HLA-B27基因亚型分型检测

目的对HLA-B27阳性的样本进行分型检测,探讨HLA-B27亚型分布情况。方法采用HLA-B27SSP（序列特异引物聚合酶链反应）亚型分型试剂盒,对流式细胞仪及B27基因筛查为阳性的样本进行分型检测。结果 91个流式细胞仪及PCR-SSP筛查均为阳性样本中,88例为B2704/25,占96.70%;1例为B2705,占1.10%;2例表现为HLA-B27阳性,但型别未确定,占2.20%。结论本实验检测的HLA-B27阳性样本型别以B2704/25为主。     

CDMA和PCR-SSP方法对HLA-B27分型的探讨

目的了解补体依赖性微量淋巴细胞毒实验（cDMA）对人类白细胞抗原B27（HLA-B27）检测结果情况。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）实验作为参考实验,对用CDMA方法检测过的标本用PCR-SSP方法进行复检,比较2种检测结果。结果用2种方法对216例标本进行检测,其中212例标本结果一致,4例标本CDMA为阴性而PCR—SSP为阳性,经统计学分析,差异无统计学意义（X^2=2．25,0．1〈P〈0．25）。结论CDMA方法能够为临床提供可靠的结果。     

HLA-B血清学纯合型标本的PCR-SSP基因分型

目的 探讨血清学和PCR—SSP 2种方法在HLA-B位点分型的应用价值。方法 对血清学分型HLA—B位点纯合型标本,用PCR—SSP方法进行基因分型。结果 血清学分型为纯合型的75例标本中,PCR—SSP方法基因分型有12例为杂合型。结论 HLA—B的PCR—SSP基因分型结果准确、可靠,而血清学分型方法成本低,快速简便。     

用PCR-SSP对HLA-DQB作中分辨法分型

采用PCR-序列特异性引物技术(SSP)对HLA-DQB作中分辨法分型。该方法不仅可行,且操作简便快速,结果准确,适用于临床器官移植配型。     

PCR-SSP法检测29种HLA-B27基因亚型

目的 采用聚合酶链反应—序列特异性引物( PCR-SSP)高分辨技术检测29种HLA-B27基因亚型. 方法 设计并合成HLA-B27亚型特异性引物35条（配对组成上下游引物组合29对）以及一对内对照引物,建立PCR-SSP方法,用于B27亚型分型.检测标本为117例HLA-B27阳性研究对象（男79名,女38名...     

应用PCR—SSP方法进行人类血小板抗原1～6系统的基因分型

目的研究采用PCR—SSP技术，建立人类血小板抗原1．6系统（HPA—1，2，3，4，5，6）的基因分型方法。方法合成18条序列特异性引物，通过调节引物浓度、Mg^2＋离子浓度和探索最佳PCR扩增条件．建立HPA—1．6系统同步基因分型技术。对第10届及第11届国际输血协会（ISBT）血小板基因定型协作组送检的考核样本进行盲检来验证。并应用该技术对198名深圳地区健康的血小板志愿捐献者进行基因分型。结果应用本研究的方法，对第10届及第11届ISBT送检的考核样本进行基因分型，结果与ISBT公布的结果完全一致，符合率达100％。对198名随机的血小板志愿捐献者观察到的基因频率分别是：HPA—1a和1b为0．9924和0．0076，HPA-2a和2b为0．9545和0．0455，HPA-3a和3b为0．5556和0．4444，HPA-4a和4b为0．9975和0．0025，HPA-5a和5b为0．9848和0．0152，HPA-6a和6b为0．9798和0．0202。结论本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点，适合于常规HPA基因分型，具有广泛的应用前景。     

江西地区强直性脊柱炎患者HLA-B27基因PCR-SBT分型研究

目的探讨江西地区人群HLA-B27亚型分布情况,分析HLA-B27亚型与强直性脊柱炎(AS)的相关性。方法采用PCR-SBT(测序法)高分辨率基因分型技术,对HLA-B27 PCR-SSP(序列特异性引物-聚合酶链法)低分辨基因检测阳性的97例AS确诊患者标本和2013年1-12月本实验室检测的1001名江西省造血干细胞志愿捐献者中22名HLA-B27携带者进行HLA-B27基因高分辨率分型。结果 97例HLA-B27阳性的AS确诊患者标本中,进一步采用PCR-SBT高分辨率分型检测,其中81例为B27*04亚型,占83.51%,其余16例为B27*05亚型,占16.49%;造血干细胞志愿捐献者检出22例HLA-B27携带者,HLA-B27亚型分布为:1例B27*02亚型,1例B27*03亚型,15例B27*04亚型,1例B27*06亚型,4例B27*07亚型,未发现B27*05亚型。结论江西地区的AS患者HLA-B27基因亚型以B27*04为主,其次为B27*05。健康人群B27基因携带者与AS患者在主导亚型分布上没有明显的差异,但在亚型种类上存在差异。     

HLA-B27基因检测对强直性脊柱炎诊断的评价

目的评价聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测HLA-B27基因对强直性脊柱炎(AS)的临床诊断价值.方法对87例临床疑似AS患者按MNY标准诊断分为病例组(AS组)和对照组(非AS组),并以PCR-SSP法检测患者血样HLA-B27基因,盲法比较二者结果.结果病例组和对照组HLA-B27阳性率分别为92.86%和11.11%,差异有统计学意义(P＜0.05).HLA-B27基因检测对AS诊断的敏感度(Sen)为92.8%、特异度(Spe)为88.9%、准确度(Acc)为90.8%、阳性预测值(+PV)为88.6%、阴性预测值(-PV)为93.0%、阳性似然比(+LR)为8.4、阴性似然比(-LR)为0.08,比值比(OR)为104.0.结论该法检测HLA-B27基因对AS诊断有较高敏感度和特异度,是一种准确、有效的实验诊断方法.     

PCR-SSP与血清学技术用于ABO血型分型的比较

目的 探讨ABO血型基因分型技术应用于临床检验的可行性.方法 随机抽样100例江西健康汉族个体,并收集20例正反定型不符的标本,采用血清学和序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)鉴定血型.结果 100例健康个体的基因分型结果与血清学分型结果一致,19例正反定型不符标本的基因分型结果准确.分型结果表明江西地区以O型为多,100例健康个体中,O型36例(36%),A型32例(32%),B型24例(24%),AB型8例(8%),基因频率:p(A)基因为0.225 3,q(B)基因为0.175 3,r(O)基因为0.599 8,且符合Hardy-Weinberg平衡.结论 基因分型技术应用于临床检验具有可行性,在鉴定疑难血型方面可以作为血清学分型的补充.     

HLA—DQB1基因分型技术

报告了简便、快速的ＨＬＡ－ＤＱＢ１聚合酶链反应一序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）基因分型技术。比较了基因分型与血清学分型技术的结果，其中３３份标本中６份血清型结果（１８．２％）与基因型不吻合。还讨论了基因分型的意义     

脐血HLA-AB分型方法探讨

目的　探讨脐血HLA AB分型方法。方法　分别采用血清学方法和PCR SSP基因定型方法对 1 0 2份脐血HLA A、B位点进行检测。结果　两方法对比分析结果显示血清学近 1 8.6 %不能得出满意结果 ,HLA A、B位点错定率分别为 6 .1 %和 1 0 .8% ,总错误率 1 6 .9%。结论　脐血HLA表达水平低 ,单个核细胞反应弱及部分交叉反应是造成血清学不能确定或错定的主要原因     

PCR-SSP方法对西北地区回族NA抗原基因分型

目的:通过NA基因分型,了解中国西北地区回族人群NA基因多态性。方法:用PCR-SSP方法对115名健康、无血缘关系个体进行NA 基因分型。结果:在研究对象中NA1 基因频率为0.5696,NA2 基因频率为0.4304。结论:在我国西北地区回族中,NA杂合子多于纯合子,NA1 基因基因频率高于NA2     

实时荧光PCR法和流式细胞术检测HLA-B27的结果分析

目的比较实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)的临床应用价值。方法分别采用实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测225例疑似强直性脊柱炎患者血中HLA-B27,比较和分析两种方法的检测结果。结果 95.11%样本检测结果相同,差异不具有统计学意义(P0.05),将存在差异的标本进行基因测序后,结果与实时荧光PCR的检测结果一致。结论两种方法检测HLA-B27均具有较高的灵敏度和特异度,实时荧光PCR法在结果的准确性上更优于流式细胞术。     

应用PCR—SSP进行HLA—AB基因分型及与血清学方法的比较

目的 建立HLAⅠ类基因分型技术并应用于骨髓七配型。方法 采用序列特异性聚合酶链反应（PCR－SSP）进行HLA－AB基因分型，并与HLAⅠ类血清学分型（微量淋巴细胞毒试验）进行比较。结果 运用PCR－SSP技术共对22例需骨髓移植的病人和48例供者进行基因分型，2例病人确认了HLA 新缘骨髓供者，其中1 已成功进行了骨髓移植；基因分型和血清分型比较，43例结果完全一致（61.4%），血清分型错误率高达38.6%(27/70)。结论 PCR－SSP分型技术具有准确性高，简便快速等优点，将取代传统的血清学方法。     

新的HLA等位基因B~*5610的发现和序列分析

目的　识别确认中国人群的HLA新等位基因。方法　经基因克隆和DNA测序 ,分析该基因和B 5 6 0 2基因序列的差异。结果　该基因和B 5 6 0 2基因序列的差异只是在外显子 3区域中 5 5 9C >A以及 5 6 0T >C 2个碱基取代 ,并导致相应的密码子 187由亮氨酸变为苏氨酸。结论　该基因为HLA新等位基因 ,2 0 0 2年 9月已被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA B 5 6 10。在大约 30 0 0名随机献血者中 ,未发现其他带有B 5 6 10基因的个体。     

PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的研究

目的 探讨PCR扩增产物磁珠纯化法应用于HLA测序分型的可能性.方法 采用本实验室建立的HLA-C基因测序分型方法 中的PCR扩增、测序反应和测序纯化等步骤,对96份标本特异性扩增HLA-C基因外显子1～4目的 序列片段约为2 000 bp,扩增产物分别采用OMEGA公司(瑞士)磁珠纯化法及USB公司(美国)的外切酶I...     

SSOP HD试剂HLA高分辨分型结果不确定的原因分析

目的使用SBT法对SSOP HD试剂分型结果不确定的22份样本进行检测,分析可能的原因。方法对血液样本抽提DNA,按照SSOP HD试剂进行分型检测;针对结果不确定的样本采用SBT法复检,根据SBT法的测序结果分析22份样本SSOP结果不确定的可能原因。结果 2 000份样本经SSOP HD试剂检测后,结果不确定样本共有22份,A位点有6份,B位点有12份,DRB1位点有4份;SBT法检测均为明确的高分辨结果;分析原因可能为磁珠的假阳性或假阴性反应影响软件结果判读;或HLA基因型为罕见型;或试剂的局限性导致两种基因型不能区分。结论 SSOP HD可完成大批量样本的HLA高分辨检测工作;对罕见基因型和磁珠假性反应调整后的结果,应结合SBT法进行核实,保证HLA基因高分辨分型结果的准确性。     

乌鲁木齐地区维吾尔族与汉族人白细胞抗原27阳性率分析

目的探讨乌鲁木齐地区维吾尔族和汉民族人白细胞抗原（HLA）B27阳性分布情况。方法用流式细胞术测定7家医院1220例疑似强直性脊柱炎（AS）患者外周血中淋巴细胞表面HLAB27抗原，并进行HLAB27阳性率分析比较。结果1220例疑似As患者中，HLAB27阳性率男性（42．1％）明显高于女性（23．9％,X^2=41．91，P〈0．01）；汉族（44．2％）明显高于维吾尔族（27．2％，X^2=13．44，P〈0．01）；汉族5～19岁组、20～39岁组和60岁以上组明显高于维吾尔族（X^2=10．61,X^2=7．46，均P〈0．01）。结论乌鲁木齐地区汉族与维吾尔族疑似AS患者中HLAB27阳性率存在民族、性别、年龄差异。