急性白血病及多发性骨髓瘤EB病毒DNA检测

目的用荧光定量PCR方法检测急性白血病（AL）与多发性骨髓瘤患者（MM）骨髓中EBV—DNA含量,并探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR技术检测40例急性白血病与25例多发性骨髓瘤患者EBV感染情况,同时检测了32例对照组小细胞低色素性贫血和巨幼细胞性贫血患者骨髓EBV—DNA含量。结果多发性骨髓瘤患者EBV感染率为56%,急性白血病组EBV感染率为7.5%,对照组EBV感染率6.2%。AL组与对照组EBV—DNA阳性率无显著性差异（P〉0.05）,MM组与对照EBV—DNA阳性率有显著性差异（P〈0.01）,MM组与AL组EBV—DNA阳性率有显著性差异（P〈0.01）。结论 AL患者的发病与EB病毒感染关系不大,MM患者的发病与EB病毒感染有关;应用荧光定量PCR方法对MM患者骨髓中EBV—DNA含量进行检测,对于揭示MM的发病与EBV感染之间的相关性提供了敏感可靠的检测方法。     

EBV—DNA定量检测对鼻咽癌的诊断

目的通过对鼻咽癌患者经治疗后EBV—DNA含量变化的观察,为临床诊治陔病寻求最佳方法。方法血浆EBV—DNA检测采用荧光定量PCR法,选择确诊的145例鼻咽癌患者为研究对象,对其EBV-DNA进行定量检测,并以同期健康者140名的血浆情况进行对比研究。结果鼻咽癌组中有136例（93．79％）患者血浆EBV—DNA呈阳性：健康组中有10例（7．14％）血浆EBV—DNA呈阳性,鼻咽癌组患者出浆EBV—DNA阳性检出率明显高出健康组（P〈0．01）;血浆EBV-DNA呈阳性的患者在治疗过程中,血浆EBY—DNA含量呈逐渐下降趋势。结论给予鼻咽癌患者EBV—DNA定量检测,对诊断和指导治疗价值明显。     

荧光定量PCR法检测鼻咽癌血浆游离EBV DNA的临床意义

目的通过检测血浆中游离EBV DNA水平,探讨其在鼻咽癌诊断、鉴别诊断、临床分期中的临床意义,方法采用荧光定量PCR方法定量检测111例初治鼻咽癌患者和107例放疗后持续缓解患者血浆游离EBC DNA水平．结果初治组及临床缓解组血浆中游离EBV DNA检出率分别为74．8％（83／111）和4．6％（5／107）．初治组检出率显著高于临床缓解组．在统计学上有显著性差异;初治组中晚期（Ⅲ＋Ⅳ期）血浆游离EBV DNA拷贝数显著高于早期（Ⅰ＋Ⅱ期）;N晚期（N2＋N3）拷贝数显著高于早期（N0＋N1）;T晚期（T3＋T4）拷贝数显著高于早期（T1＋T2）;统计学上均有显著性差异。结论荧光定量PCR方法检测血浆中游离EBV DNA是一种敏感可靠的方法,血浆游离EBV DNA定量检测对鼻咽癌诊断、鉴别诊断、分期、治疗后监测有重要的临床意义．有望成为鼻咽癌肿瘤学标记物。     

儿童社区获得性肺炎常见非典型病原体临床研究

目的探讨常见非典型病原体（MP、CP、CT）在儿童社区获得性肺炎（CAP）的分布特点,为临床提供病原诊断依据。方法选取我院2010年1月-2010年12月期间住院确诊为社区获得性肺炎的650例患儿,年龄1月-14岁;人院时取深部呼吸道新鲜痰液,采用聚合酶联荧光定量（FQ—PCR）技术检测肺炎支原体、肺炎衣原体、沙眼衣原体的基因片段。结果常见非典型病原体病原阳性率为28％（182／6501,单纯MP感染检出率为10％（65／650）,单纯cP感染率为8．9％（58／560）,单纯cT感染检出率为2．9％（19／5601,混合感染检出率为6．2％（40／560）;男性患儿病原体检出率为28．6％（99／345）,女性患儿检出率为27．2％（83／305）;MP、CP3岁以上儿童的感染率分别为61．5％（40／65）和70．7％（41／58）;CT检出率1-6月年龄组最高,为52．6％（10／19）;混合感染6月～3岁年龄组检出率为62．5％（25／40）;春夏秋冬四季总检出率分别为24．2％（44／182）、23．6％（43／182）、24．7％（45／182）、27．4％（50／182）;异常胸x线表现间质浸润、肺叶浸润、胸膜反应等出现率比较差异无显著性（p〉0．05l肺门淋巴结肿大出现率比较差异有显著性（P〈0．05）。结论CAP患儿非典型病原体以MP、CP为多,MP、CP感染多见于、3岁以上儿童,并随年龄的增长而增加;CT感染1．6月年龄组最高,混合感染6月～3岁年龄组最高;性别、季节和胸x线间质浸润、肺叶浸润、胸膜反应等异常表现对MP、CP、CT诊断无鉴别意义,但肺门淋巴结肿大,MP感染可能性大。     

MP—DNA与IgM在儿童肺炎支原体感染病程中动态检测的意义

目的利用FQ—PCR技术和DIGFA试验对儿童呼吸道感染患者分别检测MP—DNA和MP—IgM,观察分析其在不同病程中的变化规律,探讨FQ—PCR检测MP—DNA和DIGFA检测MP—IgM用于儿童肺炎支原体感染中的诊断价值。方法入选患儿留取呼吸道分泌物和血清标本,采用FQ—PCR法检测呼吸道分泌物MP—DNA,用胶体金DIGFA法检测患儿血清MP—IgM。入院患儿被检出单一MP—DNA阳性或MP—IgM阳性或两者双阳性者均确诊为MP感染病例,对确诊的病例观察分析病程不同时期MP—DNA和MP—IgM阳性率消长的动态及其变化规律。结果根据患儿MP—DNA和MP—IgM检出情况,被确诊为肺炎支原体感染的患儿共56例。对这56例患儿进行病程追踪检查分析显示：在病程初期阶段,MP—DNA检出阳性率为82．14％（46／56）,MP—IgM阳性率为35．7l％（20／56）;两种检测阳性率比较,MP—DNA阳性率显著高于MP—IgM阳性率,两者差异有显著性（P〈0．05）。在病程中期,MP—DNA检出阳性率下降为64．29％（36／56）,MP—IgM阳性率上升为80．36％（45／56）;到恢复期,MP—DNA阳性检出率继续下降为1．79％（1／56）,而MP—IgM阳性率在中期升高后又返降为23．21％（13／56）。结论在肺炎支原体感染患儿不同病程中,存在MP—DNA随病程延长逐渐降低而MP—IgM随病程延长逐渐增高至中期又返折下降的消长规律。FQ—PCR检测MP—DNA对MP感染患儿发病初期就诊者确诊价值较高,而DIGFA检测MP—IgM对发病时间已较长而又初次就诊者诊断意义较大。两种方法联合应用既可在诊断上优势互补,又可用于患儿病情转归预测评估。     

EB病毒感染与多发性硬化症关系的研究

目的了解多发性硬化症（multiple sclerosis，Ms）患者EB病毒（EB virus,EBV）感染情况。方法收集26例临床确诊为MS患者的脑脊液（CSF）及26例正常对照组的CSF，应用ELISA法检测CSF中EBV特异的IgG的产生，并采用PCR技术检测MS患者CSF中EBV的DNA。结果在26例临床确诊为MS患者的CSF中发现IgG增高百分率为76．9％（20／26），EBV—DNA阳性率为94．6％（24／26）。结论MS患者CSF中普遍存在EBV感染情况。     

PCR检测70例儿童EBV-DNA的临床分析

目的探讨应用荧光定量PCR检测EBV-DNA的临床应用及70例EBV阳性病例的临床分析。方法应用荧光定量PCR检测外周血EBV-DNA,并回顾性分析70例阳性病例的临床特点。结果大部分患儿的拷贝数分布于102~103之间,70例患儿中以传染性单核细胞增多症21例(30%),呼吸道感染14例(20%)为主。结论荧光定量PCR法检测EBV-DNA均有高效性、灵敏度高等优点,在EB病毒感染相关疾病诊断中很有价值。     

PCR技术检测呼吸道感染患者痰和咽拭子中肺炎衣原体的研究

采用聚合酶链式反应（PCR）检测110例呼吸道感染住院患者痰和咽拭子标本中肺炎衣原体DNA。肺炎衣原体PCR检测的阳性率为10．9％（12／110），其中30岁以下患者阳性率最高（31．8％）；12冽PCR阳性患者中，肺炎所占比例最高（41．7％），其次为哮喘（16．7％）和支气管炎（16．7％）。提示肺炎衣原体是呼吸道感染的重要致病原之一，而PCR技术是检测肺炎衣原体急性感染的有用方法。     

荧光定量PCR快速检测小儿巨细胞病毒感染标本的选择

目的优化检测标本,提高小儿巨细胞病毒感染的阳性检出率,准确量化巨细胞病毒拷贝数,为临床诊断和治疗提供可靠依据。方法荧光定量PCR检测患儿血、尿中的HCMV—DNA,比较其阳性检出率、Ct值、HCMV拷贝数。结果523例患儿标本中,血标本488倒,阳性89例（18．24％）;尿标本85例,阳性36例（42．35％）;其中有50例患儿同时采集血、尿进行HCMV—DNA定量检测,血标本阳性9例（18％）;尿标本阳性23例（46％）。血、尿标本HCMV的检出率出现明显差异。结论采用荧光定量PCR检测小儿巨细胞病毒感染,用尿作标本明显优于血标本,可提高HCMV的阳性检出率。     

乙型肝炎病毒DNA载量与HBeAg、Pre—S1Ag表达关系的探讨

目的：探讨HBV—DNA不同载量下HBeAg、Pre-S1Ag表达关系，正确评价其临床意义。方法：采用ELISA法对188例不同HBV—DNA含量（荧光定量PCR检测）的标本进行HBeAg、Pre—S1Ag检测，并作比较分析。结果：HBV～DNA〉10^3 copies／ml标本中，Pre—S1Ag阳性率明显高于HBeAg阳性率，中低拷贝数（10^6—10^3copies／ml）尤甚。Pre-S1Ag与HBeAg的阳性符合率为80％，Pre—S1Ag（＋）漏检率是HBeAg（＋）漏检率的47．8％。结论：Pre—S1Ag与HBeAg相伴存在，是较HBeAg更准确地反映乙肝病毒复制的血清学指标。     

实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析

目的分析实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测在人巨细胞病毒(HCMV)感染中的应用价值。方法选取363例疑似HCMV感染患儿及50例健康儿童,均采集血样进行实时荧光定量PCR检测。分析荧光定量PCR检测结果 ,并比较不同性别、不同年龄HCMV感染的阳性检出情况。结果实时荧光定量PCR检测显示, HCMV感染患儿中32例为阳性,阳性率为8.82%;健康儿童中1例为阳性,阳性率为2%。阳性患儿的HCMV载量在5.0×102~1.0×104 copies/ml。HCMV感染患儿阳性率高于健康儿童,差异具有统计学意义(P<0.05)。188例男性CMV感染患儿的阳性率为9.04%(17/188), 175例女性CMV感染患儿的阳性率为8.57%(15/175),不同性别HCMV感染患儿阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。152例年龄<1岁CMV感染患儿的阳性率最高,为14.5%;其次为1~3岁患儿,阳性率为6.9%;109例>3岁患儿的阳性率最低,为2.8%;不同年龄段CMV感染患儿的阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 <1岁儿童由于机体的免疫力和抵抗力较弱,容易出现HCMV感染的情况,因此需要借助实时荧光定量PCR技术进行筛查,从而尽早诊断和治疗,能够避免严重并发症的出现。     

白三烯动态变化与小儿上呼吸道感染关系研究

目的探讨白三烯（LTs）在小儿上呼吸道感染中的变化特征及其意义。方法回顾性分析本院2009年6月～2010年10月收治入院的急性上呼吸道感染患儿46例临床资料,选择本院同期正常体检儿童46例做为对照组。所有患儿分别用双核夹心ELISA法测定急性期及恢复期血、尿白三烯的水平。结果上呼吸道感染患儿在急性期血、尿中白三烯水平显著高于健康儿童,而恢复期与健康儿童差异无统计学意义。上呼吸道感染时白细胞计数大于10×109时显示血、尿LTs水平明显增加,P〈0.05。结论白三烯参与上呼吸道感染的发病过程,白三烯受体拮抗剂在上呼吸道感染治疗上可能有一定作用。     

传染性单核细胞增多症患儿EBV-DNA检测及其意义

目的 探讨应用PCR技术检测EB病毒DNA(EBV-DNA)的临床应用价值.方法 应用PCR和荧光检测技术检测外周血EBV-DNA,对100例阳性病例的临床特点进行回顾性分析.结果:病例年龄1个月至12岁,中位年龄3岁,＜3岁65例,3～7岁25例,＞7岁10例;传染性单核细胞增多症(IM)组EBV-DNA的阳性率为84.0%(84/100),对照组阳性率为5.0%(2/40),差异有统计学意义(P＜0.01);IM患儿早期EBV的含量[(75.52±175.11)×103 copies/ml],明显高于恢复期EBV的含量[(0.67±2.27)×103 copies/ml](P＜0.01).结论 PCR法检测EBV-DNA时间短,准确性好,灵敏度高,在EB病毒感染相关疾病诊断中有一定价值.     

社区急性上呼吸道感染分析

目的 分析2008 -2010年急性上呼吸道感染的临床特点,为临床治疗提供参考.方法 随机抽样我院急诊科2008 -2010年急性上呼吸道感染患者登记资料,每年300例,统计分析相关检验检测指标.结果 2008年咽拭子培养结果中34例为草绿色溶血性链球菌,8例流感嗜血杆菌,阳性率为14.0％(42/300).2009年26例为草绿色溶血性链球菌,4例流感嗜血杆菌,阳性率为10.0％( 30/300).2010年28例为草绿色溶血性链球菌,4例流感嗜血杆菌,阳性率为10.7％ (32/300).3年培养结果阳性率差异无统计学意义(x2=0.003,P＞0.05).2008年68例(22.7％)中性粒细胞升高,32例(10.7％)降低;2009年74例(24.7％)升高,48例(16.0％)降低;2010年71例(23.7％)升高,38例(12.7％)降低.3组差异无统计学意义(P＞0.05).2008年血液分析结果显示以淋巴细胞升高为主,为188例,占62.7％;2009年为224例,占74.7％;2010年以淋巴细胞降低为主,为185例,占61.7％.3组差异有统计学意义(P＜0.05).2008年单核细胞升高88例(29.3％),降低3例(1％);2009年单核细胞升高76例(25.3％),降低4例(1.3％);2010年单核细胞升高82例(27.3％),降低1例(0.3％).3组单核细胞变化情况差异无统计学意义(P＞0.05).结论 2008至2010年武昌区居民上呼吸道感染以病毒为主要病因,2009年及2010年主要以淋巴细胞偏低为血液分析变化特点.     

小儿呼吸道偏肺病毒感染的临床分析

目的分析偏肺病毒（hMPV）nT吸道感染患儿的临床特征,为更好地观察和治疗小儿呼吸道偏肺病毒感染提供参考。方法选取广州市妇女儿童医疗中心儿童院区呼吸科2008年6月-2010年6月收治的1798例急性呼吸道感染患儿新鲜痰液,用逆转录·聚合酶链反应法检测hMPVN基因,随机挑选部分阳性PCR扩增产物进行核苷酸测定并将所测序列在GenBank中进行比较分析,检测是否hMPV感染,常规查外周血象、胸片、C反应蛋白、记录临床资料。结果小于6月龄组有43例hMPV阳性检出率46．7％,6月龄～1岁组有9例（9．8％）,1～3岁组有27例（29．3％）,3。7岁组有10例（10．9％）,7．14岁组有3例（3．3％）。hMPV感染的临床表现依次为：咳嗽（89．1％）、发热（73．9％）、肺部哕音（S1．1％）、喘息（33．7％）、气促（8％）。结论广州地区部分儿童呼吸道感染与hMPV有关,全年存在hMPV感染,流行高峰期在3～4月,6个月以下小儿感染率较高;hMPV感染临床特征无特异性,可表现为发热、咳嗽、喘息。     

抗幽门螺杆菌治疗用于特发性血小板减少性紫癜的疗效观察

目的探讨抗幽门螺杆菌（HP）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）治疗中的作用。方法145例HP阳性ITP患者根据血小板计数分为血小板小于50×10^9及血小板大于50×10^9两组。血小板小于50×10^9／LHP阳性患者95例,按人院顺序随机分为联合治疗组与单用糖皮质激素组。联合治疗组给予根除HP及糖皮质激素治疗,单用糖皮质激素组未给予根除HP治疗,其余治疗同联合治疗组。血小板大于50×10^9／LHP阳性、无明显出血征象者50例,按入院顺序随机分为抗HP治疗组与对照组。抗HP治疗组进行单纯正规抗HP治疗,对照组未用任何药物治疗,定期复查血常规。结果联合治疗组总有效率（92％）明显高于单用糖皮质激素治疗组（75％）（X2=5．01,P〈0．05）,2年内复发率（19％）明显低于单用糖皮质激素组（49％）（x2=9．69,P〈0．01）。单纯根除HP治疗对ITP患者有一定疗效。结论根除HP是合并HP感染的ITP患者行之有效的治疗方法。     

头孢硫脒对小儿重症肝炎并发感染的预防作用

目的 观察头孢硫脒对小儿重症肝炎并发感染的预防作用.方法 70例重症肝炎患儿,按随机数字表法将其分为观察组和对照组各35例.两组患儿均给予保肝、利胆退黄、利尿等治疗,另给予观察组患儿头孢硫脒静脉滴注1周.记录并分析两组患儿治疗前后体内炎症水平、治疗后感染情况、感染部位分布以及治疗过程中的不良反应.结果 (1)观察组医院内感染比例、病死率、合并感染病死率分别为28.57％、25.71％、40.00％,低于对照组57.14％、51.43％、66.67％,差异有统计学意义(均P<0.05);(2)在感染部位的分布上,两组患者差异无统计学意义,均以腹膜炎和呼吸道感染为主;(3)观察组治疗后血浆白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平分别为(38.96±3.76)、(34.58±3.17)ng·L-1,低于对照组(49.39±4.38)、(42.16±3.87)ng·L-1,差异有统计学意义(均P<0.05);(4)观察组治疗后血浆白细胞水平和中性粒细胞比例分别为(8.97±0.59)×109 L-1、72.83％ ±2.71％,低于对照组(10.99±0.68)×109 L-1、78.68％ ±4.16％,差异有统计学意义(均P<0.05);(5)治疗过程中观察组患儿发生不良反应比例为11.43％,略高于对照组5.72％,但差异无统计学意义(χ2=0.729,P=0.393).结论 头孢硫脒可降低小儿重症肝炎并发感染的比例,改善重症肝炎患儿预后,且不会明显增加治疗过程中的不良反应.     

降钙素原联合C反应蛋白、白细胞诊断新生儿感染性肺炎临床分析

目的：研究降钙素原（PCT）联合C反应蛋白（CRP）、白细胞（WBC）诊断新生儿感染性肺炎的临床影响。方法：选取2012年7月～2014年7月我院收治的110例患有感染性肺炎的新生儿作为观察组,其中细菌性感染患儿55例,病毒性感染患儿55例,随机选取无任何感染性疾病的新生儿55例作为对照组,抽取静脉血诊断降钙素原、C反应蛋白、白细胞,观察并比较3组间的PCT、CBP、WBC水平。结果：观察组中细菌感染患儿的PCT水平（0.81±0.25）ng/ml,CRP水平（22.53±3.28）mg/L,WBC水平（16.86±2.63）×109/L,病毒性感染患儿的PCT水平（0.57±0.37）ng/ml,CRP水平（9.35±2.63）mg/L,WBC水平（10.51±2.45）×109/L,对照组中PCT水平（0.31±0.34）ng/ml,CRP水平（5.23±2.21）mg/L,WBC水平（6.53±2.41）×109/L。三组比较组间水平差异显著,具有统计学意义（P<0.05）;两两比较,细菌感染组水平高于病毒感染组与对照组患儿,差异显著,具有统计学意义（P<0.05）;且病毒感染组水平高于对照组,差异显著,具有统计学意义（P<0.05）。细菌感染组中：PCT敏感度为82.80%,特异度为91.40%,CRP敏感度为69.80%,特异度为46.30%,WBC敏感度为40.20%,特异度为34.60%;病毒感染组中：PCT敏感度为59.70%,特异度为71.60%,WBC敏感度为39.50%,特异度为31.30%,联合诊断敏感度为16.90%,特异度为21.40%。结论：采用降钙素原联合C反应蛋白、白细胞诊断新生儿感染性肺炎具有良好的敏感度、特异度,能有效帮助医生确切诊断细菌性感染或病毒性感染,在临床上值得推广应用。     

荧光定量PCR法在检测246例小儿巨细胞病毒感染中的应用

目的：探讨FQ-PCR在诊断小儿巨细胞病毒感染的临床应用价值。方法：分别应用血清抗体检测和荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）的方法对患者进行血液和尿液病毒的检测,并对确诊的患者进行母乳CMV病毒的检测。结果：在怀疑为活动性CMV感染的169例患儿中,PCR法的阳性检出率为75.1%,血清IgM法为52.1%,两种方法的阳性符合率为86.4%;18例尿液CMV-DNA阳性的患者查出母亲乳汁中CMV-DNA,含量为1.7×10～4.5×103copies/mL。结论：FQ-PCR可以准确检测患儿体液及血液中的CMV含量,提示体内复制情况,对于临床的诊断和治疗有一定的指导意义。     

天津地区儿童急性呼吸道和消化道感染Saffold病毒的检出和临床流行特征

目的 调查天津地区儿童急性呼吸道和消化道感染中是否存在 Saffold 病毒（SAFV）感染及其流行病学特征。 方法 收集 360 份急性呼吸道感染患儿鼻咽抽吸物和 384 份消化道感染患儿粪便标本, 以针对 SAFV 5′-UTR 基因序列设计的特异性引物进行荧光定量 PCR 扩增, 随机取阳性扩增产物进行核苷酸序列测定, 并将所测序列在 GenBank 中进行比对。 计算呼吸道和消化道 SAFV 感染阳性者的阳性率, 不同年龄段及季节的 SAFV 阳性构成比和阳性检出率。 同时考察 SAFV 与其他病毒的混合感染情况。 结果 呼吸道和消化道检测 SAFV 阳性率分别为 11.9%（43/360）和 16.4%（63/384）。 不同性别的呼吸道 SAFV 阳性检出率差异无统计学意义［ 男 、女分别为 11.5% （28/243）和 12.8%（15/117）, χ2=0.13, P > 0.05］, 年龄 6 d～ 12 岁, ＜ 1 岁者占 79.0%（34/43）;消化道检测 SAFV 阳性患儿阳性检出率差异有统计学意义［ 男 、女分别为 13.4%（33/246）和 21.7%（30/138）, χ2=4.47, P＜ 0.05］, 年龄 5 h～ 11 岁。 不同年龄段的呼吸道和消化道 SAFV 阳性检出率差异均无统计学意义。 不同季节呼吸道 SAFV 阳性检出率差异有统计学意义, 以冬季和夏季为主（P＜ 0.01）, 而消化道 SAFV 阳性检出率差异无统计学意义。 呼吸道和消化道 SAFV 与其他病毒混合感染率分别为 7.0%（3/43）和 12.7%（8/63）。 结论 天津地区儿童存在 SAFV 感染, 在急性呼吸道和消化道感染患儿中具有较高的阳性检出率, 且在 1 岁以内患儿中的阳性检出率较高, 应该引起临床重视。