光动力疗法对裸鼠实验性胰腺癌治疗机制的研究

目的 研究光动力疗法（photodynamic therapy,PDT)对裸鼠胰腺移植癌的治疗效果及血管损伤在其中的作用，为临床应用PDT治疗胰腺癌提供依据。方法 将人胰腺癌细胞株SW1990接种于裸鼠皮下，建立移植癌模型。以血卟啉衍生物作为光敏剂，研究PDT治疗胰腺癌的效果，并以第Ⅷ因子为标记，采用免疫组化LSAB法，观察肿瘤血管损伤的情况。结果 PDT对肿瘤有杀伤作用，使肿瘤生长速度明显减慢；PDT可引起血管内皮细胞的损伤和血管结构的破坏。结论 PDT对胰腺癌有治疗作用，血管损伤是其杀伤肿瘤的重要途径。     

光动力治疗人胆管癌细胞荷瘤裸鼠的实验研究

目的研究光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人胆管癌荷瘤裸鼠的治疗效果,探讨其抗肿瘤性、安全性及腹腔注射和瘤内注射光敏剂两种不同给药途径疗效的差异。方法人胆管癌细胞QBC939接种于Balb/c裸小鼠皮下,建立荷瘤动物模型。以血卟啉衍生物(HpD)作光敏剂,采用腹腔内和瘤内注射2种不同给药方式,后以波长630 nm的激光照射肿瘤组织,观察PDT后肿瘤体积变化和病理改变。结果接受光动力治疗的两组肿瘤生长速度明显减慢,瘤内局部注射给药组疗效与腹腔给药组差异无统计学意义(P>0.05);组织学检查见肿瘤组织有广泛坏死,各组裸鼠心、肝、肺、肾组织切片未见病理性结构改变。结论HpD,PDT对人胆管癌荷瘤裸鼠的肿瘤组织有杀伤作用,使肿瘤生长减慢;HpD-PDT杀伤胆管癌移植瘤的深度可达0.8cm;在本实验光照条件下的PDT治疗是安全的。     

纳米微粒光敏剂光动力治疗结肠癌的实验研究

目的探讨普通光敏剂profrinⅡ纳米化后光动力疗法（PDT）对结肠癌的生长抑制作用。方法超声乳化法构建profrinⅡ纳米微粒，建立人结肠癌LOVO细胞裸鼠种植瘤模型，把荷瘤裸鼠分为对照组：不注射光敏剂，不用激光照射；纳米微粒光敏剂组：注射profrinⅡ纳米微粒悬液，不用激光照射；普通光敏剂PDT组：注射profrinⅡ后3h，激光照射30min；纳米微粒光敏剂PDT组：profrinⅡ纳米微粒悬液注射后3h，激光照射30min。经小鼠尾静脉注入profrinⅡ纳米微粒（30mg／kg体重），光敏化3h后用半导体激光仪垂直照射肿瘤30min（能量密度9J／cm^2）。然后连续观察肿瘤体积的变化及荷瘤裸鼠生存时间，瘤体苏木精-伊红染色病理分析。结果纳米微粒光敏剂PDT组在治疗后早期产生明显的抑制肿瘤增殖作用，瘤体组织坏死，腺腔样结构解离破坏，微血管坏死，血栓形成。纳米微粒光敏剂PDT组与对照组和纳米微粒光敏剂组相比，延命率提高65．2％和58．3％（P〈0．05），抑瘤率增加87．9％和87．5％（P〈0．05）；与普通光敏剂PDT组相比，延命率提高18．8％（P〈0．05），抑瘤率增加56．0％（P〈0．05）。结论纳米微粒光敏剂PDT可明显抑制裸鼠结肠种植瘤生长，延长荷瘤裸鼠生存期。     

逆转录病毒介导单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因对胰腺癌细胞的杀伤作用

目的：观察单纯疱疹病毒－胸苷激酶（HSV－tk)／丙氧鸟苷（GCV）基因治疗系统在体内外对人胰腺癌细胞的杀伤效应。方法：构建含HSV－tk基因的重组逆转录病毒载体pDOR-tk-neo,经病毒包装细胞PA317产生重组逆转录病毒,后者将HSV－tk基因转入人胰腺癌细胞系PC－2细胞内,筛选出稳定表达HSV－tk的细胞克隆PC－2／tk。测定PC－2/tk细胞在体外对GCV的敏感性及其旁观杀伤效应PC－2／tk细胞在裸鼠皮下成瘤,观察GCV的治疗作用。结果：GCV对PC－2/tk细胞有明显的杀伤作用,且其作用呈现剂量和时间依赖性特点以及旁观杀伤效应,对母本细胞则无明显毒性。裸鼠腹腔注射GCV后对移植瘤有明显治疗作用。结论：表达HSV－tk的人胰腺癌细胞在体内外均可被GCV有效杀伤。     

新型光敏剂2-丁胺-2-去甲氧基竹红菌乙素光动力作用诱导Capan-1细胞凋亡的实验研究

目的 以新型光敏剂2－丁胺－2－去甲氧基竹红菌乙素（2－BA－2－DMHB）为研究对象，研究其光动力作用诱导人胰腺癌细胞（Capan-1)凋亡。方法 利用荧光分光光度计，MTT，细胞凋亡DNA梯带，流式细胞仪等技术研究2－BA－2－DMHB对人胰腺癌细胞的杀伤作用，诱导细胞凋亡的特征。结果 2－BA－2－DMHB在10－15min内被Capan-1细胞摄取，以后基本保持动态平衡。低浓度时主要定位于线粒体，高浓度时也定位于溶酶体。0.5μM,4J/cm^2红光照射下细胞抑制率达50％以上，8μM,4J/cm^2红光照射下细胞抑制率接近90％。在4J／cm^2红光照射下光增强因子在200以上。DNA琼脂糖电泳分析显示特征性细胞凋亡DNA梯带，流式细胞仪检测有明显凋亡发生，透射电镜分析显示特征性的凋亡小体和核着边。结论 2－BA－2－DMHB在低浓度时光动力作用具有较高细胞抑制作用，其光动力作用机制与细胞凋亡有关，是一种有重要应用前景的光敏剂。     

CDHS 801治疗膀胱癌的光动力学实验动物研究

目的 研究光敏剂CDHS 801体内光动力治疗膀胱癌机理.方法 创建膀胱癌裸鼠动物模型后,腹腔注射CDHS 801,12小时后激光照射肿瘤后处死动物,然后取瘤体进行H.E.染色、免疫组化及电镜观察.结果 激光照射后6h.肿瘤表面皮肤水肿.浅表血管扩张充血.H.E.染色发现肿瘤血管充血、血管形成血栓、大片区域肿瘤细胞变形坏死,TUNEL染色发现肿瘤细胞核内出现棕黄色颗粒,电镜提示细胞核内染色质浓集、边集于核膜下并出现新月体样变化,伴有线粒体肿胀、膜破裂、嵴断裂或消失等现象.结论 CHDS 801光动力学体内治疗膀胱癌的机理,既有PDT(photodynamic therapy)产生ROS对细胞直接杀伤作用,也有引起血管损伤导致肿瘤缺血缺氧间接杀灭肿瘤的作用,诱导肿瘤发生凋亡是其杀灭肿瘤的主要机理.     

生长抑素类似物基因对胰腺癌的治疗作用

目的 利用携带SSTR2基因的重组腺病毒载体Adeno-X-SSTR2转染裸鼠胰腺癌皮下模型，使用SSTR2特异激动剂NC-8-12，观察其在体内实验中是否能取得抑制胰腺癌细胞增殖的效果。方法 构建重组携带SSTR2基因的肿瘤增殖缺陷型腺病毒载体Adeno-X-SSTR2。建立裸鼠胰腺癌皮下模型，分为转染和未转染SSTR2基因的两组，皮下分别给予不同剂量NC-8-12，观察肿瘤体积和重量的变化。结果 在裸鼠皮下模型实验中，NC-8-12对未转染SSTR2基因的胰腺癌细胞无抑制作用（P〉0．05）；在转染了SSTR2基因的胰腺癌细胞中，NC-8—12在每日200μg／kg体重剂量下可以明显抑制肿瘤细胞增殖（P〈0．05）。结论（1）携带SSTR2基因的肿瘤增殖缺陷型腺病毒载体Adenc-X-SSTR2可以高效转染胰腺癌细胞株。（2）一定剂量的NC-8-12（每日200μg/kg体重）对裸鼠体内转染了SSTR2基因的胰腺癌细胞的生长有明显抑制作用。     

生长激素受体在胰腺癌-慢性胰腺炎导管细胞的表达及生长激素对移植瘤PCNA的影响

目的观察生长激素受体（GHR）在胰腺癌一慢性胰腺炎导管细胞的表达及生长激素（GH）对移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）的影响。方法免疫组化法检测GHR在胰腺癌细胞（Cap-l、Pane-l、Mia、Colo、SW-1990、Aspc、P3）、移植瘤及人胰腺癌切除标本的表达，并以人混合淋巴细胞、人正常胰腺及慢性胰腺炎导管细胞作对照；裸鼠成瘤后随机分为注射GH的实验组（GH组，按剂量及时间分为4mg2周、2mg2周、2mg3周3个亚组）及对照组（NS组），于最后一次注药后切除肿瘤，用免疫组化法观察GH对肿瘤细胞中PCNA表达的影响。结果GHR在各胰腺癌细胞株上有不同程度的表达；在人胰腺癌及慢性胰腺炎切除标本，GHR在导管细胞虽呈阳性表达，但与人正常胰腺的强表达形成对照，阳性率低于后者（P〈0.05）；胰腺癌细胞PCNA阳性率在组间无差别。结论GHR在胰腺癌、慢性胰腺炎导管细胞有一定程度的表达，但表达强度弱于正常胰腺，GH不改变肿瘤细胞中PCNA的表达。     

Y亚麻酸锂盐(Li-GLA)对实验性人胰腺癌生长的影响

必需脂肪酸，诸如亚麻酸（GLA）和二十碳五烯酸（EPA）对治疗癌肿有些效果，GLA的俚盐（Li－GLA）对人体胰腺癌的生长有抑制作用，可抑制不可切除的胰腺癌生长，但其在体内的机制不明，为此进行下列实验。取BALB／C裸鼠作实验，在左胁皮下种植人体胰腺癌MIAPaCa2细胞105个，或肿瘤小片块。由“容量一长度X宽度2／2”公式算出肿瘤容积。实验分组：（1）腹腔内注射给LIGLA总量0．5mg／g（7只鼠）或1mg／g（11只鼠），共10天；对照组分别给油酸锂盐0．5mg／g（5只鼠）或1mg／g（8只鼠）。（2）静脉内注射半乳糖Li－GLA治疗组给昆…     

氟尿嘧啶与生长抑素受体基因联合治疗鼠 胰腺癌移植瘤的研究

目的 ： 观察生长抑素二型受体(SSTR2)基因体内转染后裸鼠胰腺癌移植瘤对5-氟尿嘧啶（5-FU）的反应，并探讨其可能机制。方法 ：将人胰腺癌细胞株panc-1种植于裸鼠背部皮下形成胰腺癌移植瘤模型。成模后动物随机分成4组（每组6只）;I组为对照组;II组为腹腔注射5-FU治疗组;III组为瘤内注射pCMV-6C-SSTR2-脂质体转染SSTR2基因治疗组;IV组为基因治疗+5-FU治疗组。观察肿瘤生长速度，测量瘤体大小及重量。用免疫组织化学方法和免疫印迹技术(Westernblot)检测转染效率;用凋亡原位检测方法(Tunel)检测胰腺癌细胞的凋亡率。结果 ：体内转染后SSTR2可重新表达。5-FU和SSTR2基因联合治疗(IV)组肿瘤生长速度显著慢于单独基因治疗(III)组及单独5-FU治疗(II)组和空白对照(I)组（ P <0.01）;最终肿瘤大小，重量也显著小于其他3组（均 P <0.01），而癌细胞凋亡率显著高于其他3组（均 P <0.01）。结论 ：SSTR2重新表达后可增强胰腺癌细胞对化疗药物5-FU的敏感性，联合5-FU 和SSTR2基因治疗可望成为治疗胰腺癌新的途径。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。