普济煎液对豚鼠EB病毒的抑制及免疫干预作用

摘要 目的 探讨普济煎液对豚鼠EB病毒的抑制及其免疫干预作用。 方法 经滴鼻、口腔接种EB病毒1周,造模成功后,把豚鼠分为5组：正常对照组、模型组、阿昔洛韦组、低剂量普济煎液组、高剂量普济煎液组,每组各9只,分别予生理盐水、阿昔洛韦、普济煎液灌胃2周。末次给药后,检测豚鼠血液淋巴细胞中EBV-DNA载量、血清中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IFN-γ、EBV-VCA IgG含量。结果 与正常对照组比较,模型组、阿昔洛韦组、低剂量普济煎液组、高剂量普济煎液组淋巴细胞中EBV-DNA拷贝数、血清中EBV-VCA IgG含量显著升高（P<0.05）;与模型组比较,阿昔洛韦组、低剂量普济煎液组、高剂量普济煎液组淋巴细胞中EBV-DNA拷贝数降低（P<0.05）;高剂量普济煎液组淋巴细胞中EBV-DNA拷贝数较阿昔洛韦组降低（P<0.05）;与模型组比较,阿昔洛韦组、低剂量普济煎液组、高剂量普济煎液组血清中TNF-α、IL-6、IFN-γ含量升高（P<0.05）;高剂量普济煎液组中TNF-α、IFN-γ含量较阿昔洛韦组升高（P<0.05）。结论 普济煎液能有效抑制EBV-DNA复制,其机制可能是通过上调TNF-α、IL-6、IFN-γ表达,降低IL-10的表达,增强豚鼠免疫应答效应,抑制EB病毒增殖。     

补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠模型IL-5信号通路的调控机制

目的：观察中药补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）水平以及嗜酸粒细胞（ EOS）上白介素-5受体α（ IL-5 R α）mRNA表达的影响,探讨中药补肺益肾方通过IL-5信号通路促进哮喘EOS凋亡的机制。方法24只健康幼龄豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组。以卵蛋白致敏激发制备豚鼠哮喘模型,分离豚鼠BALF中的EOS,酶联免疫吸附法（ ELISA）检测BALF中IL-5的含量,TdT介导的dUTP缺口末端标记法（ TUNEL）检测EOS凋亡,原位杂交检测IL-5 RαmRNA表达。结果模型组IL-5水平高于正常组（ P﹤0.01）,中药组IL-5水平低于模型组（ P﹤0.05）。模型组豚鼠EOS凋亡明显减少,中药组EOS凋亡明显高于模型组（ P﹤0.01）。模型组豚鼠EOS表达IL-5 Rα mRNA明显低于正常组（ P﹤0.01）,中药组EOS表达 IL-5 RαmRNA明显增加（ P﹤0.05）。结论中药补肺益肾方可通过降低气道IL-5水平,促进IL-5 RαmRNA表达,来促进EOS凋亡,减轻气道炎症,从而达到防治哮喘的目的。     

霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞的干预作用

目的：研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34^＋造血细胞生物活性的影响。并与糖皮质激素比较．探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法：以卵白蛋白（OVA）致敏并激发BALB／c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组，每组6只，分别给予生理盐水（对照，A组）、泼尼松（B组）及霉酚酸酯（C组）灌胃．末次激发后24h分别取支气管肺泡灌洗液（BALF）、外周血及骨髓，测定BALF、外周血中有核细胞的分类计数及骨髓中有核细胞总数：ELISA方法测定外周血中IL-5水平；流式细胞仪测定外周血及骨髓中CD34^＋造血细胞、CD4^＋T淋巴细胞占有核细胞的比例：免疫组化结合原位杂交法检测骨髓内表达白细胞介素5（IL-5）受体α链mRNA的CD34^＋造血细胞（CD34^＋IL-5Rα mRNA^＋细胞）计数。结果：B、C组哮喘小鼠BALF中细胞总数、EOS计数，外周血中CD34^＋造血细胞计数及外周血中IL-5水平均低于A组相应指标．且差异有显著性（均P〈0．05）；C组BALF及外周血巾EOS计数、骨髓中CD34^＋造血细胞计数及CD34^＋IL-5RαmRNA＋细胞计数与B组相应指标比较，差异有显著性（均P〈0．05）。结论：霉酚酯酸（MMF）可能抑制嗜酸粒细胞（EOS）、T淋巴细胞的肺内浸润，抑制CD34^＋造血细胞从骨髓迁移至外周血，它可能主要通过抑制淋巴细胞增殖，减少IL-5的产生．来影响骨髓EOS祖细胞的分化。     

滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响

目的：研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2（IL-2）含量的变化及滨蒿内酯（Sco）对其的影响。方法：建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值，比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素（PHA）诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果：Seo剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用；Seo能够抑制PHA诱导的哮喘朦鼠T淋巴细胞转化；哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组。Seo也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论：Seo在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平，可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。     

补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞凋亡和IL-5受体表达的影响

目的观察中药补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveo larlavage fluid,BALF）中嗜酸粒细胞（eosinophils,EOS）白介素-5受体α（interleukin-5Rα,IL-5Rα）mRNA表达的影响,探讨中药补肺益肾方促进哮喘EOS凋亡的机制。方法 24只健康幼龄豚鼠随机分为正常组、模型组、中药组。以卵蛋白致敏激发制备豚鼠哮喘模型,分离豚鼠BALF中的EOS,TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TdT-mediated dUTP nick end labeling ,TUNEL）检测细胞凋亡,原位杂交检测IL-5RαmRNA表达。结果模型组豚鼠EOS凋亡明显减少,中药组EOS凋亡明显高于模型组（P〈0.01）。模型组豚鼠EOS表达IL-5RαmRNA明显低于正常组（P〈0.01）,中药组EOSIL-5RαmRNA表达明显增加（P〈0.05）。结论中药补肺益肾方可通过促进IL-5RαmRNA表达,降低IL-5生物学功能,促进EOS凋亡,减轻气道炎症,从而达到防治哮喘的目的 。     

止嗽立效颗粒对哮喘豚鼠气道变应性炎症的影响

目的：制备豚鼠哮喘模型,观察止嗽立效颗粒抗气道变应性炎症作用。方法：以卵蛋白致敏豚鼠为哮喘模型动物,灌胃给予不同剂量的止嗽立效颗粒,观察治疗后各组豚鼠外周血和肺胞灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）计数和白细胞介素-5（IL-5）含量。结果：外周血中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量均比模型组显著降低（P〈0.01）;BALF中,空白对照组和止嗽立效颗粒组的EOS计数和IL-5含量也均比模型组显著降低（P〈0.01）。结论：止嗽立效颗粒具有抗哮喘豚鼠气道变应性炎症作用,其机制可能是降低机体IL-5的表达,并减少血液中EOS的数量。     

灵芝多糖肽和小分子灵芝多糖肽抗肿瘤作用和免疫调节作用比较

目的 比较灵芝多糖肽（GLPP）和小分子灵芝多糖肽（GL-LPP3）离体抗肿瘤作用及对免疫调节作用.方法 以GLPP和GL LPP3作用于肿瘤细胞株（SW480、MCF-7、K562细胞）,以5 Fu作对照,24、48 h后收集细胞,考察其对肿瘤细胞的抑制率.建立混合淋巴细胞培养体系,以环孢素A为对照,用MTT法测定24,48,72 h细胞活性,观察GLPP和GL-1PP3对免疫的调整作用. 结果 GLPP和GLLPP3对肿瘤细胞株SW480、MCF-7、K562存活率无抑制作用;GLPP和GL-LPP3可增强淋巴细胞免疫作用. 结论 GLPP和GL-LPP3体外不能直接抑制或杀伤肿瘤细胞,可增强T淋巴细胞免疫功能.     

白芷多糖对免疫低下模型小鼠免疫调节作用的研究

目的研究白芷多糖（ADP）对环磷酰胺所致免疫低下模型小鼠免疫功能的调节作用。方法 ADP由白芷经热水煮提和乙醇醇沉提取。100只小鼠随机分为对照组、模型组和ADP低、中、高剂量（50,100,200 mg/kg）处理组,每组20只;除对照组外其余各组小鼠连续4 d腹腔注射环磷酰胺（100 mg/kg）;第5～14天,ADP各处理组每天分别给予相应浓度ADP灌胃1次,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。计算各组小鼠免疫器官指数,通过鸡红细胞吞噬实验测定巨噬细胞吞噬率及吞噬指数,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性,采用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素2（IL-2）,白细胞介素6（IL-6）,肿瘤坏死因子α（TNF-α）和免疫球蛋白G（IgG）含量。结果与对照组相比,模型组小鼠的胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率、脾淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性、血清中IL-2,IL-6,TNF-α和IgG含量均显著降低,差异具有统计学意义（均P<0. 05）。与模型组比较,低剂量组小鼠TNF-α,中、高剂量组小鼠巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率、脾淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性、IL-2,TNF-α,IgG以及高剂量组小鼠胸腺指数、脾脏指数、IL-6含量均显著升高,组间比较差异有统计学意义（均P<0. 05）。此外,高剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率、脾淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性、IL-2,IL-6,TNF-α和IgG含量均显著高于低、中剂量组,组间比较差异具有统计学意义（均P<0. 05）。结论 ADP对环磷酰胺致免疫低下小鼠的非特异性免疫和特异性免疫具有增强作用,且该作用呈现剂量依赖性。     

人外周血诱导DC1 DC2方法的初步探讨

目的：探讨人外周血单个核细胞(PBMC)体外诱导DCl、DC2的条件。方法：体外用细胞因子GM-CSF IL-4/ TNF-α及IL-3 G-CSF／ TNF-α来分别诱导DC。结果：用GM-CSF IL-4／ TNF-α诱导出CDl23^ DC2和CDl23^-DCl细胞，而采用G-CSF IL-3／ TNF-α未能诱导出CDl23^ 的DC2细胞。结论：用人的外周血单个核细胞，在体外用细胞因子组合GM-CSF IL-4／ TNF-α可以诱导出CDl23^ DC2和CDl23^-DCl细胞。     

灵芝孢子和破壁孢子多糖对体外培养的小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的比较

目的:比较体外给药时灵芝孢子多糖(Gl-SP)和灵芝破壁孢子多糖(Gl-BSP)对小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞免疫调节活性的影响.方法:噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞增殖、混合淋巴细胞培养反应(MLR)、自然杀伤细胞(NK细胞)活性;比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力;流式细胞术测定脾T细胞亚群;ELISA法测定白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)含量,生物法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性,Griess法测定NO含量.结果:当质量浓度为0.2～12.8 mg/L时两种多糖均可促进淋巴细胞增殖及丝裂原诱导的淋巴细胞增殖,提高NK细胞活性,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力并促进TNF-α和NO分泌.两种多糖均可促进MLR,在质量浓度为12.8 mg/L时,Gl-BSP促增殖作用明显强于Gl-SP,Gl-SP或Gl-BSP(0.2～12.8 mg/L)可显著增加IL-2、IFN-γ的分泌,但相同浓度的Gl-BSP增加IL-2和IFN-γ分泌的作用均强于Gl-SP.在一定的浓度范围内,两种多糖均可显著增加双向MLR反应中CD3 T、CD4 T和CD8 T细胞百分率,Gl-BSP在质量浓度为0.2～12.8 mg/L或3.2～12.8 mg/L时,增加CD4 或CD8 T细胞的作用较Gl-SP更为显著.在质量浓度为0.2～0.8 mg/L时,Gl-BSP组的CD4 T和CD8 T细胞的比值大于Gl-SP组.结论:Gl-SP和Gl-BSP在体外试验中具有相似的免疫调节活性,Gl-BSP的某些免疫调节作用强于Gl-SP.     

姜黄素对哮喘小鼠气道重构及TGF-β1 mRNA表达的影响

目的：研究姜黄素对哮喘小鼠气道重构及肺组织转化生长因子β1 mRNA表达的影响．方法：将48只雄性小鼠随机分成正常对照组（A组）、哮喘组（B组）、地塞米松1mg／kg治疗组（C组）、姜黄素治疗组（D组）,用卵清蛋白（OVA）进行致敏和激发,建立哮喘模型．收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）行白细胞和嗜酸粒细胞（EOS）计数,观察并计算离体支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度、支气管平滑肌细胞核数量和肺组织形态学改变,采用医学图像分析软件测定支气管各项指标;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织转化生长因子母,mRNA和免疫组织化学方法测定转化生长因子β1的蛋白表达水平．结果：正常对照组、哮喘组、地塞米松治疗组、姜黄素治疗组的EOS分别是（0．51±0．17）×10^8／L,（7．42±0．33）×10^8／L,（4．89±0．75）×10^8／L,（3．14±0．24）×10^8／L,哮喘组明显比正常对照组增高,两组比较有统计学意义（P〈0．01）．哮喘组小鼠具有明显的气道炎症,出现上皮细胞增生、平滑肌肌层增厚、结缔组织增生、黏液分泌旺盛并伴小气道栓塞,支气管黏膜下、血管壁及周围、肺间质均有大量胶原纤维沉积,姜黄素治疗组小鼠炎症明显改善,黏液产生减少,上皮增生、平滑肌层增厚不明显,气道周围胶原纤维及黏液颗粒均减少．免疫组化法TGF—β1的表达中,正常对照组阳性率为8．3％（1／12）,哮喘组达66．7％（8／12）,地塞米松治疗组为41．7％（5／12）,姜黄素治疗组为25．0％（3／12）,两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）．结论：姜黄素不仅可明显抑制哮喘小鼠的气道炎症反应,还可明显减轻气道重构的程度,这种作用可能是通过抑制TGF—β1 mRNA表达来实现的．     

CD4^＋ iNKT细胞在实验性变应性鼻炎发病中的作用

目的探讨实验性变应性鼻炎发病过程中CD4^＋iNKT细胞浸润情况。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为变应性鼻炎组（A组）和对照组（B组）。比较2组小鼠变应性鼻炎症状评分、鼻黏膜嗜酸粒细胞（EOS）计数、鼻黏膜组织形态,免疫酶标技术检测各组鼻黏膜CD4^＋ iNKT细胞的浸润,流式细胞技术（FCM）检测鼻腔黏膜中的CD4^＋ iNKT细胞。并进行比较分析。结果（1）A组症状评分（7.3±1.0）分较B组（0.7±0.6）分明显增高（P〈0.01）。（2）A组EOS计数（7.5±1.2）个/HP较B组（0.4±0.5）个/HP明显增高（P〈0.01）。（3）HE染色见A组纤毛结构大量脱落,组织水肿,小血管增生,黏膜上皮下固有层EOS、淋巴细胞浸润;B组纤毛结构完整,无明显EOS浸润。（4）A组鼻黏膜下有多量的CD_4和NK1.1双阳性染色细胞,即CD4^＋ iNKT细胞;B组仅见少量的CD4^＋细胞。（5）A组鼻黏膜CD4^＋ iNKT细胞阳性率（72.6%±7.9%）明显高于B组（0.49%±0.01%）（P〈0.01）。结论变应性鼻炎小鼠鼻腔黏膜有大量的CD4^＋ iNKT细胞浸润,其数量远远超过CD4^＋T细胞。     

血清IgE、外周血嗜酸细胞检测及特应性体质在儿童咳嗽变异性哮喘中的临床意义

目的:探讨血清IgE水平、外周血嗜酸细胞计数(EOS)及家族特应性体质调查在儿童咳嗽变异性哮喘(CVA)中的诊断意义。方法:分别测定咳嗽变异性哮喘患儿、哮喘发作患儿及同期我院体检的正常儿童各30例血清IgE水平,外周血嗜酸细胞计数,并调查受检者三代内特应性体质家族史。结果:①咳嗽变异性哮喘患儿发作期血清IgE水平为(525.39±252.29)IU/ml,显著高于缓解期(153.92±62.23)IU/ml,P<0.001,CVA两组水平均高于正常对照组(32.26±14.83)IU/ml,P<0.05。②咳嗽变异性哮喘发作期患儿外周血嗜酸细胞计数水平(1.11±0.48)×109/L显著高于缓解期(0.50±0.23)×109/L,P<0.001,CVA发作期和缓解期均高于正常对照组(0.13±0.07)×109/L,P<0.05。③CVA发作期血清IgE水平和外周血嗜酸细胞计数与哮喘发作期的(528.26±203.11)IU/ml和(1.16±0.43)×109/L之间比较无统计学意义(P>0.05)。④家族特应性体质调查咳嗽变异性哮喘组阳性26/30例(86.7%)显著高于正常对照组阳性7/30(23.3%)(P<0.01)。结论:联合检测外周血嗜酸细胞计数(EOS)、IgE水平及家族特应性体质调查对诊断咳嗽变异性哮喘有重要意义。     

布地奈德对变应性鼻炎大鼠鼻腔灌洗液中嗜酸粒细胞凋亡的影响

目的建立大鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）模型,观察布地奈德对AR大鼠鼻腔灌洗液中嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）凋亡的影响。方法采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型,分为AR组（B组）、布地奈德组（C组）,每组10只大鼠,分别于模型建立后第31-38天,每只每日每侧鼻腔滴入磷酸盐缓冲液50汕、布地奈德50μL（1．28μg/μL）,另设对照组（A组）大鼠10只。第39天取各组大鼠鼻腔灌洗液测定EOS百分比,流式细胞术检测EOS凋亡率。结栗C组大鼠鼻腔灌洗液中EOs为（5．10±0．51）％,明显低于B组的（29．37±4．33）％（P〈O．01）;C组鼻腔灌洗液中EOS凋亡率为（18．48±2．84）％,明显高于B组的（3．36±0．50）％（P〈0．01）;且B组、C组大鼠鼻腔灌洗液中EOS百分比与其凋亡率呈显著负相关（r=-0．892,P〈0．05）。结论布地奈德可明显减少AR大鼠鼻腔内EOS浸润,并能显著增加EOS凋亡,进而减轻AR的炎症反应。从而达到治疗AR的目的。     

不同中医证型脓毒症血小板和胃泌素的变化

目的：探讨不同中医证型脓毒症血小板和胃泌素的变化。方法：以脓毒症住院患者为对象，经中医辨证，气分组9例，血分组13例。分别采血，放免检测血清GAS、TNF-α、IL-6、PLT和WBC指标。结果：不同中医证型的脓毒症胃泌素测定值，气分组（5，67±1．89）pg／ml，血分组（65，57±18．19）pg／ml；PLT计数气分组（41．73±13.90）×10^9／L，血分组（27．73±7．69）×10^9／L，差异有显著性意义（P〈0．05）。各证型的IL-6、TNF-α和WBC差异无统计学意义。结论：不同中医证型脓毒症GAS及PLT水平不同。动态观察GAS及PLT可作为脓毒症辨证的相关参考指标。     

HER2阳性乳腺癌细胞株上清液对树突状细胞表型及功能的影响

目的探讨人HER2阳性乳腺癌细胞对树突状细胞表型及功能的影响。方法分离培养外周血单个核细胞来源的树突状细胞。培养的第5天,实验组HER2’MCF-7细胞的培养上清液孵育24小时,以不加上清液的树突状细胞作为对照组,流式细胞术检测树突状细胞表面标志CDS0、CD86、CD40、CD83和HLA—DR的表达水平,ELISA法检测树突状细胞细胞因子IL-12、TNF—α、IL-6和IL-10的分泌水平。用改良的MTT比色法检测上清液处理的树突状细胞刺激同种异体T细胞增殖的能力和ELISA法检测树突状细胞刺激T细胞分泌细胞因子的能力。结果树突状细胞与HER2’MCF-7细胞的上清液共培养后,树突状细胞表面分子CD80、CD83、CD86及CD40均表达升高,同时伴随着IL-12、TNF-α、IL-6的分泌增加。与对照组相比较,上清液处理的树突状细胞对激活同种异体T细胞增殖和分泌细胞因子的能力明显增强（P〈0．01）。结论HER2’MCF-7细胞能改善树突状细胞的抗原递呈功能和刺激T细胞活化增殖的能力,提示HER2’MCF-7细胞对树突状细胞是免疫刺激作用,对于HER2’的乳腺癌可采用基于树突状细胞疫苗的免疫治疗。     

rhIFN-γ对白血病K562细胞CD123表达的影响

［摘要］目的　检测重组人γ-干扰素（recombination human interferon gamma,rhIFN-γ）对白血病K562细胞生长的抑制作用及其对CD123表达的影响. 方法　应用MTT法检测白血病K562细胞在不同浓度rhIFN-γ作用72 h的增殖活力以及用流式检测其CD123的表达．结果　5×104～108 U/L rhIFN-γ作用K562细胞72 h,细胞生长抑制率随剂量增大而增高,而2×105 U/L rhIFN-γ使其抑制率降低．rhIFN-γ 2×105 U/L、107 U/L孵育K562细胞72 h, 流式检测到CD123在K562细胞的表达量分别为（7.2±2.50）%和（21.6±1.17）%;107 U/L rhIFN-γ组与对照组（4.10±1.46）%比较,其差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论　rhIFN-γ对白血病K562细胞生长有双向作用（抑制或促增殖）,诱导CD123表达增加.     

鱼藤素对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的：观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制。方法：细胞计数试剂盒8（cell counting kit-8,CCK8）检测0、1、5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞增殖的影响,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态,蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/Akt通路相关分子的蛋白表达。结果：5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后能明显抑制MCF-7细胞增殖（P〈0.01）,抑制率随着浓度升高和时间延长而增加,各组间两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而1μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞的增殖无明显影响（P〉0.05）。5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6h后能诱导MCF-7细胞凋亡,透射电子显微镜下可观察到典型的凋亡细胞形态,而相同条件下1μmol/L鱼藤素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用不明显。5μmol/L鱼藤素作用6h后,MCF-7细胞内磷酸化Akt（p-Akt）（Thr308）、磷酸化糖原合成酶激酶-3β（phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β）（Ser9）、磷酸化磷酸肌醇依赖性激酶1（phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase1,p-PDK1）（Ser241）和磷酸化人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因编码的蛋白（phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome10,p-PTEN）（Ser380）的表达量明显减少,而总Akt蛋白的表达量则无明显变化;1μmol/L鱼藤素作用6h后,细胞内上述所有蛋白的表达量均无明显变化。结论：鱼藤素可能通过抑制PTEN（Ser380）和PDK1（Ser241）蛋白的磷酸化,进而抑制Akt（Thr308）的磷酸化,间接抑制其下游GSK-3β（Ser9）的磷酸化,最终诱导MCF-7细胞凋亡和抑制其增殖。     

姜黄素对哮喘小鼠α-SMA的表达及气道重构的影响

目的：观察腹腔注射姜黄素对小鼠α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,验证其对哮喘小鼠气道炎症的防治和对肺的保护作用,探讨姜黄素在哮喘气道重构的治疗作用.方法：36只雄性SD小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、姜黄素治疗组各12只,采用卵蛋白致敏小鼠哮喘模型,ELISA检测支气管肺泡灌洗液中浓度并进行嗜酸粒细胞计数,HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况,同时采用免疫组化法检测α-SMA在肺组织的表达.结果：正常对照组、哮喘模型组、姜黄素治疗组的EOS分别是（0.74±0.26）×108/L,（5.32±0.41）×108/L,（3.55±0.46）×108/L,哮喘模型组明显比正常对照组增高,两组比较有统计学意义（P〈0.01）.哮喘模型组小鼠具有明显的气道炎症,以淋巴细胞、嗜酸粒细胞为主,出现上皮细胞增生、平滑肌肌层增厚、结缔组织增生、黏液分泌旺盛并伴小气道栓塞.支气管黏膜下、血管壁及周围、肺间质均有大量胶原纤维沉积.姜黄素治疗组小鼠炎症明显改善,黏液产生减少,上皮增生、平滑肌层增厚不明显,气道周围胶原纤维及黏液颗粒均减少,无明显气道痉挛.正常对照组α-SMA的表达阳性率为8%（1/12）,哮喘模型组达58%（7/12）,姜黄素治疗组为33%（4/12）,两两比较差异有统计学意义（P〈0.01）.结论：姜黄素能够抑制α-SMA的表达,减轻气道炎症反应、延缓气道重构进程.     

白介素5和趋化因子eotaxin在鼻息肉中的表达及其意义

目的:研究白介素5和趋化因子eotaxin在鼻息肉中的表达,及与嗜酸性粒细胞(EOS)浸润状态的相关性。方法:运用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)结合半定量分析方法检测20例鼻息肉和8例下鼻甲黏膜组织(对照组)中白介素5和eotaxin的mRNA的表达水平。同时运用HE染色、免疫组织化学方法检测两组中EOS的分布及白介素5和eotaxin的蛋白表达情况,比较两组间差异,分析每组中EOS浸润数目与白介素5和eotaxin表达的相关性。结果:120例鼻息肉组织中以EOS浸润阳性(+)以上者有75%(15例),明显高于8例对照组的12.5%(1例)。且鼻息肉组织中的浸润EOS率21.64±4.33明显高于对照组1.15±0.68(P<0.01);2鼻息肉组织中白介素5和eotaxin的蛋白表达阳性细胞数明显高于对照组(P<0.01);3白介素5和eotaxin的mRNA在鼻息肉组织中的表达明显高于正常对照组(P<0.05)。4白介素5和eotaxin的表达与EOS浸润相关(P<0.01),且两种因子之间也呈正相关关系(P<0.05)。结论:从基因水平和蛋白水平均表明在鼻息肉组织中白介素5和eotaxin含量明显升高,而且与组织中EOS浸润呈明显相关性,提示白介素5和eotaxin是鼻息肉病变中重要的EOS趋化因子,并增强该细胞的局部作用,参与了鼻息肉的发病机制,且二者有协同作用。