针刺对哮喘大鼠肺与大肠SP-A mRNA表达的影响

目的:通过研究哮喘大鼠肺与大肠组织表面蛋白A(SP-A) mRNA表达改变及针刺对其的调节,初步揭示肺与大肠表里相关的生物学机制,为针灸调节脏腑相关的研究提供新的思路和方法.方法:将48只SD大鼠随机分成空白对照组、捆绑组、假手术组、哮喘模型组、原络配穴组、原穴组6组.采用腹腔注射卵蛋白致敏,2周后颈外静脉注射卵蛋白的方法激发哮喘发作.原络配穴组取穴太渊(双)、列缺(双),原穴组取穴太渊(双).检测各组大鼠大鼠肺与大肠组织SP-A mRNA的表达改变.结果:哮喘模型组大鼠肺组织SP-A mRNA表达较假手术组低,差别有统计学意义(P＜0.01);原络配穴组、原穴组大鼠肺组织SP-A mRNA表达均较哮喘模型组升高(P＜0.01,P＜0.05),且原络配穴组与原穴组相比,差别也有统计学意义(p＜0.05);捆绑和假手术组肺组织SP-A mRNA的表达较空白对照组升高(P＜0.05);原络配穴组、原穴组大鼠大肠组织SP-A mRNA表达与哮喘模型组对比,差别均有统计学意义,(P＜0.05),2组之间对比,差别无统计学意义(P＞0.05);假手术组、捆绑组大鼠大肠组织SP-A mRNA表达与空白对照组对比,差别亦有统计学意义(P＜0.05).结论:哮喘大鼠肺和大肠SP-AmRNA发生异常表达,肺与大肠存在生物学联系,针刺能够调节肺与大肠相关的失调,并且表里经原络配穴优于单纯原穴治疗.     

针刺对哮喘模型大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的影响

目的:探讨针刺对哮喘模型大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞及嗜酸粒细胞(EOS)的影响.方法:将30只清洁级雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组和针刺组,每组10只.针刺组和模型组采用腹腔注射卵蛋白(OVA)的方法建造哮喘模型,模型组只建模,不予针刺干预;针刺组在建模的同时取“大椎”“肺俞”和“风门”进行针刺干预,隔日1次,共治疗7次(2周);空白组不予任何处理.各组大鼠2周后使用肺灌洗法收集BALF,在光学显微镜下计数白细胞总数,瑞氏染色法计数EOS总数.结果:造模后,模型组大鼠BALF中白细胞、EOS计数与空白组比较明显升高(P＜0.05);针刺后,针刺组大鼠BALF中白细胞、EOS计数与模型组相比明显降低(P＜0.05).模型组大鼠的BALF中EOS占白细胞比例高于空白组(P＜0.05);针刺组大鼠BALF中的EOS占白细胞比例低于模型组(P＜0.05).结论:针刺干预能明显减少哮喘模型大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞和嗜酸性粒细胞数目,从而达到缓解哮喘的目的.     

肉苁蓉对气管切开插管大鼠肺部病理及肺泡灌洗液SP-A浓度的影响

目的:探讨肉苁蓉对气管切开插管大鼠肺部病理及肺泡灌洗液(BALF)肺泡表面活性物质相关蛋白A(SPA)的影响。方法:将54只SD雄性大鼠采用随机数字表法分为A组(正常组18只)、B组(气管切开插管模型组18只)、C组(气管切开插管+肉苁蓉干预18只)。各组分别于24 h、72 h、168 h 3个时段取材6只。取材时结扎并取右肺组织行病理切片检查,采用Smith评分半定量分析;于左肺取肺泡灌洗液,应用SP-A ELISA试剂盒检测SP-A浓度。结果:肺组织病理切片显示B组、C组大鼠24 h、72 h、168 h时段均有不同程度的水肿、肺泡及间质炎症、出血、肺不张等肺组织损伤,Smith评分高于对应时段正常大鼠。C组3个时段评分与B组对应时段评分比较无明显差异。气管切开插管大鼠24 h、72 h、168 h 3个时段肺组织损伤程度不同,随着时间增加损伤程度不断加重,3个时段有明显差异。B组、C组大鼠肺泡灌洗液SP-A浓度在24 h、72 h、168 h 3个时段均明显高于对应时段空白对照组,以24 h浓度最高,168 h最低,呈随气管切开插管时间的延长而浓度不断降低的趋势,C组168h SP-A浓度高于B组。结论:气管切开插管可导致水肿、肺泡炎症、出血、肺不张等肺组织损伤及肺部固有免疫功能紊乱,SP-A有保护肺组织作用,早期SP-A代偿性增高,随后逐渐下降,而肉苁蓉在后期可提高SP-A的浓度而抑制肺组织的损害。     

针刺对支气管哮喘大鼠肺组织P-AKT蛋白表达的调控

目的:探讨针刺对哮喘大鼠肺组织中P-AKT蛋白表达的影响。方法:将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、哮喘模型组、哮喘模型针刺组和哮喘模型雾化阻断剂组,每组10只。各组分别给予相应干预后,用HE染色观察大鼠肺组织形态学改变,Western Blot法和免疫组织化学法检测大鼠肺组织P-AKT蛋白的表达。结果:HE染色显示哮喘模型组大鼠气道周围有多种炎症细胞的浸润和聚集,支气管平滑肌痉挛,官腔狭窄;针刺组和雾化阻断剂组有少量炎症细胞,官腔狭窄管壁增厚程度较模型组减轻。Western Blot和免疫组化法检测示哮喘模型组P-AKT蛋白表达较空白组、针刺组、雾化阻断剂组升高(P0.05);针刺后P-AKT蛋白表达降低(P0.05),雾化阻断剂组与空白组无差异(P0.05)。结论:针刺可降低大鼠肺组织中P-AKT蛋白表达以减轻炎症反应和气道重塑。     

桔梗总皂苷对肺炎支原体感染大鼠肺组织SP-A的影响

目的:通过研究桔梗总皂苷对肺炎支原体(MP)感染大鼠肺部组织中肺表面活性蛋白A(SP-A)表达的影响,探讨其对肺炎支原体感染大鼠肺部组织可能的修复机制。方法:60只Wistar大鼠,雌雄各半,体重80~100 g,随机分为6组,每组10只。分别为空白组、模型组、阳性药(阿奇霉素)组(第1天为45 mg·kg-1,第2~5天为22.5 mg·kg-1)、桔梗总皂苷高、中、低(56,28,14 mg·kg-1)剂量组。采用肺炎支原体滴鼻法造模1次。造模后第2天开始ig给药,阿奇霉素给药5 d,桔梗总皂苷给药10 d后采集大鼠左肺及右肺组织中叶,常规HE染色,显微镜下观察肺组织病理改变,逆转录聚合酶链反应法(RTPCR)检测肺组织中SP-A mRNA的表达水平,采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析。结果:病理结果显示:模型组与空白组比较,肺组织可见明显的肺间质炎症(P0.01);与模型组比较,阳性药组、桔梗总皂苷高、中、低剂量组的肺组织炎症较模型组明显减轻(P0.05);肺组织中SP-A mRNA的表达水平显示:与空白组比较,模型组的肺组织SP-A mRNA表达明显下调(P0.01),与模型组比较,阳性药组、桔梗总皂苷高、中剂量组SP-A mRNA表达上调(P0.05)桔梗总皂苷低剂量组无显著差异。结论:桔梗总皂苷能够改善MP感染大鼠肺部组织的炎症,且对肺部的修复作用可能是通过上调SP-A表达实现的。     

针刺对过敏性哮喘大鼠气道阻力和肺顺应性影响的研究

目的:观察针刺对大鼠过敏性哮喘模型气道阻力和肺顺应性的影响。方法:哮喘模型针刺组针刺大椎、肺俞、风门,哮喘捆绑组作对照。结果:针刺能明显降低哮喘模型大鼠的气道阻力,增加肺顺应性。结论:针刺治疗过敏性哮喘是从降低气道阻力、增加肺顺应性,从而改善肺功能而发挥治疗作用的;结果也表明针刺与捆绑是两种不同的刺激方式。     

针刺对支气管哮喘大鼠肺组织c-fos蛋白表达的影响

目的:探讨针刺对支气管哮喘大鼠肺组织中c-fos蛋白表达的影响。方法:将40只SPF级SD大鼠随机分为空白组、哮喘模型组、哮喘模型针刺组、哮喘针刺对照组,每组10只。各组分别给予相应干预后,采用细胞计数、HE染色法观察大鼠肺组织中炎症程度及病理变化,免疫组织化学染色法检测肺组织中c-fos蛋白的表达程度,免疫荧光染色法检测肺组织中TGF-β1的表达。结果:哮喘针刺组大鼠细胞计数中白细胞及嗜酸性粒细胞较哮喘模型组数量减少但较空白组多(P<0.05);哮喘模型针刺组大鼠肺组织病理改变较哮喘模型组减轻但较空白组重;免疫组化及免疫荧光结果显示,哮喘针刺组大鼠肺组织c-fos蛋白表达(IOD值)低于哮喘模型组(P<0.05)。结论:针刺可明显改善支气管哮喘大鼠炎症反应,能明显抑制c-fos的蛋白表达,针刺可能通过抑制c-fos蛋白表达而达到减轻支气管哮喘症状的目的。说明原癌基因c-fos与支气管哮喘的发作有密切关系。     

针刺对支气管哮喘大鼠肺组织c-fos蛋白表达的影响

目的探讨针刺对哮喘大鼠肺组织中c-fos蛋白表达的影响。方法将70只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(A组)、哮喘模型组(B组)、空白针刺对照组(C组)、哮喘模型针刺对照组(D组)、哮喘模型针刺组(E组)、哮喘模型假针刺组(F组)和空白针刺组(G组),每组10只。各组分别给予相应干预后,用免疫组化、Western blot法检测大鼠肺组织c-fos蛋白的表达。结果免疫组化示A、C、G、E组c-fos蛋白表达呈阴性,B、D、F组呈弱阳性;Western blot检测示B组c-fos蛋白表达较A、E组升高(P0.01);E组低于D、F组(P0.05,P0.01)。结论针刺可降低大鼠肺组织中c-fos蛋白表达以减轻炎症反应。     

“三穴五针法”对过敏性支气管哮喘大鼠肺组织ERK1/2蛋白表达的影响

目的:探讨三穴五针法对过敏性支气管哮喘大鼠肺组织ERK1/2蛋白表达的影响。方法:将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(C组)、哮喘模型组(M组)、哮喘模型针刺组(A组)及哮喘模型雾化阻断剂组(PD组)4组,每组10只,给予相应干预后,采用HE染色法、免疫组织化学法及Western Blot法观察各组大鼠肺组织病理学变化,检测大鼠肺组织中ERK1/2蛋白的表达程度。结果:A组及PD组大鼠肺组织病理改变较M组均减轻而较C组重,免疫组化法及Western Blot法均显示M组哮喘大鼠肺组织ERK1/2蛋白的表达高于C组(P<0.05),而A组及PD组大鼠肺组织ERK1/2蛋白的表达低于M组(P<0.05)。结论:三穴五针法可明显改善过敏性支气管哮喘大鼠炎症反应,抑制哮喘大鼠肺组织ERK1/2蛋白的表达,针刺可能通过抑制ERK1/2蛋白的表达而达到减轻过敏性支气管哮喘症状的目的。     

针刺对哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶及c-fos蛋白表达的影响

目的探讨针刺对哮喘大鼠肺组织中p38MAPK、c-fos蛋白表达的影响。方法将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、哮喘模型组、哮喘模型针刺组3组,每组10只。制作卵蛋白致敏大鼠哮喘模型。采用HE染色法、免疫组化法,观察3组大鼠肺组织病理变化及p38MAPK、c-fos蛋白的表达程度。结果针刺组大鼠肺组织HE染色病理改变较哮喘模型组有所减轻,但较空白组重。免疫组化结果显示,针刺组大鼠肺组织p38MAPK、c-fos蛋白表达(AOD值)低于哮喘模型组(P<0.01)。结论针刺法具有良好的抗炎作用,能有效缓解大鼠哮喘发作。该法能明显抑制哮喘大鼠肺组织p38MAPK、c-fos的表达。其治疗作用机制:可能与MAPK接受细胞外针刺刺激发生反应,又参与细胞内的信息传递过程有关。     

雷公藤和糖皮质激素对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的影响

目的　研究大鼠哮喘模型支气管肺泡灌洗液 (BALF)中嗜酸性粒细胞的改变以及雷公藤和糖皮质激素治疗对BALF中嗜酸性粒细胞的影响。方法　随机将 4 0只大鼠分为正常、哮喘、雷公藤治疗和激素治疗组 ,并对其BALF的嗜酸性粒细胞进行计数。结果　哮喘组大鼠BALF中的嗜酸性粒细胞计数明显高于正常组 (P <0 .0 1) ;激素组BALF中嗜酸性粒细胞计数与哮喘组比较明显降低 (P <0 .0 1)。雷公藤组BALF中嗜酸性粒细胞计数与哮喘组比较明显降低 (P <0 .0 1)。结论　雷公藤及激素可以明显降低哮喘大鼠BALF中的嗜酸性粒细胞数目 ,减轻哮喘的发作     

二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的研究

目的观察二硫化二砷(As2S2)诱发哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的作用。方法采用卵白蛋白制备哮喘豚鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸细胞。将嗜酸细胞悬浮生长于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,嗜酸细胞初始浓度均为2×109L-1。A组As2S2以1.406 3 mg/L终浓度分别加入细胞培养液中培养3,6,12,24,48 h。B组将As2S2终浓度调整为0.04,0.09,0.18,0.35,0.70,1.41,2.81 mg/L,培养6h。2组均以不加As2S2为对照。Wright’s染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变化。流式细胞仪检测观察嗜酸细胞凋亡率。结果嗜酸细胞与As2S2作用6 h后,Wright’s染色、透射电子显微镜均观察到嗜酸细胞出现凋亡的形态学改变。将嗜酸细胞与终浓度为1.406 3 mg/L As2S2在培养基中分别培养3,6,12,24,48 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2作用时间的延长而先升高,于24 h达最高,凋亡率为27.19%,而后下降。各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较均有显著性差异。将嗜酸细胞与不同终浓度As2S2在培养基中分别培养6 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较亦均有显著性差异。结论As2S2可促进哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着As2S2作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显。     

加减补肺汤对COPD肺气虚证模型大鼠支气管肺泡灌洗液TNF-α、IL-8的影响

[目的]研究加减补肺汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证模型对支气管肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素细胞-8(IL-8)表达及大鼠气道病理改变的影响,探讨加减补肺汤治疗COPD肺气虚证的机制.[方法]用烟熏并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法复制COPD"肺气虚证"大鼠模型,将100只雌雄各半大鼠随机分为5组:正常组、模型组、补高组、补低组、桂龙组.治疗后.光镜观察大鼠支气管、肺组织病理改变,放免法检测大鼠支气管肺泡灌洗液TNF-α、IL-8水平.[结果]与正常对照组比较,造模组支气管管腔及周围炎性细胞浸润,纤毛粘连、倒伏、脱落,肺泡扩大融合,数量减少;支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-8高表达,各治疗组以上改变均明显减轻.以补高组最为显著(P<0.01).[结论]加减补肺汤具有缓解气道炎症的作用.对COPD肺气虚证疗效确切.     

IL-1β基因在哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液炎细胞中的表达

目的　观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中炎细胞IL - 1βmRNA的表达情况 ,探讨IL - 1在哮喘发病中的作用。方法　用卵白蛋白 (OVA)致敏并激发大鼠哮喘反应 ,于激发后即刻、1h ,4h和 16h行支气管肺泡灌洗。用地高辛配基标记的cDNA探针检测BALF炎细胞IL - 1βmRNA的原位杂交水平。结果　正常大鼠BALF炎细胞极少表达IL - 1βmRNA ,过敏原激发可诱导BALF炎细胞表达IL - 1βmRNA显著增加。结论　哮喘大鼠BALF炎细胞表达IL - 1βmRNA增加 ,提示IL - 1在哮喘发病中有一定作用。     

针刺对大鼠颅脑损伤后轴突导向因子Slit2表达的影响

目的:观察神经导向因子Slit2在大鼠颅脑损伤后的表达变化,探讨针刺干预颅脑损伤后大鼠Slit2表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为针刺组、模型组、正常组,用改良Feeney打击法制成颅脑损伤模型,分别于损伤后48h、6d组取损伤局部脑组织,采用免疫组化法观察神经导向因子Slit2的表达变化,并进行统计学分析。结果:颅脑损伤后,模型组、针刺组颅脑损伤48h、6d后大鼠颅脑损伤脑组织中Slit2的表达均升高。与模型组相比较,针刺组Slit2表达显著升高,并有显著性差异(P<0.05)。针刺48h组与针刺6d组相比较,针刺48h组Slit2表达显著高于针刺6d组,有显著性差异(P<0.05)。结论:成年SD大鼠颅脑损伤后,针刺治疗对大鼠颅脑损伤后轴突导向因子Slit2表达具有明显的促进作用,并呈一定规律性,提示Slit2与颅脑损伤脑组织的修复相关。     

针刺对大鼠颅脑损伤后Nogo-A表达的实验研究

[目的]观察Nogo—A在大鼠颅脑损伤后表达变化,探讨针刺干预颅脑损伤后大鼠Nogo—A表达的影响。[方法]雄性SD大鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组、正常对照组,用改良Feeney’s打击法制成大鼠左顶叶局限性脑挫裂伤模型,分别于损伤后6、24、48h和6d组取损伤局部脑组织,采用免疫组化法观察Nogo-A的表达变化并进行统计学分析。[结果]颅脑损伤后,从24h开始,针刺组大鼠脑损伤组织中Nogo—A的表达开始下降。与模型组相比较,针刺组48h、6d的Nogo—A表达均显著降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。[结论]针刺治疗对大鼠颅脑损伤后Nogo—A表达具有明显的抑制作用,表明针刺对脑损伤大鼠的神经再生具有促进作用。     

针刺对去卵巢大鼠脑内芳香化酶基因表达的影响

本研究旨在探讨雌激素对大鼠脑内芳香化酶（Atom）基因表达的影响和针刺“人中”、“内关”、“三阴交”穴对去卵巢大鼠脑内芳香化酶（Amm）表达的调整作用。实验选用成年4—5个月的SD雌性大鼠，将动物分为假手术组（Sham）、去卵巢组（Ovx）和去卵巢针刺组（Ovx＋Ac），3组动物都进行捆绑。用放射免疫分析方法测定血清中雌二醇、睾酮的含量，通过海马中心组织块的琼脂包被静止培养法转化睾酮，然后用放射免疫法测定雌二醇的量来计算组织块的Aran活性，使用原住杂交和免疫组织化学技术来观察海马AmmmRNA和蛋白的阳性神经元表达，然后使用计算机图像分析系统进行统计分析。实验结果显示：去卵巢大鼠体内雌二醇和睾酮的量明显降低，海马AmmmRNA和蛋白的阳性表达产物的平均面积与灰度值均明显减少，与假手术组相比均有显著性差异，脑内海马中心组织块的Amm活性稍微降低，与假手术组相比较不存在显著性差异；去卵巢针刺组与去卵巢组相比，血清雌二醇水平明显升高，海马AmmmRNA和蛋白的阳性表达产物的平均面积与灰度值均明显升高，血清睾酮水平出现降低，海马组织块的Atom活性出现升高，但没有达到显著性水平。以上结果表明：脑内Amm基因表达与血中雌激素水平密切相关，去卵巢大鼠针刺后脑部Arom基因表达量明显升高，使脑局部雌激素水平升高，对于预防及治疗老年脑部疾病有很好的作用。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的:观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、咳喘宁高剂量组(27g生药/kg体质量)、咳喘宁低剂量组(13.5g生药/kg体质量)、桂龙咳喘宁对照组(0.41g/kg体质量),每组8只.除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各治疗组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药,激发并给药4周后处死大鼠,采用免疫组化法观察肺组织NF-κB表达和病理组织学变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织NF-κB表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组均可显著降低支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织NF-κB表达量(P<0.05或P<0.01);且咳喘宁高剂量组优于桂龙咳喘宁组(P<0.05).结论:咳喘宁可通过抑制NF-κB的表达,降低炎症蛋白基因的转录,减少炎性介质产生,减轻气道炎症.     

针刺对心理应激性勃起功能障碍大鼠阴茎组织中nNOS的影响

目的：探讨针刺对心理应激性勃起功能障碍（ED）大鼠勃起功能影响的作用机制。方法：应用悬吊水池法建立心理应激性勃起功能障碍大鼠模型30只,将制模成功的大鼠随机分为模型组（n=10）、针刺组（n=10）,另设正常对照组（n=10）。针刺组取“关元”、“三阴交”、“肾俞”穴施治,应用免疫组化SP法检测3组大鼠阴茎组织中神经型一氧化氮合酶（nNOS）的表达。结果：与模型组相比,针刺能明显提高针刺组大鼠的勃起次数（P〈0．05）,并提高大鼠阴茎组织中nNOS的表达（P〈O．05）。结论：针刺能明显增强心理应激性勃起功能障碍大鼠的勃起功能,其作用机制与大鼠阴茎组织中nNOS水平升高有关。     

Effect of acupuncture on nitric oxide synthase expression in cerebral cortex of streptozotocin-induced diabetic rats

Effect of acupuncture on the expressions of nitric oxide synthase (NOS) and neuronal NOS (nNOS) in the cerebral cortex of streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats was investigated. Animals were divided into four groups; the control group, the nondiabetic and acupunctured group, the STZ-induced-diabetes group, and the STZ-induced diabetic and acupunctured group. To produce the diabetic animal model, a single intraperitoneal injection of STZ (50 mg/kg) was given to each animal; animals of the nondiabetic groups received equivalent amounts of normal saline, also via intraperitoneal injection. From the results, acupuncture was shown to increase the numbers of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase-positive and nNOS-positive neurons in STZ-induced diabetic rats. From the present study, it may be suggested that acupuncture modulates NOS and nNOS expressions in the cerebral cortex under diabetic conditions.