罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎的作用

目的 探讨罗格列酮(ROSI)静脉给药对大鼠重症急性咦腺炎(SAP)的作用及其机制. 方法 雄性Wistar大鼠54只,随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、罗格列酮预处理组(ROSI组),每组18只大鼠.胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.SO组、SAP组造模前30 min股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)(0.2 ml/100g);ROSI组则注射等量的10%DMSO溶解的罗格列酮(6 mg/kg).术后3、6、12 h分批剖杀大鼠,每个时间点6只.检测血清淀粉酶(AMY)和胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平,取胰头部胰腺组织行病理学检查;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平. 结果 SAP组各时间点AMY、MPO及病理评分较SO组升高(P<0.05);ROSI组上述指标较SAP组下降,AMY在6 h、12h时点差异具有统计学意义(P<0.05)、MPO在12 h差异具有统计学意义(P<0.05).SAP组各时间点TNF-α和ICAM-1 mRNA的表达水平均较SO组升高(P<0.05),其中TNF-α在6 h时点达高峰、ICAM-1在12 h时点达高峰.ROSI组各时间点TNF-α mRNA的表达水平较SAP组下降(P<0.05);6h、12 h时点ICAM-1 mRNA的表达水平较SAP组降低(P<0.05). 结论 罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎具有保护作用,其机制与抑制胰腺组织TNF-α和ICM-1 mRNA的表达有关.     

N-乙酰半胱氨酸联合维生素C对急性胰腺炎大鼠NF-κB和ICAM-1作用的实验研究

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)联合维生素C对急性胰腺炎大鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的作用.方法 40只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、急性胰腺炎模型组(AP组)、N-乙酰半胱氨酸治疗组(NAC组)和NAC 维生素C治疗组(NAC VitC组).造模后12 h取材,同时观察大鼠胰腺病理评分,测定血清淀粉酶(AMY)、丙二醛(MDA)浓度;检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)含量;免疫组化链霉亲合素-生物素-过氧化物酶连结法(SABC)法检测胰腺组织NF-κB的表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定胰腺组织ICAM-1 mRNA的表达.结果 AP组胰腺病理评分、AMY、MDA、MPO、NF-KB阳性表达率及ICAM-1 mR-NA的表达明显高于其他3组(P＜0.01);NAC组上述指标均低于AP组(P＜0.01),但仍高于SO组(P＜0.01);NAC VitC组上述指标低于AP组和NAC组(P＜0.01),但仍高于SO组(P＜0.01).结论 在AP时应用NAC联合维生素C能明显减轻胰腺病理损伤,显著降低胰腺炎时血清AMY、MDA和胰腺组织MPO活性;通过抑制NF-κB的活性,减少胰腺组织ICAM-1 mRNA的表达,减轻胰腺的损伤,对AP具有的治疗和保护作用.     

乌司他丁联合生长抑素对重症急性胰腺炎大鼠血清炎性细胞因子的影响

目的研究乌司他丁联合生长抑素用药对重症急性胰腺炎(SAP)炎性细胞因子的影响。方法建立大鼠急性胰腺炎模型成功后,将大鼠分为4组:重症急性胰腺炎(SAP)组、乌司他丁(U)组、生长抑素(S)组、乌司他丁组联合生长抑素(U+S)组;另加假手术(SO)组,每组各10只。各组大鼠于造模后12 h下腔静脉取血检测血清淀粉酶(AMY)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子(ICAM-1)、白介素-1β(IL-1β)水平,观察胰腺病理学改变并进行胰腺病理学评分。结果 1血清AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平:与SO组相比,其余4组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平均升高(P0.05);与SAP组相比,乌司他丁、生长抑素单给药组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平均降低,与单给药组相比,乌司他丁组联合生长抑素组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平进一步降低(P0.05)。2胰腺组织病理学表现:与假手术组相比,其余4组胰腺组织损伤严重;与SAP组相比,单给药组及乌司他丁联合生长抑素组病理损伤减轻;与单给药组相比,乌司他丁联合生长抑素组病理损伤进一步减轻。3胰腺病理学评分:与SO组相比,其余4组胰腺病理学评分均升高(P0.05);与SAP组相比,单给药组乌司他丁组、生长抑素组胰腺病理学评分均降低,与单给药组相比,乌司他丁组联合生长抑素组胰腺病理学评分进一步降低(P0.05)。结论乌司他丁联合生长抑素能够有效减轻SAP大鼠胰腺损伤,其保护机制可能与降低炎性因子的表达有关。     

聚ADP核糖聚合酶抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肺炎症介质表达和肺损伤的影响

目的 探讨多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤治疗作用的机制.方法 36只Wistar大鼠按随机数字法分为假手术对照组(SO组)、SAP组和3-AB处理组.采用5％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法制备SAP模型,3-AB组在SAP造模前、后30 min分别经静脉注射3-AB (10 mg/kg).术后12 h测定血清淀粉酶、肺组织湿/干比、肺髓过氧化物酶(MPO)水平,光镜观察胰腺和肺脏病理变化,逆转录-聚合酶链反应法检测肺组织IL-1β和IL-6 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织TNF-α和ICAM-1蛋白表达.结果 SAP制模后血清淀粉酶、胰腺和肺损伤评分、肺组织湿/干比和MPO值,肺IL-1β和IL-6 mRNA的表达、TNF-α和ICAM-1蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).应用3-AB处理后,上述指标较SAP组均明显下降(P＜0.05).结论 PARP抑制剂3-AB可能通过抑制肺组织MPO,下调IL-1β、IL-6、TNF-α和ICAM-1等炎症介质的表达,对SAP肺损伤发挥保护和治疗作用.     

高迁移率蛋白-1在重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤中的作用

目的:探讨高迁移率蛋白-1(HMGB1)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺中的变化规律及其对胰腺损伤的作用.方法:84只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(36只)、SAP组(48只).SAP模型采用十二指肠壁穿刺经乳头逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠1 mL/kg建立.造模后1、3、6、12、24、48 h处死动物.采用EUSA法检测胰腺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Westem blot测定胰腺HMGB1水平.同时观察胰腺组织病理变化,检测血清淀粉酶(AMY)及腹水量.结果:与对照组相比,SAP组胰腺TNF-α于术后1 h开始明显升高,6 h达高峰,12h即大幅下降,而HMGB1术后12 h显著升高,24 h达高峰.48 h仍维持在较高水平;同时SAP组胰腺病理评分及血清AMY、腹水量亦明显高于对照组(P<0.05).结论:HMGB1作为一种晚期炎症因子参与了SAP大鼠的胰腺组织损伤.     

罗格利酮对伴高脂血症大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的作用研究

目的 探讨罗格列酮(ROSI)对伴高脂血症大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的保护作用及其可能机制.方法 雄性SD大鼠120只,脂肪乳剂灌胃两周.随机(随机数字法)分为6组:高脂血症组(HL)、伴高脂血症SAP组(HP)、罗格列酮干预组(HRP)、罗格列酮拮抗组(HRGP)、罗格列酮对照组(HR)、拮抗剂对照组(HG),每组各20只.HP组、HRP组及HRGP组逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠(1 mL/kg)建立SAP模型.HL组、HR组和HG组操作同HP组、HRP组及HRGP组,但胰胆管内仅注入等容量生理盐水;HRP组和HR组于造模前经股静脉注射ROSI (10 mg/kg);HRGP组于注射ROSI前30 min经股静脉注射GW9662(0.3 mg/kg),其余操作同HRP组,HG组仅于造模前30 min经股静脉注射GW9662 (0.3 mg/kg).于12h观察大鼠胰腺、肺脏病理学变化;计算肺湿干比(W/D);测定血清淀粉酶(AMY)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量;免疫组织化学法检测各组肺组织NF-κB p65蛋白的表达;Western-Blot法检测各组肺组织肿瘤坏死因子(TNF-α)及细胞间黏附分子(ICAM-1)的蛋白表达水平.结果 HL组和HP组的TG、TC的血清水平均明显高于HR组和HRP组(1.24±0.28,1.14±0.08vs.0.41±0.17,0.58 ±0.12;14.86±1.47,12.42 ±0.96 vs.6.52±2.04,7.36±0.95;均P＜0.05);HP组、HRGP组大鼠血清AMY、肺湿干比(W/D)、胰腺、肺组织病理学评分、肺组织NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平均较HL组、HR组及HG组的各项指标有显著升高(6 501.9±3 770.0,5 922.2±925.9 vs.1 139.3 ±35.6,1 070.8 ±67.0,1 012.4 ±94.7;3.14 ±0.16,3.06±0.12 vs.1.81 ±0.13,1.76±0.23,1.83 ±0.18;均P＜0.05);HRP组的大鼠肺脏病理学评分、肺湿干比(W/D)、肺组织NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、ICAM-1蛋白表达水平均较HP组和HRGP组有所降低(均P ＜0.05),HRGP组各项指标均与HP组差异无统计学意义(均P＞0.05).HL、HR及HG三组的各项指标进行相互比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 PPAR-γ激动剂罗格列酮可以降低伴高脂血症SAP大鼠肺水肿程度,并可以通过降低血脂水平和抑制肺组织NF-κB的表达,减少其下游炎性因子TNF-α和ICAM-1的表达,对伴高脂血症SAP大鼠肺损伤产生保护作用.     

抗氧化剂对重症急性胰腺炎大鼠胰腺核因子-kB活化的影响

目的:探索抗氧化剂四氢化吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)时重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺核因子-kB(NF-kB)活化的影响及其意义.方法:72只SD大鼠随机分成假手术组(shamoperation,sO组)、SAP组和PDTC组.SAP模型采用十二指肠壁穿刺经乳头逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠1 mL/kg建立,PDTC组在造模前1 h给予腹腔注射PDTC(30 mg/kg),术后分4个时段(1、3、6、12 h)分批处死动物.应用免疫组化观察胰腺组织NF-kB的活化,并用蛋白免疫印迹法测定胰腺组织中NF-kB的活性水平,同时检测3组大鼠血清淀粉酶(AMY)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平及胰腺组织病理学评分.结果:SAP可诱发胰腺组织NF-kB的激活,PDTC可降低SAP胰腺组织NF-kB的活性水平(P<0.01).POTC组血清AMY水平及胰腺组织病理评分明显得到改善(P<0.05),且术后12 h,PDTC组血清ALT、CK-MB、BUN水平亦明显低于SAP组(P<0.01).结论:SAP时,PDTC可能通过抑制胰腺组织NF-kB的活化,从而减轻SAP大鼠胰腺组织的损伤.     

细胞间黏附分子-1在大鼠急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤中的表达和意义

目的:探讨细胞间黏附分子在大鼠急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤中的表达和意义.方法:80只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为两组,假手术组(SHAM)和胰腺炎肺损伤组(ALI).术后6、12、24、48 h分别处死大鼠观察胰腺,肺脏病理学形态改变;检测血清淀粉酶、TNF-α、IL-6含量;称肺干湿重比;检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;荧光定量PCR检测肺组织细胞间黏附分子-1 (ICAM-1) mRNA表达;免疫印迹法检测肺组织中ICAM-1蛋白表达.结果:ALI组各时点肺湿干质量比较SHAM组有显著差异(P＜0.05),MPO活性测定各时点均较SHAM组升高(P＜0.05);ALI组血清淀粉酶、TNF-α、IL-6含量均较SHAM升高(P＜0.05);ALI组ICAM-1 mRNA表达较SHAM组明显升高,并且随时间进展而逐渐增加,12h达高峰,并维持在高水平表达;同时ICAM蛋白表达也逐渐升高,12h达高峰后持续高水平表达;TNF-α与ICAM-1 mRNA及蛋白质表达变化呈正相关趋势.结论:在大鼠急性坏死性胰腺炎肺组织中,ICAM-1在基因及蛋白水平上呈过度表达,并且与肺组织损伤程度密切相关,前炎性因子TNF-α在ICAM-1的过度表达中起到了重要作用.     

吗替麦考酚酯对重症急性胰腺炎大鼠免疫损伤的影响

目的 探讨NF-κB对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠炎症因子TNF-α、IL-1β和sICAM-1的调控作用及其早期的动态变化及意义,并观察吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)的干预性作用.方法 将104只雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分成健康组、假手术组、SAP组、MMF组.(1)健康组仅开腹后缝合即可(n=8)；(2)假手术组开腹后仅翻动胰腺并以钝器轻划胰腺组织5次(n=32)；(3) SAP组采用逆行胰胆管注射牛黄胆酸钠法建立SAP模型(n=32)；(4) MMF组大鼠在完成SAP模型后1h经尾静脉注射MMF 250 mg/kg(n=32).于造模后3、6、12、24 h时点分批处死大鼠,常规HE染色进行胰腺组织病理评分；采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶AMS、血清C反应蛋白(CRP)；ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和sICAM-1的含量；荧光定量PCR法检测胰腺组织NF-κB mRNA表达.结果 SAP组与健康组、假手术组比较,胰腺组织病理评分与血清AMS、CRP、TNF-α、IL-1β及sICAM-1的含量、胰腺组织NF-κB mRNA表达在各时间点均显著升高(P＜0.05),干预组使用MMF后,胰腺组织病理评分、血清AMS、CRP、TNF-α、IL-1β和sICAM-1水平、胰腺组织NF-κB mRNA同SAP组相比均有明显降低(P＜0.05).结论 SAP早期阶段细胞因子的变化与SAP病情进展密切相关,MMF可通过抑制细胞免疫及炎性细胞因子的产生,减轻炎症损伤反应.     

大承气汤抑制高迁移率族蛋白1-Toll样受体4信号通路减轻炎症反应改善重症胰腺炎大鼠肾损伤

目的研究大承气汤(DCQD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损伤的作用及机制。方法 60只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham)、SAP组,DCQD治疗组和r-HMGB1组各15只。经胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠构建大鼠SAP模型。评估各组肾脏病理形态,血清中淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LIS)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和高迁移率族蛋白1(HMGB1)含量,血清和肾脏白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达及肾脏HMGB1、乙酰化HMGB1(Acetyl-HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、Myd88、p-p65和p65蛋白表达。结果与Sham组比较,SAP组肾脏病理损伤加重,AMS、LIS、Cr、BUN、HMGB1、IL-6、MCP-1、TNF-α、Acety-HMGB1、TLR4、Myd88和p-p65的表达增高(P0.05);与SAP组比较,DCQD组肾脏病理损伤减轻,AMS、LIS、Cr、BUN、HMGB1、IL-6、MCP-1、TNF-α、Acety-HMGB1、TLR-4、Myd88和p-p65的表达降低(P0.05);与DCQD组比较,r-HMGB1组肾脏病理损伤加重,AMS、LIS、Cr、BUN、HMGB1、IL-6、MCP-1、TNF-α、Acety-HMGB1、TLR-4、Myd88和p-p65的表达增高(P0.05)。四组间p65表达比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论大承气汤对SAP诱发的肾损伤有保护作用,其作用机制与促进HMGB1去乙酰化修饰,继而抑制HMGB1-TLR-4/NF-κB介导的炎症反应相关