hsa＿circ＿0001785在乳腺癌患者血清中的表达及临床意义研究

目的 探讨hsa＿circ＿0001785在乳腺癌患者血清中的表达及临床意义。方法 选择2021年9月至2022年3月广州医科大学附属第五医院甲乳外科收治的乳腺癌患者43例(乳腺癌组),乳腺良性肿瘤患者54例(良性肿瘤组),健康体检者45名(健康对照组)。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测其血清hsa＿circ＿0001785的相对表达量,并进行三组间比较。分析hsa＿circ＿0001785表达水平与乳腺癌患者临床病理特征的关联性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析hsa＿circ＿0001785诊断乳腺癌的效能。结果 乳腺癌组血清hsa＿circ＿0001785表达水平显著高于良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05),良性肿瘤组和健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清hsa＿circ＿0001785具有诊断乳腺癌的应用价值(AUC=0.780,P<0.05),且诊断效能优于癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)。乳腺癌患者血清hsa＿circ＿0001785的表达水平与其年龄、肿瘤类型、TNM分期、淋巴结受累、远处...     

胶质瘤中hsa＿circ＿0021350的表达情况及临床意义研究

目的 探讨hsa＿circ＿0021350在胶质瘤中的表达及临床意义,初步评价其应用于胶质瘤诊断和治疗的潜力。方法 选择2016年1月至2022年5月在广西医科大学第一附属医院神经外科经手术获取的胶质瘤组织标本40例(高级别胶质瘤22例,低级别胶质瘤18例),正常脑组织标本10例。通过RNase R消化联合逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证hsa＿circ＿0021350的环状特性。通过TA克隆测序法鉴定实时荧光定量PCR(qRT-PCR)扩增产物。比较高级别胶质瘤、低级别胶质瘤和正常脑组织hsa＿circ＿0021350的表达水平。分析hsa＿circ＿0021350表达与胶质瘤患者临床病理指标的关联性。结果 该研究所设计的发散引物可有效特异扩增hsa＿circ＿0021350。经验证,hsa＿circ＿0021350呈环状,且能耐受RNase R消化。qRT-PCR实验结果显示,高级别胶质瘤和低级别胶质瘤hsa＿circ＿0021350的表达水平均高于正常脑组织,且高级别胶质瘤hsa＿circ＿0021350的表达水平较低级别胶质瘤更高,差异有统计学意义(P<0.05)。...     

2型糖尿病患者外周血hsa＿circ＿0071336表达及临床意义的研究

目的 探讨T2DM患者外周血hsa＿circ＿0071336表达及临床意义。方法 选取2017年5月至2019年8月于首都医科大学附属宣武医院就诊的89例新诊断T2DM患者（T2DM组）、76例IFG患者（IFG组）及83名同期体检健康者（NC组）,分析各组hsa＿circ＿0071336表达水平与糖代谢指标的相关性。采用多元线性回归和Logistic回归分析IR、T2DM和IFG的影响因素。受试者工作特征（ROC）曲线评价hsa＿circ＿0071336对鉴别T2DM和IFG的程度。结果 T2DM组BMI、腰高比、WC,SBP、DBP,FPG、HbA1c、FIns、TG、LDL-C,HOMA-IR、TyG、Mets-IR高于NC组（P<0.05）,APN低于NC、IFG组（P<0.05）。Spearman相关分析显示,hsa＿circ＿0071336表达水平与APN呈正相关（P<0.05）,与FPG、HbA1c、FIns呈负相关（P<0.05）。多元线性回归分析和Logistic回归分析结果显示,hsa＿circ＿0071336是IR、T2DM和IFG的影响因...     

miR-195在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达变化及其过表达对瘤细胞肿瘤生物学特性的影响

目的 探讨微小RNA-195(miR-195)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞中的表达变化,并探讨miR-195过表达对瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等肿瘤生物学特性的影响及可能的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR检测人DLBCL细胞系U2932、HBL1、OCI-LY-10及人正常B淋巴细胞系IM-9中的mi...     

RNA介导Survivin基因沉默对胰腺癌细胞Panc-1细胞株凋亡及增殖的影响

目的观察靶向封闭survivin基因对胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响，探讨survivin基因在胰腺癌的发生、发展中作用：方法设计2对survivin-shRNA，体外转录制备shRNA。利用脂质体转染技术将survivin-shRNA转染胰腺癌细胞株（Panc-1），RT-PCR检测survivin-mRNA水平；MTT法检测细胞生长情况并绘制细胞生长曲线；细胞形态学观察及流式细胞仪分析细胞凋亡。结果转染2对survivin-shRNA可分别使Panc-1细胞survivin-mRNA水平下降54．86％，52．19％；MTT法检测结果显示：转染两对survivin-shRNA24、48、72小时对细胞增殖无明显影响（P〉0．05）；细胞形态学观察及流式细胞仪分析结果显示：转染两对survivin-shRNA 24、48、72小时对细胞凋亡无明显影响（P〉0．05）。结论应用RNAi技术，将survivin-shRNA转染胰腺癌细胞（Panc-1），能成功介导survivin基因沉默，达到部分靶向封闭survivin的目的：部分靶向封闭survivin对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及增殖无明显影响。提示：survivin在胰腺癌细胞增殖与凋亡调控中所起的作用可能并非关键性的。因而以survivin为靶基因的基因治疗对胰腺癌可能无效。     

Bcl-2家族对细胞凋亡的作用及其在胰腺癌中的表达

Bcl-2基因是最早被发现与细胞凋亡有关的调控基因之一。Bcl-2家族中促进凋亡和抑制凋亡成员形成的二聚体结构对凋亡前的信号传导起重要作用。Bcl-2家族在胰腺癌组织中表达失调，且此现象与细胞凋亡和胰腺癌转移等表现相关。     

BMP-4对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响及其分子机制

目的 观察骨形态发生蛋白4(BMP-4)对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响,并探讨其与Smad1信号通路的关系.方法 常规培养PTC细胞系B-CPAP、TPC-1、K1细胞,采用qPCR法检测BMP-4 mRNA表达水平.取BMP-4 mRNA表达量较低的B-CPAP细胞,将其分为阴性对照组和过表...     

长链非编码RNA HOTAIR在肝癌细胞生物学行为中的调节作用及其机制研究进展

反义转录长链非编码RNA-同源盒基因转录反义RNA(HOTAIR)是在肝癌细胞中第一个被发现的长链非编码RNA,其可通过调控表观遗传和染色质状态来调节其基因的表达水平,并影响肝癌细胞的生物学行为。其中,HOTAIR可通过与PRC2转录抑制复合物结合,使其相应靶基因甲基化,从而诱导和促进肝癌细胞的激活与增殖,或者通过竞争同种miRNA,参与靶基因的水平表达调节,来促进肝癌细胞的侵袭与转移。沉默HOTAIR可通过调控miR-217-5p活化磷酸化-磷脂酰肌醇3-激酶/磷酸化-苏氨酸蛋白激酶/基质金属蛋白酶-2/9信号通路及降低磷酸化信号转导和转录激活因子3的表达水平,促进肝癌细胞凋亡现象的发生。     

Bcl-2家族对细胞凋亡的作用及其在胰腺癌中的表达

Bcl-2基因是最早被发现与细胞凋亡有关的调控基因之一。Bcl-2家族中促进凋亡和抑制凋亡成员形成的二聚体结构对凋亡前的信号传导起重要作用。Bcl-2家族在胰腺癌组织中表达失调,且此现象与细胞凋亡和胰腺癌转移等表现相关。     

CD14对胃癌细胞SGC-7901生物学性能的影响

目的 观察CD14对胃癌细胞SGC-7901生物学性能的影响,探讨其在胃癌发生发展中的作用.方法 用CD14蛋白受体胞壁酰二肽(MDP)刺激CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞,CCK-8法以及平板克隆形成实验检测细胞的活性和增殖能力,流式细胞术检测CD14对细胞凋亡的影响,Transwell侵袭模型检测细胞的侵袭能力.结果 CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞活性显著降低(P ＜0.05);CD14稳定转染的细胞克隆形成率为15.66％±5.94％,与空质粒转染细胞的19.28％ ±5.48％相比,P＜0.05;CD14稳定转染的胃癌细胞凋亡率为14.38％,与空质粒转染细胞的4.58％相比,P＜0.05;CD14稳定转染的胃癌SGC-7901细胞在24、48 h的侵袭细胞数分别为(69.40±6.73)、(108.20±9.68)个,与空质粒转染细胞的(81.40±7.80)、(133.20±12.87)个相比,P均＜0.05.结论 CD14能够促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,同时抑制其增殖及侵袭.     

趋化因子配体16对人胰腺癌细胞株PANC1生物学行为的影响

目的探讨趋化因子配体16（CXCL16）对人胰腺癌细胞PANC1生物学行为的影响。方法取对数生长期的人胰腺癌细胞PANC1,分别加入50、1013、200ng／ml的重组人CXCL16（rhCXCL16）和抗CXCL16抗体处理4h,以不加rhCLCL16作为对照。采用MTT法检测细胞增殖,采用Mqrtigel基质检测细胞的黏附率,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。结果100ng／ml rhCXCL16处理PANC1细胞后,细胞增殖、对基质的黏附率、侵袭和迁移能力分别为0．264±0．021、（91．4±8．6）％、1．246±0．216、1．361±0．276,其中细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力均显著高于对照组的（20．6±3．2）％、0．259±0．013、0．199±0．008（P〈0．01）,对细胞的增殖不影响;2130ng/ml rhCXCL16处理后,细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力进一步提高到（92．1±6．3）％、1．511±0．174、1．600±0．208（P〈0．05）。结论CXCL16可诱导人胰腺癌细胞PANC1增强对基质的黏附性、侵袭性和迁移性。     

趋化因子配体16对人胰腺癌细胞株PANC1生物学行为的影响

目的 探讨趋化因子配体16(CXCL16)对人胰腺癌细胞PANC1生物学行为的影响.方法 取对数生长期的人胰腺癌细胞PANC1,分别加人50、100、200 ng/ml的重组人CXCL16(rhCXCL16)和抗CXCL16 抗体处理4 h,以不加rhCLCL16作为对照.采用MTT法检测细胞增殖,采用Mqrtigel基质检测细胞的黏附率,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力.结果 100 ng/ml rhCXCL16处理PANC1细胞后,细胞增殖、对基质的黏附率、侵袭和迁移能力分别为0.264±0.021、(91.4±8.6)%、1.246±0.216、1.361±0.276,其中细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力均显著高于对照组的(20.6±3.2)%、0.259±0.013、0.199±0.1308(P<0.01),对细胞的增殖不影响;200ng/ml rhCXCL16处理后,细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力进一步提高到(92.1±6.3)%、1.511±0.174、1.600±0.20s(P<0.05).结论 CXCL16可诱导人胰腺癌细胞PANC1增强对基质的黏附性、侵袭性和迁移性.     

干扰Sema4D基因表达对胰腺癌细胞生物学特征的影响

目的探讨干扰Sema4D基因的表达对胰腺癌细胞生物学的影响。方法设计合成Sema4D-siRNA,转染到人胰腺癌细胞系中,将实验分为3组,转染siRNA组、阴性对照组(即转染非特异性对照组)﹑空白对照组(未经任何处理的胰腺癌细胞)。转染48 h后利用RT-q PCR检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化,转染72 h后利用Western-Blot的方法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell小室侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变;采用流式细胞技术检测肿瘤细胞凋亡的变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析比较,进一步两两比较采用LSD-t检验法。结果转染Sema4D-siRNA 48 h后,转染siRNA组Sema4D mRNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组,3组比较差异有统计学意义(F=421.990,P<0.001)。转染Sema4D-siRNA 72 h后,转染siRNA组Sema4D蛋白明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(F=27.074,P=0.002 3)。转染siRNA组48、72、96 h的细胞生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异均有统计学意义(F值分别为15.314、62.255、223.493,P值分别为0.004、<0.001、<0.001)。转染siRNA组穿膜细胞个数明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义(42.0±5.9 vs 60.0±6.1 vs 61.0±4.6,F=37.21,P=0.000 4]。转染siRNA组穿膜细胞凋亡率明显低于阴性对照组和空白对照组,3组间比较差异有统计学意义[(16.57±0.31)%vs(9.50±0.45)%vs(9.90±0.61)%,F=26.75,P=0.007 4]。结论 siRNA能够下调Sema4D基因在胰腺细胞中的表达,可以抑制胰腺癌细胞增殖,使胰腺癌细胞侵袭能力明显下降,凋亡率下降。     

三联脆组基因对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究三联脆组基因(fragile histidine triad,FHIT)对胰腺癌细胞增殖的影响,探讨FHIT基因对胰腺癌增殖的抑癌机制。方法：通过脂质体介导的方法将pRC／CMV FHIT质粒转染有FHIT全基因丢失的胰腺癌1990细胞株。用RT－PCR及Western-blot方法对获得G418抗性细胞进行外源性FHIT基因整合及表达的鉴定。对导入有外源性FHIT基因表达的细胞（1990p FHIT)进行 细胞生长特征及裸鼠致瘤性分析。经光镜及电镜对1990pFHIT进行观察,并对其进行DNA片段化分析。结果：转染FHIT基因的1990细胞,有外源性FHIT基因的整合及表达,其增殖活性明显减弱,裸鼠致瘤性明显降低或消失。1990pFHIT细胞中存在明显的凋亡现象。结论：导放外源性的FHIT基因,通过某种途径诱导胰腺癌细胞的凋亡,从而抑制肿瘤细胞的恶性增殖。     

丙泊酚对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及机制

目的 探讨丙泊酚对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及机制.方法 将培养至对数生长期的人胃癌细胞株MGC-803随机分为0、2、4、8μg/L丙泊酚组并用相应浓度丙泊酚进行干预,其中0μg/L丙泊酚组为对照组.用MTT法检测细胞增殖能力,用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,用Wes...     

Midkine和Caspase-3在胰腺癌中的表达与细胞凋亡的关系

目的:研究人胰腺癌组织中Midkine(MK)和Caspase-3蛋白的表达特点,探讨其表达与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法:收集人胰腺癌组织标本49例,免疫组织化学SP法检测MK和Caspase-3蛋白的表达,原位凋亡检测试剂盒辣根过氧化物酶(TUNEL)检测细胞凋亡指数.以同期15例正常胰腺组织标本为对照.结果:MK蛋白、Caspase-3蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率高于正常胰腺组织(71.4%VS 0,P＜0.01;77.6% VS 46.7%,P＜0.05),MK蛋白表达与胰腺癌组织学分化、临床分期和淋巴转移相关(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达仅与组织学分化有关;胰腺癌组织标本中,MK阳性表达组凋亡指数显著低于MK阴性表达组(5.13±2.69 VS 7.93±6.65,P＜0.05);胰腺癌组织中MK与Caspase-3蛋白的表达呈负相关(r=-0.34.P＜0.05).结论:MKC和Caspase-3参与了胰腺癌的发生发展,MK在胰腺癌组织中的高表达具有抑制细胞凋亡的生物学功能,其作用机制可能是通过抑制Caspase-3的活性.