间充质干细胞外泌体修复骨缺损的机制及作用研究进展

骨缺损是由于严重的创伤、感染、肿瘤切除、先天性畸形等引起的骨质丧失, 难以自然修复的骨缺损需要通过骨移植技术、膜诱导技术或干细胞骨组织工程技术修复。骨移植相关技术存在应用范围局限、操作复杂等缺点;膜诱导技术存在骨水泥降解速率不可控制, 需要二次手术等缺点;干细胞骨组织工程技术仍存在干细胞不定向分化等不稳定因素。外泌体是细胞之间通信的关键脂质体, 而工程化外泌体相较于天然干细胞外泌体有产量大、免疫原性低的优势, 有望代替干细胞应用于临床。笔者就间充质干细胞(MSC)外泌体修复骨缺损的机制及基于MSC的工程化外泌体修复骨缺损的作用研究进展进行综述, 为骨缺损的基础研究及临床治疗提供新思路。     

间充质干细胞外泌体治疗脊髓损伤作用机制的研究进展

脊髓损伤后继发性损伤及胶质瘢痕,使神经细胞在微环境中出现再生障碍,导致治疗困难.间充质干细胞(MSCs)具有多向分化、自我更新能力、参与免疫调节等功能,可用于治疗脊髓损伤,但存在不易通过血脊屏障、高致瘤性等缺点.MSCs外泌体是由MSCs分泌的纳米级外囊泡,包裹多种活性物质,在脊髓损伤研究中具有极强的神经修复作用,且具...     

脐带间充质干细胞对严重切割伤致脑水肿的保护作用

目的探讨严重切割伤导致脑水肿的程度以及脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的保护作用。方法选取90只雌性C57L小鼠, 使用手术刀片制备小鼠腹部严重切割伤模型。按随机数字表法分为对照组(20只)、切割伤组(20只)、白细胞介素-6抗体(IL-6-AB)伤前使用组(切割伤前18 h使用, 15只)、IL-6-AB伤后使用组(切割伤后1 h使用, 15只)和UC-MSCs组(20只)。检测脑组织含水量。ELISA法检测脑组织IL-6变化趋势, Western blot检测水通道蛋白(AQP-4)表达变化。结果大脑组织含水量检测证实, 与对照组[(77.1±2.4)%]比较, 切割伤组脑组织含水量显著增高[(81.5±1.8)%](P<0.05)。与切割伤组比较, UC-MSCs组[(76.8±2.4)%]及IL-6-AB伤前使用组[(76.2±2.9)%]脑组织含水量均显著降低(P<0.05), 但IL-6-AB伤后使用组[(82.4±1.7)%]差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法检测发现, 与对照组[(10.3±0.3)pg/ml]比较, 切割伤组[(16.6...     

人脐带间充质干细胞来源的外泌体免疫调节功能异质性研究

目的 研究不同供者来源的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)分泌的外泌体免疫调节能力的异质性.方法 培养5株不同供者来源的hUC-MSC,收集无血清培养上清提取外泌体,流式细胞术检测其表面特异性标志CD9、CD63、CD81、CD44的表达,BCA法测定总蛋白含量.将外泌体和脐带血单个核细胞(UBMC)共培养72 h,MTT实验检测细胞增殖活性, ELISA测定共培养上清中干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.离心重悬UBMC和K562细胞按5∶1的比例共培养4 h,MTT实验检测细胞活性,计算UBMC的杀伤能力.结果 提取的外泌体表达CD9,CD63,CD81及CD44.不同供者来源hUC-MSC分泌的外泌体对UBMC的增殖、分泌细胞因子及K562细胞杀伤能力的作用不同.结论 不同供者hUC-MSC的外泌体免疫调节能力具有异质性.     

骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤是中枢神经系统的一类严重创伤,其所造成的运动及感觉功能障碍,显著降低了患者的生存和生活质量。现行的修复方法和药物治疗效果欠佳,以致于给个人、家庭和社会造成了沉重的负担。随着生物学及分子生物学研究的不断深入,以骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植为代表的生物治疗为脊髓损伤的修复带来了曙光。本文将就脊髓损伤修复的现状、BMSCs的生物学特性和作用机制、以及其应用于脊髓损伤修复的潜在价值等方面进行综述。     

间充质干细胞片及其衍生材料在骨缺损修复中作用的研究进展

骨缺损多由严重创伤、感染、肿瘤切除、先天性畸形所致, 对患者健康和生活质量造成不利影响。目前主要采用自体骨和同种异体骨移植来填充缺损, 这些方法存在供体短缺、继发性骨损伤和瘢痕形成等问题。近年来, 骨组织工程学的兴起为骨缺损修复提供了新的方式, 其中利用组织工程学原理制备的间充质干细胞(MSC)片可以很好地解决上述自体或异体骨移植出现的问题。随着制备技术的发展, 目前在MSC片的基础上已衍生出脱细胞细胞外基质(ECM)片和MSC/ECM团块等新型骨缺损修复材料。为此, 笔者对MSC片及其衍生材料的制备、MSC片及其衍生材料在骨缺损修复中作用进行综述, 为骨缺损修复的相关基础研究及临床治疗提供参考。     

脊髓损伤基础研究存在的问题及改进建议

脊髓损伤致死率和致残率极高, 其治疗一直是世界难题。随着医疗救治手段的进步, 脊髓损伤患者的生存率有所提高, 但脊髓损伤的临床疗效仍不理想。中国在脊髓损伤基础研究方面取得了重要进展, 如解析脊髓损伤修复机制、研发多种细胞疗法和生物支架等治疗脊髓损伤。然而, 部分基础研究对脊髓损伤微环境和动物模型认识不足或缺乏临床问题支撑, 导致研究结论过于浅显甚至互相矛盾, 迫切需要重新审视研究方法, 开展基础研究与临床转化相结合的研究。为此, 笔者探讨脊髓损伤基础研究存在的关键问题和困难, 并提出改进建议, 为正确开展基础研究和加速临床创新转化提供新思路。     

智能精准辅助技术在脊髓电刺激治疗脊髓损伤中应用的研究进展

脊髓损伤是一种严重的中枢神经系统疾病, 常导致损伤平面以下的肢体感觉运动障碍, 并伴有呼吸功能衰竭、肠道功能及血流动力学紊乱。现有治疗方法中, 早期减压手术和激素类药物冲击疗法效果欠佳且易引发多种严重并发症, 与此同时, 康复治疗费用高昂且仅能获得有限功能恢复。脊髓电刺激(SCS)通过刺激调控残存的低位脊髓中间神经元, 重塑残存神经传导束功能, 可有效促进脊髓损伤患者运动功能修复。脊柱外科引入智能精准辅助技术, 针对脊髓损伤不同程度、节段及病程来制订更加精准、个体化的神经调控和康复策略, 结合实时反馈, 不断修正算法, 实现对SCS的远程安全调控, 提高脊髓损伤患者救治的有效性及安全性, 有助于制订更为有效的康复干预方案, 进一步提高临床转化价值。笔者就智能精准辅助技术在SCS治疗脊髓损伤中应用的研究进展进行综述, 为脊髓损伤的康复治疗提供参考。     

脑-机接口技术在脊髓损伤后运动功能改善中应用的研究进展

大多数脊髓损伤患者遗留四肢运动功能障碍, 药物及手术等常规治疗往往不能取得良好疗效, 患者只能依赖轮椅活动甚至长期卧床, 严重影响生活质量。脑-机接口(BCI)技术可为脊髓损伤患者的运动功能康复提供非肌肉通道, 通过自身非病变脊髓的正常功能或体外机械设备, 实现部分运动功能的改善。BCI技术经过几十年的发展, 信号收集装置可以较为精准地识别和收集大脑运动信号, 并通过特征分析将信号进行转化, 利用输出装置使大脑指令得到实施。大量基础研究和临床研究结果表明, 将BCI技术应用于脊髓损伤, 可使患者上下肢的运动功能得到部分改善。因此, BCI技术受到越来越多的关注。笔者就BCI技术及其对脊髓损伤患者运动功能改善的影响两个方面的研究进展进行综述, 为改善脊髓损伤患者运动功能提供参考。     

脊髓损伤患者肠道菌群特征及以肠道菌群为靶点的治疗方法研究进展

脊髓损伤严重影响患者胃肠功能并引发肠道菌群失衡, 导致脊髓神经炎症加剧。近年来, 随着肠道菌群-肠-脑轴理论的提出, 肠道菌群在中枢神经与胃肠系统中的调节作用逐渐得到重视。尽管已有相当多的研究从不同角度关注脊髓损伤患者肠道菌群特征对脊髓神经功能修复的影响, 但当前以肠道菌群为干预靶点治疗脊髓损伤的研究模式繁多, 仍缺乏统一有效的临床治疗方法。笔者就脊髓损伤患者肠道菌群特征及以肠道菌群为靶点的治疗方法研究进展进行综述, 为脊髓损伤的临床救治与基础研究提供参考。     

更正

本刊2023年第39卷第10期第880页1.4 统计学分析应改为1.5 统计学分析。特此更正并致歉意!     

骨髓间充质干细胞移植治疗成鼠脊髓损伤的研究

目的:研究骨髓间充质干细胞移植治疗成鼠脊髓损伤的可行性。方法:选取成年雌性SD大鼠32只,2只用以提取骨髓间充质干细胞,其余大鼠随机分为细胞移植组、PBS缓冲液组及空白对照组。骨髓间充质干细胞分离传代培养后Hoechst33342标记,损伤1周后采取局部注射移植于大鼠脊髓损伤区,移植6周后用免疫荧光法检测细胞的存活与分化。移植后1~6周对各组动物进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分。结果:细胞移植组BBB评分提高显著,与其他两组差异有统计学意义;免疫荧光显示,移植细胞在体内大量存活,多数细胞神经元特异性标记物NSE、NF-200表达呈阳性,少数细胞GFAP表达呈阳性。结论:局部移植的骨髓间充质干细胞可以转化为神经元样细胞,并有助于大鼠脊髓损伤后的功能恢复。     

放射性肠炎高压氧治疗疗效研究进展

放射性肠炎是盆腔、腹腔以及腹膜后肿瘤放射治疗常见的并发症之一, 严重影响患者的生存质量, 甚至危及患者生命。目前放射性肠炎病理机制尚不十分明确, 且临床缺乏有效的预防及治疗手段。高压氧治疗作为一种新兴的治疗手段, 针对放射性肠炎的治疗价值得到越来越多肯定。本综述主要介绍高压氧治疗放射性肠炎的研究现状及其修复机制, 重点综合既往文献循证医学研究, 总结临床应用高压氧治疗的疗效及其不良反应的发生率。并且针对高压氧是否促进肿瘤细胞生长的疑虑进行分析解答, 旨在对放射性肠炎的高压氧治疗临床决策提供参考依据。     

静脉移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤

目的 研究静脉移植骨髓间充质干细胞(bone martow stromal cells,BMSCs)对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响.方法 对10只同种异体SD大鼠的BMSCs进行体外分离、培养、扩增、纯化后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)进行标记;重物打击致瘫痪造模法制成完全性截瘫的同种大鼠脊髓损伤动物模型,制模后7 d完全随机分为A、B、C三组:A组22只,作为BMSCs移植组,经鼠尾静脉注射2×106/ml的BMSCs细胞悬液1 ml;B组22只,作为对照组,注射1 ml培养液;C组22只,作为空白手术对照组.注射后2,3,6周,免疫组织化学检测BMSCs在损伤段脊髓的存活、分布、分化并计数,观察损伤段脊髓内生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)、神经丝蛋白200(neurofilament 200,NF200)和巢蛋白的表达,注射后1,2,3,4,5,6周Basso-Beattie-Bresnaban(BBB)评分评估各组后肢运动功能.结果 移植后2,3,6周BrdU阳性的BMSCs主要分布于损伤段及邻近节段脊髓内.计数发现,移植后2周BrdU阳性的BMSCs约占移植细胞数的4.9%,3周占4.4%,6周占2.9%;移植后2周,BMSCs形态大多变为圆形或椭圆形,部分阳性标记的细胞长出神经元样突起,约12.6%表达胶质纤维酸性蛋白(glial fribrillary acidic protein,GAFP),约5.4%表达神经元特异性核蛋白(neuronal nuclear antigen,NeuN);移植后2,3,6周,A组GAP-43、NF200、巢蛋白的表达明显高于B、C组(P<0.05);移植后3周开始,A组的BBB评分在各观察时相点明显高于B、C组(P<0.05).结论 通过静脉注射的BMSCs能向脊髓损伤灶内迁徙、存活,表现出对损伤灶的趋化性,并向神经元和星形胶质细胞分化,上调GAP-43、NF200和巢蛋白的表达,改善神经功能,可用于脊髓损伤的细胞移植治疗.     

烯醇化酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后自噬及运动功能的影响

目的探讨烯醇化酶(Enolase)抑制剂(ENOblock)对大鼠脊髓损伤后调控自噬相关蛋白表达及促进运动功能的影响。方法选取160只雌性SD大鼠, 按照随机数字表法分为假手术组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)自噬抑制剂处理组(3-MA组)、脊髓损伤组及ENOblock处理组(ENOblock组), 每组40只。假手术组行背部椎板切除, 但不损伤脊髓。3-MA组、脊髓损伤组和ENOblock组采用改良Allen法打击装置损伤T8脊髓, 建立脊髓损伤模型。3-MA组和ENOblock组分别在伤后立即向鼠尾静脉推注3-MA(2.5 mg/kg)和ENOblock(100 μg/kg)。假手术组和脊髓损伤组向鼠尾静脉推注等剂量的等渗氯化钠溶液。伤后1, 3, 7, 14, 21 d采用BBB评分评估各组双下肢运动功能。伤后3 d采用免疫印迹法检测各组微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ和LC3-Ⅰ比值、自噬效应蛋白(Beclin-1)和多泛素结合蛋白(p62)的表达量。伤后7 d采用免疫荧光法检测各组脊髓组织损伤区域LC3-Ⅱ和Beclin-1的阳性细胞。伤后3 d 采用RT-PCR检测各组脊髓组...     

创伤性脊柱脊髓损伤康复治疗专家共识(2020版)

创伤性脊柱脊髓损伤(TSCI)患者由于运动感觉功能障碍,导致多种并发症而危及生命,患者的生存质量受到严重影响。本共识在TSCI流行病学的基础上,总结国内外文献和调研结果,对TSCI的损伤分级、康复评定、康复策略和主要康复措施等方面进行归纳和总结,期望对TSCI的康复治疗提供早期合理规范的治疗方案。     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的抗凋亡机制

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植治疗大鼠脊髓损伤的潜在抗凋亡机制。方法成年雄性SD大鼠48只，随机分为对照组、模型组、治疗组，每组16只。模型组、治疗组采用改良Allen法建立大鼠下胸段脊髓损伤模型。造模后7d，于L4～L5间隙蛛网膜下腔向对照组及治疗组注射BMSCs，模型组注射同体积Hank缓冲液。术后评估大鼠后肢运动功能。以原位末端标记法（TUNEL）检测神经细胞凋亡，免疫组织化学染色法检测Bax、Bcl-2的表达。结果BMSCs移植后，治疗组动物后肢运动功能持续恢复。移植后14d，模型组TUNEL阳性细胞数量高于对照组和治疗组（P〈0．01），治疗组亦高于对照组（P〈0．01）；模型组Bax阳性细胞表达多于对照组和治疗组（P〈0．01），治疗组Bax阳性细胞表达多于对照组（P〈0.01），Bcl-2阳性细胞表达各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。移植后28d，各组TUNEL阳性细胞数量均减少，模型组仍然高于对照组和治疗组，但差异无统计学意义（P〉0.05）；各组Bax阳性细胞表达减少，各组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05），Bcl-2阳性细胞表达变化不明显。结论BMSCs移植可改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能，减少神经细胞凋亡，具有潜在抗凋亡作用，这一作用可能通过下调凋亡调控蛋白Bax表达而实现。     

脐带间充质干细胞外泌体对大鼠卵巢功能作用及机制研究

目的探讨脐带间充质干细胞外泌体(MSCs-exo)对大鼠卵巢功能的作用及机制。方法将24只大鼠随机分为空白组、模型组和干预组3组,每组各8只。空白组作为对照,模型组建立卵巢早衰大鼠模型,干预组建立卵巢早衰大鼠模型后采用MSCs-exo处理。ELISA法检测各组大鼠血清激素水平,Western blot检测卵巢组织中凋亡相关蛋白(Bax、Caspase-3)、相关通路蛋白(Ras、Erk)表达水平。提取各组大鼠卵巢颗粒细胞,模型组建立颗粒细胞损伤模型,干预组建立颗粒细胞损伤模型后采用MSCs-exo处理。CCK-8检测颗粒细胞活力,ELISA法检测颗粒细胞激素水平,流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡情况。结果模型组、干预组干预2 d、4 d、6 d、8 d、10 d的颗粒细胞增殖率均低于空白组,且模型组低于干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、干预组颗粒细胞雌二醇水平、颗粒细胞孕激素水平、血清雌二醇水平、血清孕激素水平均低于空白组,且模型组低于干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、干预组颗粒细胞凋亡数量高于空白组,且模型组高于干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、干预组大鼠卵巢组织Bax和Caspase-3表达水平高于空白组,且模型组高于干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、干预组卵巢组织Ras、Erk蛋白表达水平低于空白组,且模型组低于干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MSCs-exo能够改善大鼠卵巢功能,其机制可能与调节Ras/Erk信号通路有关。     

间充质干细胞外泌体在创伤修复再生中作用的研究进展

间充质干细胞（MSCs）外泌体能够通过旁分泌作用,发挥类似干细胞的促进组织器官修复再生的功能,避免了直接移植MSCs的风险,如致瘤、伦理、免疫排斥反应等。MSCs外泌体参与细胞通讯,维持微环境的稳态,促进细胞的增殖、迁移及细胞外基质的修复再生,且能够在不同物种之间传递,却不会引起明显的免疫反应,在组织器官的修复与再生方...