家兔主动脉平滑肌细胞牛磺酸转运和缺氧－复氧损伤对其的影响

目的：观察血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）牛磺酸跨膜转运的特征及缺氧－复氧损伤后的改变。方法：用３Ｈ标记的牛磺酸在培养的家兔主动脉ＶＳＭＣ上进行实验。结果：ＶＳＭＣ的牛磺酸转运是钠浓度依赖的高亲和转运，Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶抑制剂哇巴因呈浓度依赖性地抑制其转运。ＶＳＭＣ经缺氧－复氧处理后Ｖｍａｘ下降３４％（Ｐ＜０．０１），但Ｋｍ值无明显改变。结论：ＶＳＭＣ具有高亲和牛磺酸转运系统，缺氧－复氧处理可能损伤这一转运系统。     

卡托普利和依那普利拉对培养心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用

为探讨血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利和依那普利拉对心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用，应用培养心肌细胞缺氧再复氧模型，分别测定细胞内乳酸脱氢酶及琥珀酸脱氢酶活性，细胞脂质过氧化物含量和细胞搏动率。结果显示，卡托普利和依那普利拉均能提高缺氧心肌细胞内乳酸脱氢酶活性（Ｐ＜０．０１），不同程度减少缺氧后再复氧心肌细胞脂质过氧化物的形成（Ｐ＜０．０５－０．０１），促进再复氧阶段心肌细胞搏动功能的恢复（Ｐ＜０．０５）．上述结果表明卡托普利和依那普利拉能明显改善缺氧心肌细胞的糖代谢，加速糖酵解，拮抗缺氧再复氧脂质过氧化损伤作用，维护细胞功能，对缺氧再复氧心肌细胞具有明显的保护作用。     

卡托普利和依那普利拉对培养心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护…

为探讨血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利和地普利拉对心肌细胞缺氧再复氧损伤的保护作用，心甩细胞缺氧再复氧模型，分别测定细胞内乳酸脱氢酶及琥珀脱氢酶活性，细胞脂质过化物含量和细胞搏动率。结果显示，卡托普利和依娜普利拉均能提高缺氧心肌细胞内乳酸脱氢酶活性（Ｐ〈０．０１），不同程度减少氧后再复氧心肌细胞脂质过化物的形成（Ｐ〈０．０５－０．０１），促进再复氧阶段心肌细胞搏劝功能的恢复（Ｐ〈０．０５）。上述结果     

亮氨酸脑啡肽对缺氧时肺动脉平滑平细胞增殖的影响

目的：研究缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的作用,并观察亮氨酸脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）和阿片受体阻断剂纳洛酮（Ｎａｌ）的影响．方法：离体培养兔ＰＡＳＭＣ,采用四唑盐比色试验（ＭＴＴ）,３Ｈ－ＴｄＲ参入技术和流式细胞仪分析细胞周期等方法,观察ＰＡＳＭＣ增殖、ＤＮＡ合成和细胞周期的变化．结果：ＰＡＳＭＣ缺氧培养１２ｈ,２４ｈ后,ＭＴＴ的Ａ值和３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别为（１７９±１９．１）％,（１８５±２０．３）％和（１５８±１３．６）％,（１６７±１７．４）％,比常氧对照组（１００％）显著增加（Ｐ＜０．０１）．缺氧培养２４ｈ后,在Ｇ２,Ｍ期的细胞比例显著升高,Ｇ０,Ｇ１期的细胞比例显著减少（Ｐ＜０．０１）．Ｌ－Ｅｎｋ（１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）可明显抑制缺氧促进ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成的作用（Ｐ＜０．０１）,该抑制作用可被Ｎａｌ阻断．结论：Ｌ－Ｅｎｋ可抑制缺氧时ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成作用,该抑制效应是通过阿片受体介导的．     

反义寡核苷酸对正常和常压缺氧大鼠肺血流动力学的作用

筛选出针对内皮素 １ （ＥＴ １） 前体基因反义硫代寡核苷酸片断（ＥＴＡＳＯＤＮ）, 已证明ＥＴＡＳＯＤＮ能显著抑制培养细胞ＥＴ １的生成（Ｐ＜ ０．０５）。通过实验观察侧脑室注射该片断对常氧和常压缺氧大鼠的作用, 发现缺氧性肺动脉高压大鼠下丘脑ＥＴ １含量显著高于常氧大鼠（Ｐ＜ ０．０５）; 侧脑室内注ＥＴＡＳＯＤＮ 能显著降低常氧和缺氧大鼠下丘脑ＥＴ １水平（Ｐ＜ ０．０５）、降低常氧大鼠肺动脉平均压（Ｐｐａ） （Ｐ＜ ０．０５） 和降低缺氧大鼠的Ｐｐａ和肺血管阻力（ＰＶＲ） （Ｐ＜ ０．０１）, 而且缺氧组大鼠下丘脑ＥＴ １ 及Ｐｐａ下降的幅度均显著大于常氧组大鼠, 尤以两组Ｐｐａ与ＰＶＲ降幅差最为显著 （Ｐ＜ ０．０１）。结果表明： ＥＴ １ 作为中枢神经介质, 参与肺血管张力的调节和缺氧性肺动脉高压的形成, ＥＴＡＳＯＤＮ颅内注射能舒张肺血管和降低肺动脉压, 有可能用于肺动脉高压的基因治疗     

缺氧预处理对家兔血管平滑肌细胞缺氧—复氧损伤的保护

观察缺氧预处理对家兔血管平滑肌细胞缺氧－复氧损伤的影响。     

PDGF在缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机理初探

目的：研究缺氧性肺动脉高压肺血管结构改建中肺血管平滑肌细胞增殖的机理。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和核酸分杂交技术观察了缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）增殖及血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链，－Ｂ链，α，β亚基受体基因表达的影响，结果：低氧６ｈ使ＰＡＳＭ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入减少（Ｐ〈０．０５），无氧６ｈＰＡＳＭ的＾３Ｈ－ＴｄＲ参入均较常氧对照组明显增多Ｐ〈０．００１，而缺氧１２ｈ则促进参入，至     

自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞缺氧预处理的延迟保护作用

目的：观察缺氧预处理（ＰＣ）对于自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）缺氧复氧（Ｈ／Ｒ）损伤的延迟保护作用，并探讨其可能机制。方法：对ＶＳＭＣ于缺氧ＰＣ２４ｈ后进行Ｈ（２ｈ）／Ｒ（１ｈ），结束实验时测定其Ｈ／Ｒ后细胞存活率、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放和ＡＴＰ含量，并测定其金属硫蛋白（ＭＴ）量。结果：缺氧ＰＣ明显减轻Ｈ／Ｒ造成的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ存活率下降、ＡＴＰ耗竭和ＬＤＨ释放，并使细胞内应激蛋白ＭＴ含量升高１．３倍，上述指标与正常血压对照组ＷＫＹ大鼠ＶＳＭＣ的结果相近。结论：培养的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ亦存在ＰＣ的延迟保护作用，其保护机制涉及ＭＴ合成增多。     

缺氧时培养的肺动脉平滑肌细胞的增殖与内皮素自分泌关系的探讨

目的：缺氧能否中通过影响血管平滑肌细胞血管活性肽的自分泌功能而参与缺氧性肺动脉高压的发生尚不明确,本实验在培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）上探讨内皮素－１（ＥＴ－１）自分泌在其中的作用。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入研究ＰＡＳＭ增殖,放免测定和斑点杂交技术研究ＥＴ－１分泌和表达。结果：无氧培养（０％Ｏ２）２４ｈ使新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）的＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入与常氧组相比增加４２．     

L－精氨酸抑制兔肺动脉巨噬细胞平滑肌细胞增殖

目的：观察Ｌ－精氨酸是否通过抑制巨噬细胞浸润和平滑肌细胞增殖而起抗动脉粥样硬化作用。方法：２０只成年雄性新西兰兔随机分为ＡＣ组（ｌ％胆固醇＋饮水含２．２５％Ｌ－精氨酸）；ＭＣ组（１％胆固醇＋饮水含０．９％蛋氨酸；Ｃ组（１％胆固醇）和ＮＣ组（普通饲料和自来水）；每组各５只。１０周后采血标本，处死兔取主肺动脉作形态学和免疫组织化学研究。统计学采取ｔ检验和方差分析。结果：Ｌ－精氨酸使肺动脉内膜增生明显减轻（１．９４至０．６７，Ｐ＜０．０５），巨噬细胞浸润及平滑肌细胞增殖显著减少（分别为７５％～１３％，和６８％～２１％，Ｐ均＜０．０１）；而蛋氨酸却无此作用。结论：Ｌ－精氨酸能抑制高胆固醇兔肺动脉粥样硬化，其机理主要与抑制巨噬细胞浸润和平滑肌细胞增殖有关。     

预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其机理探讨

目的观察预处理（ＰＣ）对乳鼠心肌细胞缺氧复氧（Ａ／Ｒ）损伤的影响，并探讨其机理。方法采用心肌细胞Ａ／Ｒ损伤模型，用短暂缺氧进行预处理。结果预处理能提高Ａ／Ｒ后心肌细胞存活率，减少细胞ＭＤＡ产生及ＬＤＨ和蛋白质的漏出，激活心肌细胞ＰＫＣ活性。ＰＫＣ抑制剂完全阻断了ＰＣ的细胞保护作用。结论离体心肌细胞存在ＰＣ保护现象，其保护机理与ＰＫＣ激活有关     

血管内皮剥脱后大鼠血管平滑肌线粒体摄钙功能的变化

目的：探讨血管损伤与血管平滑肌线粒体钙转运的关系。方法：建立大鼠腹主动脉球囊内皮剥脱模型，用同位素标记。结果：内皮损伤可致ＶＳＭＣ增生、内膜增厚。线粒体摄钙功能在内皮剥脱后３－ｄ和１０ｄ时明显增强；线粒体摄钙初速率和最大摄钙量均显著高于对照。结论：内皮剥脱后ＶＳＭＣ增生过程中线粒体摄钙功能发生了相应变化。     

依普黄酮体外代谢性药物相互作用研究

目的:研究依普黄酮与常用心血管类药物、激素类药物等在细胞色素P450酶介导的代谢过程中的相互作用.方法:以β-萘黄酮诱导的大鼠肝微粒体为酶源,将依普黄酮与普罗帕酮或雌二醇等共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,观察依普黄酮与这些药物在体外代谢中的相互影响.结果:①与未加入依普黄酮相比较,10 μg/ml普罗帕酮与50 μg/ml依普黄酮共孵育后,普罗帕酮的代谢受到抑制,差异均有显著性(P<0.01),而10 μg/ml雌二醇与10 μg/ml或100 μg/ml依普黄酮共孵育后,雌二醇的代谢几无影响(P＞0.05).②与未加入其它药物相比较,20 μg/ml的依普黄酮分别与0.5 μg/ml的普奈洛尔或0.5 μg/ml的普罗帕酮或5.0 μg/ml的雌二醇共孵育后,依普黄酮的代谢受到不同程度的抑制,差异均有显著性(P<0.05,P<0.05,P<0.02).结论:依普黄酮与普罗帕酮之间代谢互受影响,而与雌二醇之间的相互作用程度较低.     

高血压大鼠血管平滑肌细胞中细胞外信号调节激酶和c-jun及凋亡相关基因的表达

目的:探讨血管平滑肌细胞(VSMC)在高血压中的作用及其机制。方法:Wis-tar大鼠两肾一夹型高血压模型,采用免疫组织化学方法,观察肾细小动脉平滑肌细胞中ERK-2、c-jun和bax及bcl-6表达。结果:实验期间,高血压大鼠血压从112±18mmHg升高到实验结束时的198±33mmHg;高血压组肾小叶间动脉ERK-2染色阳性率(16.86%)明显高于对照组(P<0.01),入球动脉、小叶间动脉、叶间动脉和弓形动脉VSMC中ERK-2染色阳性率均明显高于对照组(P<0.01);高血压组入球动脉、小叶间动脉和弓形动脉VSMC中c-jun的阳性率明显高于对照组(P<0.01);高血压组肾弓形动脉及叶间动脉VSMC中bax染色阳性率均明显低于对照组(P<0.01);高血压组肾小叶间动脉bcl-6染色阳性率(12.96%)明显高于对照组(P<0.01),入球动脉、小叶间动脉VSMC中bcl-6阳性率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:两肾一夹型高血压时,少数肾小动脉血管平滑肌细胞ERK-2过表达,使得转录相关基因c-jun等活化,凋亡基因抑制,最终使VSMC增多导致血管重构。     

幼兔非酒精性脂肪肝炎模型的建立

目的：以高脂饲料喂养的幼兔模型模拟青春期前肥胖儿童非酒精性脂肪肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）的形成，评价脂联素等炎症相关因子在NASH形成中的作用。方法：38只新西兰大耳兔根据饮食及喂养时间的不同分为：对照组、模型A组和模型B组。实验结束后，取肝脏进行HE染色、组织学诊断，取血清测血生化、脂联素、IL-6、IL-10、TNF-α浓度。结果：HE染色显示模型组大耳兔全部符合NASH病理特征。与对照组比较，模型组血清ALT、AST、TG、TC显著升高（P〈0．01），脂联素、IL-10下降（P〈0．05），两个模型组之间没有差异。前炎症因子IL-6、TNFα在模型B组明显高于模型A组和对照组，但是在模型A组与对照组之间没有差别。多元回归分析发现，肝细胞脂肪变性和TC是血清脂联素的两个独立决定因素，两者系数（8）分别为-0．97和-1．3，P值分别为0．038、0．006；常数项系数为27．89，P=0．000，决定系数（R^2）为0．294。结论：本实验所建立的幼兔NASH模型能较好地反映疾病形成的关键；血清脂联素能在一定程度上反映幼兔肝脏脂肪变性的严重度。     

脓毒血症时大鼠心血管系统血红素加氧酶的变化

目的：探讨脓毒血症时心血管系统血红素加氧酶（ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ,ＨＯ）的变化及作用。方法：盲肠结扎穿孔法复制大鼠腹膜炎脓毒血症模型,术后９ ｈ 和１８ ｈ 测血流动力学指标及血浆乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）,取心、主动脉测ＨＯ 活性和丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ） 含量,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ 测ＨＯ１ｍＲＮＡ 表达。结果：早期组血流动力学指标及血浆ＬＤＨ 无明显变化,心脏与主动脉ＭＤＡ 含量分别增加６０．３ ％ 和９６ ．５ ％ （Ｐ＜ ０ ．０５） ,心脏ＨＯ 活性比对照组升高７２ ．１％ （Ｐ＜ ０．０１） ,主动脉ＨＯ 活性无明显变化。晚期组血压降低、心功能下降,血浆ＬＤＨ与组织ＭＤＡ含量升高,心脏ＨＯ 活性仍维持高水平,主动脉ＨＯ 活性比早期组增加２６１ ％ （Ｐ＜ ０．０１）。心脏ＨＯ１ ｍ ＲＮＡ表达与ＨＯ 活性变化趋势相同;早、晚期主动脉ＨＯ１ｍＲＮＡ表达分别增加４９ ．２％ （Ｐ＜ ０．０５） 和１４３％（ Ｐ＜０ ．０１） 。结论：脓毒血症时心脏与主动脉ＨＯ 活性及ＨＯ１ ｍＲＮＡ 表达增加,但变化趋势不同;ＨＯ可能与早期机体的抗损伤机制和晚期低血压的形成有     

大鼠胸主动脉球囊成形术后血管壁丝裂素活化蛋白激酶活性的变化

目的；丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）与大鼠胸主动脉内皮剥脱术后平滑肌细胞（SMC）增殖的关系。方法：将剥脱术后的Wistar大鼠随机分为两组（n＝6），分别于术后7天和14天时处死取材，其血管条分别做3H－TdR参入和MAPK活性测定，并与假手术组相比较。结果：剥脱术后7天和 14天与假手术组相比，3H－TdR参入分别是后者的 2.6倍和 2． 0倍（P＜0. 01），MAPK活性分别为 7.6倍和 2. 4倍（P＜0．01）。结论：大鼠胸主动脉球囊内皮剥脱术后血管SMC发生增殖，同时MAPK活性明显升高，说明MAPK与内皮损伤后的血管壁SMC增殖有关。     

慢性丙型肝炎患者（2＇，5＇）寡腺苷酸合成酶的活性测定

目的：了解慢性丙型肝炎患者（２＇，５＇）寡腺苷酸合成酶（２－５ＡＳ）活性在干扰素治疗过程中的动态变化及意义。方法：ＰＥＩ－ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ薄板层析法。结果：（１）慢性丙型肝炎患者２－５ＡＳ基础水平比正常人显著升高（Ｐ＜０．０１）；（２）ＩＦＮα治疗结束后ＨＣＶＲＮＡ持续阳性的病人２－５ＡＳ基础水平比ＨＣＶＲＮＡ转阴的病人要高（Ｐ＜０．０５）；（３）ＩＦＮα治疗效果较好，ＨＣＶＲＮＡ转阴的病人２－５ＡＳ水平在用药后２４ｈ比ＨＣＶＲＮＡ未转阴的病人上升得更高（Ｐ＜０．０１）；（４）用药后１个月２～５ＡＳ水平与ＩＦＮα治疗效果无显著相关性（Ｐ＞０．０５）。结论：２－５ＡＳ可以作为评价干扰素治疗效果的１个机体反应指标。     

川芎嗪对PDGF-BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对血小板源生长因子(PDGF BB)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及骨桥蛋白mRNA表达的影响。方法:大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外培养,PDGF BB刺激VSMC ,采用MTT法和流式细胞仪测定川芎嗪对VSMC增殖的影响,逆转录聚合酶联反应(RT PCR)测定VSMC骨桥蛋白mRNA的表达水平。结果:川芎嗪可显著地抑制VSMC增殖(P <0 .0 1) ,使细胞生长停滞于G0 /G1期;PDGF BB诱导骨桥蛋白mRNA呈高表达,川芎嗪下调了这种表达。结论:川芎嗪能抑制体外的VSMC增殖,提示川芎嗪可能作为防治血管成形术后再狭窄的一种药物。