胶体金免疫层法在鼠疫监测中应用效果评价

目的 了解胶体金免疫层析法在鼠疫监测中的作用及其优劣.同时观察56℃30 min灭活与升汞盐水作用1 min对鼠疫菌F1抗体检测的影响.方法 对2006年从广西隆林县、西林县鼠疫监测中收集的鼠脏器、鼠血清以及既往鼠疫抗体阳性患者血清,利用胶体金免疫层析技术进行鼠疫菌F1抗原(脏器)与F1抗体(血清)检测.结果 鼠肝脏120份、鼠脾脏99份,胶体金法检测鼠疫菌Fl抗原均为阴性;鼠血清235份胶体金法检测鼠疫菌F1抗体为阴性、既往鼠疫阳性病人27例,胶体金检测鼠疫菌Fl抗体灭活组阳性2例,阳性率为7.41%(2/27),升汞组均为阴性.结论 升汞对鼠疫菌F1抗体的检测有抑制作用;胶体金免疫层析法具有特异性强、敏感性高、操作简便、快速等优点,在鼠疫监测中具有重要意义.     

建立快速检测鼠疫耶尔森菌的胶体金免疫层析法

〔目的〕　建立检测鼠疫耶尔森菌 (鼠疫杆菌 )的胶体金标记免疫层析方法。〔方法〕　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,并标记鼠疫杆菌的抗体 ,制成免疫层析检测试纸条 ,进行特异性和敏感性评价 ,并对面粉、土壤、奶粉、淀粉等不同材料进行模拟添加鼠疫菌检测。〔结果〕　用多种不同的常见细菌或近缘细菌进行测试 ,未出现非特异性反应 ,检测鼠疫杆菌的灵敏度为 1× 10 5cfu/ml,对水、土壤、奶粉、面粉、淀粉、酵母粉等不同材料中鼠疫杆菌进行检测也取得同样结果 ,10～ 15min即可得到结果。〔结论〕　建立了 1种可以用于现场快速检测鼠疫杆菌的胶体金免疫层析方法 ,为进一步大规模应用奠定了基础。     

免疫胶体金层析法快速检测食品中吗啡

食品中罂粟的测定采用液相色谱法,因仪器价格昂贵,不易推广,基层常采用薄层层析法,但该法操作繁杂,而且由于被测样品中往往含有多种香料,对实验造成严重干扰,可能得到不准确结果.本实验采用免疫胶体金层析法进行食品中吗啡分析,该法特异性强、灵敏度高,取得了良好效果.现报告如下.     

应用胶体金免疫层析法检测水产品中霍乱弧菌的研究

〔目的〕应用胶体金免疫层析法,研究水产品中霍乱弧菌的快速检测方法。〔方法〕通过模拟水产品棉拭子标本比对试验及现场应用比对试验,比较不同检验方法的差异。〔结果〕70份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×10CFU/ml的模拟水产品棉拭子标本分别按检验方法1、检验方法2检验,同时检出阳性51份,检验方法2的检出率(87%)显著高于检验方法1的检出率(74%);30份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×101CFU/ml的“模拟水产品棉拭子标本”按检验方法2进行检验的检测结果均为阳性。对2000份水产品进行检测的现场应用对照实验结果显示:检验方法3的检出率(0.4%)与检验方法1的检出率(0.3%)差异无显著性;胶体金试纸条实验的假阳性率为8%。〔结论〕在胶体金免疫层析法实验中,增菌液增菌前霍乱弧菌含量为1CFU/ml,通过增菌后可被检出;增菌液霍乱弧菌含量为10CFU/ml,增菌12h后均可被检出;水产品棉拭子标本增菌12h检测阴性者可报告阴性,阳性者则参照《霍乱防治手册》[1]进一步分离鉴定。鱼贝类霍乱弧菌污染菌数较少(103CFU/100g以下)[2],无法满足使用胶体金免疫层析法所要求的含菌量(106CFU/ml)[3],可以通过改良增菌培养液成分,以提高待检菌繁殖能力,在短时间内提高增菌液待检菌浓度,使胶体金免疫层析法的灵敏性高于或接近常规的分离鉴定法。     

胶体金免疫层析法在卫生检疫医学实验中的应用

[目的]研究适用于口岸快速通关放行要求的传染病病原体和标志物的快速检测方法。[方法]采用胶体金免疫层析测定法(GICA)对HIV抗体、HBsAg、丙型肝炎抗体、梅毒螺旋体抗体进行检测。[结果]该方法可在15min内检测出上述病原体和标志物，大大提高了检测速度，可满足部分出入境人员快速通关放行的要求，但在使用时还必须注意9个方面的问题。[结论]CICA快速检测方法仅供出入境传染病监测体检初筛检测使用，最终的确诊应由检疫医师综合各检测指标、临床症状及流行病学调查后作出。     

胶体金免疫层析法在霍乱弧菌诊断中的应用初探

胶体金免疫层析法是目前国内外所建立的一种快速诊断方法,在许多项目的应用中取得了较为理想的效果.霍乱弧菌传统诊断方法是细菌培养法.本文用胶体金免疫层析法与细菌培养法相结合的方式对疫区180份标本进行同步试验,比较分析并摸索出一些经验.现报道如下.     

胶体金免疫层析法应用于环境水体中霍乱检测的效果评价

目的验证胶体金免疫层析法应用于环境水样本中霍乱检测的特异性、灵敏性和实用性,寻求简便、可靠的环境水中霍乱检测方法。方法环境水样置36.5℃经6 h增菌培养后,用胶体金免疫层析法检测,同时用传统分离培养法,培养后的菌落用血清玻片凝集方法作为鉴别霍乱弧菌的金标准,且用统计学方法对这两种方法检测的结果进行比较。结果 747份水样中胶体金试验阳性19份,分离培养法培养出16株霍乱弧菌,经χ2检验,差异无统计学意义(χ2=0.61,P>0.05),表明胶体金免疫层析法与传统分离培养法检测外环境水中霍乱的结果之间差异无统计学意义。胶体金免疫层析法检测外环境水中霍乱的灵敏度为100.00%,特异性为99.59%,假阳性率为0.41%,假阴性率为0.00%,与传统分离培养法的结果一致率为99.60%。结论胶体金免疫层析法检测外环境水中霍乱的敏感度好(100.00%),特异性高(99.59%),与传统分离培养法的结果一致性较高,对外环境水中霍乱检测具有可靠性、简便性、实用性,适宜在基层作为辅助检测方法推广应用。     

胶体金免疫层析法检测技术在喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地的现场应用

青海省处于三江源地区,有鼠疫疫源地面积20余万km^2,该地区动物间鼠疫流行较猛烈,并时常波及到人间,笔者应用胶体金免疫层析法检测技术（GICA）对一起人间鼠疫疫情成功的进行了早期检测。2006年9月在青海省湟源县发生一起人间鼠疫疫情。该患者于2006年9月8日在青海省玉树州曲麻莱县喜马拉雅旱獭鼠疫疫区剥食旱獭的过程中左手中指被划伤而感染，于2006年9月16日返回湟源县，就诊时被疑似鼠疫而隔离；由鼠疫专业人员现场采集患者标本，用GICA进行了初步的诊断。检测鼠疫F1抗原（抗体）的胶体金免疫层析条（诊断试剂盒）由北京庄笛禾生物医学科技有限公司生产，中国疾病预防控制中心（CDC）传染病预防控制所提供；批号20060424。     

鼠疫菌免疫胶体金快速检测方法的建立

目的利用免疫胶体金技术建立一种简便、快速并适用于基层人员使用的鼠疫菌抗原检测方法。方法将抗鼠疫菌F1抗原的抗体致敏硝酸纤维素膜,用于捕获鼠疫抗原,然后用免疫胶体金颗粒进行标记。结果应用鼠疫菌免疫胶体金快速检测法最低可检出不同鼠疫菌(EV和Evp株)1.56×105CFU/ml,检测鼠疫菌F1抗原最低可检出1ng/ml,与鼠疫反向间接血凝法的检测结果一致;并且不与假结核小肠结肠炎等耶尔森菌以及其他相关细菌发生交叉反应。结论鼠疫菌免疫胶体金快速检测法具有较好的特异性、敏感性和简便快速的特点。     

胶体金免疫层析法检测弓形虫循环抗原的研究

目的：建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（GICA）用于检测血清中弓形虫循环抗原（CAg）。方法：用胶体金颗粒标记弓形虫单克隆抗体，制成免疫层析测试条。血清中的弓形虫循环抗原与测试条上的金标记单克隆抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果：用GICA与ELISA比较检测105份小鼠血清中循环抗原，两法符合率为95％（P〉0．05）。结论：GICA检测血清中的弓形虫循环抗原特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

内蒙古自治区不同生态系鼠疫自然疫源地动物鼠疫流行现状及流行风险简析

内蒙古面临着多种类型疫源地鼠疫流行和复燃的风险。蒙古旱獭疫源地虽然暂未在国内发现动物间鼠疫流行,但过去检出过阳性血清,同时蒙古旱獭种群数量持续增加且分布范围不断扩大,毗邻的蒙古国和俄罗斯联邦的蒙古旱獭疫源地动物间鼠疫持续流行;达乌尔黄鼠疫源地动物间鼠疫时隐时现;长爪沙鼠疫源地动物间鼠疫流行猛烈,并频频波及人间。由于蒙古旱獭和达乌尔黄鼠鼠疫耶尔森菌菌株毒力明显高于长爪沙鼠鼠疫耶尔森菌菌株,且在历史上曾给当地带来深重灾难,因此内蒙古自治区鼠疫防控重点应在常规鼠疫监测的基础上,进一步加强蒙古旱獭和达乌尔黄鼠疫源地流行动态的监测,警惕该两个疫源地复燃并波及人间。     

内蒙古自治区不同生态系鼠疫自然疫源地动物鼠疫流行现状及流行风险简析

内蒙古面临着多种类型疫源地鼠疫流行和复燃的风险。蒙古旱獭疫源地虽然暂未在国内发现动物间鼠疫流行,但过去检出过阳性血清,同时蒙古旱獭种群数量持续增加且分布范围不断扩大,毗邻的蒙古国和俄罗斯联邦的蒙古旱獭疫源地动物间鼠疫持续流行;达乌尔黄鼠疫源地动物间鼠疫时隐时现;长爪沙鼠疫源地动物间鼠疫流行猛烈,并频频波及人间。由于蒙古旱獭和达乌尔黄鼠鼠疫耶尔森菌菌株毒力明显高于长爪沙鼠鼠疫耶尔森菌菌株,且在历史上曾给当地带来深重灾难,因此内蒙古自治区鼠疫防控重点应在常规鼠疫监测的基础上,进一步加强蒙古旱獭和达乌尔黄鼠疫源地流行动态的监测,警惕该两个疫源地复燃并波及人间。     

不同鼠疫检测技术在河北省鼠疫监测中的应用研究

目的通过用鼠疫血凝试验、胶体金标记免疫层析(金标)和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清,用金标、ELISA、PCR与鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器,评价其在鼠疫监测中的应用效果。方法用鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法检测啮齿动物血清;用金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离检测啮齿动物脏器。结果鼠疫血凝试验、金标和ELISA 3种方法对啮齿动物血清的阳性检出率分别为0.32%、0.32%和1.26%。金标、ELISA、PCR、鼠疫反向血凝试验和细菌分离对啮齿动物脏器的阳性检出率分别为3.15%、0.70%、4.90%、0.70%和0.70%。结论金标、ELISA、PCR值得推广应用,非常适合基层和快速诊断应用。     

青海省2004年人间鼠疫分离株基因分型及流行病学意义

目的探讨鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）基因分型在鼠疫暴发中的流行病学意义.方法根据已经证实的23个差异区段设计引物,对2004年青海省人间鼠疫流行期间分离到的13株鼠疫菌进行PCR扩增.结果13株鼠疫菌可分为4个基因组型,即Genomovar 8、10、15和16.其中囊谦的8株菌全部为Genomovar 10;乌兰的2株菌分别为Genomovar 8和15;祁连、曲麻莱、称多的3株鼠疫菌的基因组型均为Genomovar 16.结论鼠疫菌基因分型是鼠疫疫情暴发流行病学调查的有力工具.     

鼠疫亚单位疫苗的免疫学效果评价

9.10,P<0.01),而豚鼠和兔产生的F1 IgG抗体滴度的差异无统计学意义(q=0.06,P=0.81).亚单位疫苗免疫的小鼠、豚鼠和兔免疫保护率分别为100%(10/10)、86%(12/14)和100%(5/5);EV76疫苗免疫的小鼠、豚鼠和兔免疫保护率分别为100%(6/6)、93%(13/14)和100%(6/6).结论 BALB/c小鼠是较好的评价鼠疫亚单位疫苗的小型动物;豚鼠评价鼠疫亚单位疫苗存在较大个体差异;兔也可用作评价鼠疫亚单位疫苗的动物.     

基因和抗原检测技术在鼠疫监测中的应用与评价

目的 对鼠疫特异性基因和抗原检测新技术进行鼠疫监测现场的应用及评价。方法检测来自鼠疫自然疫源地的各类标本中鼠疫菌DNA和F1抗原,采用多重PCR、胶体金免疫技术和酶联免疫吸附试验,与鼠疫菌培养和反向间接血凝试验进行平行对照。结果 使用5种方法平行检测鼠类、蚤类标本1798份,共判定鼠疫标本132份,总阳性率为7．34%;与单纯鼠疫菌培养阳性相比（113份,阳性率为6．28%）,其中鼠疫菌培养与基因、抗原检测的总阳性率为7．34%,与单纯检菌阳性率比较检出率提高16．81%,符合率达到97．13%。结论 在鼠疫监测中增加基因与抗原联合检测,可以提高鼠疫的确诊率。     

Epizootiologic parameters for plague in Kazakhstan

Reliable estimates are lacking of key epizootiologic parameters for plague caused by Yersinia pestis infection in its natural reservoirs. We report results of a 3-year longitudinal study of plague dynamics in populations of a maintenance host, the great gerbil (Rhombomys opimus), in 2 populations in Kazakhstan. Serologic results suggest a mid-summer peak in the abundance of infectious hosts and possible transmission from the reservoir to humans. Decrease in antibody titer to an undetectable level showed no seasonal pattern. Our findings did not support the use of the nitroblue-tetrazolium test characterization of plague-infected hosts. Y. pestis infection reduced survival of otherwise asymptomatic hosts.     

中国鼠疫自然疫源地分型研究Ⅳ.鼠疫耶尔森菌生物型生物学特征的探讨

鼠疫菌生物型是鼠疫菌起源进化遗传性状最稳定的生物学标准,是鼠疫起源进化普系的“活化石”,也是该菌起源进化最具代表性的模式.依据其对甘油和阿拉伯糖的酵解和还原硝酸盐的能力,鼠疫菌可分为4种生物型,即古典型(甘油酵解阳性,阿拉伯糖酵解阳性,硝酸盐还原阳性)、中世纪型(甘油酵解阳性,阿拉伯糖酵解阳性,硝酸盐还原阴性)、东方型(甘油酵解阴性,阿拉伯糖酵解阳性,硝酸盐还原阳性)和田鼠型(甘油酵解阳性,阿拉伯糖酵解阴性,硝酸盐还原阴性).前三种生物型与人类历史3次鼠疫大流行相对应,最后一种生物型对人不致病,但能造成田鼠鼠疫并在其自然疫源地内流行.目前中国鼠疫自然疫源地有4种鼠疫菌生物型.     

The history of the plague and the research on the causative agent Yersinia pestis

The plague is an infectious bacterial disease having a high fatality rate without treatment. It has occurred in three huge pandemics since the 6th century with millions of deaths and numerous smaller epidemics and sporadic cases. Referring to specific clinical symptoms of pulmonary plague the disease became known as the Black Death. This pandemic probably originated in central Asia and began spreading westward along major trade routes. Upon the arrival in the eastern Mediterranean the disease quickly spread especially by sea traffic to Italy, Greece and France and later throughout Europe by land. Until the 18th century many European cities were frequently affected by other great plague epidemics. The worldwide spread of the third pandemic began when the plague reached Hong Kong and Canton in the year 1894. The gram-negative coccobacillus now designated as Yersinia pestis has been discovered as the causative agent of plague in this Hong Kong outbreak. In the following years the role of rats and fleas and their detailed role in the transmission of plague has been discovered and experimentally verified. Today the plague is still endemic in many countries of the world.