短暂性脑缺血再灌注对大鼠脑PGRN表达的影响

目的检测短暂性脑缺血再灌注早期,大鼠的额颞叶皮质、海马及纹状体中颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)的表达变化,为进一步探讨PGRN对脑缺血的治疗提供实验基础。方法 SPF级成年SD大鼠随机分为2组,假手术组(shamoperation group)和实验组(MCAO group)。用线栓法制作右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)1 h,然后再灌注30 min、2 h、12 h、24 h模型,以缺血侧为实验组(ipsilateral group),其对侧为对照组(contralateral group)。假手术组为处理对照。用TTC染色法观察缺血梗死体积。用免疫荧光组织化学法和Western-blot分别检测PGRN的细胞定位及其表达变化。结果 TTC染色表明,脑缺血区域呈现白色,而对照无缺血区为红色。免疫组织化学结果提示,PGRN在神经元中大量表达,在小胶质细胞中有少量表达,而在星形胶质细胞中几乎无表达。Western blot结果提示,与对照组相比,缺血再灌注后2 h大鼠脑额颞叶皮质的缺血侧与非缺血侧PGRN含量均显著上调。在海马区缺血再灌注能瞬间降低PGRN水平,随着时间延长PGRN表达水平在24 h逐步恢复到正常水平。与皮质和海马相比,纹状体在短时间再灌注后PGRN具有较高的表达,特别是在缺血再灌注24 h后。结论短暂性脑缺血再灌注能显著影响PGRN在大鼠脑缺血区及半暗带区的水平,提示PGRN可能参与缺血后脑的调节。     

缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后谷氨酸的影响

目的:研究缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注后谷氨酸(Glu)浓度变化的影响。方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将36只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、脑缺血再灌注(I/R)组和缺血后适应(I Postcond)组,每组12只。应用高效液相色谱检测缺血脑组织匀浆Glu浓度。结果:局灶脑缺血再灌注6 h后,I Postcond组Glu浓度相较I/R组明显降低(P<0.01),局灶脑缺血再灌注24 h后,I Postcond组Glu浓度较I/R组低,但两者差异亦无显著性(P>0.05)。结论:本研究表明,I Postcond能够减轻MCAO大鼠模型中I/R损伤。细胞间隙Glu清除的加速可能是其重要保护机制之一。     

天麻素对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质的影响及可能机制

目的 探讨天麻素对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质的影响及抑制MAPK信号通路的可能机制.方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组、脑缺血再灌注损伤组、天麻素组,每组8只.各组于再灌注72h后,通过神经功能评分及HE染色观察脑组织损伤情况;湿干重检测脑组织含水率;Western blot检测大鼠脑炎症相关指标IL-1β、NF-κ...     

3,5-二羟苯甘氨酸诱导的大鼠脑缺血再灌注耐受模型

目的本研究尝试建立3,5-二羟苯甘氨酸(3,5-dihydroxyphenylglycine,DHPG)诱导的脑缺血耐受动物模型,为脑耐受机制研究提供新平台。方法选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、假手术对照组、5个单纯全脑缺血15min再灌注组(0min,6h,12h,24h,48h)和5个DHPG预处理全脑缺血15min再灌注组(0min,6h,12h,24h,48h),按Pulsinelli-Brierley方法制作四血管全脑缺血模型,脑缺血前30min通过脑室内埋植套管注射DHPG或生理盐水3μl到右侧脑室;石蜡切片5μm,尼氏染色,海马CA1区健康神经元计数。结果随脑缺血再灌注时间延长,24h和48h神经元损伤最严重,健康神经元各为20.36±3.45、16.04±4.96,与对照组(55.96±3.17,53.28±2.94)相比有显著性差异(P<0.01);DHPG预处理组神经元损伤明显减轻,24h和48h的健康神经元各为44.34±4.42和40.34±4.42,与单纯全脑缺血再灌注组相比有显著性差异(P<0.01)。结论DHPG预处理对缺血神经元有保护作用。     

激光多普勒血流仪动态观察镁对脑缺血再灌注损伤保护作用

目的: 用激光多普勒血流仪动态观察硫酸镁对局灶性大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型缺血/再灌注损伤的保护作用。方法: 体重280-300 g的雄性SD大鼠24只,传统线栓法制作单侧MCAO模型后根据硫酸镁处理时间不同分为4组,每组6只,分别为:缺血20 min、30 min、40 min硫酸镁处理组(25% 硫酸镁160 mg/kg 腹腔注射)和对照组(等体积生理盐水腹腔注射),激光多普勒血流仪实时动态监测各组不同时段的脑血流变化。4组动物模型均于缺血2 h+再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,断头取脑,TTC染色观测脑片梗死灶体积。结果: 再灌注后硫酸镁处理的各组脑血流均缓慢恢复至基线而后保持稳定,对照组脑血流随心跳波动明显,平均血流变化幅度有明显差异。平均脑梗死体积为:硫酸镁组26.5%、36.5%和24.5%,对照组为54.0%。神经功能缺损评分:硫酸镁组5.670±1.003、8.670±1.211和7.170±1.472,对照组11.170±0.983。结论: 缺血早期给予硫酸镁对脑缺血和再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能是通过改善脑血管的自动调节功能来实现的。     

马来酸桂哌齐特对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究马来酸桂哌齐特对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法:成年雄性大鼠60只,给予线栓法大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)后,随机分为马来酸桂哌齐特处理组和生理盐水对照组,观察大鼠的体重变化和死亡情况;再灌注后2 h和7 d对动物进行神经功能评分;7 d时用TTC染色法比较两组脑梗死体积。结果:两组大鼠的体重(P0.05)和总体死亡率(P0.05)无显著差异,但马来酸桂哌齐特能明显降低MCAO 24 h内的死亡率(P0.05);马来酸桂哌齐特能够显著改善MCAO损伤的神经功能评分,并可明显减少脑梗死体积百分比(P0.05)。结论:马来酸桂哌齐特对大鼠脑急性缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

插线法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的研究

目的：介绍一种简便易行的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的制备方法。方法：用自制的插线,从颈外动脉向颈内动脉插入,栓塞大脑中动脉。结果：插线前端经自制装置的处理和插线直径与动物体重不同组合的选择,插线栓塞大脑中动脉的成功率可达８１．３％￣９４．５％。不同缺血时间再灌注总的成功率可达７０％￣８５％。结论：该方法简便快捷（手术时间３０分钟）,结果可靠,适合于形态学对比观察。     

后处理对肠缺血-再灌注大鼠肺组织凋亡相关基因表达的影响

目的: 观察后处理对肠缺血-再灌注大鼠肺组织凋亡相关基因表达的影响。方法: 24只SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术(sham)组、缺血-再灌注(I/R)组、缺血后处理(IPOST)组;应用光学显微镜观察各组大鼠肺组织病理学变化,测定肺湿/干比值(W/D)。应用RT-PCR和Western blotting方法分别检测各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax 和caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化。结果: 与T/R组相比,IPOST组大鼠肺组织病理学改变明显减轻,肺W/D显著下降(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而Bax和caspase-3 mRNA与蛋白表达量则明显降低(P<0.05)。结论: 缺血后处理可能通过上调Bcl-2 mRNA和蛋白表达,下调Bax mRNA和蛋白表达,减轻大鼠肠缺血-再灌注所致的急性肺损伤。     

大鼠脑缺血及再灌注情形下血液触变性的研究

本文建立了大鼠脑缺血及再灌注模型,并对缺血以及缺血后再灌注不同时间的血液触变性进行了实验研究,用Ｈｕａｎｇ’ｓ方程拟合实验曲线以得到各组血液的５个触变性参数,结果表明：缺血以及缺血后再灌注不同时间,以血液触变性参数有明显的影响。缺血过程中,τ１和μ的值随着缺血时间的增加逐渐降低,缺血再灌注１小时的τ０和μ明显大于缺血期的值,τ０也高于正常值,随着再灌注的增加,τ０逐渐回落至正常血液水平,同时μ也逐     

牛磺酸对大鼠脑缺血再灌注损伤时内皮素变化的影响

为了探讨牛磺酸对缺血－再灌注损伤的保护机理，在大鼠脑缺血－再灌注模型上观察牛磺酸治疗效果，发现牛磺酸（６００ｍｇ／ｋｇｉ．ｐ．）能明显减轻脑组织的损伤和钙超载，增加脑组织牛磺酸的含量，抑制血浆和脑脊液内皮素水平的增加。在离体孵育的大鼠脑血管条上发现牛磺酸呈剂量依赖地抑制缺氧引起的内皮素释放。以上结果提示牛磺酸抑制内皮素释放可能是其防治脑缺血－再灌注损伤的机理之一。     

局部动脉内溶栓治疗大脑中动脉急性脑梗死

目的探讨局部动脉内溶栓对大脑中动脉（MCA）急性脑梗死的治疗效果。方法对67例MCA急性脑梗死患者应用尿激酶进行局部动脉内溶栓治疗，分析不同时间及阻塞部位血管再通和3个月后临床预后的关系。结果M1M2段阻塞41例（61．19％），M3M4段阻塞26例（38．81％）。溶栓后阻塞血管成功再通47例（70．15％），其中M1M2段28例（68．29％），M3M4段19例（73．08％），M3M4段阻塞再通率似高于M1M2段，但差异无显著性（P〉0．05）。溶栓时间在发病6h以内者13例（19．40％），阻塞血管再通10例（75．92％），预后良好9例（69．23％）。发病时间在6h以上者54例（80．60％），阻塞血管再通37例（68．51％），预后良好者30例（55．56％）。发病6h以内溶栓者的阻塞血管再通率和预后良好率较6h以上者为高，但差异无显著性（P〉0．05）。血管再通和预后明显相关（r=0．76）。6h以上溶栓易致颅内出血。结论MCA急性脑梗死动脉内溶栓疗效确切，早期溶栓效果较好，晚期溶栓易并发颅内出血。     

双侧颈总动脉夹闭法构建脑缺血再灌注损伤模型的经验总结

双侧颈总动脉夹闭法因其操作简单、动物死亡率低、模型成功率高等优点正在受到广泛的应用,本文通过对原有的双侧颈总动脉夹闭法构建脑缺血再灌注损伤模型进行了一定的优化,并总结了一些成功的经验和体会,以期能为模型制作提供一定的参考。     

Wistar大鼠永久性局灶性大脑中动脉阻断脑缺血新模型的建立

在Ｗｉｓｔａｒ大鼠用改良的开颅方法两点阻断大脑中动脉,建立一个新的永久性局灶性脑缺血模型（ＰＭＣＡＯ）。通过大鼠脑梗塞后神经功能状况的观察,明胶－墨汁灌注、ＴＴＣ染色计算机图像分析及病理形态学的方法对模型进行研究评价。Ｗｉｓｔａｒ大鼠大脑中动脉阻断后２４　ｈ,神经功能为２级;模型组梗塞面积稳定,占对侧面积５７±５％,其梗塞灶位于脑皮质和纹状体外侧;病理形态学表现为典型的缺血性改变。结果表明,用本方法阻断大脑中动脉,阻断确切,梗塞灶的大小、位置恒定。这一模型为局灶性脑缺血机制的研究以及治疗药物的疗效观察提供了一个可重复、稳定可靠的动物模型。     

Specific Neuroprotective Effects of Manual Stimulation of Real Acupoints Versus Non-Acupoints in Rats after Middle Cerebral Artery Occlusion

The objective of this study was to investigate the effectiveness and specific effects of acupuncture on ischemic-induced damage in rats after permanent middle cerebral artery occlusion. Cerebral ischemia was induced by middle cerebral artery occlusion in male Wistar rats. The rats were divided into the following 4 groups: normal controls, ischemic, real acupuncture-treated (Shuigou, DU26), and non-acupoint-treated groups. On the third postoperative day, neurological deficit scores, cerebral blood flow, infarction volume, and neuronal cell death counts were measured. In the real acupuncture-treated group, the neurological deficit scores and cerebral blood flow were improved (p < 0.05) and the infarction volume and neuronal cell death counts were reduced (p < 0.01) compared to the ischemic and non-acupoint-treated groups. The present study demonstrated that real acupuncture was effective against focal ischemia-induced damage in rats after middle cerebral artery occlusion, and the effects were specifically related to the right needling location.     

Effect of Oral Administration of Pheretima Aspergillum (Earthworm) in Rats with Cerebral Infarction Induced by Middle-Cerebral Artery Occlusion

We investigated the curative effect of Pheretima aspergillum (earthworm, PA) on rats with middle cerebral artery occlusion (MCAo). The MCAo-induced cerebral infarction was established and its underlying mechanisms by counting the infarction areas and evaluating the rats'' neurological status. Immunostaining was used to test the expression of NeuN, and glial fibrillary acidic (GFAP), S100B, and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) proteins. Our results showed that oral administration of PA for two weeks to rats with MCAo successfully reduced cerebral infarction areas in the cortex and striatum, and also reduced scores of neurological deficit. The PA-treated MCAo rats showed greatly decreased neuronal death, glial proliferation, and S100B proteins in the penumbra area of the cortex and in the ischemic core area of the cortex, but BDNF did not changed. These results demonstrated novel and detailed cellular mechanisms underlying the neuroprotective effects of PA in MCAo rats     

自发性高血压模型大鼠(SHR)与SD大鼠大脑中动脉的应力松弛特性

研究5月龄SD雄性大鼠和5月龄SHR雄性大鼠大脑中动脉的应力松弛特性.为了解高血压的发病机制提供应力松弛特性参数.对5月龄正常SD雄性大鼠大脑中动脉和5月龄自发性高血压模型大鼠(SHR)大脑中动脉各10个试样在日本岛津电子万能试验机上对SD大鼠和SHR大鼠大脑中动脉进行应力松弛实验,在(36.5±0.5)％的温度场下以0.05％/s的应变增加速度对试样施加应变,设定时间为7200s.采集100个数据,采用归一化分析的方法计算两组试样的归一化应力松弛函数方程.两组试样应力松弛曲线是以指数关系变化的,SD大鼠组大脑中动脉试样7200 s应力下降大于SHR组大脑中动脉试样,差异显著(P＜0.05).正常SD大鼠中动脉和SHR大鼠大脑中动脉具有不同的应力松弛特性,SHR大鼠中动脉应力松弛特性发生改变.     

正常和硬化大脑中动脉力学特性

本文采用ＨＬＣ－Ｉ型生物活组织力学试验机对正常和硬化大脑中动脉进行一维环向应力应变试验，建立其本构方程。找出脑动脉的力学范围和变形规律。结果表明：在正常压力范围内，管壁变形不明显，并不是随压力升高而出现大变形，而中于指数函数关系，硬化后应力应变仍存在非线性关系，但与正常组相比，曲线左移，材料常数不同，并出现刚性管的特性，容易造成脑血管疾病。     

L-精氨酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤研究

目的 探讨一氧化氮（NO）前体L-精氨酸（L-Arg）对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤的影响.方法 建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,设立假手术组、缺血组（ischemia/reperfusion,IS组）,L-Arg治疗组（n=10）.L-Arg治疗组于缺血2h再灌注即刻给予L-Arg,缺血组给予生理盐水.将大鼠于缺血再灌注6h后断头取脑,检测脑组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）的活性,测定脑组织含水量和脑梗死体积.结果 局灶性脑缺血再灌注大鼠给予L-Arg治疗组TNF-α和IL-6的表达下降,IL-10升高,脑组织含水量及脑梗死面积减少.结论 L-精氨酸可以通过抑制脑组织炎性因子TNF-α和IL-6的表达,上调IL-10的含量来发挥抗炎作用,从而对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期产生一定程度的保护作用.     

急性局灶性脑挫裂伤对大鼠脑微循环影响的研究

目的探讨脑损伤后脑微循环障碍变化规律,为临床改善脑损伤后脑微循环障碍、治疗脑缺血、促进神经功能恢复提供理论依据。方法采用Feeney’s自由落体撞击法建立急性局灶性脑挫裂伤模型。每组6只行内源性过氧化物酶(EGPOX)组织化学染色、脑含水量测定,并进行图象分析。每组3只电镜观察微血管内皮细胞超微结构改变。结果①脑损伤后30min伤区可见出血灶,伤区内无血管染色,伤区周围存在“微无血管区”。“微无血管区”的存在持续至伤后72h。②脑损伤后30min微血管面密度明显下降,伤后48h达到高峰,直到伤后168h才有所恢复,但仍未达到正常水平。③脑损伤后30min微血管平均光密度明显下降,伤后24、48h回升,72h再次下降,至168h仍未恢复正常。④脑损伤后30min,微血管内皮细胞有轻度受损迹象,伤后2h毛细血管腔内有微绒毛形成,伤后6h微绒毛增多。伤后12~72h毛细血管腔明显狭窄。结论EGPOX组织化学染色方法能准确反应脑损伤后脑微循环的改变,脑损伤后即发生脑缺血改变,而脑缺血的发生源于脑损伤后脑微血管结构的破坏和微循环灌注不足。