骨形成蛋白（BMP—5）与IA型BMP受体在口腔鳞癌中的表达及意义

目的：认识和分析BMP及其受体BMPR-IA与口腔鳞癌发生、发展的可能关系。方法：用免疫组织化学方法分析BMP-5、BMP受体BMPR-IA在口号颊部粘膜正常上皮、慢性炎症和癌变中的表达，标本为18例正常上皮（normal buccal mucosa,NB)，24例慢性炎症（nonspecofic chronic inflammation.NCI)，58例鳞癌（squamous cell carcinoma,SCC)。结果：BMP-5、BMPR-IA在口腔粘膜的正常与慢性炎症上皮中有弱表达，NB与NCI明显差别；在鳞癌上皮中除2例BMP-5表达为阴性外，其余均有阳性或强阳性表达，明显高于NB、NCI两组；鳞癌中高分化、中分化、低分化三组间的表达无明显差别。结论：BMP-5、BMPR-IA可能参与对口腔鳞癌发生、发展的调控。     

骨形成蛋白7及骨形成蛋白受体IA在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨骨形成蛋白7（BMP-7）及骨形成蛋白受体IA（BMPR-IA）在胶质瘤中的表达及其与预后的相关性。方法 应用免疫组织化学方法检测60例脑胶质瘤标本（Ⅰ型8例、Ⅱ型24例、Ⅲ型16例、Ⅳ型12例）和5例正常脑组织标本BMP-7和BMPRIA表达情况,对表达丰度进行半定量差异分析。结果 BMP-7和BMPR-IA在脑胶质瘤中表达丰度均随肿瘤恶性程度增加而增加。肿瘤1年生存率与BMP-7和BMPR-IA表达旱负相关。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型组的1年生存率分别为100．0％、66．6％、43．7％和25．0％。结论 BMP-7和BMPRIA在脑胶质瘤中表达丰度随着恶性程度增加而增加,且与预后呈负相关,提示BMP-7和BMPR-IA与脑胶质瘤的形成、生物学行为相关。     

转化生长因子Ⅱ型受体和Smad4在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子Ⅱ型受体(TβRⅡ)和Smad4蛋白与外阴鳞癌的发生发展关系。方法采用免疫组织化学方法检测TβRⅡ和Smad4在25例外阴鳞癌及15例外阴正常皮肤中的表达情况,并收集外阴鳞癌患者的临床病理资料进行分析。结果 TβRⅡ和Smad4蛋白在外阴鳞癌中的表达明显低于外阴正常皮肤(P<0.05);在外阴鳞癌Ⅲ期中表达明显低于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),在有淋巴结转移中明显低于无淋巴结转移,在中低分化中表达明显低于高分化(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明:TβRⅡ和Smad4在外阴鳞癌中的表达呈正相关。结论 TβRⅡ和Smad4的低表达与外阴鳞癌的发生和发展有关。     

TGF-β受体Ⅰ型、Ⅱ型在实验性鼠牙髓炎中的免疫组化研究

转化生长因子-β（transforming growth factor,TGF-β）是一族具有多种生物学功能的细胞因子,对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用,有利于胚胎发育和细胞修复,参与牙胚的发生、发展、成熟以及牙体组织的修复过程。在哺乳动物,已发现7种Ⅰ型受体和5种Ⅱ型受体。转化生长因子受体（TGF-β）包括TGF-βⅠ、Ⅱ、Ⅲ型3种形式。TGF-βⅠ、Ⅱ参与了牙胚的发育及成牙本质细胞、成釉细胞的分化。TGF-βRⅠ、Ⅱ在鼠、牛以及人第三磨牙牙髓细胞、成牙本质细胞的表达均有报道[3]。本实验采用免疫组化方法检测大鼠可复性牙髓炎模型中不同时间TGF-βⅠ、Ⅱ的动态表达及定位情况;并探讨其在牙髓损伤修复过程中的生物学作用。     

血管紧张素Ⅱ1型受体在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的研究血管紧张素 Ⅱ1型受体(AT1受体)在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法收集 2012年 1—12月期间在南京市口腔医院 46例经术后常规病理确诊为口腔鳞癌的病人的石蜡组织切片,其中 20例切片中包含了正常的癌旁组织。采用免疫组织化学方法检测 46例口腔鳞癌组织和 20例相邻癌旁组织中 AT1受体的表达。结果 20例正常癌旁组织中 AT1受体阳性率为 15.0%,低于口腔鳞癌组织中阳性率(89.1%)(χ2＝109.696,P＜0.01)。 AT1受体在口腔鳞癌组织中低表达 14例,高表达 27例,高表达的 AT1受体与病人的性别、年龄无关,与原发肿瘤大小、颈部淋巴组织转移及临床分期密切相关。结论 AT1受体在口腔鳞癌组织中高表达,有可能作为口腔鳞癌的诊断和预后的指标。     

骨形成蛋白2基因转染对犬牙髓细胞生物学特性的影响

目的构建骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2,BMP2）绿色荧融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞（DDPCs）形成BMP2-DDPCs细胞,观察BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的DDPCs,检测BMP2-DDPCs碱性磷酸酶（ALP）活性,骨钙素（OC）产量和Ⅰ型胶原合成量等指标的测定,研究BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2、4.7kb可见两条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功。BMP2-DDPC中ALP活性,OC产量和Ⅰ型胶原合成量增加,与对照组DDPCs、N1-DDPCs相比差异有统计学意义（P〈0.05）,通过增强ALP、OC和Ⅰ型胶原等成骨标志物的表达,促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。结论 pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。     

白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖的作用与促进骨形态蛋白9及其受体表达的关系研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用与骨形态蛋白9(bone morphorgenetic protein 9,BMP9)之间的可能关系。方法采用结晶紫染色与流式细胞术检测Res对Lo Vo细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测Res对Lo Vo细胞凋亡的诱导作用。利用RTPCR和Western blot检测Res在Lo Vo细胞中对BMP9表达的影响,以及对BMP9的受体ALK2和ALK3表达的影响。采用ALK2和ALK3的抑制剂,通过结晶紫染色分析BMP9介导Res抑制Lo Vo细胞增殖的可能机制。结果与对照组相比,Res明显呈浓度依赖性抑制Lo Vo细胞增殖,并诱导Lo Vo细胞发生S期阻滞;Res呈浓度依赖性增加Lo Vo细胞凋亡比例;Res促进BMP9的mRNA表达并明显增加其蛋白水平;外源性过表达BMP9能增强Res对Lo Vo细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用;Res能诱导BMP9的受体ALK2和ALK3的mRNA表达,抑制ALK2和ALK3能明显促进Lo Vo细胞增殖,并减弱Res对Lo Vo细胞增殖的抑制作用。结论Res对Lo Vo细胞的增殖具有明显抑制作用,这种作用可能与Res促进BMP9及其受体表达有关。     

骨形成蛋白4对单侧输尿管梗阻小鼠肾组织白细胞介素-1β表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨骨形成蛋白4(BMP4)对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾组织白细胞介素-1β(IL-1β)表达及细胞凋亡的影响。方法:将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水鄄假手术组、生理盐水鄄UUO组、BMP4抗体鄄假手术组、BMP4抗体鄄UUO组各8只,各组均于手术日起每天分别给予小鼠抗人BMP4抗体200 μL/g 或等量生理盐水腹腔注射,术后7 d处死小鼠取材。采用免疫荧光法观察正常小鼠肾脏组织BMP4的表达与分布;实时荧光定量PCR检测小鼠肾脏组织IL-1βmRNA 的表达;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:正常小鼠肾组织表达BMP4,主要分布于肾小管。BMP4抗体鄄假手术组和生理盐水鄄假手术组的IL-1βmRNA 表达、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05);BMP4抗体鄄UUO组IL-1βmRNA 表达、细胞凋亡率低于生理盐水鄄UUO组(P均<0.05)。结论:BMP4可能参与了梗阻性肾病肾间质炎症及细胞凋亡过程,有可能作为肾脏疾病的治疗靶点。     

肝癌中骨形成蛋白2对PTEN蛋白水平影响的研究

目的用骨形成蛋白2(BMP2)干预肝癌细胞系HepG2细胞,从而观察肝癌细胞中PTEN蛋白水平的变化,观察BMP2对PTEN蛋白表达的影响,探讨BMP2与PTEN蛋白水平之间的关系,探索肝癌治疗的新途径。方法将受试对象分为3个组:对照组、BMP2100ng/ml组、BMP2300ng/ml组,作用时间为3个水平:6、12、24h。用免疫组织化学方法测定细胞中PTEN蛋白水平。结果免疫组织化学结果显示在不同浓度BMP2组中HepG2细胞中PTEN蛋白表达差异有统计学意义。不同时间组中PTEN蛋白表达差异有统计学意义。PTEN蛋白阳性表达率在300ng/ml组与100ng/ml组、对照组之间差异有统计学意义(P<0.05),在6h组与12h组、24h组之间差异有统计学意义(P<0.05)。在300ng/ml、24h组中PTEN蛋白阳性表达最高。浓度与时间之间无交互作用。结论在肝癌中BMP2可以增加PTEN蛋白水平,且呈浓度时间依赖。     

骨形成蛋白4对大鼠牙乳头细胞生物学行为的影响

目的观察骨形成蛋白4(BMP4)对体外培养的大鼠牙乳头细胞增殖及分化的影响,为探讨BMP4在牙胚发生发育中的调控作用奠定基础。方法体外培养胚胎13d的大鼠牙乳头细胞,利用MTT法和测定细胞内碱性磷酸酶含量检测BMP4对大鼠牙乳头细胞增殖及分化的影响。结果BMP4能抑制牙乳头细胞的增殖,并能促进细胞分泌碱性磷酸酶(P<0.01)。结论BMP4具有抑制大鼠牙乳头细胞增殖,并促进牙乳头细胞成熟分化的调控作用。     

BMP2、VEGF165双基因共表达质粒在小鼠骨髓基质干细胞的表达

目的观察转染BMP2和VEGF165双基因共表达质粒在小鼠骨髓基质干细胞的表达情况。方法脂质体介导下将双基因真核表达质粒pIRES-BMP2-VEGF165导入小鼠骨髓基质干细胞,用RT-PCR和免疫组织化学方法观察BMP2和VEGF165双基因在小鼠骨髓基质干细胞内的表达。结果转染BMP2、VEGF165的小鼠骨髓基质干细胞有明显的BMP2和VEGF165 mRNA及其蛋白表达。结论转染BMP2和VEGF165双基因的小鼠骨,髓基质干细胞能同时表达以上两种基因。     

Survivin蛋白在舌鳞癌中的表达及意义

目的 研究Survivin蛋白在舌鳞癌中的表达及其与各临床病理因素的关系.方法 应用免疫细胞化学法检测舌癌Tca-8113细胞株中Survivin蛋白的表达;应用免疫组织化学法检测Survivin蛋白在60例舌鳞癌组织中的表达情况.结果 Survivin在舌癌Tca-8113细胞株中阳性表达,在舌鳞癌中阳性表达率为65.0%(39/60),其阳性表达在淋巴结转移特点、病理分化等方面差异有显著性(P＜0.05).结论 Survivin基因与舌鳞癌的自然发展过程有关,可能成为舌癌新的诊断标志及基因治疗的靶点.     

寻常型银屑病表皮细胞中bcl-2、Fas、P53蛋白的表达

目的探讨bcl-2、Fas、p53蛋白在寻常型银屑病(psoriasis,PS)患者皮损中的表达.方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化法(S-P法),检测30例PS患者皮损及10例正常皮肤组织中bcl-2、Fas、p53蛋白的表达.结果(1)bcl-2蛋白在30例PS表皮角质形成细胞(keratinocytes,KC)中均呈阴性表达;有26例部分黑素细胞(melanocytes,MC)和浸润的淋巴细胞呈阳性表达,表达强度为Ⅰ级(P＞0.05);10例正常皮肤组织中基底细胞呈Ⅰ级阳性表达.(2)Fas蛋白在30例PS中有26例呈阳性表达,其中3例呈Ⅰ级表达,8例呈Ⅱ级表达,15例呈Ⅲ级表达(P＜0.01);而10例正常皮肤组织均为阴性表达.(3)p53蛋白在30例PS中有12例在棘层、颗粒层少数KC中呈阳性表达,均为Ⅰ级表达(P＞0.05);10例正常皮肤表皮棘层、颗粒层KC未见阳性表达,仅在基底细胞有2例呈Ⅰ级阳性表达.结论推测Fas蛋白与寻常型银屑病发病机理可能有关,而p53、bcl-2蛋白与寻常型银屑病的发病机理无显著的相关性.     

左乙拉西坦对致痫大鼠海马组织中BMP4表达的影响

目的：建立氯化锂－匹罗卡品幼年大鼠癫痫模型,观察左乙拉西坦对癫痫海马组织中骨形成蛋白（BMP4）表达的影响,以探讨左乙拉西坦的抗癫痫作用机制。方法：将116只21d龄Wistar雄性大鼠随机分为4组,其中空白对照组（NS组）24只、左乙拉西坦对照组（LEV对照组）24只、氯化锂一匹罗卡品模型组（PILO组）34只、氧化锂一匹罗卡品模型＋左乙拉西坦治疗组（LEV治疗组）34只。PILO组和LEV治疗组大鼠首先给予腹腔注射氯化锂（125mg／kg）进行诱导,16h后腹腔注射硫酸阿托品（1mg／kg）,30min后再以匹罗卡品（60mg／kg）腹腔注射,如果没有癫痫发作,可在半小时后,再次腹腔注射匹罗卡品15rag／kg,直至充分点燃建立癫痫模型。其中,LEV治疗组,每日给予左乙拉西坦200mg／kg,连续3周进行灌胃治疗,并分别于1周,2周,3周,处死各组大鼠,并通RT--PCR的方法分别检测及观察海马组织中BMP4表达的变化。结果：PILO组与NS对照组相比,BMP4的表达增加,第1周达高峰（P〈0．01）,第2周、第3周BMP4表达逐渐下降,但较NS对照组仍高表达（P〈0．05）,LEV治疗组与PILO对照组相比,BMP4表达逐渐降低（P〈0．05）,LEV对照组与NS对照组无统计学意义（P〉0．05）。结论：癫痫发作后BMP4表达增加,提示BMP4与癫痫形成密切相关,左乙拉西坦可能通过抑制海马组织中BMP4表达而发挥抗癫痫发作。     

口腔鳞癌及癌前病变中P53蛋白的免疫组化研究

目的：用免疫组化方法检测P53蛋白在口腔鳞癌及癌前病变中的表达，并分析其与临床、病理指标及烟酒嗜好之间的关系。方法：使用D0－7单克隆抗体对口腔鳞癌（29例）、癌前病变（7例）石蜡标本进行免疫组化染色，并结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：9／29口腔鳞癌、27癌前病变表达P53蛋白。结论：口腔鳞癌细胞表达P53蛋白与组织学分级，临床分期及肿瘤发生部位无关，与患烟酒嗜好有关。     

天然型网孔羟基磷灰石复合BMP基因质粒直接盖髓的实验研究

目的观察以质粒为BMP基因转移载体以羟基磷灰石为支架的缓释系统(HAP-BMPcDNA)促进修复性牙本质形成的情况。方法将编码骨形成蛋白的cDNA克隆至真核表达质粒,然后将其与网孔羟基磷灰石复合导植到狗牙露髓处,同时用BMP组和氢氧化钙组做实验对照,进行组织学观察。结果HAP-BMPcDNA组可有效促进修复性牙本质的形成,效果明显优于BMP组和氢氧化钙组。结论质粒为BMP基因转移载体羟基磷灰石为支架的缓释系统(HAP-BMPcDNA)作用于促进修复性牙本质(reparative dentinogenesis.RD)形成的方法,不仅可有效增强牙齿露髓时RD的形成、克服在露髓处单纯放置BMP不能为成牙本质细胞样细胞提供足够刺激的不足;而且还可避免因用重组病毒作为载体可能诱发牙髓组织免疫损伤的发生。     

舌鳞癌中bcl-2的表达及意义

目的研究bcl-2蛋白在舌鳞癌中的表达及其与临床病理因素的关系。方法应用免疫细胞化学法检测舌癌Tca-8113细胞株bcl-2蛋白的表达;应用免疫组织化学法检测bcl-2蛋白在60例舌鳞癌组织中的表达情况。结果舌癌细胞株中bcl-2阳性表达,bcl-2在舌鳞癌中阳性表达率为53.3%(32/60)其阳性表达在有无淋巴结转移、病理分化等方面差异有显著性(P<0.05)。结论bcl-2基因与舌鳞癌的自然发展过程有关,可能会成为舌癌新的诊断标志物基因治疗靶点。     

BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs后细胞矿化的实验研究

目的 探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化后细胞矿化的能力。方法 密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs，流式细胞仪检测细胞表面标记。将BMSCs分为空白对照组(未转染)、Lv-EGFP组[转染仅携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒]和Lv-BMP2/EGFP组(转染携带BMP2和EGFP基因的慢病毒)。免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot检测BMP2蛋白和基因表达情况；SP法检测Ⅰ型胶原蛋白表达；茜素红染色法检测矿化结节形成；于转染第7、14、21天检测细胞碱性磷酸酶(ALP)水平；通过扫描电镜和能谱分析进一步观测矿化结节表面微观形貌及其主要元素构成。结果 流式细胞仪检测显示第5代BMSCs的细胞表面CD44、CD29表达呈阳性，CD45表达呈阴性；免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot显示Lv-BMP2/EGFP组较Lv-EGFP组及空白对照组能高效表达BMP2目的蛋白和基因，转染第7、14、21天ALP水平较其余2组升高，Ⅰ型胶原染色及茜素红染色均呈阳性，扫描电镜下见矿化结节散...     

Fas在口腔鳞癌中表达意义的研究

Fas（又称Apo－1,CD95）是当前广泛研究的一种细胞表面受体。当与其配体FasL结合时,可诱导Fas”细胞发生凋亡。在维持机体的自身稳定中发挥着重要的作用。据Leithanser报道恶性肿瘤细胞通过Fas抗原的下调表达,逃避机体细胞毒T淋巴细胞（CTL）的杀伤,最终导致肿瘤的形成。本研究通过40例口腔鳞癌及7例淋巴结转移癌标本Fas抗原的检测,初步探讨Fas在口腔鳞癌发生中的作用及其与口腔鳞癌预后间的关系。临床资料一、方法我院1990～1998年口腔鳞形细胞癌手术标本存档蜡块40例,复习HE切片,挑选癌与癌旁交界处蜡块。其中高分化鳞癌19…     

CXCL13及其受体CXCR5在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的观察趋化因子CXCL13及受体CXCR5在喉鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌和癌旁正常黏膜石蜡包埋组织中CXCL13及CXCR5蛋白的表达,并结合临床病理参数分析二者的临床意义。结果 (1)喉鳞癌组织中CXCL13及CXCR5阳性表达与癌旁正常黏膜组织相比差异有统计学意义(P<0.01),CXCL13及CXCR5在喉鳞癌中的表达强度明显高于癌旁组织;(2)研究CXCL13和CXCR5表达与喉鳞癌组织各临床病理参数的相关性发现:CXCL13及CXCR5蛋白表达强度与性别、年龄无明显相关性,而与TNM分期、淋巴结转移情况及临床分期呈显著相关性(P<0.05);CXCL13及CXCR5的表达强度在声门型喉癌与声门上型喉癌中差异具有统计学意义(P<0.05);CXCL13的表达可能与分化程度相关(P=0.05);(3)在喉鳞癌组织中,CXCL13与CXCR5的表达具有显著相关性。结论 CXCL13及CXCR5在喉鳞癌组织中的阳性表达显著高于癌旁组织,说明CXCL13及其受体蛋白CXCR5表达水平可以作为评估喉癌发病及可能发生侵袭转移的指标,并提示CXCL13及CXCR5可能为喉癌患者的不良预后因子。