SIRT1对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的表观遗传调控

目的：探讨沉默信息调节蛋白1（SIRT1）对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法：实验研究。通 过定量PCR和Western blot法检测SIRT1在葡萄膜黑色素瘤细胞（M23和SP6.5）和正常人葡萄膜黑色 素细胞（DM78、UM95和UM96）中的表达。在葡萄膜黑色素瘤细胞（M23、SP6.5）中，用EX527抑 制SIRT1活性，以溶剂DMSO作为阴性对照组；用SIRT1小干扰RNA（siSIRT1）转染细胞抑制SIRT1 表达，以无义小干扰RNA（NC）转染作为阴性对照组。细胞增殖实验（MTS）、流式细胞术、平板 克隆形成实验分别检测细胞活性、细胞周期以及细胞克隆形成能力。裸鼠眼内成瘤实验检测葡萄 膜黑色素瘤细胞眼内成瘤能力。Western blot法检测增殖相关蛋白。组间数据均采用独立样本t检验 进行比较。结果：与葡萄膜黑色素细胞相比，葡萄膜黑色素瘤细胞（M23、SP6.5）中SIRT1 mRNA （t=17.08，P<0.001；t=13.24，P<0.001）和蛋白（t=6.26，P=0.008）表达水平显著升高。MTS结果显示， EX527抑制M23和SP6.5细胞活性，并呈药物浓度依赖性；与NC转染组相比，siSIRT1转染组细胞 活性显著减弱（t=5.94，P<0.001；t=10.73，P<0.001）。与溶剂DMSO组相比，EX527处理组（t=5.10， P=0.047；t=7.57，P=0.002）和SIRT1 siRNA转染组（t=6.41，P=0.003；t=6.10，P=0.004）中处于G1期 的细胞比例均显著升高。另外，M23和SP6.5细胞EX527处理组（t=5.04，P=0.001；t=5.93，P<0.001） 和siSIRT1转染组（t=11.44，P<0.001；t=8.24，P<0.001）克隆形成数量显著降低。在裸鼠眼内成瘤实 验中，与NC组相比，siSIRT1转染组眼内瘤体大小显著变小（t=5.50，P<0.001）。Western blot结果显 示，与DMSO处理组相比，EX527处理组中P21（t=4.63，P=0.010；t=7.90，P=0.001）表达升高，E2F1 （t=12.10，P=0.003；t=5.96，P=0.004）、CYCLIND2（t=36.28，P<0.001；t=16.58，P<0.001）、p-RB（t=17.55， P<0.001；t=21.34，P<0.001）表达降低，p-AKT表达下调。与NC转染组相比，siSIRT1转染组中， P21（t=5.88，P=0.004；t=10.51，P<0.001）表达升高，E2F1（t=4.60，P=0.01；t=4.89，P=0.008）、 CYCLIND2（t=5.13，P=0.007；t=5.63，P=0.005）、p-RB（t=4.45，P=0.011；t=6.53，P=0.003）表达水 平降低，p-AKT（t=9.61，P<0.001；t=6.44，P=0.003）表达下调。结论：抑制SIRT1活性或表达可以明 显抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖，提示SIRT1可以作为治疗葡萄膜黑色素瘤的一个新靶标。     

SIRT1对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的表观遗传调控

目的: 探讨沉默信息调节蛋白1(SIRT1)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法: 实验研究。通过定量PCR和Western blot法检测SIRT1在葡萄膜黑色素瘤细胞(M23和SP6.5)和正常人葡萄膜黑色素细胞(DM78、UM95和UM96)中的表达。在葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中, 用EX527抑制SIRT1活性, 以溶剂DMSO作为阴性对照组;用SIRT1小干扰RNA(siSIRT1)转染细胞抑制SIRT1表达, 以无义小干扰RNA(NC)转染作为阴性对照组。细胞增殖实验(MTS)、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活性、细胞周期以及细胞克隆形成能力。裸鼠眼内成瘤实验检测葡萄膜黑色素瘤细胞眼内成瘤能力。Western blot法检测增殖相关蛋白。组间数据均采用独立样本t检验进行比较。结果: 与葡萄膜黑色素细胞相比, 葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中SIRT1 mRNA(t=17.08, P<0.001;t=13.24, P<0.001)和蛋白(t=6.26, P=0.008)表达水平显著升高。MTS结果显示, EX527抑制M23和...     

miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中的表达及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的　探讨miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中的表达及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法　RT-PCR检测miR-194在正常视网膜上皮细胞系ARPE-19及葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中的表达。取SP6.5、M23及OM431细胞分成两组,miR-194过表达组（miR-194组）及阴性对照组（NC组）,经Lipofectamine^TM 2000分别转染miR-194 mimic及阴性对照序列scramble。CCK-8实验及流式细胞仪分别测定细胞增殖和凋亡能力,细胞划痕及Transwell实验分别测定细胞迁移和侵袭能力。Western blot测定叉头盒蛋白A1（forkhead box,FOXOA1)、多聚ADP-核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达。结果　正常视网膜上皮细胞系ARPE-19中miR-194的相对表达量为1.03±0.04,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431相对表达量分别为0.25±0.02、0.37±0.02及0.47±0.03,葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及OM431中miR-194相对表达量低于正常视网膜上皮细胞系ARPE-19(均为P<0.001 )。转染0 h、24 h、48 h、72 h、96 h后,miR-194组和 NC组A值分别为:0.23±0.02、0.21±0.03（t=0.960,P=0.391）,0.38±0.02、0.37±0.03（t=0.480,P=0.656）,0.75±0.04、0.78±0.06（t=-0.720,P=0.511）,0.87±0.09、1.59±0.12（t=-8.313,P=0.001）,1.53±0.14、3.05±0.22（t=-10.096,P=0.000）;流式细胞仪检测结果显示:miR-194组细胞凋亡率为23.30%±2.10%,NC组为2.47%±0.30%,miR-194组细胞凋亡率高于NC组（t=17.007,P=0.000）。细胞划痕实验结果显示:miR-194组细胞划痕愈合率为25.3%±3.5%,NC组为72.9%±6.4%,miR-194组细胞划痕愈合率低于NC组（t=-11.302,P=0.000）;Transwell实验结果显示:200倍视野下,miR-194组侵袭细胞数为（188.6±20.7）个,NC组为（352.9±32.8）个,miR-194组侵袭细胞数少于NC组（t=-7.337,P=0.001）。miR-194组FOX A1蛋白相对表达量为0.29±0.03,NC组为1.03±0.06,miR-194组FOX A1蛋白相对表达量低于NC组（t=-19.106,P=0.000）;miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量为2.87±0.24,NC组为1.03±0.06,miR-194组裂解型PARP蛋白相对表达量高于NC组（t=12.882,P=0.000）。结论　miR-194在葡萄膜黑色素瘤细胞系中低表达,上调miR-194表达可抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖,促进凋亡,抑制迁移和侵袭,其机制可能与下调FOX A1及上调裂解型PARP蛋白表达有关。     

miRNA-19对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的 探讨miR-19在葡萄膜黑色素瘤(UM)细胞中的表达及其对UM细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR检测正常视网膜上皮细胞系ARPE-19和UM细胞系 SP6.5、M23中 miR-19的表达.将 M23细胞分为 miR-19 inhibitor 组(转染 miR-19-inhibit...     

miR-135a/b靶向SIRT1调控葡萄膜黑色素瘤细胞的迁移

目的：研究microRNA-135a/b（miR-135a/b）对葡萄膜黑色素瘤（UM）细胞迁移能力的调控作用及其机制。方法：实验研究。采用定量RT-PCR检测UM标本和癌旁组织中miR-135a/b的表达水平。将miRNA模拟物转染入UM细胞（M23和SP6.5）过表达miR-135a/b，转染无义序列作为对照组（NC）。利用小RNA干扰技术和慢病毒过表达载体感染技术分别下调和上调细胞中SIRT1蛋白表达水平，分别以无义小干扰RNA（siNC）和插入无义序列的慢病毒载体（Lv-NC）作为阴性对照。采用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力。双萤光素酶报告实验用于鉴定miR-135a/b的靶基因。Western blot检测SIRT1蛋白的表达水平。采用独立样本t检验进行数据分析。结果：定量RT-PCR结果显示miR-135a/b在UM组织较癌旁组织的表达水平明显下调（miR-135a：t=6.38，P=0.003；miR-135b：t=23.26，P<0.001）。划痕实验和Transwell实验结果显示，与NC组相比，miR-135a/b过表达M23和SP6.5细胞迁移距离减小（miR-135a：t=36.01、8.98，均P<0.01；miR-135b：t=27.53、10.51，均P<0.01）且迁移细胞数量减少（miR-135a：t=7.04、7.02，均P<0.01；miR-135b：t=5.01、7.32，均P<0.01）。双萤光素酶实验证实，miR-135a/b能够明显抑制SIRT1野生组萤光素酶的荧光值（miR-135a：t=2.88，P=0.028；miR-135b：t=4.99，P=0.003）；Western blot结果表明，与NC组相比，过表达miR-135a/b的M23和SP6.5细胞中SIRT1的蛋白水平下调（miR-135a：t=9.93、4.13，均P<0.01；miR-135b：t=4.66、6.20，均P<0.01）。siSIRT1转染后划痕实验和Transwell实验结果显示，与siRNC组相比，M23和SP6.5细胞中下调SIRT1蛋白水平后细胞的迁移距离减小（siSIRT1-I：t=13.88、11.78，均P<0.01；siSIRT1-II：t=31.20、6.27，均P<0.01）且迁移细胞数量减少（siSIRT1-I：t=7.57、4.66，均P<0.01；siSIRT1-II：t=5.58、3.25，均P<0.05）。M23和SP6.5细胞中上调SIRT1蛋白水平同时过表达miR-135a/b，Transwell实验结果显示，细胞的迁移数量较仅过表达miR-135a/b升高（miR-135a+Lv-SIRT1：t=4.10、2.75，均P<0.05；miR-135b+Lv-SIRT1：t=2.99、2.49，均P<0.05）。结论：miR-135a/b在UM中明显下调且通过靶向结合SIRT1 mRNA 3'非翻译区抑制UM细胞的迁移，提示miR-135a/b-SIRT1信号轴在UM发展中发挥重要作用。     

DZNep靶向EZH2抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖

目的：探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A（DZNep）对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法：实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞（UM95、UM96）和葡萄膜黑色素瘤细胞（M23、SP6.5）中的表达，然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理，作为实验组；以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞 术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平，细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本t 检验进行比较。结果：EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高（t=25.050，P=0.002；t=14.220，P=0.005）。MTS结果显示，DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性，呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比，实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量 显著降低（t=3.364，P=0.015；t=6.997，P<0.001），并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少 （t=5.117，P=0.002；t=3.399，P=0.015）。流式细胞术检测结果显示，与阴性对照组相比，实验组中 M23和SP6.5细胞处于G1期的细胞比例均显著升高（t=6.199，P=0.003；t=3.729，P=0.020）。Western blot检测结果显示，与阴性对照组相比，实验组M23和SP6.5细胞中的EZH2（t=5.214，P=0.035； t=13.530，P=0.005）、p-Rb（t=4.551，P=0.045；t=4.655，P=0.043）、E2F1（t=8.090，P=0.015；t=9.313， P=0.011）以及p-ERK（t=4.819，P=0.040；t=8.951，P=0.012）表达均有降低，H3K27me3修饰水平显 著下降（t=5.257，P=0.034；t=5.697，P=0.030）。结论：DZNep能够抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖，具有治疗葡萄膜黑色素瘤的应用前景。     

miR-26a对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的 分析miR26a在葡萄膜黑色素瘤中的表达及对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响.方法 对葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及正常葡萄膜上皮细胞系ARPE-19行RT-PCR实验,检测3种细胞系中miR-26a的相对表达差异;将葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5分成miR-26a模拟物组和NC组,分别转染miR-26a mimics和对照序列scramble,用CCK-8实验和流式细胞术分别检测两组细胞增殖和凋亡;采用细胞划痕实验及Transwell实验分别检测两组细胞的迁移和侵袭能力;采用Western blot检测其下游蛋白组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的表达水平.结果 葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5中miR-26a相对表达量为0.250±0.029,细胞系M23中为0.350±0.017,正常葡萄膜上皮细胞系ARPE-19中miR-26a相对表达量为1.0,在细胞系SP6.5及M23中miR-26a的相对表达量均低于正常葡萄膜上皮细胞系ARPE-19中miR-26a的相对表达量(均为P＜0.001).miR-26a模拟物组在培养72 h、96 h、120 h OD450值(0.69 ±0.09、1.23 ±0.15、2.12±0.23)均显著低于NC组(1.39±0.11、2.35 ±0.25、3.53±0.27),差异均有统计学意义(均为P＜0.05).miR-26a模拟物组细胞凋亡率(15.60±2.30)％高于NC组(5.00±0.70)％(P＜0.01);miR-26a模拟物组划痕愈合率(23.7±2.1)％低于NC组(68.9 ±5.1)％(P＜0.01);侵袭细胞数(45.1±3.9)个低于NC组(115.3±8.9)个(P＜0.O1).miR-26a模拟物组EZH2蛋白相对表达量(0.39±0.09)低于NC组(1.0;P＜0.01).结论 miR-26a在葡萄膜黑色素瘤中低表达,过表达miR-26a显著抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖,促进凋亡,并抑制迁移和侵袭,其可能是通过下调EZH2的表达来发挥作用的.     

MicroRNA-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞增殖的抑制作用

目的：探讨MicroRNA-199a-3p（miR-199a-3p）对脉络膜黑色素瘤细胞OCM290增殖的影响及机制。 方法：实验研究。首先采用Real-time PCR技术检测miR-199a-3p在正常的脉络膜黑色素细胞UM96和肿瘤细胞OCM290中的表达情况;其次采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的转染方法,将miR- 199a-3p转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞OCM290中过表达作为实验组,将随机序列寡核苷酸链转染入OCM290细胞作为阴性对照组;然后在转染的基础上运用细胞增殖实验法（MTS法）、克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力。流式细胞术检测细胞周期。Western blot法检测与细胞周期相关的信号蛋白如CDK2、CDK4、E2F1等的表达。组间数据比较采用独立样本t检验。结果：miR-199a-3p在UM96中高表达,而在OCM290中表达明显下调（t=13.2,P<0.001）。OCM290细胞转染 miR-199a-3p后,MTS结果显示实验组细胞数为对照组的（23.8±1.7）%,细胞增殖明显被抑制（t=78.1,P<0.001);细胞克隆数减少;细胞周期滞留在G1期（t=-8.5,P=0.001）;Western blot法检测发现miR-199a-3p能下调OCM290中CDK2、CDK4、E2F1等的表达水平（t=10.3,P=0.001;t=9.9,P=0.001; t=10.4,P<0.001）。结论：miR-199a-3p通过下调调控细胞周期进程的关键蛋白,影响细胞周期的进程,从而抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖。     

长链非编码RNA（lncRNA）核仁小RNA宿主基因7（SNHG7）对葡萄膜黑色素瘤癌细胞增殖和侵袭力的影响

目的　探讨长链非编码RNA（lncRNA）核仁小RNA宿主基因7（SNHG7）对葡萄膜黑色素瘤癌细胞增殖和侵袭力的影响。方法　选取2011年8月至2019年8月在我院行手术治疗的葡萄膜黑色素瘤患者71例71眼作为葡萄膜黑色素瘤组,另选取因外伤摘除且葡萄膜完整、眼球正常的患者40例40眼作为正常组。两组患者性别、年龄、患眼眼别差异均无统计学意义（均为P>0.05）。采用实时荧光定量PCR检测两组患者眼球组织中SNHG7表达。取M23细胞进行培养,将对数生长期细胞分成3组,SNHG7干扰组:转染SNHG7干扰序列;阴性对照组:转染阴性对照序列;空白组:不作任何处理。采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中SNHG7表达,CCK-8法检测转染后细胞增殖活性,Transwell法检测细胞侵袭力。结果　葡萄膜黑色素瘤组患者眼球组织中SNHG7的相对表达量为2.05±0.16,正常组患者眼球组织中SNHG7的相对表达量为1.01±0.07,两组差异有统计学意义（t=39.461,P<0.001）。葡萄膜黑色素瘤组在发生巩膜浸润和眼外生长的患者眼球组织中SNHG7相对表达量均较无巩膜浸润和无眼外生长的患者高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。转染后继续培养48 h,SNHG7干扰组细胞SNHG7相对表达量（0.27±0.09）明显低于阴性对照组（1.01±0.07）和空白组（1.03±0.09）（均为P<0.001）。与阴性对照组和空白组相比,SNHG7干扰组细胞转染后24 h、48 h、72 h和96 h时光密度均降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。转染后48 h,SNHG7干扰组侵袭细胞数［（89.77±9.82）个］显著低于阴性对照组［（133.14±7.54）个］和空白组［（137.09±10.05）个］（均为P<0.001）。结论　葡萄膜黑色素瘤患者眼球组织中SNHG7呈高表达,且SNHG7高表达与肿瘤组织巩膜浸润和眼外生长有关,下调SNHG7基因表达可阻碍M23细胞增殖和侵袭。     

MicroRNA-96对人视网膜色素上皮细胞增殖与迁移的影响

目的：探讨MicroRNA-96（miR-96）对人视网膜色素上皮（RPE）细胞增殖和迁移的影响。方法：实验研究。通过RNA原位杂交检测人胚胎眼（20周）石蜡切片中RPE层miR-96的表达情况。将miR-96和阴性对照（NC）通过阳离子脂质体介导转染人眼RPE细胞,采用细胞增殖实验（MTS）、流式细胞术和Transwell实验分别检测细胞增殖、细胞周期以及细胞迁移能力。通过生物信息学及Western blot法确定miR-96作用的靶基因。应用Western blot检测miR-96对细胞增殖迁移相关信号通路蛋白（Akt、ERK）及细胞周期相关蛋白（p-Cdc2、CyclinD2、p-Rb）表达的影响。组间数据比较采用独立样本t检 验。结果：MiR-96在人眼RPE细胞中有表达。MTS结果显示,转染NC、miR-96后,人眼RPE细胞的相对增殖速率分别为100%、74%±2%,差异有统计学意义（t=42.174,P=0.002）。流式细胞术检测结果显示,转染miR-96后阻滞在G1期的RPE细胞显著多于转染NC后,且差异有统计学意义（t= -18.444,P=0.003）。Transwell实验结果显示,与转染NC相比,转染miR-96能显著抑制RPE细胞的迁移,差异具有统计学意义（t=6.754,P=0.002）。进而,明确了MITF是miR-96作用的靶基因。Western blot检测结果显示,转染miR-96后细胞中细胞周期相关蛋白p-Rb（t=11.211,P=0.002）、p-Cdc2（t=9.133, P=0.003）、CyclinD2（t=7.542,P=0.005）以及迁移相关信号通路蛋白p-ERK（t=16.699,P<0.001）,p-Akt （t=23.552,P<0.001）的表达水平均降低。结论：miR-96通过作用于靶基因MITF,并调控细胞周期和迁移相关蛋白的表达从而抑制人RPE细胞的增殖和迁移。     

LncRNA MT1JP对葡萄膜黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响

目的 研究LncRNA MT1JP对葡萄膜黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响及机制.方法 实时荧光定量PCR测定Ln-cRNA MT1JP在葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5、M23及正常视网膜色素上皮细胞系ARPE-19中的表达,将SP6.5细胞分成3组,即MT1JP组、siMT1JP组和NC组,分别转染pcDNA3.1-MT1JP、pcDNA3.1-siMT1JP及pcDNA3.1空载体,采用细胞划痕实验和Transwell实验测定3组划痕愈合率和侵袭细胞数,Western blot测定P53蛋白表达水平.结果 葡萄膜黑色素瘤细胞系SP6.5和M23中LncRNA MT1JP的相对表达量分别为0.20±0.02和0.31±0.01,均显著低于正常视网膜色素上皮细胞系ARPE-19的1.0(均为P＜0.01).siMT1JP组划痕愈合率为61.5％±3.7％,MT1JP组为10.6％±1.7％,NC组为20.0％±2.1％,3组间两两相比差异均有统计学意义(均为P＜0.01).在200倍视野下,siMT1JP组侵袭细胞数为(75.6±6.8)个,MT1JP组侵袭细胞数为(10.3±2.6)个,NC组为(29.50±3.9)个,3组间两两相比差异均有统计学意义(均为P＜0.01).siMT1JP组P53蛋白相对表达量为0.41±0.04,显著低于NC组的1.0(P ＜0.01);MT1JP组P53蛋白相对表达量为5.73±0.62,显著高于NC组的1.0(P＜0.01).结论 LncRNA MT1JP抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的转移和侵袭,其机制可能与上调P53蛋白表达有关.     

Secretion of interleukin-6 and prostaglandin E2 during uveal melanoma-monocyte in vitro interactions

Host-tumor interactions in uveal melanoma are not well understood. It is believed that the cytokine interleukin-6 and the lipid mediator autacoid prostaglandin E2 are involved in tumor growth, proliferation, tumor cell survival, and angiogenesis. These cytokines have been shown to be poor prognostic markers in uveal and cutaneous melanoma. In this study, we investigated the levels of interleukin-6 and prostaglandin E2 in monocyte and uveal melanoma conditioned medium. Five human uveal melanoma cell lines (92.1, MKT-BR, OCM-1, SP6.5 and UW-1), and one monocyte cell line (28SC) were seeded in 6 well plates at a concentration of 1 x 10(6)cells ml(-1). After 18 hr melanoma conditioned medium was placed on the monocyte cell line and monocyte conditioned medium was placed on each uveal melanoma cell line. Tumor cells and monocytes incubated in fresh medium after 18 hr were used as controls. Interleukin-6 and prostaglandin E2 levels were determined by immunoassays prior to media transfer and 6, 12, 24, and 36 hr thereafter. In the absence of conditioned medium, neither product showed baseline levels of expression. Interleukin-6 but not prostaglandin E2, which remained undetectable for the duration of the study, showed up-regulation of expression after incubation in conditioned medium. 28SC incubated in melanoma conditioned medium expressed higher levels of interleukin-6 than did uveal melanoma cells incubated in monocyte conditioned medium. In addition each cell line exhibited a distinct pattern of expression with individual cell lines exhibiting peak levels of cytokine production at different time points. The results of this study offer insight into the mechanism by which interleukin 6 may be involved in tumor-host interactions potentially favoring tumor growth, survival, and proliferation.