研究及临床应用提供了依据。     

^60Coγ射线全身照射与离体照射诱发人精子染色体畸变研究

本文采用人精子染色体制备技术，分析了两名６０Ｃｏ事故性全身受照者照后６，７年的精子染色体畸变和用摸拟两受照者睾丸剂量离体照射后的健康人精子染色畸变。结果显示：在相同剂量点，离体照射组染色体畸变率显著高于全身受照组（Ｐ＜００１）；两受照组均以断裂型畸变为主，但全身受照组重接型畸变的比例显著增高；全身受照组Ｙ－精子与Ｘ－精子的比例显著增高（１６０∶１）。提示：生殖细胞在不同的发育阶段的遗传危害与对射线的敏感性是两个不同的概念，精子染色体重接型畸变的检测对评价电离辐射效应具有一定意义。两受照组Ｙ－精子与Ｘ－精子之比的差异提示辐射引进Ｘ连锁显性致死性突变的可能性。     

^60Coγ射线离体照射诱发人精子和淋巴细胞染色体畸变的比较

本文对＾６０Ｃｏγ射线离体照射诱发的人精子和淋巴细胞染色体畸变进行了分析。在对照，１．０１，１．８１和２．９９Ｇｙ剂量组，两类细胞的畸变细胞率和结构畸变率基本相同。细胞畸变类型明显不同，精子染色体以断裂型畸变为主，是淋巴细胞断裂型畸变的４倍；淋巴细胞以互换型畸变为主，是精一换型畸变的７倍。讨论了两类细胞染色体畸变类型差异的可能原因及用电离辐射诱发淋细胞染色体畸变的结果外推其对策生殖作用的可行性。     

年龄和性别对正常人外周血淋巴细胞核质桥自发率的影响

目的： 探索年龄、性别因素对我国健康人群外周血淋巴细胞核质桥自发率的影响,为核质桥的影响因素研究提供科学依据。方法： 选取98例健康成人,其中男性52例,女性46例,年龄范围为20~68岁,平均年龄为（40.7±12.6）岁。按年龄分为20~29岁组（22人）、30~39岁组（23人）、40~49岁组（25人）和50岁以上组（28人）。抽取研究对象外周血2 mL,采用胞质分裂阻滞法培养细胞40 h后,加入松胞素B （终浓度为10 μg/mL）,继续培养至68 h收获细胞。每个受试者观察1 000个双核细胞,分析核质桥、微核及核芽的数量。结果： 核质桥总体自发率为每个细胞0.56‰,男性略高于女性,但差异无统计学意义（P > 0.05）。男性在不同年龄组间,核质桥自发率差异无统计学意义（P > 0.05）。女性40~49岁年龄组核质桥自发率最高,显著高于20~29岁组（U=2.31,P < 0.05）。微核自发率女性高于男性（U=4.40,P < 0.05）,男性和女性受试者40~49岁组微核自发率均为最高。核芽自发率在不同性别间的差异无统计学意义（P > 0.05）,在不同年龄组间无明显变化规律。结论： 健康人群中的核质桥自发率较低,不受性别因素影响,在20~49岁范围内具有随年龄增加而升高的趋势。     

60Coγ射线全身照射大鼠尿液的非标记定量蛋白质组学分析

目的:鉴定全身照射大鼠尿液中的异常表达蛋白质,筛选辐射敏感生物标志,并分析其功能和相关生物学过程.方法:以未照射大鼠为阴性对照,分别采用1、5 Gy(剂量率1 Gy/min)的60Coγ射线全身照射30只大鼠,收集照射后第1和第3天的尿液样本,采用非标记(label-free)质谱技术检测样本中所鉴定蛋白的相对表达水平,筛选差异表达蛋白,进一步使用Uniport、DAVID数据库对其进行基因本体(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并使用STRING在线网站构建蛋白-蛋白相互作用网络.结果:本研究各样本共鉴定出1069种蛋白.照射后第1和第3天,与对照组比较1和5 Gy照射组均出现差异表达的蛋白279种,其中190种表达上调,97种表达下调.GO富集分析结果显示差异蛋白主要涉及对药物反应、氧化还原、老化等生物学过程,分布在细胞外泌体、细胞外空间等区域,发挥蛋白质同源二聚化活性、蛋白质结合以及钙离子结合等分子功能.KEGG富集分析结果显示差异蛋白主要涉及抗生素生物合成、谷胱甘肽代谢、碳代谢、代谢途径等多种信号通路.结论:γ射线照射后大鼠尿液蛋白质组学的综合分析表明,Gusb、Reg3g、GCLM、AZGP1蛋白上调和Ly6d蛋白下调可作为辐射敏感候选生物标志.     

年龄和性别对健康人外周血细胞流式细胞术检测参数的影响

目的 探讨某些生理因素对健康人血细胞流式细胞术检测参数的影响。方法 采用流式细胞术对８８例不同年龄和性别健康成人血细胞的３２项检测指标进行对比分析。结果 在不同年龄受检者中，随着年龄增加，主要免疫指标出现逐渐减低的变化，并呈明显的负相关，细胞增殖活性、凋亡水平和基因表达蛋白出现逐渐增高的变化，并呈明显的正相关。不同性别受检者的各项参数均无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。结论 受检者的年龄对血细胞流式细     

60Coγ射线诱导正常人淋巴母细胞XPCmRNA表达的剂量相关性研究

目的：研究正常人淋巴母细胞AHH-1电离辐射作用后XPC mRNA表达的剂量效应关系,探索建立一种基于基因表达变化的新型辐射生物剂量分子标志物的可能性。方法：剂量为1、2、4、6、8和10Gy的60Coγ线照射AHH-1细胞后4、10、24 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR技术对XPC mRNA表达水平进行相对定量检测。结果：在0～10 Gy的γ射线照射后4 h,AHH-1细胞中XPC mRNA表达水平就显著增加,并达到第1个高峰,维持至10 h左右或有所降低,随后继续上升,持续时间可达24 h。在0～8 Gy剂量范围内辐射诱导XPC mRNA表达丰度随照射剂量的升高而上调,具有显著的剂量依赖性。结论：正常人淋巴母细胞XPC mRNA表达水平与电离辐射之间具有良好的剂量效应和时间效应关系,有成为新的辐射生物剂量计的潜力。     

人外周血淋巴细胞微核分析用于估算离体模拟局部照射剂量的研究

目的：探讨利用人外周血淋巴细胞微核分析估算局部照射剂量的可行性。方法：收集2例人外周血样本,每例血样分为两部分,一部分不照射,另一部分再分成两组分别于1和5 Gy的⁶⁰Co γ射线下离体照射,剂量率为1 Gy/min。将来自同一样本的照射血与未照射血按1∶3或3∶1比例混合以模拟局部照射,共分析8组混合血样中双核淋巴细胞微核（MN）率,利用国际原子能机构（IAEA）推荐的Dolphin's模型推算混合血中受照血的微核率,并采用卫生行业标准（WS/T 178—1999）推荐的剂量效应曲线估算局部照射剂量。结果：各组混合血样MN分布均不符合泊松分布。1 Gy照射组估算的局部剂量与实际照射剂量偏差较大,5 Gy照射组估算的局部剂量与实际照射剂量较接近。结论：离体情况下,MN能较好的用于估算局部照射剂量,且MN可能更适用于较高剂量的估算。     

过钒酸钠对60Coγ射线照射后BET-2细胞增殖反应的影响研究

目的:观察酪氨酸磷酸酶(PTP)特异性抑制剂过钒酸钠(sodiumpervanadate Per)对60Coγ射线照射后造血细胞增殖反应的影响。方法:BET2细胞经60Coγ射线照射0、1、3、5、7和10Gy后,分为Per处理组和无Per组,用MTT法测定BEL2细胞对EPO的增殖反应性。结果:60Coγ射线照射后,BET2细胞对EPO增殖反应性显著降低,并与照射剂量相关;适当浓度Per(1～31.25mmol/L)能促进BET2细胞在无EPO状态下经一定剂量60Coγ射线照射后的细胞存活和增殖。结论:60Coγ射线照射后造血细胞的损伤可能伴有造血因子受体信号转导障碍,调控造血细胞受体信号通路中PTP活性对60Coγ射线照射引发的造血细胞损伤有一定的保护作用。     

电离辐射对小鼠外周血单核细胞亚群的影响

目的：探讨电离辐射对小鼠外周血Ly6C⁺和Ly6C^-单核细胞亚群比例和数目的影响,及其在辐射损伤防护中的意义。方法：实验分为4 Gy γ射线照射后第3、5、7、14和21天处理组及对照组,每组10只,雌雄各半。用血球仪检测受照小鼠及其对照组外周血单核细胞数目,用流式细胞术检测受照小鼠外周血Ly6C⁺和Ly6C^-单核细胞亚群的比例,根据单核细胞数目与单核细胞亚群比例的乘积计算出单核细胞亚群的数目。结果：与对照组相比,4 Gy γ射线照射小鼠后第3、5和7天外周血单核细胞Ly6C⁺亚群与Ly6C^-亚群数目显著降低（P<0.01）,Ly6C⁺单核亚群数目出现先降低（照后3 d）后升高（照后5 d）再降低（照后7 d）的双相变化。与对照组相比,4 Gy γ射线照射小鼠后第3和第5天外周血Ly6C⁺亚群比例显著升高至90%（P<0.01）,Ly6C^-单核亚群的比例显著降低至10%（P<0.01）。与对照组比较,4 Gy γ射线照射小鼠后第14天外周血单核细胞Ly6C⁺亚群数目和比例仍显著降低（P<0.01）,第21天外周血Ly6C⁺和Ly6C^-单核亚群的比例和数目基本恢复正常。结论：4 Gy γ射线受照小鼠外周血Ly6C⁺和Ly6C^-单核细胞亚群数目在受照后第1周显著降低,这可能与电离辐射诱导小鼠外周血单核细胞亚群发生凋亡有关。     

肿瘤组织和外周血细胞肿瘤转移抑制基因表达的对比研究

目的:探讨恶性肿瘤患者肿瘤组织和外周血细胞中肿瘤转移抑制基因表达的相关性。方法:采用流式细胞术对恶性肿瘤患者肿瘤组织和外周血细胞的nm23、DCC、p16和p53V细胞检出率进行检测分析。结果:恶性肿瘤患者的肿瘤组织和外周血细胞nm23、DCC和p16细胞的检出率均显著低于正常对照组P<0·01和P<0·05。肿瘤转移者nm23、DCC和p16的表达率均显著低于未转移者P<0·01或P<0·05。p53V细胞检出率的变化规律与nm23、DCC、p16相反,且差异有统计学意义,P<0·01。肿瘤患者癌组织和外周血细胞之间的nm23和p53V基因编码蛋白表达率均呈良好的正相关关系,r1=0·3652,P1=0·0073;r2=0·3321,P2=0·0091,而p16和DCC的表达率无显著相关性。结论:肿瘤转移抑制基因表达与肿瘤转移呈相关性,检测肿瘤患者外周血细胞肿瘤转移基因nm23、p53的表达有助于肿瘤预后的判断。     

SOD对电离辐射诱导不同肿瘤细胞ROS水平和凋亡的影响

目的 研究ROS产生与电离辐射诱导细胞凋亡的关系，探讨SOD对：H22肝癌、Lewis肺癌、Hela宫颈癌细胞辐射敏感性的影响及机制。方法利用化学比色法测定肿瘤细胞中的ROS的水平，利用流式细胞仪测定肿瘤细胞凋亡。结果X线照射三种肿瘤细胞可通过产生ROS而诱发其凋亡，应用SOD在照射16h后对Lewins细胞的ROS水平无明显影响，而H22细胞和Hela细胞的ROS水平明显降低。SOD对：Hela宫颈癌细胞具有辐射保护作用，对Lewis肺癌细胞具有辐射增敏作用，对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤细胞辐射增敏性无明显影响。结论SOD通过改变肿瘤细胞的：ROS水平和参与其凋亡的分子生物学机制影响肿瘤细胞的辐射增敏性。     

Response of malignant B lymphocytes to ionizing radiation: gene expression and genotype

The human malignant B-lymphocyte cell lines Reh and U698 show arrest in G2 phase after ionizing radiation (IR), but only Reh cells arrest in G1 phase and die by apoptosis. We have used cDNA microarrays to measure changes in gene expression at 2, 4 and 6 hr after irradiation of Reh and U698 cells with 0.5 and 4 Gy in order to begin exploring the molecular mechanisms underlying the phenotypic changes. We also investigated whether gene expression changes could be caused by possible aberrations of genes, as measured by comparative genomic hybridization. Reh cells showed upregulation of CDKN1A that likely mediated the G1 arrest. In contrast, U698 cells have impaired function of TP53 protein and no activation of CDKN1A, suppressing the arrest in G1. The G2 arrest in both cell lines was likely due to repression of PLK1 and/or CCNF. IR-induced apoptosis in Reh cells was probably mediated by TP53 and CDKN1A, whereas a high expression level of MCL1, caused by gene amplification, and activation of the NFKB pathway may have suppressed the apoptotic response in U698 cells. Genes suggested to be involved in apoptosis were activated long before this phenotype was detectable and showed the same temporal expression profiles as genes involved in cell cycle arrest. Our results suggest that differences in functionality and/or copy number of several genes involved in IR-regulated pathways contributed to the phenotypic differences between Reh and U698 cells after IR, and that multiple molecular factors control the radiation response of malignant B lymphocytes.     

Possible interaction between ionizing radiation, smoking, and gender in the causation of meningioma

Data on the association between smoking and meningioma are inconsistent. The aim of this study was to assess the role of smoking in radiation- and non-radiation-related meningiomas. The study was designed as a 4-group case-control study, balanced for irradiation, including 160 irradiated meningioma case patients, 145 irradiated control subjects, 82 nonirradiated case patients, and 135 nonirradiated control subjects. The sources of these groups included a cohort of individuals who underwent radiotherapy (mean dose, 1.5 Gy to the brain) during childhood for treatment of tinea capitis, claims filed for radiation damage in the framework of a compensation law, and the Israel Cancer Registry. All tests of statistical significance were 2-sided. A statistically significantly elevated risk of meningioma was found among men who had ever smoked, compared with those who were never smokers (odds ratio [OR], 2.13; 95% confidence interval [CI], 1.09-4.15), increasing with smoking pack-years from 1.67 to 2.69 for <10 to >20 pack-years, respectively. Among women, an interaction between radiation and smoking was observed, expressed by a significant protective effect for meningioma (OR, 0.32; 95% CI, 0.14-0.77), with a strong dose-response association (P < .01) in non-irradiated women and a nonsignificant increased risk of meningioma among those who were irradiated (OR, 1.23; 95% CI, 0.68-2.23). Variation in the association between smoking and meningioma may be explained by effects of distinct host factors, such as past exposure to ionizing radiation and/or hormonal factors.