银屑病病人外周血单核细胞TLR2基因表达及血清ASO和IL-8水平变化

目的观察寻常型银屑病病人外周血单核细胞Toll样受体2（TLR2）mRNA表达及血清抗链球菌溶血素“O”（ASO）和白细胞介素-8（IL-8）水平的变化,探讨其与银屑病发病的关系。方法采用RT—PCR方法检测银屑病病人（银屑病组）外周血单核细胞TLR2 mRNA表达,采用胶乳凝集法检测血清ASO水平,采用ELISA法检测血清IL-8水平。以我院体检健康者30例作为对照（正常对照组）。结果银屑病组TLR2 mRNA表达明显高于正常对照组（t=5．541,P〈0．01）;银屑病组点滴型与斑块型TLR2 mRNA表达比较无显著性差异（t=0．318,P〉0．05）。银屑病组血清ASO水平明显高于正常对照组（x^2=8．604,P〈0．01）;且点滴型病人明显高于斑块型病人（x^2=9．780,P〈0．01）。银屑病组血清IL-8水平显著高于正常对照组（t=28．463,P〈0．01）;点滴型与斑块型病人之间比较无显著性差异（t=0．660,P〉0．05）。点滴型病人ASO阳性者TLR2 mRNA表达水平高于ASO阴性者,差异有显著性（t=2．407,P〈0．05）;银屑病病人外周血TLR2 mRNA表达与IL-8水平呈正相关（r=0．637,P〈0．01）。结论TLR2可能通过识别链球菌等入侵病原微生物启动机体免疫应答,介导细胞因子IL-8等的产生,参与银屑病皮损的发生和发展。     

HBV宫内感染中TLR4表达与细胞因子IFN—γ、IL-4水平研究

目的：研究Toll样受体4（TLR4）与干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）的相关性在乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染的意义。方法：将研究对象分为研究组[HBV表面抗原阳性（HBsAg）孕妇195例,对照组（正常孕妇）38例。采用流式细胞术测定孕妇外周血单核细胞上TLR4表达,酶联免疫吸附法（ELISA）测定孕妇外周血乙型肝炎5项指标和细胞因子IFN-γ、IL-4水平。新生儿脐血测乙型肝炎5项和HBV-DNA。结果：研究组孕妇分娩的新生儿95例有12例宫内感染,宫内感染率为12．63％。新生儿HBV宫内感染组孕妇的TLR4、IFN-γ水平显著低于HBV宫内未感染组及对照组孕妇（Pd0．01）,IL-4水平则显著高于HBV宫内未感染组及对照组孕妇（P〈0．01）。HBV宫内未感染组与对照组相比,TLR4、IFN-γ和IL-4水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。各组孕妇TLR4表达与IFN-γ水平呈高度正相关（P〈0．01）,TLR4和IFN-γ均与IL-4呈高度负相关（P〈0．01）。结论：TLR4既可增强Th1介导的细胞免疫功能,又能调节Th1和Th2细胞因子的失衡,有望成为HBV宫内感染免疫治疗的新靶位。     

慢性乙肝和慢性重型乙肝患者血单核细胞Toll 样受体2的变化

 【目的】 探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2（TLR2）的变化情况及其意义。【方法】 随机选取慢性乙型肝炎患者31例，设定为慢性乙型肝炎组，慢性重型乙型肝炎患者30例设定为慢性乙型肝炎组，健康志愿者30例为正常对照组，用流式细胞仪检测各组外周血单核细胞表面Toll样受体2的表达，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平，荧光定量PCR法检测血清HBV DNA并取对数作为复制水平的指标，总胆红素（TB）和凝血酶原时间（PT）的检测按照本院常规检测。三组均数间的比较采用单因素方差分析和Scheffe 检验进行两两间的比较；两组计量资料间的比较采用Mann-Whitney U秩和检验；两组数据间的相关性分析采用线性相关分析；P<0．05为有统计学意义。【结果】 正常对照组、慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2表达强度和外周血清TNF-α水平均分别为（21．5 ± 2．7）MFI、（39．0 ± 4．1）MFI、（47．7 ± 21．4）MFI和（54 ± 38）ng/L、（164 ± 90）ng/L、（360 ± 140）ng/L，依次逐渐升高，且各组间比较均具有显著性差异；外周血单核细胞TLR2表达水平与血清TNF-α表达水平呈现显著的正相关。慢性重型乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组TB，PT和血清HBV DNA对数值分别为（470 ± 225）μmol/L与（101 ± 131）μmol/L， （35．1 ± 21．1）s与（15．4 ± 2．2）s和5．9 ± 2．0与5．4 ± 1．6；慢性重型乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组比较，TB、PT显著升高而血清HBV DNA对数值无显著性差异；外周血单核细胞TLR2表达水平与TB及PT呈现显著的正相关，但与血清HBV DNA对数值间无显著的相关性。【结论】 TLR2可能与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞PD-L1表达的相关研究

目的：探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血树突状细胞（DCs）的PD—L1表达水平，及其对DCs刺激T细胞增殖的影响。方法：采集22例慢性HBeAg阳性CHB患者、8例急性恢复期乙型肝炎（AHB）患者和10例健康人（NC）的外周血，分离单个核细胞（PBMC）并诱导DCs的增殖和活化。相对荧光定量PCR测定DCs的PD—L1、PD—L2分子mRNA水平，流式细胞术测定DCs表面PD—L1和PD—L2的表达率。同时，测定外周血DCs刺激同种异体反应性T细胞增殖的能力，及抗PD—L1单抗对CHB组DCs刺激功能的影响。结果：体外成功诱导了外周血DCs的增殖和成熟。与NC组相比较，CHB组和AHB组患者外周血DCs内PD—L1的mRNA水平均显著增高（P均〈0．05），但CHB组和AHB组间差异无统计学意义。CHB组患者外周血DCs表面PD—L1表达率较AHB组、NC组均有明显增高（P均〈0．01）。而外周血DCs的PD—L2 mRNA水平及PD—L2在DCs表面的表达率在各实验组之间无明显差异（P均〉0．05）。CHB组外周血DCs刺激T细胞增殖的功能较AHB组和NC组明显降低（P均〈0．01），抗PDL1抗体能显著增强CHB患者DCs刺激T细胞反应的能力。CHB患者外周血DCs表面PD—L1表达率与血清HBV病毒载量成正相关（r=0．34，P=0．007）。结论：外周血DCs表面PDL1表达水平在慢性HBeAg阳性乙肝患者明显升高，抗PD—L1抗体可有效增强CHB患者外周血DCs刺激T细胞增殖反应的能力，表明PD—L1的高表达可能与T细胞免疫反应低下和HBV病毒高复制密切相关。     

急性冠脉综合征外周血单核细胞Toll样受体4、锌指蛋白A20与组织因子的表达及意义

目的：观察急性冠脉综合征（acule coronary syndrome,ACS）患者外周血单核细胞Toll样受体4（Toll—like receptor 4,TLR4）、锌指蛋白A20（zinc finger protein A20,A20）的表达与血浆组织因子、组织因子途径抑制物（tissue factor passway inhibitor,TFPI）水平的变化。方法：选择ACS患者31例和稳定型心绞痛（stable angina pectoris,SAP）患者21例为研究对象。ACS组包括急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）15例和不稳定型心绞痛（unstable angina pectoris,UAP）16例;对照组共入选20例,均为同期住院的非心血管疾病患者。根据病变血管数目将全部冠心病患者进一步分为3组：单支病变组17例;双支病变组15例;多支病变组20例。采用荧光定量PCR检测72例入选对象外周血单核细胞TLR4mRNA、锌指蛋白A20mRNA的表达;采用ELISA法测定血浆组织因子、TFPI质量浓度。结果：①ACS组患者外周血单核细胞TLR4 mRNA及A20mRNA的表达明显高于对照组和SAP组（P〈0．001）,而后两组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。多支病变组TLR4、A20mRNA表达均明显高于单支病变组（P=0．006,P=0．000）。②ACS组血浆组织因子、TFPI水平明显高于SAP和正常对照组（P均〈0．01）;多支病变组血清组织因子含量高于单支病变组（P=0．017）。ACS外周血单核细胞TLR4mRNA表达与A20mRNA的表达呈正相关（r=0．640,P=0．002）,与血浆组织因子浓度亦呈正相关（r=0．716,P=0．000）。结论：冠心病患者冠状动脉病变程度和粥样硬化斑块稳定性与外周血单核细胞TLR4表达水平有关;TLR4炎症信号通路激活可能参与ACS冠脉粥样斑块破裂、促进凝血异常及血栓形成。     

慢性和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体2的变化及其与白细胞介素6的关系

目的探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体2(TLR2)的变化情况及其意义。方法用流式细胞仪检测30例正常对照者、31例慢性乙型肝炎患者和30例慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞表面TOLL样受体2的表达,ELISA法检测上述患者血清白细胞介素6(IL-6)的水平。结果正常对照组、慢性乙型肝炎组和慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2的平均免疫荧光强度和外周血清IL-6水平分别为(21.5±2.7)、(39.0±4.1)、(47.7±21.4)MFI和(11.5±7.2)、(40.8±31.2)、(77.6±33.3)ng/L,自正常对照组到慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2表达强度和外周血清IL-6水平均依次升高,且各组间比较差异均具有显著性(P<0.05);外周血单核细胞TLR2表达水平与血清IL-6表达水平呈显著正相关,相关系数γ=0.769,P<0.05。结论TLR2可能与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

慢性肝病患者HBV复制与IL-18水平变化的意义

目的为探讨慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者HBV复制对血清中细胞因子IL-18水平变化的影响及其临床意义。方法HBV复制应用聚合酶链；IL-18水平应用ELISA等方法对慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者外周血中的HBV—DNA、IL-18水平进行了平行测定，比较HBV复制与慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者IL-18水平的相关关系。结果慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者组的IL-18含量与正常健康对照组比较均明显升高（P〈0．05）。慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者HBV—DNA高复制组（HBV—DNA含量〉10）IL-18含量明显高于HBV—DNA阴性组（P〈0．05）；慢性乙型肝炎与肝炎肝硬化患者组之间IL-18含量比较无显著性差异（P〉0．05）。结论细胞因子IL-18活性在慢性乙型肝炎与肝炎肝硬化发生发展中具有一定作用；慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者HBV复制与血清中细胞因子IL-18水平变化具有一定的相关关系。因此，在临床上慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化患者检测外周血中HBV—DNA、IL-18水平对判断患者病情的发展变化、预后及指导治疗具有一定意义。     

HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者多项病情指标的比较

目的 探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性患者外周血和肝组织多项病情相关指标的差异情况。方法 采集49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者和32例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者，分离外周血单核淋巴细胞并通过流式细胞术分析CD8＋T和CD4＋CD25＋T细胞的水平，并对部分HBeAg阳性和HBeAg阴性患者的肝脏病理分期进行比较。所有病例均经酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV血清标记物水平，荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量，同时进行肝功能检测。结果 慢性HBeAg阳性乙型肝炎组外周血CD8＋T和CD4＋CD25＋T细胞占总T细胞的平均比率均高于HBeAg阴性组患者，但差异无显著性。而慢性HBeAg阳性组外周血CD4＋CD25high T细胞比率明显高于HBeAg阴性组（P〈0．05）。HBeAg阳性组患者血清HBV病毒载量的平均水平与HBeAg阴性组相比有统计学差异（P〈0．05），且HBeAg阳性组患者肝脏的病理炎症程度要低于HBeAg阴性组（P〈0．05）。结论 慢性HBeAg阳性乙型肝炎患者可能由于HBeAg的长期刺激而诱导了机体的免疫耐受，进而引起HBV的长期慢性感染状态，影响治疗与疾病的预后。     

白细胞介素12mRNA在慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中的表达

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞（PBMC）中IL-12mRNA的表达水平,了解其对乙型肝炎病毒和宿主作用的影响。方法：临床51例慢性乙型肝炎患者和13例正常对照者,采用RT-PCR法扩增IL-12mRNA,以β肌动蛋白（β-actin)的表达作为内参照,比较IL-12mRNA的表达水平。结果：慢性乙型肝炎感染者活动期外周血单个核细胞中IL-12mRNA表达明显高于正常对照组（F=11.7,P＜0.01)。慢性乙型肝炎患者IL-12mRNA的表达水平与其肝组织病理的炎症程度有关,中、重度炎症者IL-12P40表达高于轻度炎症者。结论：在慢性乙型肝炎病程发展过程中诱导了一个病毒特异性的TH细胞活动,而IL-12是建立宿主免疫反应、控制乙型肝炎病毒复制的一个重要因子。     

乙型肝炎病毒C基因启动子变异、HBV DNA及细胞因子与原发性肝癌的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒C基因启动子（HBVBCP）变异、HBVDNA及细胞因子与原发性肝癌（HCC）的关系。方法：将176例HBV慢性感染者分为慢性肝病组（156例）和HCC组（20例）。采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术检测HBVBCP区核苷酸（nt）1762碱基A→T和1764碱基G→A联合突变。并检测两组患者的血清HBVDNA含量及细胞因子白细胞介素-10（IL-10）、IL-12、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、γ干扰素（IFN-γ）水平。结果：HBVBCP变异在HCC组的阳性率（70．0％）显著高于慢性肝病组（37．8％，P〈0．01）。HCC组的血清HBVDNA含量、TNF—α水平均显著高于慢性肝病组（P〈0．05，P〈0．01），而血清IL-10、IL-12和IFN-γ水平与慢性肝病组无显著性差异（均P〉0．05）。结论：HBV BCP变异与原发性肝癌关系密切．且血清TNF—α及HBV DNA复制水平在原发性肝癌的发生中可能也起到主要的作用．     

Toll样受体在不同转移能力人乳腺癌细胞株中的差异表达及意义研究

目的探讨Toll样受体在不同转移能力人乳腺癌细胞株中的差异表达及意义。方法分别选取高转移能力人乳腺癌细胞株MDA-MB231与低转移能力人乳腺癌细胞株MCF-7,采用RT-PCR、实时荧光定量PCR及细胞免疫荧光检测测定其蛋白水平及TLR1-TLR10mRNA水平,比较两株细胞TLRs表达情况及差异性。结果人乳腺癌细胞株MCF-7mRNA、MDA-MB-231 mRNA、蛋白水平均存在TLRs广泛表达;两种细胞株TLR4、TLR6、TLR8及TLR9 m RNA水平表达存在明显的差异性(P0.05);MDA-MB-231的TLR4、TLR6、TLR7及TLR5水平明显高于MCF-7(P0.05)。结论 TLRs在不同转移能力人乳腺癌细胞株中表达广泛但水平存在差异,其中TLR4受体差异表现最为明显,考虑TLRs表达差异与乳腺癌细胞转移能力相关。     

Toll样受体4、9mRNA在带状疱疹患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的研究带状疱疹患者外周血单个核细胞中Toll样受体TLR4、TLR9mRNA的表达情况,并探讨其与带状疱疹的发病关系。方法采用实时荧光定量PCR方法检测30例带状疱疹患者和20例正常人的外周血单一核细胞中Toll受体TLR4、TLR9mRNA的表达水平。结果带状疱疹患者与正常人对照,其外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,具有显著的统计学差异（P〈0.05）。结论带状疱疹患者外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,说明在带状疱疹患者的发病过程中,TLR样受体4、9可能参与了水痘-带状疱疹病毒的识别及抗病毒免疫。     

Expression of Toil-like Receptor 4 in Neonatal Cord Blood Mononuclear Cells in Patients with Preeclampsia

The expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) in neonatal cord blood mononuclear cells (MNCs) and serum TNF-α were investigated in order to explore the roles of TLR4 in the pathogenesis ofpreeclampsia. The study enrolled 27 patients suffering from preeclampsia (experimental group)and 21 normal pregnancy patients (control group). After MNCs were separated, the expression of TLR4 mRNA and protein was detected by using real-time quantitative PCR and Western blotting respectively, and the expression of TNF-α by using ELISA. The results showed the TLR4 mRNA level in cord blood MNCs (2-△CT: 0.07±0.17), TLR4 protein expression level (absorbance ratio:0.81%±0.15%) and TNF-a level (9.5±1.73 pg/mL) were all increased in experimental group as compared with control group with the differences being statistically significant (P＜0.05). There was a positive correlation between the expression of TLR4 mRNA and TNF-α in both experimental group and control group (r=0.54 and 0.53, respectively, P＜0.05). It was concluded that TLR4 expression in the experimental group of cord blood MNCs was increased and there was a positive correlation between the expression of TLR4 mRNA and TNF-α in both groups. TLR4-mediated release of inflammatory cytokines may be one of the important reasons leading to preeclampsia.     

荧光定量分型PCR法与直接测序法检测HBV-DNA水平的应用价值比较

目的比较荧光定量分型PCR法与直接测序法检测HBV-DNA水平的应用价值。方法选取该院2012年1月—2013年12月收治的126例符合入选标准的HBV患者,分别采用荧光定量分型PCR法与直接测序法检测HBV-DNA水平,对HBV-DNA基因分型结果进行比较分析。结果 126份样本只检测出3种基因分型（B型、C型、B/C混合型）,其中B型占明显优势。荧光定量分型PCR法B/C混合型检出率明显高于直接测序法（P〈0.001）;一致性检验表明两种检测方法的一致性较好（Kappa〉0.75）;TA克隆结果与荧光定量分型PCR法一致。结论荧光定量分型PCR法检测HBV-DNA水平应用价值较直接测序法高,值得临床推广应用。     

脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4基因的表达及相关性

目的 探讨脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达变化及其相互关系.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制成脓毒症大鼠模型.将50只Wistar大鼠分成正常对照组(10只)和CLP组(40只),CLP组分别于CLP术后6、12、18、24 h各处死10只大鼠,应用实时聚合酶链反应检测肝脏组织HMGB1和TLR4 mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肝脏组织存在微量的HMGB1、TLR4 mRNA表达.脓毒症组大鼠CLP术后各时间点的HMGB1、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(P值均<0.01),CPL术后6 h HMGB1、TLR4 mRNA表达开始升高,至12 h达峰值,18 h后开始下降,各时间点间HMGB1、TLR4 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05).直线相关分析表明,脓毒症大鼠肝脏组织HMGB1 mRNA与TLR4 mRNA的表达呈正相关(r=0.90,P=0.04).结论 HMGB1可能通过TLR4进一步激活炎性细胞,引起下游炎性因子释放的瀑布效应.     

Expression of toll-like receptor 9 in peripheral blood mononuclear cells from patients with different hepatitis B and C viral loads

The aim of the present study was to investigate the expression of toll-like receptors （TLR） 9 in peripheral blood mononuclear cells （PBMC） of patients with chronic hepatitis B and C with different virus copies. The study group included 90 patients （60 with chronic hepatitis B, and 30 with chronic hepatitis C）, and 20 healthy people served as control group. The protein and mRNA levels of TLR9 were detected by using flow cytometry and real-time PCR. The serum viral copies of HBV and HCV were measured in all patients, and the correlation between HBV-DNA copies or HCV-RNA copies and the TLR9 expression was analyzed. Our results demonstrated that HBV or HCV infection led to a decreased expression of TLR9 mRNA and protein compared to the control group （P〈0.05）. The TLR9 protein and mRNA levels were negatively correlated with serum viral copies of HBV and HCV （r=-0.632, r=-0.909, P〈0.01）. It was concluded that TLR9 mRNA and protein are down-regulated in PBMC of HBV-infected or HCV-infected patients, and they are negatively correlated with serum viral copies and play an important role in detecting viral replication of HBV and HCV.     

组胺对肺上皮细胞Toll样受体表达的上调作用

目的: 观察组胺对肺上皮细胞中Toll样受体(TLR)表达的影响. 方法: 体外培养人肺上皮细胞株A549,用RT-PCR和实时定量PCR检测静息状态或组胺作用下的A549细胞中TLR1～TLR10 mRNA的变化,并用流式细胞术进一步确定组胺对TLR3表达的调节作用. 结果: A549细胞有TLR1～TLR10 mRNA的组成型表达,组胺对TLR3 mRNA和蛋白的上调作用具有时间和剂量依赖性,并且H1受体阻断剂可抑制组胺对TLR3的上调作用. 结论: 组胺可上调肺上皮细胞中TLR3的表达,提示当呼吸道存在变态反应性病变时,增多的组胺可能会增加肺上皮细胞对病毒感染的敏感性.     

Toll样受体7在人胃癌细胞株中的表达及其激动剂诱导SGC-7901细胞发生凋亡的实验研究

目的探讨Toll 样受体7（TLR7）在不同人胃癌细胞株中的表达及其激动剂咪喹莫特对SGC-7901 细胞增殖和凋亡的影
响。方法Western blot法检测3种胃癌细胞株（SGC-7901、HGC-27和MKN-28）中TLR7蛋白表达差异,选取高表达TLR7的胃
癌细胞作为主要研究对象;MTT法考察不同浓度咪喹莫特处理TLR7高表达胃癌细胞12~72 h后细胞增殖活性的改变;流式细
胞仪AnnexinV-FITC/PI双染色法观察100 μg/ml咪喹莫特干预12及24 h后细胞早期凋亡比率的改变;透射电镜下观察细胞凋
亡形态学改变;实时定量PCR法分析Bcl-2及Bax mRNA在咪喹莫特作用前后表达差异。结果TLR7蛋白在SGC-7901中表
达水平高于其他两种胃癌细胞,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并且呈现出浓度及时间依赖性;100 μg/ml
咪喹莫特干预24 h 后SGC-7901 细胞早期凋亡比率明显上升,透射电镜下可观察到典型的凋亡形态学改变;咪喹莫特处理后
SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA表达呈浓度依赖性下降,Bax mRNA呈浓度依赖性上升。结论TLR7在3种不同分化程度的胃癌
细胞中均有表达,其激动剂咪喹莫特能够明显抑制SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡。
     

卵巢癌患者外周血单个核细胞Toll样受体2的表达及其诱导的IL-10表达

目的:观察Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)在卵巢癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的表达及其诱导IL-10的表达水平,初步探索TLR2在卵巢癌发生发展中的作用机制?方法:收集20例卵巢癌患者?20例妇科良性疾病患者及20例同期健康体检女性EDTA抗凝外周全血,采用荧光定量PCR技术检测3组PBMC中TLR2的表达水平,并比较3组表达差异情况?TLR1?TLR2和TLR6相应配体刺激PBMC,细胞中细胞因子IL-10表达水平采用荧光定量PCR技术进行检测;流式细胞技术(FACS)检测各组IL-10分泌水平?结果:各组PBMC中TLR2均有表达;卵巢癌组PBMC 中TLR2表达量显著高于良性疾病组和健康对照组(P < 0.05),良性疾病组TLR2表达水平与健康对照组间无显著性差异;各组PBMC经TLR2的配体HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-10 mRNA表达明显增强,分别为良性疾病组和健康对照组的2.25?2.33倍,妇科良性疾病组IL-10 mRNA表达水平与健康对照组间无显著差异;TLR6配体FSL-1刺激后,卵巢癌组IL-10 mRNA表达水平分别为良性疾病组和健康对照组的1.95?2.16倍,差异具有统计学意义(P < 0.05),而良性疾病组与健康对照组间无显著差异?FACS结果显示各组PBMC经TLR1的配体Pam3CSK4刺激24 h后,卵巢癌组?良性疾病组及健康对照组IL-10分泌水平中位值(M)分别为46.70?61.53?31.11 pg/ml,差异无统计学意义;经TLR2配体HKLM刺激24 h后,卵巢癌组IL-10分泌水平(M = 150.46 pg/ml)显著高于良性疾病组(M = 38.86 pg/ml)及健康对照组(M = 44.93 pg/ml),差异有统计学意义(P < 0.05),良性疾病组与健康对照组间无显著性改变;TLR6配体FSL-1刺激24 h后,卵巢癌组?良性疾病组及健康对照组IL-10分泌水平中位值分别为20.20?31.12?35.48 pg/ml,3组间无显著差异?结论:卵巢癌患者PBMC中TLR2表达水平显著增高,经其介导的细胞因子IL-10表达水平的改变可能与卵巢癌的免疫抑制相关,在卵巢癌的肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用?     

健脾养血汤对特异性皮炎小鼠模型中Toll样受体的表达影响及意义

目的:观察健脾养血汤剂对特异性皮炎小鼠模型皮肤炎症症状和Toll样受体表达的影响。方法:通过外用2,4-二硝基氟苯(DNFB)丙酮制备特异性皮炎小鼠模型,小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=10)和健脾养血汤剂治疗组(n=10)。造模后10d各组皮炎症状打分,使用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组皮肤组织中TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组和健脾养血汤治疗组皮炎症状显著,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA均明显上升,表达显著增高(P<0.05)。与模型组比较,健脾养血汤治疗组皮炎症状显著减轻,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达均降低(P<0.05)。结论:健脾养血汤剂可通过抑制TLR2、TLR3、TLR4、TLR9表达,改善特异性皮炎临床症状。