DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。     

电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

改良使用Carazzi苏木素染液的体会

H.E染色是组织切片最常用的染色方法,苏木素染液的配方甚多,染色效果也有差异,影响染色效果的因素颇多。未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用。苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。多年来,我们在探讨一种使用方便,染色效果好的苏木素染液。经过对原Carazzi苏木素染液配方的不断改良,摸索出一个比较合适的使用方法介绍如下。1　材料和方法为了更好的优化组合苏木素、钾明矾、碘酸钠三者的比例和探讨染液的有效期,我们多次改良原Carazzi的配…     

肾穿刺组织荧光加苏木精染色效果观察

在肾脏病理诊断中 ,确定免疫复合物在肾组织中的沉积是很重要的。肾穿组织切片荧光染色后 ,肉眼和普通光镜下是无色的 ,不易观察组织结构 ,加染苏木后 ,则易行光镜观察 ,对荧光无影响。1　材料和方法　　我们取 10例新鲜肾穿组织 ,切 0 5ｃｍ进行冷冻切片 ,切片厚 3μｍ ,采用武汉博士德生物工程有限公司试剂分两组同时行ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ及Ｃ3ｃ荧光染色 ,37℃染色 30ｍｉｎ后行ＰＢＳ洗 3ｍｉｎ× 3次 ,蒸馏水洗。第一组直接缓冲甘油封片 ,第二组浅染苏木精 1ｍｉｎ ,水洗 ,缓冲甘油封片。在荧光镜下分别观察两组切片 ,发现两组切…     

一种病理组织切片恒温染色台的设计

目的设计一种可提高组织切片苏木精-伊红(HE)染色速率及染色质量的病理组织切片染色装置。方法设计制作由水浴箱、带盖染色缸、电控箱三部分构成的组织切片恒温染色台,实验比对组织石蜡切片上的石蜡膜溶于二甲苯的互溶速率和镜下染色效果。结果在37.0℃条件下,石蜡膜在二甲苯中的溶脱时间比室温条件下缩短了近一半的时间,互溶速率两组比较差异有显著统计学意义(P<0.001);在减少1/2染色时间染制的切片组织色泽与室温条件下的染色效果类似,而且细小颗粒着色清晰。结论应用该设备条件的组织切片染色效果优于传统常温方法。     

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

苏木素是组织切片最常用的细胞核染料 ,H.E染色中配方甚多 ,染色效果也有差异 ,影响染色的因素颇多 ,未经氧化的苏木素无染色能力 ,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝 ,还要借助媒染剂的作用 ,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期 ,使苏木素染色达到最佳效果 ,为此我们进行了以下探讨。1　方法与结果1.1　Ehrlich苏木素染液　这是一种自然氧化成熟的苏木素染液 ,比较合理的配方是 :苏木素 5g,无水乙醇2 0 0 ml,硫酸铝钾 2 0 g,甘油 2 0 0 ml,蒸馏水 1…     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

几种半薄切片染色法的比较与改进

半薄切片是超薄切片前的一个重要步骤。光镜检查半薄切片,可确定电镜观察部位,判断组织固定和包埋的质量。半薄切片染色法很多,我们对几种常用方法进行了一些比较和改进,现将实践中的体会介绍如下,供参考。一、方法及结果:用Epon812包埋的组织块切成1微米或1.5微米厚的半薄切片,捞到滴有蒸馏水的载片上,在烘箱内烤干,待染色。1.甲苯胺兰染色法:将染液滴于切片上,在酒精灯上加热数秒钟,勿煮沸,流水冲洗,自然干燥,树胶封固后观察。不必经酒精及二甲苯,免切片皱缩不平。如染色适度,组织染成兰色,结构清楚,而树脂无色。2.苏木精—伊红染色法:锇酸固定、树脂包埋的组织,用此法难于着色,一般须先用氢氧化钾溶液脱去树脂,然后染色.为避免氢氧化钾液对组织可能产生的损伤,我们参考Chang法改用2.5%高碘酸处理切片,并用滴     

苏木素染色液配制方法的改进

苏木素-伊红染色(HE)在组织学、病理学、细胞学及病理诊断、科研和教学中有着十分重要的意义,HE染色质量的好坏与细胞核着色有着十分密切的关系。目前多采用Harris(1900)氏法来配制苏木素染液,该方法存在着媒染剂析出结晶多、染液表面有亮膜污染切片及氧化程度不易控制等缺点。针对上述缺点,我们对媒染剂铝明矾的用量进行了实验,经三年多的实际应用,改进后的苏木素染色,其染色效果与原配制方法相同,而且节省了媒染剂的用量。     

环保型组织样本制备液在不同脂肪细胞检测中的应用价值

背景：当前使用的传统试剂(甲醛溶液固定、乙醇脱水、二甲苯透明脱蜡)对组织前期处理制作的常规石蜡切片质量较低,已成为制约脂肪细胞性肿瘤病理诊断的瓶颈。而且,传统试剂容易对实验室环境造成污染,对实验室人员造成多种健康危害。目的：探讨环保型组织样本制备液在脂肪细胞肿瘤苏木精-伊红染色及非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤MDM2基因检测中的应用价值。方法：选取2016年2月至2022年7月期间592例脂肪细胞肿瘤标本为研究对象,同一标本对半切开,按照所使用的标本前期处理试剂的不同,随机分为2组：传统组和环保组。传统组使用传统试剂甲醛溶液固定、乙醇脱水、二甲苯透明脱蜡制作常规石蜡切片592张;环保组使用环保型组织样本制备液制作切片592张。依据切片苏木精-伊红染色质量的不同等级,比较两组切片的苏木精-伊红染色优良率;进一步对其中病理确诊为非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤的33例标本再次切片后,使用荧光原位杂交法检测MDM2基因,比较两组切片MDM2基因扩增率的差异。结果与结论：(1)相对于传统组,环保组的脂肪细胞肿瘤的组织切片更舒展、更完整,细胞无折叠,染色更清晰,红蓝对比度更佳,细胞结构...     

进口胶带和国产自制胶带在冷冻小动物整体切片染色中的对比

冷冻小动脉整体切片 (不脱钙 )是组织切片技术中的一种特殊技术方法。它可将如小鼠、大鼠的整体或大动物的局部组织器官制成切片 ,以便用于动物组织器官的研究及药物在动物体内分布的实验。切片过程中需用透明粘合胶带贴在包埋块上 ,使切下的组织片与胶带紧密粘合 ,而后可进行染色观察。目前国内在整体切片中所用的透明粘合胶带主要为进口产品 ,如 scotch80 0 ,81 0 ,6 88,85 0 ,32 5等型号的胶带。它们的共同优点是粘度强 ,透明度较好 ,但其缺点也十分突出 ,即不易干燥 ,且在进行基本的 H.E染色时 ,遇二甲苯后 ,胶带便严重卷曲 ,无法封片…     

消除组织切片中甲醛色素方法的探讨

在组织切片中 ,常见体内各种生理性和病理性色素以及组织离体后经化学试剂溶液的固定、染色过程中产生的各种色素 ,如甲醛色素、汞、铬和苏木精的沉着物等。在组织切片中这些色素多不溶于水、乙醇和二甲苯中。然而汞、铬等重金属盐的结晶仅见于特定含铬、汞类的固定液浸泡时的标本内 ,而甲醛溶液是病理学、组织学、解剖学常见的固定液 ,尤其是含血丰富或坏死组织的固定中甲醛色素特别多见 ,它将直接或间接地影响日常病理组织切片的观察和诊断工作 ,所以 ,鉴别和消除组织切片中的甲醛色素有其重要意义。1　材料和方法1 1　标本　取新鲜的心脏…     

组织染色后封片技巧

免疫组织化学、原位杂交等染色后显微镜观察满意的片子，为保存结果，以便进一步观察、照像、统计分析等，需作封片处理。如何才能将切片封好，使染色结果清晰、无水珠，是一个值得注意的问题。传统的封片步骤为：将干燥的片子进梯度酒精脱水、二甲苯透明，然后中性树胶封片。传统方法步骤较多，耗时长，且有时因梯度酒精置换不干净，使细胞表面存有细水     

骨骼肌组织石蜡切片的技术改良

正在制作骨骼肌教学切片中常出现组织内有空洞、碎裂、掉片等现象,且肌原纤维往往显示不清楚。为了有效地解决这些问题,笔者在实际工作中通过实践,在制片方法上进行了一些分析和改进,采用Heidenhain Susa固定剂无需水洗直接投入95%乙醇溶液中脱水,蜡带直接展片法,环保组织透明液代替二甲苯透明、脱蜡,环保封片胶代替中性树胶封片,利用震荡法缩短制片时间。改进后的骨骼肌组织切片质量有所提高,制片时间缩短,且减少了实验人员对有毒有害物质的接触。现报道如下。     

变色酸2R-亮绿法在神经髓鞘染色中的应用

在神经病理诊断和研究工作中，显示神经髓鞘多采用苏木素染色法。我们根据神经髓鞘的组织结构和生化特点，经大量实验，采用变色酸２Ｒ亮绿法对神经髓鞘进行染色，染色效果理想。一、材料与方法１标本来源：本科活检及尸检正常或病变的脑组织、脊髓和周围神经组织，均...     

介绍一种新苏木素染液的配制方法

介绍一种新苏木素染液的配制方法杜双存关键词苏木素，染液配制，染色中国图书分类号Ｒ４４６苏木素染液配制方法虽有不同，其目的都是使本身无染色能力的苏木素经氧化后产生具有染色能力的苏木红，又称氧化苏木素或苏木因。常用氧化方法有两种：一是自然氧化；二是加入氧...     

透明切片的废旧二甲苯提纯方法与应用

用于组织切片透明的二甲苯经长时间使用后,会混入大量的无水乙醇、组织碎屑及少许伊红染料,尤其是夏季天气潮湿还会吸收水分,液体呈淡红色混浊状,染色缸底部会有小水珠。此时二甲苯的透明作用明显减弱,致使组织切片透明不彻底,切片模糊不清,造成诊断困难,甚至误诊。通常解决的办法是将旧液倒掉,换新液。因目前二甲苯售价较贵,为节约试剂、降低消耗、减少环境污染,我们根据乙醇溶于水而二甲苯不溶于水的特性,经反复试验,探索出用水提取旧二甲苯内的无水乙醇和水,从而提纯旧二甲苯的方法。     

成年斑马鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红染色

目的介绍斑马鱼石蜡连续切片的制作和苏木精-伊红(HE)染色的方法。方法利用ThermoShandonExcelsior组织处理机、ThermoShandonHistocentre2型石蜡包埋机、ThermoShandonFinesse325型切片机、ThermoShandonVaristainGemini全自动染片机和ThermoShandonConsul全自动封片机制作成年斑马鱼石蜡连续切片并进行HE染色。结果利用上述方法获得清晰的成年斑马鱼石蜡连续HE染色切片。结论斑马鱼石蜡连续切片的制作和HE染色与哺乳类动物组织切片和染色在操作和某些工作参数上有所不同。     

HE染色切片标本褪色的原因及解决方法

ＨＥ染色法是组织学与病理学常用的染色方法,ＨＥ染色切片标本是学生观察最多的一种切片。但该切片经数年后,细胞易褪色,直接影响观察效果。本文结合多年实践经验与详细观察,就这一现象的成因与解决方法提出如下浅见。１褪色原因（１）封固剂的酸化问题：干性封固剂是最常用的封固剂,主要是加拿大胶和中性树胶,但这两种封固剂均采用二甲苯作为溶剂。因日久二甲苯往往被逐渐氧化,生成苯甲酸和邻苯二甲酸而呈酸性,可导致碱性染料（苏木精）褪色（熊绪 ）。（２）切片标本经苏木精、伊红染色的过程中,脱水不净。（３）载玻片和盖玻片…     

Lillie-Mayer苏木精在冷冻切片快速进行性染色中应用

恒温冷冻切片是用于术中快速病理诊断的主要制片技术,除了要求技术人员有熟练的操作技能外,更重要的是要求在制作程序及苏木精染液的配制和使用方法上做出有效的选择,才能达到最佳的染色效果.Lillie-Mayer苏木精染液是一种从英国引进的改良配方,应用于冷冻切片的快速进行性染色,全程染色约90 s完成,该方法简化了盐酸乙醇分化的程序,节省了分化和返蓝中所消耗的时间,避免了盐酸乙醇酸化后引起的部分组织脱落掉片的现象.现将我科多年来在冷冻切片的快速染色方法及Lillie-Mayer苏木精染液的配制方法介绍如下.