胰腺干细胞和胰岛移植

胰岛移植是治疗糖尿病行之有效的方法，但是胰岛移植需要解决两大难题：首先，每位受体需要移植大约10万个胰岛，所以要有足够量的胰岛供体，而目前胰腺供体相当匮乏；其次是免疫排斥问题，当前所采用的免疫移植剂治疗都有严重的副作用。     

胰岛和胰岛干细胞移植的研究进展

随着免疫学、分子生物学等相关学科不断发展,目前胰岛移植和胰岛干细胞研究取得了相当大的进展,文中将就研究的现状、面临的问题及其可能解决途径等进行综述。     

成人胰腺干细胞分离及转分化为胰岛的研究

目的 通过对成人胰腺干细胞分离和转分化为胰岛过程的研究以便更进一步了解及改进胰腺干细胞分离、培养、鉴定方法。方法 成人胰腺组织以胶原酶消化，密度梯度离心法获得纯化的胰腺外分泌细胞、导管上皮细胞和胰岛。导管上皮细胞在体外共培养27d，观察细胞形态学变化及干细胞特异性转录基因PDX—1，CK—19蛋白等的表达。结果 上述方法可获得大量胰腺导管上皮细胞。体外培养第1天即可见PDX—1，CK—19阳性细胞，胰腺导管上皮细胞迅速分裂增殖并转变为有分化能力的干细胞继而转分化为三维结构的胰岛细胞。培养27d后，平均每克胰腺组织可生成760个胰岛。结论 用改进的方法可获得大量成人胰腺导管上皮细胞，并可在体外转分化为大量具有内分泌功能的胰岛，可能为克服胰岛移植的供体短缺提供一条新途径。     

子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植治疗糖尿病

目的 探讨利用子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植保护移植胰岛,提高糖尿病移植疗效的可行性.方法 分离纯化孕16 d SD大鼠子鼠:胰腺干细胞培养传代,行Nestin免疫组织化学及流式细胞术鉴定;分离纯化SD大鼠胰岛,分联合移植组(10只)、单独移植组(10只)及正常对照组(10只),分别将2×105个子鼠:胰腺干细胞与800个胰岛和单纯800个胰岛移植至糖尿病大鼠模型左肾包膜下,定期监测各组大鼠血糖情况及留取血浆ELISA测胰岛素含量,观察胰岛存活时间.结果 子鼠:胰腺干细胞培养传代3代后细胞涂片免疫组织化学示存在Nestin阳性细胞,流式细胞术测定nestin阳性细胞含量占74.1%.联合移植组大鼠均于术后第3天起血糖开始下降,血浆胰岛素水平逐渐升高,术后5 d内血糖可降至正常[(5.4±0.6)mmol/L],血浆胰岛素达到正常水平[(509.8±16.6)ng/L],胰岛存活时间(18.2±2.4)d;单独移植组大鼠血糖可于术后1周内降至正常[(6.1±0.9)mmol/L],胰岛存活时间(14.4±2.1)d;两组胰岛存活时间差别有统计学意义(P《0.05).结论 子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植可保护胰岛功能,延长胰岛体内存活时间,提高移植疗效.     

胰岛和胰岛干细胞的微创移植

目前 ,I型糖尿病的常规治疗方法是应用外源性胰岛素注射控制血糖。胰岛素注射不能完全控制血糖和远期并发症 ,因为常有血糖波动和低血糖发生 ,而且患者难免遭受注射所带来的不便和痛苦。全胰腺移植始于 2 0世纪 6 0年代初期 ,到 2 0 0 0年全球实施了近 1 0 0 0例手术[1 ] ,虽然患者移植后 1年生存率和移植功能存活率逐渐提高 ,但胰腺单独移植存活率低 ,只有与肾或其它脏器联合移植才能获得较高的成活率[2 ,3 ] 。尽管胰腺移植是一种有效的治疗方法 ,但要求条件高 ,损伤大 ,费用高 ,而且只有少数单位能够承担此项工作 ,难以普及。另外 ,还受…     

胰岛发育和胰腺干细胞研究进展

胰腺移植手术可使糖尿病患者得到治愈,但供体不足成为制约其开展的瓶颈.胰腺干细胞移植治疗糖尿病是极具潜力的治疗方案,有希望克服尸体胰岛移植供体不足和需免疫抑制治疗的缺陷.众多研究者尝试利用不同来源的干细胞分化或转分化形成胰岛或β细胞,并努力寻找胰腺干细胞的特异性标志以确证和分离纯化胰腺干细胞.本文综述了近年胰岛发育和胰腺干细胞研究领域的一些研究进展.     

干细胞分化为胰岛素分泌细胞研究进展

1型糖尿病的本质是胰岛β细胞功能的严重受损,细胞替代治疗是一种重要的治疗方法。影响其临床应用的主要因素之一是供体细胞的严重短缺,目前细胞替代治疗效果相对较好的方法是全胰移植,但也只能使患者暂时脱离注射胰岛素及并发症。理论上,干细胞替代治疗具有一系列优越性。本文综述胚胎干细胞、间充质干细胞、诱导多能干细胞等分化为胰岛素分泌细胞方面的最新进展及目前所遇到的一些问题,并展望1型糖尿病治疗的未来。     

胰腺干细胞研究进展

糖尿病是严重危害人类健康的重大疾病之一,发病率愈来愈高,预计2025年全球将有3亿患者。目前对于糖尿病的治疗尤其对于1型糖尿病,仍然以胰岛素替代治疗为主,研究表明,胰岛素替代治疗不能改善远期并发的症的发生率,而且存在需要终身治疗、花费昂贵、治疗痛苦等诸多弊端。自1974年Lacy等证实胰岛移植能纠正糖尿病大鼠的高血糖以来,胰岛细胞移植作为目前1型糖尿病治疗最有前景的方法之一已经取得重要进展,到90年代,已有胰岛移植治疗人糖尿病取得成功的报道。但胰岛来源的严重不足限制了其临床应用,近些年来,胰腺干细胞的研究成为新的热点,研究者们试图利用干细胞具有胰岛细胞分化潜能的特点,来从干细胞途径获取足量的胰岛细胞,并且已经有成体胰腺干细胞来源的胰岛细胞移植治疗动物高血糖模型成功的报道。     

胰岛干细胞移植

胰岛细胞的替代治疗是糖尿病治疗的新方向，但由于受到供体来源的限制无法推广。利用干细胞移植分化成为胰岛功能细胞是目前的热门科研项目。本文综述了近年来从胚胎干细胞和成体干细胞分化为胰岛细胞的试验成果。     

胰腺肿瘤干细胞标记物的研究进展

胰腺癌是一种侵袭性恶性肿瘤,有很高的远处转移率、复发率及致死率。近年研究发现,肿瘤组织中的肿瘤干细胞（CSCs）在肿瘤的发生、发展、转移、复发以及耐药中起着重要作用。CSCs标记物对肿瘤临床诊断及预后分析有潜在价值,并可能是潜在的治疗靶点。胰腺癌预后不良可能由胰腺CSCs的存在引起的,因此,对胰腺CSCs的研究与鉴定将有助于胰腺癌发病机制的认识与新疗法的推出。     

牙髓干细胞研究进展

干细胞是一类具有自我更新、高度增生能力和多相分化潜能的细胞,能够产生高度分化的功能细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞。目前,已在体外成功地扩增出人体多种组织的成体干细胞,自从2000年Gronthos等[1]发现人牙髓组织中存在成体干细胞即牙髓干细胞（dental pulp stemcells,DPSCs）后,近十年来国内外学者对牙髓干细胞的培养、生物学特性、细胞表型、分化能力及重组为诱导性多潜能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）等方面已进行了大量研究,本文就牙髓干细胞的研究现状综述如下。     

蛋白转导技术在胰腺干细胞分化中的应用

蛋白转导是将具有生物学活性的目的 片段与蛋白转导结构域相连接,然后导入细胞中并发挥其生物学效应的一项技术.蛋白转导结构域是一种小分子多肽,不仅具有穿透细胞膜的功能,同时也能够保持其融合蛋白的活性.蛋白转导技术是一项新兴的生物学技术,自从这项技术发明以来,被广泛的应用到了细胞基因调控的各个方面.本文以Tat、Pdx-1、Beta2/NeuroD转导蛋白为例,综述蛋白转导技术在胰腺干细胞分化中的应用.     

人胰腺癌细胞系表达干细胞标志物研究

目的 观察胚胎干细胞和胰腺相关干细胞标志物在胰腺癌细胞系中基因和蛋白水平的表达,探讨胰腺癌起源.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胚胎干细胞标志物Oct4、abc2、c-kit以及c-kit配体干细胞因子(SCF)和胰腺相关干细胞标志物角蛋白19(ck19)、巢蛋白(nestin)、波形蛋白(vimentin)、胰十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)等在胰腺痛细胞系sw1990、BxPC3、pc3和jt305中基因水平(mRNA)的表达;利用免疫细胞化学(ICC)方法检测Oct4、abcs2、c-kit和ck19、nestin在上述细胞系中蛋白水平的表达.同时结合异硫氰荧光素(FITC)标记抗体进行流式分选检测上述指标在胰腺癌细胞中的表达率.结果 除BxPC3、pc3和j1305不表达c-kit以外,上述4种胰腺癌细胞系在mRNA水平表达其余所有的标志物;在蛋白水平,上述4种细胞均表达Oct4、abcg2、ck19、nestin,而除sw1990以外的3株胰腺癌细胞株小表达c-kit.结论 人胰腺癌细胞系表达胚胎干细胞标志物Oct4、abcg2和胰腺干细胞标志物ck19、nestin、vimentin、PDX-1,部分表达c-kit.胰腺癌可能来源于成体胰腺干细胞或胰腺前体细胞.     

消融技术治疗局部进展期胰腺癌研究进展

对局部进展期胰腺癌(LAPC)术前需先行转化治疗,但之后大部分LAPC仍无法切除。局部消融技术、尤其纳米刀的应用为治疗LAPC带来突破性进展。本文围绕消融技术治疗LAPC研究进展进行综述。     

胰腺癌干细胞研究进展

胰腺癌干细胞（PCSC）在胰腺癌的发生、发展过程中起着重要作用,且与胰腺癌的耐药、转移机制关系密切。PCSC的表面标志物、分离、鉴定、信号通路、微环境、耐药、转移和靶向治疗等方面的研究,将为临床胰腺癌的治疗提供新的方向。     

胰腺癌的病理学及相关分子生物学研究进展

胰腺癌是一类临床表现隐匿、进展迅速和预后极差的恶性肿瘤,85%的病人在确诊后一年内死亡,手术切除率仅为25%,且术后复发率较高。近年随着分子生物学技术的发展,对胰腺癌病理形态学和分子水平上的认识也不断深入。综合近年的研究进展,对下列问题作一综述。胰腺癌的病理形态学认识2000年出版的W H O消化系统肿瘤国际组织学新分类中胰腺外分泌部肿瘤部分沿用了上一版(1996年版)的分类方式[1],但对某些概念及定义有了新的认识。一、确认胰腺癌的病理形态学认识1996年的W H O分类已经将实性鄄假乳头状瘤并入了交界性肿瘤,2000年版进一步描述…     

Endothelial cells promote pancreatic stem cell activation during islet regeneration in mice

Objectives

Diabetes is the clinical consequence of the loss of the majority of the β-cell population and failure to regenerate new pancreatic β cells. The current therapies based on β-cell replacement have failed to achieve β-cell renewal and thus, long-term insulin freedom. We have hypothesized that early rejection of endothelial elements within the islet grafts may seriously hamper islet regeneration in both native and islet grafts.

Methods

In the present study, we analyzed the role of endothelial cells to activate pancreatic stem cells during islet regeneration. Mice were pretreated with or without endothelial pharmacological ablation of endothelial cells, followed by an acute β-cell injury using a single intraperitoneal injection of streptozotocin. We performed comparative morphometric analyses of recovered pancreata on days 3, 7, 10, and 30 after streptozotocin injury, staining with bromodeoxyuridine (BrdU) for representative cell types, β cells, endothelial elements, and stem cells. Blood glucose levels were measured continuously after the injury to monitor the capacity for metabolic control.

Results

Morphometric analyses revealed an increasing number of cells over time to be stained with a stem cell and BrdU markers among animals only injured with streptozotocin but not with endothelial ablation. Notably, on day 10, stem cell markers were dramatically decrease nearly to basal levels, with appearance of numerous insulin-positive cells. Intact vessels with cobblestone-shaped endothelial elements were observed in direct proportion to the better outcomes, both by morphometric and by metabolic parameters. In contrast, fewer insulin-positive cells were observed in pancreata that had been ablated of endothelial cells showing extensive collapse of endocrine functions.

Conclusions

We observed that endothelial elements promoted stem cell proliferation and islet regeneration after a β-cell insult. We believe that preservation of endothelial cells positively affects the process of pancreatic regeneration.     

胰腺癌干细胞的研究进展

越来越多的证据表明肿瘤细胞中存在一小部分干细胞性质的肿瘤干细胞（cancer stem cell）．其具有自我更新及多向分化潜能。肿瘤干细胞是肿瘤细胞增殖、转移、复发和耐药的根源。胰腺癌是预后最差的肿瘤之一,肿瘤干细胞理论的提出将为胰腺癌的根治提供新的靶点和新的治疗方案。