丙戊酸钠对博莱霉素致肺纤维化大鼠转化生长因子β1表达的调节

目的 探讨组蛋白脱乙酰基转移酶抑制剂丙戊酸钠对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的调节.方法 54只雄性SD大鼠随机分为控制对照组、肺纤维化模型组、丙戊酸钠干预组.肺纤维化模型组、丙戊酸钠干预组均给予博莱霉素溶液按5 mg/kg气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,控制对照组予以等体积生理盐水注射.丙戊酸钠干预组对肺纤维化大鼠予丙戊酸钠(200mg· kg-1· d-1)干预.各组随机于造模后第7、14和28天分3批处死,观察大鼠大体及HE变化和Masson染色,Szapiel评分,肺组织羟脯氨酸(HYP)检测及TGF-β1免疫组化检测.结果 与控制对照组同时间点相比,肺纤维化模型组14 d和28 d肺组织TGF-β1及HYP含量显著增高(P＜0.01),丙戊酸钠干预后增高的Szapiel评分、TGF-β1及HYP受到明显抑制.结论 予以VPA干预后肺组织Masson染色显示蓝色胶原沉积明显减少,能显著抑制博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的TGF-β1,VPA有抑制抗肺纤维化作用.     

激动素对实验性肺纤维化的治疗作用研究简

目的 研究激动素（Kinetin）对博来霉素 A5 （ BLMA5） 诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用.方法 雌性Wister大鼠60只随机分为3组：A组为生理盐水对照组;B 组为BLMA5造模组;C 组为Kinetin治疗组.分别于第3、7、14、28天处死大鼠,取肺组织行HE及Masson染色以观察肺泡炎和肺纤维化情况,检测肺组织匀浆HYP、SOD、MDA、TNF-α、TGF-β1的含量.结果与模型组比较,Kinetin治疗组的肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻;肺组织SOD水平上升,MDA、TNF-α、TGF-β1水平下降.结论 Kinetin通过抗氧化、抑制TNF-α、TGF-β1减轻博来霉素A5所致大鼠肺纤维化.     

肺心清胶囊对大鼠肺纤维化及其细胞因子TGF-β1、Smad2/3作用的实验研究

目的 观察肺心清胶囊对博来霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用及对表达水平的影响,探讨其可能机制.方法 32只健康雄性SD大鼠,随机分为4组:空白对照组(CG),模型组(MG),强的松治疗组(DG),肺心清胶囊治疗组(EG),每组8只;除空白对照组外,其余各组采用一次性气管内滴注博莱霉素制备肺纤维化大鼠模型,CG组气管内注射等量生理盐水,DG组、EG组于造模后24小时开始给予相应的干预药物,DG、MG组给予生理盐水,分别予干预第28天处死各组动物,取左肺下叶采用HE染色及免疫组化方法观察其病理变化,检测肺组织TGF-β1,Smad2/3表达.结果 与模型组比较,肺心清胶囊治疗组的肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻,肺组织TGF-β1、Smad2/3表达下降.结论 肺心清胶囊具有抗肺纤维化作用可能是通过TGF-β1及其信号通路Smad2/3的抑制而发挥作用.     

骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的抑制作用

目的分析大鼠气管内注入博来霉素(BLMS)后,观察不同时间点移入骨髓间充质干细胞(MSC)的分化行为,分析细胞因子表达规律及其与病理变化的相关性,确定MSC移植治疗实验性肺纤维化大鼠的最佳时间窗及标准,旨在为临床上干细胞移植治疗肺纤维化的时机提供可靠参考依据。方法体外分离和培养雄性Wistar大鼠的MSC。将60只雌性Wistar大鼠随机分为4组:A组为生理盐水对照组,气管内注入PBS50μL;B组为博来霉素模型组,向气管内注入BLMS 5mg/kg;C组气管内注入BLMS后立即尾静脉注射移植MSC 1×10~7/mL,200μL;D组气管内注入BLMS 14d后移植MSC 1×107/mL,200μL。于实验7d、14d、28d(D组于28d)分别处死大鼠5只,取肺组织病理切片行HE及Masson染色,观察肺部炎症和纤维化情况及羟脯氨酸(HYP)含量测定;提取肺组织通过聚合酶链反应(PCR)检测雄性鼠的性别决定基因(SRY);提取肺组织免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达。结果病理切片观察:B组第7天肺泡炎最明显,28d时肺纤维化最严重,与其他3组比较有统计学意义(P0.05或P0.01);C组、D组肺泡炎及肺纤维化程度均较B组显著减轻(P0.05),但仍较A组严重(P0.05或P0.01),其中D组较C组严重(P0.05)。Y染色体性别决定区SRY基因的检测:A组及B组检测不到SRY基因,但C组和D组各时间点均能检测到SRY基因。HYP含量:B组第7天HYP含量开始升高,28d达到最高峰,高于其他3组(P0.05或P0.01),与A组相比各时间点HYP含量的差异均具有统计学意义(P0.01);C组与D组大鼠HYP含量均呈低水平升高趋势,造模后7d、14d、28dHYP含量均显著低于B组(P0.05)。TGF-β1:B组TGF-β1在14d时表达最高,28d时逐渐下降,各组之间比较均有统计学意义(P0.05)。结论气管内注入博来霉素可成功复制大鼠肺纤维化模型;MSC可减轻肺泡炎、肺纤维化的程度;MSC到达损伤肺后可能抑制TGF-β1的表达,从而抑制博来霉素诱导肺纤维化的形成。     

外源性H_2S对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子-β1及结缔组织生长因子的干预作用

目的动态观察硫化氢(H2S)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法采用气管内一次注射BLM 5 mg/kg致大鼠肺纤维化的造模方法,将健康雄性Wistar大鼠54只随机分为对照组、肺纤维化组和NaHS(H2S供体)+肺纤维化组,造模后第2天开始:NaHS+肺纤维化组每天腹腔注射0.5 ml NaHS(28μmol/kg),对照组及肺纤维化组每天腹腔内注射等量生理盐水。各组在给药后7、14、28 d分别随机处死6只取材,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)水平的变化,免疫组化法检测TGF-β1及CTGF蛋白在肺组织的表达。结果与对照组相比,肺纤维化组各期大鼠肺组织HYP含量、TGF-β1及CTGF蛋白表达均显著升高(P<0.01);与肺纤维化相比,NaHS+肺纤维化各组大鼠HYP含量、TGF-β1及CTGF蛋白表达在各期均显著降低(P<0.01、0.05)。各组各期肺组织TGF-β1与CTGF呈显著正相关(r=0.891⁰.968,P均<0.01)。结论外源性H2S可以通过抑制TGF-β1信号通路,下调CTGF蛋白表达发挥抗纤维化作用。     

细菌溶解产物对衰老相关肺纤维化小鼠免疫功能的影响

目的探讨衰老相关肺纤维化与免疫功能的关系及细菌溶解产物对老年小鼠肺纤维化的影响。方法 24只老年健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(N组)、肺纤维化组(M组)、肺纤维化+细菌溶解产物干预组(P组), M、P组于气管内注射博来霉素(5 mg/kg)建立小鼠肺纤维化模型, N组注射生理盐水, P组建模后经口注入细菌溶解产物0.4 ml, 1次/d, 造模28 d后取肺组织和血液。通过苏木精-伊红(HE)和马松三色(Masson)染色检测小鼠肺组织病理变化并进行Ashcroft评分, 免疫组化检测肺组织CD4+、CD8+表达, 酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-13(IL-13)和免疫球蛋白A(IgA)蛋白含量, 实时定量反转聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肺组织INF-γ、IL-13 mRNA的含量, 蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织型金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达水平。结果 P组小鼠在细菌溶解产物干预下肺纤维化程度较M组明显减轻;与N组比较, M组CD4+T...     

补阳还五汤抑制大鼠肺纤维化及对肺组织TGF-β/Smads信号通路的影响

目的 观察补阳还五汤对大鼠肺纤维化的抑制作用,并通过转化生长因子β(TGF-β)/Smads通路变化探讨其机制.方法 将36只SD大鼠随机分为三组各12只,模型组、干预组气管内注入博来霉素诱导肺纤维化模型,造模后分别予以补阳还五汤、生理盐水灌胃2次/天;对照组气管内注入生理盐水,给予生理盐水灌胃2次/天.灌胃1周后处死...     

趋化素在特发性肺纤维化中的表达及其保护作用研究

目的探讨趋化素在特发性肺纤维化(IPF)中的表达及其作用。方法分别使用定量PCR与蛋白质免疫印迹法测定对照与IPF患者肺部组织中趋化素的mRNA及蛋白表达水平, 通过酶联免疫吸附实验检测临床血清样本中趋化素的含量。构建肺纤维化体外模型, 将分离得到的原代成纤维细胞分成对照组、TGF-β组、TGF-β+趋化素组和趋化素组, 使用免疫荧光法检测各组成纤维细胞α-平滑肌蛋白(α-SMA)表达水平。构建肺纤维化体内模型, 采用随机分组法将C57BL/6小鼠分成对照组、博来霉素组、博来霉素+趋化素组和趋化素组, 通过肺组织病理学染色观察各组小鼠肺纤维化严重程度。通过定量PCR与免疫组化染色法分别检测肺纤维化体外与体内模型中上皮间充质转化(EMT)标记基因的表达情况。结果与对照组相比, IPF患者肺组织与血清中趋化素表达量均下调。免疫荧光结果显示, TGF-β组α-SMA表达水平较对照组明显增强, TGF-β+趋化素组中α-SMA表达水平则与对照组相仿。病理学染色结果显示, 博来霉素组小鼠较对照组肺组织纤维化病变明显, 趋化素表达量显著下调;博来霉素+趋化素组小鼠肺组织受损程度则有所缓解。定量PC...     

转录活化子1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织中细胞因子和胶原表达的影响

目的 观察信号转导子与转录活化子1(STAT1)反义寡核苷酸雾化吸入对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原,纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和羟脯氨酸表达的影响.方法 将45只Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、博来霉素组和寡核苷酸组,每组15只,分别在气管内灌注并雾化吸入生理盐水、博来霉素、STAT1反义寡核苷酸.分别于雾化后第7天、第14天和第28天每组各处死5只大鼠.肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变,免疫组织化学SP法测定肺组织中TGF-β_1、PAI-1表达,逆转录PCR测定肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,肺组织匀浆测定羟脯氨酸含量.样本均数间比较采用单因素方差分析和q检验.结果 寡核苷酸组大鼠各时间点的肺泡炎和肺纤维化程度均较博来霉素组减轻.博来霉素组和寡核苷酸组大鼠肺组织中TGF-β、PAI-1表达水平均明显高于生理盐水组,博来霉素组和寡核苷酸组大鼠雾化后第7天TGF-β、PAI-1的积分吸光度值分别为182±12和169±12、128±11和113±13,明显高于生理盐水组的21±6和27±9,第28天时(68±7和87±7、54±8和57±8)仍高于生理盐水组(22±7和26±7);雾化后第7天、第14天和第28天,寡核苷酸组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为1.36±0.10、1.19±0.28、1.22±0.24和1.20±0.09、0.62±0.09、0.76±0.12,明显低于博来霉素组(3.29±0.28、2.04±0.25、1.91±0.30和1.63±0.15、1.58±0.13、1.12±0.09),寡核苷酸组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量(mg/g)分别为3.02±0.13、3.24±0.31和3.60±0.16,明显低于博来霉素组的3.76±0.10、3.92±0.30和4.62±0.28.结论 STAT1反义寡核苷酸雾化吸入能减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β_1、PAI-1的表达,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达减少,羟脯氨酸含量降低有关.     

大麻素2型受体激动剂JWH133干预对肺纤维化小鼠的保护作用

目的探讨大麻素2型受体激动剂JWH133对肺纤维化小鼠的保护作用。方法选24只C57BL/6J雄性小鼠按随机数字法分为对照组、模型组、JWH133干预组、JWH133+大麻素2型受体拮抗剂AM630拮抗组, 每组6只。气管滴注博来霉素(5 mg/kg)制作小鼠肺纤维化模型, 造模后第1天起, 对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.1 ml, 模型组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.1 ml, JWH133干预组小鼠腹腔注射JWH133(2.5 mg/kg, 溶于生理盐水中)0.1 ml, JWH133+AM630拮抗组小鼠腹腔注射JWH133(2.5 mg/kg)和AM630(2.5 mg/kg)0.1 ml, 28 d后处死所有小鼠, 取肺组织, 病理观察肺组织改变, 并进行肺泡炎评分和Ashcroft评分, 采用免疫组化测4组小鼠肺组织Ⅰ型胶原含量, 酶联免疫吸附测定(ELISA)测4组小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平, 测4组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量, Western-blot测4组小鼠肺组织中Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞...     

Trichostatin A对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的抑制作用

目的 观察非选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂Trichostatin A(TSA)对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的影响以及肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原含量及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的变化.方法 将46只SPF级雄性160～180 g SD大鼠随机分为正常对照组、模型组Ⅰ、模型组Ⅱ、治疗组,其中正常对照组10只,模型组Ⅰ 14只,模型组Ⅱ12只,治疗组10只.模型组Ⅰ、模型组Ⅱ及治疗组经气管内注入盐酸博莱霉素(5mg/kg),制备肺纤维化大鼠模型.正常对照组气管内注入相同体积生理盐水.治疗组在造模次日起腹腔内注射TSA 2 mg/kg溶于二甲基亚砜(DMSO) 60μl,并稀释于生理盐水1.2 ml中,每天1次,连续3d;模型组Ⅱ在造模次日起腹腔内注射DMSO 60 μl稀释于生理盐水1.2 ml中,每天1次,连续3 d；模型组Ⅰ及正常对照组在造模次日起腹腔内注射生理盐水1.2 ml,每天1次,连续3d.其中模型组Ⅰ大鼠死亡5只,模型组Ⅱ大鼠死亡4只,治疗组大鼠死亡2只.于造模第21天处死全部存活大鼠.取肺组织进行HE染色及Masson三色染色,评估肺纤维化程度.碱水解法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量.酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织匀浆中α-SMA及Ⅰ型胶原的含量.real-time PCR检测肺组织TGF-β1mRNA表达的变化.结果 ①HE染色分析:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ肺泡炎程度较正常对照组增高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ之间肺泡炎程度差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组肺泡炎程度均较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ减轻(P＜0.05),与正常对照组比较肺泡炎程度差异无统计学意义(P＞0.05).②Masson染色分析:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ肺组织纤维化程度较正常对照组增高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ之间肺纤维化程度差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组肺纤维化程度较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ减轻(P＜0.05),与正常对照组比较肺纤维化程度差异无统计学意义(P＞0.05).③肺组织HYP含量:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的HYP含量较正常对照组高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的HYP含量无明显变化(P＞0.05).治疗组的HYP含量较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ降低(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).④肺组织匀浆中α-SMA蛋白浓度:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的α-SMA含量较正常对照组高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的α-SMA含量差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组的α-SMA含量较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ降低(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).⑤肺组织匀浆中Ⅰ型胶原蛋白浓度:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的Ⅰ型胶原含量较正常对照组高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的Ⅰ型胶原含量差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组的Ⅰ型胶原含量较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ降低(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).⑥肺组织TGF-β1 mRNA:模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的TGF-β1 mRNA表达较正常对照组升高(P＜0.05),模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的TGF-β1 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05),治疗组的TGF-β1mRNA表达较模型组Ⅰ及模型组Ⅱ降低(P＜0.05),但高于正常对照组(P＜0.05).结论 气管内注入博莱霉素成功构建肺纤维化大鼠模型.非选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能减轻博莱霉素诱导大鼠肺纤维化,降低肺组织中纤维化相关蛋白α-SMA、Ⅰ型胶原含量以及TGF-β1 mRNA表达.     

罗格列酮对肺纤维化大鼠TGF-β1 表达的影响

将45只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素-A5(BLM-A5),对照组大鼠滴注等体积生理盐水.注药后治疗组灌服罗格列酮8 mg/(kg·d),对照组、模型组给予等体积生理盐水.各组动物于7、14、28 d随机处死5只,取肺组织进行HE和Masson染色,免疫组化法检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平.HE染色示治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组轻;Masson 染色示治疗组胶原沉积明显少于模型组.治疗组与模型组各时期TGF-β1表达水平均有统计学差异.提示罗格列酮能减轻BLM-A5诱导的肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1表达有关.     

温补肾阳法对肾阳虚肺纤维化大鼠肺内CTGF表达的影响

目的探讨温补肾阳法治疗肾阳虚肺纤维化(PF)的作用及机制。方法 60只雄性6周龄Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组和干预组,采用一次性博来霉素A5气管插管给药加腺嘌呤连续灌胃28 d复制肾阳虚PF大鼠模型。正常组大鼠气管插管给予生理盐水加等渗生理盐水灌胃作为对照,模型组大鼠造模后生理盐水灌胃14 d,干预组大鼠造模后加味参附汤灌胃14 d,每组于实验第42天处死大鼠,留24 h尿液检测17-羟皮质类固醇(17-OH-CS)含量,同时,HE和MASSON染色观察肺纤维化程度,免疫组化法和Western印迹测定大鼠肺内结缔组织生长因子(CTGF)蛋白的表达,RT-PCR检测肺组织CTGF mRNA的表达。结果与正常组比较,肾阳虚肺纤维化模型大鼠尿17-OH-CS明显下降,模型大鼠肺组织内可见肺泡结构大量破坏,大量胶原沉积,干预组大鼠肺泡结构也基本消失,可见较多的胶原沉积,病理组织学表现明显轻于模型组。与正常组比较,模型组肺组织CTGF在肺内的表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,干预组大鼠肺内CTGF的表达降低(P0.05)。结论肾阳虚PF大鼠肾阳虚症状明显,肺内纤维化表现明显,造模成功,加味参附汤可以改善大鼠肾阳虚症状,可能通过抑制CTGF蛋白表达而缓解肺内胶原的进一步沉积减缓肺纤维化的发展。     

白三烯抑制剂对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用

目的 观察白三烯抑制剂(LT-S)齐留通对博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化模型肺纤维化形成过程的影响.方法 54只SD雄性大鼠随机分为正常组(C组)、模型对照组(M组)和LT-S组(S组)3组,每组18只.S组于气管内滴注BLM(5 mg/kg)诱导肺纤维化,于造模当天开始每日给予齐留通100 mg/kg灌胃;M组以生理盐水代替齐留通灌胃;C组均用生理盐水代替BLM和齐留通.各组动物均于制模后的第7天、第14天和第28天分别随机处死6只动物,分取肺组织行病理切片苏木精-伊红染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化程度、碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)浓度、免疫组织化学技术检测肺组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平.结果 S组肺泡炎和肺纤维化程度及肺组织Hyp含量均显著低于M组,其TGF-β1和α-SMA在肺组织中的表达水平亦均显著低于M组.结论 LT-S可减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,并可能通过抑制TGF-β1蛋白表达而实现对成纤维原细胞增殖的抑制.     

吡非尼酮逆转博来霉素诱导大鼠PIF的疗效及对TGF-β1、caspase-3的影响

目的探讨吡非尼酮治疗博来霉素诱导大鼠肺纤维化(PIF)的效果及对大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、凋亡相关蛋白caspase-3的影响。方法选取SPF级成年SD大鼠72只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水处理)、模型组(等量生理盐水处理)、阳性对照组(强的松0.6 mg/100 g/d)、实验组(500 mg/kg/d)各18只,连续干预4周,检测各组大鼠血清中肺纤维化相关指标,采用免疫组化染色检测并肺组织中TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白的表达程度,采用RT-PCR方法检测TGF-β1 mRNA表达程度。结果模型组大鼠的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于空白组(P0.05),MDA、iNOS显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于模型组(P0.05),MDA、iNOS显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1 mRNA表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1 mRNA表达水平低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平低于模型组(P0.05)。结论吡非尼酮治疗博来霉素诱导的大鼠PIF具有一定的效果,主要与增强抗氧化能力,降低血清中纤维化指标、炎症反应程度、TGF-β1和caspase-3表达有关。     

激动素对实验性肺纤维化的治疗作用研究

目的研究激动素(Kinetin)对博来霉素A5(BLMA5)诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用。方法雌性Wister大鼠60只随机分为3组:A组为生理盐水对照组;B组为BLMA5造模组;C组为Kinetin治疗组。分别于第3、7、14、28天处死大鼠,取肺组织行HE及Masson染色以观察肺泡炎和肺纤维化情况,检测肺组织匀浆HYP、SOD、MDA、TNF-α、TGF-β1的含量。结果与模型组比较,Kinetin治疗组的肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻;肺组织SOD水平上升,MDA、TNF-α、TGF-β1水平下降。结论 Kinetin通过抗氧化、抑制TNF-α、TGF-β1减轻博来霉素A5所致大鼠肺纤维化。     

骨形态发生蛋白7对肺纤维化大鼠胶原和转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)对肺纤维化大鼠肺组织炎症、纤维化程度及转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响.方法 将雄性Wister大鼠48只随机分为正常对照组、纤维化组、小剂量组和大剂量组,每组12只.气管内灌注博莱霉素A5制作肺纤维化模型.对小剂量组和大剂量组动物,每天分别以100 μg/kg、500 μg/kg剂量腹腔注射BMP-7.各组在制作模型后第14、28天随机处死6只大鼠.HE、Masson染色观察肺组织病理变化,测定组织胶原含量,免疫组织化学测定肺组织中Ⅰ型胶原蛋白及TGF-β1的表达,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织TGF-β1 mRNA的表达.结果 BMP-7处理后第14、28天肺组织炎症及纤维化程度均低于纤维化组,差异有统计学意义(P＜0.05).BMP-7使14 d、28 d时肺组织胶原含量较同期纤维化组胶原含量减少(P＜0.05).经过BMP-7处理,14 d、28 d时肺组织Ⅰ型胶原和TGF-β1蛋白的表达均较纤维化组减弱(P＜0.05).BMP-7使肺组织TGF-β1 mRNA的表达水平较同期纤维化组降低(P＜0.05).而且BMP-7的上述作用在大剂量时更明显(P＜0.05).结论 在博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化模型中,BMP-7可以剂量依赖的方式抑制肺组织炎症及纤维化程度,其可能机制可能与BMP-7抑制TGF-β1在肺组织的表达有关.     

沙利度胺联合丹参川芎嗪治疗大鼠肺纤维化的实验研究

目的探讨沙利度胺联合丹参川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织病理改变及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原、α-SMA表达的影响。方法选取SPF级SD雄性大鼠100只,根据随机数字表法分为正常组、对照组、研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组。除正常组外,余4组均制备大鼠肺纤维化模型。在造模28d后,沙利度胺组给予沙利度胺灌胃、丹参川芎嗪组给予丹参川芎嗪灌胃、研究组给予沙利度胺联合丹参川芎嗪灌胃、对照组及正常组灌注相同体积的生理盐水。连续灌胃28 d,灌胃结束后,取肺组织进行HE染色,分别检测5组大鼠血清及肺泡灌洗液VEGF、TNF-α及TGF-β1水平,比较5组大鼠肺组织Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA阳性细胞数的变化情况。结果肺组织病理学观察结果显示,对照组大鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁增厚、肺泡腔及肺间质内有大量炎性细胞浸润,部分肺泡消失。研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组肺泡壁厚度、炎性因子浸润程度及肺泡破坏程度均有所改善。相较于对照组,研究组、沙利度胺组、丹参川芎嗪组大鼠血清及肺泡灌洗液VEGF、TNF-α及TGF-β1水平及肺组织Ⅲ型胶原、α-SMA表达水平均有所改善,且研究组改善程度更优(P0.05)。结论沙利度胺联合丹参川芎嗪可有效抑制肺纤维化大鼠VEGF、TNF-α、TGF-β1、Ⅲ型胶原及α-SMA水平,从而减轻肺纤维化程度。     

TGF-β/Smads信号传导通路在实验性大鼠肺间质纤维化中的作用

目的 研究化瘀理肺方对肺间质纤维化大鼠肺组织中转化生长因子β(TGF-β)、Smad3、Smad7蛋白表达的影响.方法 对照组在气管插管内注入生理盐水,其余大鼠注入博莱霉素建立肺纤维化模型.分别给予大鼠化瘀理肺方药物(中药组)、生理盐水灌胃(模型组、对照组)、氢化可的松琥珀酸钠腹腔注射(激素组)进行干预,并于给药后14、28 d处死,取肺组织行HE染色观察病理变化,免疫组化法测定肺组织TGF-β、Smad3、Smad7蛋白表达情况.结果 与模型组和激素组比较,中药组肺泡炎和肺纤维化程度及TGF-β、Smad3蛋白表达均明显降低,Smad7蛋白表达升高.结论 TGF-β、Smad3、Smad7在实验性大鼠肺纤维化的形成中起重要作用,化瘀理肺方可通过调节这些蛋白的表达,从而起到防治肺纤维化的作用.     

双氢青蒿素干预实验大鼠肺纤维化机制的研究

目的研究双氢青蒿素干预肺纤维化的作用机制。方法构建博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型[1],造模后行灌胃治疗。用HE染色、Masson染色法观察大鼠肺组织病理变化,碱水解法检测羟脯氨酸含量,Ellisa法检测血清中TGFβ1(转化生长因子β1)含量,荧光定量PCR法检测TGFβ1、SMAD2、SMAD3基因表达,免疫组化法检测大鼠肺组织中TGFβ1、SMAD2/3、p SMAD2/3蛋白表达。结果双氢青蒿素可减轻肺纤维化模型大鼠肺组织炎症和纤维化程度,抑制TGFβ1、SMAD2、SMAD3基因表达和TGFβ1、SMAD2/3、p SMAD2/3蛋白表达。结论双氢青蒿素可能通过抑制TGFβ1-SMAD2/3通路干预肺纤维化。