miRNA药物的发展前景

microRNA(miRNA)是一类非编码RNA(ncRNA),在转录后水平调节内源性基因表达.miRNA通过直接或间接上调或下调靶标mRNA的表达,几乎参与体内所有生理和病理过程.miRNA具有易于化学合成和修饰的优点,使其成为具有巨大治疗潜力的主要非编码RNA.本研究梳理miRNA类似物和抑制剂在癌症、心血管疾病、...     

miRNA研究进展

miRNA是近年来在多种真核细胞及病毒中发现的一类来源内源性染色体上的非编码单链RNA,长度为21～25nt的短序列,在进化上具有高度的保守性,能够通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对,引起靶mRNA降解或者抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控[1].     

高尿酸血症患者外周血miRNA表达谱的分析及ceRNA网络构建

目的:探讨高尿酸血症(HUA)患者外周血miRNA表达谱及ceRNA网络构建。方法:对5例HUA患者及5名体检健康者外周血单个核细胞miRNA表达水平进行检测并测序,筛选出差异表达的miRNA分子。利用miRwalk、miRBD、miRTarBase和targetscan数据库预测miRNA的靶基因;circbank数据库预测circRNA-miRNA的靶向结合关系。通过DAVID和Metascape数据库对靶基因的基因功能和通路富集分析。利用Cytoscape构建主要信号通路的circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结果:在HUA患者与体检健康者中,共发现47种已知miRNA和4种新miRNA差异表达,其中已知差异表达miRNA有25种上调,22种下调。差异表达miRNA的靶基因主要富集在癌症和细胞衰老相关信号通路。基于ceRNA理论构建的癌症相关信号通路circRNA-miRNA-mRNA调控网络,涉及96个circRNA节点、13个miRNA节点及212个mRNA节点。结论:HUA患者外周血miRNA表达谱与健康体检者存在差异,且差异表达miRNA靶基因与癌症的发生发展密切...     

乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究

 【目的】 应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】 收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】 对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs, 相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】 筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。     

乳腺癌差异表达的MicroRNA的筛选研究

【目的】应用miRNA芯片技术筛选乳腺癌及癌旁组织差异表达的miRNA,发现与乳腺癌相关的miRNA,为进一步阐明其在乳腺癌发病机制中的作用打下基础。【方法】收集8例新鲜的乳腺癌及其癌旁组织,抽提总RNA并分离出小RNA进行Cy3荧光标记,将标记的小RNA在miRNA芯片上进行杂交反应,应用实时定量RT-PCR方法验证miRNAs芯片结果的可靠性。【结果】对芯片数据进行SAM分析,结果筛选获得16个乳腺癌相关miRNAs,相对于癌旁组织,在乳腺癌组织中9个miRNAs表达上调,7个miRNAs表达下调。其中显著上调的有miR-21,miR-365,显著下调的有miR-497,miR-31。【结论】筛选得到乳腺癌miRNA差异表达谱,其可能与乳腺癌的发生发展有关。     

微小核糖核酸在胃癌中的研究进展

研究证实,miRNA与胃癌发生、发展、转移、耐药性等密切相关,在多种胃癌相关信号通路中起重要作用.miRNA是极具研究价值的新型肿瘤标志物,并可能为肿瘤基因治疗提供新的分子生物途径.随着对miRNA调控机制和靶基因功能的深入研究,肿瘤的发病机制将获进一步的阐明,胃癌的诊断和治疗也将获益.     

miRNA21抑制物对食管癌细胞凋亡的影响

目的:利用miRNA21抑制物抑制食管癌细胞系ECA-109中miRNA21的表达,观察对ECA-109细胞凋亡的影响,为探讨miRNA21抑制物在食管癌治疗中的应用提供理论参考。方法:以正常培养的ECA-109细胞为空白对照组,转染miRNA21抑制物阴性对照物作为阴性对照组,转染miRNA21抑制物作为实验组,通过MTT法、流式细胞术、实时荧光定量PCR研究miRNA21抑制物对ECA-109细胞增殖、凋亡及凋亡相关基因表达的影响。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,转染miRNA21抑制物能够显著性地抑制ECA-109细胞的增殖(P<0.05),并且明显提高ECA-109细胞的凋亡率(P<0.05),促进细胞凋亡。同时,转染miRNA21抑制剂的实验组ECA-109细胞中促凋亡基因caspase3、p53、在m RNA水平的表达均显著升高(P<0.05),而抗凋亡基因Bcl-2的表达则被显著抑制(P<0.05)。结论:miRNA21抑制剂能够抑制食管癌细胞ECA-109的增殖,增强促凋亡相关基因的表达,促进癌细胞的凋亡;miRNA21具有明显的原癌基因样功能,可作为食管癌细胞治疗的靶标。     

结肠癌microRNA表达谱检测及生物信息学分析

目的 探讨miRNA(microRNA,微小RNA)在结肠癌组织中的表达特征及生物学功能.方法 选取临床特征相似的3对结肠癌组织及其配对正常黏膜组织,应用Exiqon miRNA芯片检测miRNA在结肠癌及其配对组织中差异表达情况;3个差异表达的miRNA被选取进行qPCR验证;生物信息学分析差异表达的miRNA及其靶向基因在结肠癌进展中的作用机制.结果 芯片结果显示,在3对结肠癌组织中有201个miRNA出现上调表达,94个下调表达(差异倍数>2),差异有统计学意义(P<0.05).qPCR结果显示,与对照组织比较,选取的3个miRNA中hsa-miR-18b-3p、hsa-miR-31-5p在结肠癌组织中表达上调,hsa-miR-142-3p表达下调,与芯片结果一致,差异有统计学意义(P<0.05).GO及pathway分析显示差异表达的miRNA涉及结肠癌细胞的分化、迁移、定位、增生及RNA、蛋白合成等功能调控,与细胞粘附、结肠癌发生发展等信号途径的激活相关.结论 结肠癌组织中miRNA存在异常表达,可能涉及结肠癌的发生、发展.     

补肾方含药血清处理的大鼠成骨细胞miRNA差异表达

目的 筛选补肾方含药血清干预的大鼠成骨细胞中差异表达的miRNA,为补肾方治疗骨质疏松症提供可供选择的目标miRNA,以探讨其通过调控靶基因表达发挥治疗效应的机制。方法 经细胞性状鉴定的原代大鼠成骨细胞用含药血清干预,采用miRNA芯片检测补肾方含药血清干预3 d与干预1 d的成骨细胞miRNA表达水平,并挑选差异表达2倍以上的miRNA进行定量PCR验证。结果 培养的原代细胞具有典型的成骨细胞性状特征。与对照血清相比,补肾方含药血清干预3 d的成骨细胞共有24个2倍以上表达差异的miRNA,其中上调的16个,下调的8个。差异表达2倍以上的miRNA定量PCR结果与芯片数据一致。结论 补肾方通过成骨细胞中差异表达的miRNA调控靶基因改善骨质疏松症。     

针刀松解法、电针对膝骨关节炎兔中枢单胺类神经递质的影响

目的 对比观察针刀松解法、电针对膝骨关节炎兔中枢神经5-羟色胺类和儿茶酚胺类神经递质的影响.方法 采用高效液相色谱仪分别测定端脑、下丘脑、脑干和脊髓中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NA)、高香草酸(HVA)和3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量.结果 模型组端脑、下丘脑、脑干和脊髓等的5-HT含量与正常组相比均无显著性差异,但有降低的趋势;模型组下丘脑和脑干中5-HIAA含量与正常组相比无显著性差异,但端脑和腰膨大5-HIAA含量较正常组显著降低,针刀治疗后端脑或脊髓5-HIAA含量与模型组相比显著升高;电针治疗后端脑5-HIAA含量与模型组相比显著升高,而脊髓中5-HIAA含量与模型组相比显著降低.模型组端脑NA含量较正常组显著降低;针刀或电针治疗后NA含量与模型组相比较呈显著性升高;模型组下丘脑和脑干NA含量较正常组显著性增加,针刀或电针治疗后显著降低;模型组脊髓NA含量与正常组相比较无显著差别.模型组端脑HVA含量较正常组显著降低,针刀或电针治疗后显著性升高,针刀组与电针组相比较无显著性差别;模型组下丘脑、脑干和脊髓HVA含量与正常组比较无显著差别.模型组端脑和脊髓DOPAC含量与正常组相比无显著变化;模型组下丘脑和脑干DOPAC含量较正常组明显升高,针刀或电针治疗后DOPAC含量较模型组均显著降低.结论 针刀松解法或电针疗法对膝骨关节炎兔脑、脊髓中5-羟色胺类和儿茶酚胺类神经递质的含量有一定的调节作用,提示2种疗法在减轻关节软骨损伤的同时,可通过调节中枢神经5-羟色胺和儿茶酚胺类神经递质的合成和代谢以缓解关节疼痛的发生和发展.     

胃癌患者血浆,组织LPO,SOD含量的观察

本文选择了胃癌、胃溃疡及正常对照共５８例作为观测对象，测定其血液和胃粘膜组织脂质过氧化物（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量的变化．结果表明，血浆和组织ＬＰＯ值胃溃疡＞胃癌＞正常；血浆ＳＯＤ值胃溃疡＜胃癌＜正常；组织ＳＯＤ值则胃癌＞正常＞胃溃疡。同一病例ＬＰＯ值癌组织＜癌旁组织，溃疡区＞溃疡旁组织；ＳＯＤ癌组织＞癌旁组织，溃疡区则＜溃疡旁组织．结果提示，胃癌病人血浆及组织ＬＰＯ增高，但没有胃溃疡明显，而ＳＯＤ值血浆值低于正常组而高于胃溃疡组，组织值甚至高于正常组，反映了癌症病人体内自由基产生与清除失去平衡，尤其是癌组织ＳＯＤ增高可能是癌细胞产生大量免疫学性质改变了的ＳＯＤ．     

整合素α5和α6亚基在硬皮病中的表达

目的：观察整合素α5和α6在硬皮病皮损区和正常人表皮中的表达情况。方法：运用免疫荧光法检测正常人和硬皮病患者皮肤中整合素α5和α6的表达。结果：α5亚基在正常人的表皮各层都有表达,基底层表达略增加,并且在胞膜和胞浆均有表达。硬皮病中各层均有α5亚基表达,基底层尤为明显,但在颗粒层为胞浆胞膜表达,在棘层和基底层基本表达在胞膜。α6亚基在正常人表皮中在表皮各层,胞膜胞浆均有表达,但以颗粒层及真表皮交界处明显。硬皮病中以棘层和真表皮交界处为主,棘层主要表达于胞膜。结论：在硬皮病皮损表皮中,整合素α5和α6亚基表达的部位和位置发生改变,从而造成细胞功能的异常。     

过敏性休克死亡豚鼠脏器中IgE、IL-4的表达及其法医学意义

 【目的】寻找法医学鉴定过敏性休克死亡的病理形态学诊断指标。【方法】利用组织芯片技术采用免疫组化方法（SP法）检测35只过敏性休克豚鼠（实验组28只，对照组7只）死后0、6、12、24h4个时间点的心、肝、肺、肾、脾、胃、肠、气管及扁桃体组织中的ISE及IL-4的表达情况。【结果】ISE的表达：实验组肺及气管组织呈阳性表达，并以0、6h表达最强，各时间点的表达强度有统计学意义，P〈0．01；脾组织呈弱阳性表达。各时间点的表达强度无统计学意义，P〉0．05；实验组其它脏器及对照组所有脏器均无表达。IL-4的表达：实验组肺、气管及胃组织呈阳性表达，并以0、6h表达最强，各时间点的表达强度有统计学意义，P〈0．01；肠组织呈弱阳性表达，各时间点的表达强度无统计学意义，P〉0．05；实验组其它脏器及对照组所有脏器均无表达。【结论】免疫组化方法检测ISE、IL-4的表达，可望作为鉴定过敏性休克死亡的病理形态学诊断指标。     

健身气功·五禽戏改善轻度抑郁大学生前额叶和海马氢质子磁共振波谱

目的探讨健身气功·五禽戏干预轻度抑郁症的效果及其对前额叶和海马氢质子磁共振波谱的影响。方法大学生志愿者 58人,其中轻度抑郁症患者30人为抑郁组,健康者28人为对照组,上述两组内随机均分为干预组和非干预组,干预组进行健身 气功·五禽戏训练12周,非干预组不训练;各组干预前后,用BECK抑郁自评问卷（BDI）和汉密尔顿抑郁量表（HAMD）进行得分 评价,氢质子磁共振波谱（1H-MRS）检测前额叶、海马代谢指标NAA/Cr、Cho/Cr等,将抑郁量表得分与1H-MRS检测数据进行皮 尔逊相关分析。结果干预前,抑郁组BDI、HAMD得分均显著高于对照组（P<0.01）;干预后,抑郁组中干预组BDI、HAMD得分 均显著低于干预前（P<0.01）。1H-MRS检测显示,干预前,与对照组相比,抑郁组左侧前额叶、双侧海马NAA/Cr值和左侧前额 叶、左侧海马Cho/Cr值等均显著增高（P<0.05）,双侧前额叶NAA/Cho值和右侧海马Cho/NAA值等均显著降低（P<0.05）。干预 后,抑郁组中干预组双侧海马NAA/Cr值和右侧海马NAA/Cho值均显著低于干预前（P<0.05）,右侧前额叶NAA/Cho值、右侧海 马Cho/NAA值均显著高于干预前（P<0.05）。经皮尔逊相关分析,干预前,BDI、HAMD得分与额叶Cho/Cr值和海马NAA/Cr值 呈正相关（P<0.01）,与额叶NAA/Cho值、海马Cho/NAA值呈负相关（P<0.05）;干预后,BDI、HAMD得分与海马NAA/Cr值和左 侧海马Cho/Cr值呈正相关（P<0.05）。结论健身气功·五禽戏锻炼降低轻度抑郁症患者抑郁量表得分,对前额叶和海马代谢指 标NAA/Cr、Cho/Cr等有一定改善作用。     

高职护理教学中运用联合教学法的实践与研究

目的:探讨在高职护理专业护理教学中运用案例与情景联合教学法的实践效果。方法:随机抽取2007级与2008级护理系2个班共90名护生,分为实验组42名和对照组48名。实验组采用案例与情景联合式教学法,对照组采用传统教学法。测量两组护生期末考试成绩和实践能力。结果:实验组护生理论知识成绩和实践能力成绩均高于对照组(P0.001)。结论:运用案例与情景联合教学法能激发护生的主观能动性,提高护生实践、沟通、协调与思维能力及分析解决问题等综合能力,提高护生综合素质与教师的教学效果与水平。     

短暂性前脑缺血-再灌注后小鼠海马星形胶质细胞bcl-2和bax蛋白表达的动态变化及抗呆Ⅰ号的影响

应用免疫组织化学方法观察抗呆Ⅰ号对小鼠前脑缺血再灌注损伤海马星形胶质细胞表达bcl-2和bax动态变化的影响,探讨其与缺血性神经元的联系.结果发现:前脑缺血再灌注3～7 d bcl-2表达呈强阳性.再灌注7～10 d bax表达呈强阳性.用药组bcl-2和bax的表达较模型组均减弱.而正常对照组和假手术组无bcl-2和bax的表达.且星形胶质细胞表达bcl-2和bax的强弱与神经细胞的存亡有关.本实验提示:前脑缺血再灌注后海马反应性星形胶质细胞表达bcl-2和bax呈动态变化,抗呆Ⅰ号对缺血再灌注损伤星形胶质细胞和神经细胞有良好的保护作用.     

脑干病变引起眼球运动障碍、眼球震颤的临床分析

目的：探讨眼球运动障碍、眼球震颤对脑干病变定位的临床意义。方法：对３９例经ＣＴ、ＭＲＩ证实为脑干病变的患者行眼球运动障碍、眼球震颤分析。结果：眼球垂直注视麻痹、会聚麻痹对中脑病变有定位意义;核间性眼肌麻痹对中脑、脑桥病变有定位意义;眼球水平运动障碍对脑桥病变有定位意义;延髓病变无眼球运动障碍;眼球震颤可发生在脑干各种部位病变。结论：眼球运动障碍对脑干病变定位有临床意义;眼球震颤尤其是垂直性、旋转性     

Prevalence of asthma, rhinitis and eczema among children in 2 Canadian cities: the International Study of Asthma and Allergies in Childhood

BACKGROUND: Wide variations in the prevalence of asthma, rhinitis and eczema have been reported between regions within Canada and between different countries. The International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC) was developed to provide a standardized tool and methodology to ascertain the prevalence of asthma and allergies in different regions. Comparisons of prevalence rates across geographic regions and at different times may help to identify factors that contribute to the development of these conditions in individuals. METHODS: Two Canadian centres, Hamilton and Saskatoon, participated in the ISAAC. A standard questionnaire was distributed through schools and completed by 13- and 14-year-old children and by the parents of 6- and 7-year-old children. Prevalence rates and 95% confidence intervals were calculated for asthma, wheezing, rhinitis and eczema. RESULTS: The overall response rates were 75.1% among the children 6 and 7 years old and 68.6% among those 13 and 14 years old. Among the younger children, the lifetime prevalence of asthma was 17.2% in Hamilton and 11.2% in Saskatoon; the corresponding rates among the older children were 19.2% and 12.2% respectively. The prevalence of wheezing in the 12 months before the survey in the younger group was 20.1% in Hamilton and 14.1% in Saskatoon; in the older group it was 30.6% and 24.0% respectively. The prevalence of rhinitis in the 12 months before the survey was 28.6% in Hamilton and 22.6% in Saskatoon in the younger group and 45.8% and 33.8% respectively in the older group. The prevalence of eczema was slightly higher in Saskatoon in both age groups. INTERPRETATION: High prevalence rates of asthma, rhinitis and eczema exist among school children in Hamilton and Saskatoon, similar to rates in other Western countries. Further studies are required to determine the factors associated with the high rates in the 2 regions and possible reasons for the higher rates in Hamilton.     

六种哺乳类动物肝细胞内溶酶体形态的比较研究

本文用电镜、酸性磷酸酶ACPase组化和立体计量分析,对成年猴、狗、猫、兔、大鼠和小鼠肝细胞内溶酶体作了超微结构定性和定量的比较观测。 几种动物肝细胞的致密体超微结构相似,但数量和大小各有差别。消化泡以大鼠、小鼠、兔和猴的数量最多,狗和猫的较少。与此相反,大鼠、小鼠和兔的殁体较少见,猫和猴的稍多,狗的残体为数最多,且见有在其旁的未消化物质正进入残体内进行消化。这几种哺乳类动物肝细胞内消化泡与残体所出现的差别,据推测可能与所食饲料的性质和动物种属不同有关。 鬃毛有衣小泡多位于细胞膜的深处。在狗和猴见到侧邻的两个肝细胞的一侧胞膜出芽,陷入胞质内,其末端膨大,似脱离而形成鬃毛有衣小泡。 6种哺乳类动物肝细胞内溶酶体的形态计量分析所得结果;体积密度中,以狗为最高,小鼠最低;数目密度中,猴最高,兔最低。