Pig-a基因突变试验研究进展

Pig-a基因突变试验是利用流式细胞术或有限稀释克隆法检测细胞表面糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚链蛋白的缺失情况,并以Pig-a基因突变率的变化来评价受试物的遗传毒性。该试验能够跨物种跨组织检测体内多种类型的突变作用,并能有效整合至其他体内重复给药毒性试验实现多终点联合检测,在药物临床前安全性评价中具有非常广阔的应用前景,有望成为体内遗传毒性试验的新选择,从而弥补现有遗传毒性试验组合的不足。本文对Pig-a基因突变试验的研究进展等进行综述。     

氯化消毒对自来水致突变性影响研究

本文通过鼠伤寒沙门氏菌致突变试验,分析常用氯化消毒方法对饮用水遗传毒性的影响。     

丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性研究

目的： 检测丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性,为其安全性评价提供资料。方法：采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验 (Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性。Ames试验设每皿0.08、0.4、2.0、10.0和50.0 μL剂量组,另设空白、溶剂、阳性对照;微核试验设350、700和1 400 mg/kg剂量组,另设溶剂、阳性对照;TK基因突变试验设12.5、25、50和100 μmol/L剂量组,另设溶剂、阳性对照。 结果：Ames试验中,加或不加S9的情况下,丙烯酸-2-乙基己酯对TA97、TA98、TA100和TA102菌株均显示致突变作用。微核试验中,雌雄鼠微核率均呈现剂量-反应关系;雄鼠高剂量组微核率与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);雌鼠各剂量组微核率与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。TK基因突变试验中高剂量组突变频率与对照组比较,差异具统计学意义(P<0.05)。结论：在本实验条件下,Ames试验和TK基因突变试验均显示阳性结果,微核试验显示可疑阳性。丙烯酸-2-乙基己酯遗传毒性需结合其他检测系统综合评定。     

30种中西药品二种细菌致突变性试验的检测与评价

本文按照国际有关标准建立的Ames试验和重组修复试验两种致突变探测方法,对30种中西药品进行了遗传毒性的检测与评价。结果表明:两种试验共检出17种药品为阳性结果(环磷酰胺、噻替派、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、正定霉素、丝裂霉素C、阿的平、灭滴灵、还原青蒿素、利福平、异烟肼、双酮嗪、水合氯醛、咖啡因、芜花酯乙、铬酸和黄花素),另外13种药品为阴性结果。有关药品安全性的问题,特别是临床还大量和较长期使用的药品以及中草药所发现的遗传毒性,应当引起有关部门的重视。     

适合纳米材料遗传毒性评价方法的选择

纳米材料独特的小尺寸和大的比表面积等物理化学性质,及其与生物体相互作用的高活性特性,为其在多种领域提供了广阔应用前景。与此同时,也可能带来潜在的安全风险。纳米材料的代谢和分布方式与普通化合物存在一定差异,如何科学地评价纳米材料对人体的潜在毒性风险,尤其是遗传毒性,是目前科学界及各相关监管部门亟需解决的问题。本文对现有常用遗传毒性评价方法用以评价纳米材料时存在的试验体系的局限性和灵敏度方面存在的优势与劣势进行回顾,总结了纳米材料遗传毒性评价时的关注点;并基于经济合作与发展（OECD）专家工作组的相关建议及相关遗传毒性评价指导原则,初步提出纳米材料遗传毒性试验组合优化方案。以期填补相关领域的空白,为纳米材料毒性评价和含纳米材料产品的上市前技术审评工作提供有益的借鉴。     

育发剂致突变性2种试验方法的比较

背景与目的:探讨检测育发剂致突变性的适宜的方法.材料与方法:运用Ames试验、小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)对3种育发剂的致突变性进行研究.结果:28种育发剂中有85.72%的样品对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌均有程度不同的抑菌或杀菌作用,选取的3种育发剂对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌均有较强的抑菌杀菌作用,在试验浓度下均未呈现致突变性;MLA试验结果显示,1号样品和3号样品育发剂在测试浓度下未呈现致突变性;2号样品育发剂随浓度增大,L5178Y细胞TK位点的突变频率有升高的趋势,其中8 μl/ml、40 μl/ml和200 μl/ml剂量组的突变率,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)可做为毒性较大育发剂的遗传毒性筛检的补充试验.     

桑芪胶囊的一般毒性和致突变性研究

目的:评价桑芪胶囊的一般毒性和致突变性。方法:采用小鼠急性经口毒性试验和大鼠30 d喂养试验评价桑芪胶囊的一般毒性,采用3项致突变试验(Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验)评价桑芪胶囊的致突变性,试验方法均按国家标准进行。结果:桑芪胶囊对雌、雄性小鼠的急性经口最大耐受剂量(MTD)均大于20 g/kg;3项致突变试验结果均为阴性;30 d喂养试验(最高剂量8.33 g/kg)无异常发现。结论:在本实验条件下,桑芪胶囊的一般毒性和致突变性结果均为阴性,可进一步开展桑芪胶囊降血糖等功能学研究。     

大黄素和大黄酸的体外遗传毒性评价

目的：评价大黄素和大黄酸的体外遗传毒性。方法：使用不同浓度的大黄素和大黄酸（均分别为20、40、80、120μg/ml）处理人的类淋巴母细胞WTK1后,进行彗星实验、体外微核试验和TK基因突变试验。并设溶剂对照组和甲基甲烷磺酸（mthylmethane sulfonate,MMS）阳性对照组。结果：大黄素80和120μg/ml剂量组TK基因突变频率、细胞拖尾率及平均尾长均增高（P〈0.05）;大黄酸120μg/ml剂量组TK位点总突变频率增高（P〈0.05）。结论：在本实验条件下,大黄素和大黄酸均表现出弱致突变作用。     

低硫,低芳烃铝轧制油的致突变作用研究

本文通过沙门氏菌致突变试验，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子致畸形试验的检测，探讨低硫，低芳烃铝轧制油有无致突变潜在毒性，结果未测到该样品对体细胞及生殖细胞的潜在致突变作用。     

Ames试验与HPRT试验两种方法对6种氧化型染发剂的检测

目的：通过细菌回复突变试验(Ames试验)和体外哺乳动物细胞基因突变试验(HPRT试验)两种方法检测氧化型染发剂,并对其结果进行分析比较,探讨两种方法在检测氧化型染发剂致突变性中的应用。方法：Ames试验采用一组营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌检测6种氧化型染发剂。各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从312～10 000μg/皿,通过计算受试物回复突变菌落数,判定受试物的致突变性。HPRT试验采用体外培养的V79细胞,各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从4.88～5 000μg/mL,研究6种氧化型染发剂致细胞HPRT位点突变的频率,通过计算受试物引起的V79细胞的突变频率,判定其致突变性。结果：在Ames试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,受试物在2 500～10 000μg/皿剂量范围均存在回变菌落数超过溶剂对照组两倍的情况,并有剂量-反应关系,表明Ames试验检测6种氧化型染发剂均为阳性结果。而在HPRT试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,各受试物在>2 500μg/mL时具有明显毒性作用,在9.75～2 500μg/mL剂量范围细胞突变频率与阴性对照组比较...     

交通性污染物对小鼠遗传毒性的影响

目的与方法：采用Ａｍｅ试验及精子畸形试验对长沙市湘雅路北站和松桂园３个有代表性的交通性污染路口现场染毒及实验室对照现场小鼠的遗传毒性进行研究。结果与结论：结果表明：染毒小鼠肺组织存在直接和间接的致突变物；小鼠胸骨嗜多染红细胞的微核率和精子畸形率明显高于对照组。同时说明交通性污染物对小鼠呈体细胞和生殖细胞的遗传毒性作用。     

遗传毒理学短期试验统计评价的要点

遗传毒理学短期试验统计评价的要点周宗灿，王纪宪北京医科大学卫生毒理学教研室，北京生物数学和生物统计学教研室１０００８３遗传毒理学短期试验（ＳＴＴ）的目的是检测化学品及环境样品的遗传毒性，评定对哺乳动物和人体细胞及性细胞的遗传危险性，以及，预测对哺乳动...     

应用蚕豆根尖细胞微核技术检测上海给排水系统中的致突变情况①

目的:本文主要检测上海市给排水系统中不同水体的遗传毒性.方法:采用蚕豆根尖细胞微核技术,结果:除自来水、某公园池塘水为无污染外,雨水、某江上游水、某河水、某污水处理厂出水、进水都有不同程度的污染,其中某污水处理厂进水污染最严重.结论:研究发现蚕豆根尖微核方法灵敏、简单、经济,是一种很有价值的筛选环境致突变物的短期生物试验方法.     

淮河水中非挥发性有机物的遗传毒性研究

目的:研究淮河水中非挥发性有机物对机体的遗传毒性。方法:采集淮河源水、自来水厂滤池出水、氯化消毒自来水及大型贮水箱水各200 升,经吸附浓缩后予小鼠灌胃染毒。以胸骨骨髓嗜多染红细胞微核率检测致突变性,以精子畸形率检测遗传毒性。结果:淮河源水及消毒处理过的自来水均有一定程度的致突变及致精子畸形性。遗传毒性大小顺序依次为:消毒处理过的自来水> 贮水箱水> 源水> 滤池出水。结论:淮河源水已受到有机诱变物的污染。混凝沉淀具有去除有机物、降低源水遗传毒性作用。而加氯消毒使水质的遗传毒性增高。     

Ames试验与MLA试验检测两味含马兜铃酸中药的致突变性

背景与目的:检测单味马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性.材料与方法:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames test)检测含马兜铃酸的两味单、复方中药的细菌回复突变率;采用96孔微孔板接种法进行小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(mouse lymphoma assay,MLA),经单、复方含马兜铃酸浓度5 μg/ml对L5178Y/tk(+/-)-3.7.2c细胞进行染毒,分别测定其接种效率(PE),相对总增长率(RTG)和突变频率(MF).结果:Ames试验结果为阴性,而小鼠淋巴瘤试验显示单味马兜铃具有一定细胞毒性并诱导tk基因突变,产生突变集落;而复方龙胆泻肝丸未诱发tk基因突变.结论:受试的单味马兜铃具有一定的遗传毒而复方龙胆泻肝丸具有对马兜铃的减毒效应.     

甘泰康的遗传毒性研究

目的与方法:采用Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验检测甘泰康的遗传毒性,为其食用安全性提供依据.结果与结论:3项遗传毒性试验均为阴性,甘泰康对所试菌株、小鼠体细胞及雄性生殖细胞无诱变性.     

TK基因突变试验—L5178Y细胞与TK6细胞的比较研究

TK基因突变试验是一种国外已广泛使用的体外短期致突变实验,它具有很高的灵敏度,可检出包括点突变、大的缺失、重组、染色体异倍性和其他较大范围基因组改变在内的多种遗传改变。TK基因突变试验采用的靶细胞系主要有小鼠淋巴瘤细胞L5178Y以及人类淋巴母细胞TK6和WTK1等,其基因型均为tk^ /-。使用L5178Y细胞的试验（即小鼠淋巴瘤细胞试验）发展较早,已形成一套比较完善的方法。而TK6和WTK1等人类来源的细胞在TK基因突变分析中的应用时间还不长,其方法尚不太成熟且资料有限,但因为来源于人类,在评价受试物对人体的损伤方面意义可能更大。有关小鼠淋巴瘤细胞和人类淋巴母细胞在TK基因突变试验中的灵敏度和特异性方面的比较性研究的报告尚不多见。本研究使用3种常规诱变剂（MMS、EMS、MMC）和一种非诱变剂（KCl）,分别采用琼脂平皿血和微孔平板法对两种细胞（L5178Y与TK6）的灵敏度和特异性进行比较研究。研究结果表明,直接比较同一受试物诱发两种细胞的突变频率,TK6细胞显著低于L5178Y细胞。比较两种细胞的相对突变指数时,TK6细胞突变指数显著高于L5178Y细胞。而且TK6细胞在较低浓度的受试物剂量下即可诱发突变频率、突变指数的显著增加。说明TK6细胞在本试验中比L5178Y细胞敏感。两种细胞采用两种方法对4种受试物的致突变性评价结果一致,即3种强致突变剂的检测结果均为阳性;微孔法检测KCl的结果两种细胞均为阳性,而琼脂法的检测结果均为无反应。结论：使用TK6细胞和L5178Y细胞对4种受试物的检测结果基本一致,但TK6细胞在检测低毒性、低浓度受试物时优于L5178Y细胞。另外,从对人类的实际意义来看,也应推广TK6细胞在TK细胞突变分析中的应用。     

N-烟酰基-L-天门冬氨酸的致突变性检测

背景与目的:研究N-烟酰基-L-天门冬氨酸遗传毒性,为临床安全用药提供理论依据.材料与方法:采用Ames试验、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)染色体畸变试验及小鼠微核试验对N-烟酰基-L-天门冬氨酸进行致突变性研究.结果:Ames试验中加S9与不加S9混合液的各剂量组回变菌落数与阴性对照无明显差别,且无剂量-效应关系.小鼠骨髓细胞微核率及CHO细胞染色体畸变率与阴性对照组比较,差别也无统计学意义(P＞0.05).结论:在本实验条件下,N-烟酰基山天门冬氨酸无致突变作用.     

一种氧化型染发剂的致突变性研究

目的: 检测一种染发剂的致突变性作为毒理学评价的一部分.方法:用Ames试验和体外哺乳动物细胞(CHL)染色体畸变试验来检测氧化型染发剂的致突变性.结果:在加S-9mix条件下,每皿2 500 μg至5 000 μg对测试菌株TA98具有明显的诱变性,其回变菌落数是自发回变数的2～3倍, Ames试验检测结果为阳性.体外哺乳动物细胞(CHL)染色体畸变试验显示在加或不加S-9mix条件下,当受试物终浓度为300 μg/ml,600 μg/ml和1 000 μg/ml,除了300 μg/ml在加S-9mix时染色体畸变细胞率未显著增加外(P＞0.05),其余浓度无论加或不加S-9mix,染色体畸变细胞率与阴性对照组相比均有显著性差异(P＜0.05).结论:受试的氧化型染发剂具有一定的遗传毒性.     

79个化合物及药物的诱变性研究

本实验用Ames试验对79个化合物及药物的诱变性进行了研究,包括加或不加代谢活化系统。检测的化合物和药物包括已知的直接、间接诱变剂、抗肿瘤药物、抗寄生虫剂物、抗菌药物、计划生育药物、抗矽肺药、黄酮类化合物、中草药提取物、高分子医用材料等多种类型。同一类型的化合物如蒽环类抗肿瘤抗生素和黄酮类化合物、含有不同化学基团或不同化学键的同系物其诱变性截然不同,提示可借鉴Ames试验评价化学结构与遗传毒性的关系。为开发疗效高、遗传毒性低的新药提供信息。“复方苯酚糊剂”及