T淋巴细胞亚群异常与特发性血小板减少性紫癜的关系

目的 通过检测T淋巴细胞亚群及其凋亡，初步探讨T淋巴细胞亚群异常在特发性减少性紫癜（ITP）发病机制中的作用。方法 采用流式细胞术对ITP患者及正常对照组的外周血淋巴细胞亚群进行检测；DNA琼脂糖凝胶电泳检测T淋巴细胞的凋亡。结栗ITP患者CD3^＋、CD4^＋和CD4^＋CD25^＋T细胞比例均显著低于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），而CD8^＋T细胞和CD4^＋T细胞表面Fas表达均较正常组增加（P〈0．01）；T淋巴细胞凋亡敏感性增加。结论 ITP患者外周血T淋巴细胞亚群异常，T细胞免疫调控亚群（CD4^＋CD25^＋）凋亡增多，对自身反应性T细胞亚群免疫下调作用降低，破坏自身免疫耐受，在ITP的发病中起重要作用。     

多发性硬化患者外周血T淋巴细胞凋亡和Fas的表达

目的 探讨多发性硬化（MS）患者外周血T淋巴细胞凋亡和Fas表达及其与复发缓解病程的关系。方法 42例复发缓解型MS患者，根据其病程分为复发期组20例和缓解期组22例，另外选择20例健康人作为对照组，采用五色流式细胞术（FCM）检测以上三组外周血T淋巴细胞凋亡和Fas表达的情况。结果三组间外周血T淋巴细胞Fas的表达无明显差别。复发期MS患者凋亡的CD4^＋T淋巴细胞（由AV染色标记）和Fas相关的CD4^＋T淋巴细胞凋亡（由AV^＋CD95^＋／CD4^＋标记）明显低于缓解期MS患者和对照组（均P〈0．05）。复发期MS患者和缓解期MS患者凋亡的CD8^＋T淋巴细胞（由AV染色标记）和Fas相关的CD8^＋T淋巴细胞凋亡（由AV^＋CD95^＋／CD8^＋标记）都明显低于对照组（均P〈0．05），但复发期MS患者和缓解期MS患者之间无明显差异（P〉0．05）。结论T 淋巴细胞的凋亡和Fas的表达与复发缓解型MS患者的发病和病情的加重有关，MS患者对Fas／FasL介导凋亡的抵抗可能参与了MS发病的调节机制。     

T淋巴细胞亚群异常与特发性血小板减少性紫癜的关系

目的通过检测T淋巴细胞亚群及其凋亡,初步探讨T淋巴细胞亚群异常在特发性减少性紫癜(ITP)发病机制中的作用.方法采用流式细胞术对ITP患者及正常对照组的外周血淋巴细胞亚群进行检测;DNA琼脂糖凝胶电泳检测T淋巴细胞的凋亡.结果 ITP患者CD+3、CD+4和CD+4CD+25T细胞比例均显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01),而CD+8T细胞和CD+4T细胞表面Fas 表达均较正常组增加(P<0.01);T淋巴细胞凋亡敏感性增加.结论 ITP患者外周血T淋巴细胞亚群异常,T细胞免疫调控亚群(CD+4CD+25)凋亡增多,对自身反应性T细胞亚群免疫下调作用降低,破坏自身免疫耐受,在ITP的发病中起重要作用.     

急性ITP患者T细胞亚群及血小板凋亡相关蛋白的检测

目的 检测凋亡相关蛋白Fas、FasL在急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿T细胞亚群及血小板中的表达，分析其在ITP发病机制中的作用。方法 收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的CD30 mAb和Cy5标记的CD4、CD8 mAb及FITC标记的Fas、FasL mAb作三色流式细胞术，分析ITP患儿Th／Tc、Thl／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化；以FITC标记的Fas、FasL mAb作单色流武细胞术，分析ITP患儿血小板Fas、FasL表达的变化。结果 与健康儿童相比，ITP患儿Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均显著性升高（P〈O．05）；同时，111P患儿血小板Fas的表达显著性升高（P〈0．05）而FasL的表达无明显变化（P〉0.05）。结论 ITP患儿存在免疫功能失调，T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP免疫病理机制有关。     

流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜患者血小板相关免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群

目的：应用流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血中的血小板相关免疫球蛋白（PAIg）水平和T淋巴细胞亚群分布情况。方法：应用三色免疫荧光多参数流式细胞术检测ITP患者（n=30）和对照者（n=30）外周血PAIg水平和T淋巴细胞免疫表型（CD3^＋、CD3^＋CD4^＋及CD3^＋CD8^＋）。结果：ITP患者外周血PAIgG、PAIgM及PAIgA的平均荧光强度均显著高于正常对照组（P〈0．01）；与对照组比较，ITP患者外周血CI）3^＋、CD3^＋CD4^＋亚群明显减低（P〈0．05），CD3^CD8^＋亚群明显升高（P〈0．05），而CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值显著减低（P〈0．01）。结论：ITP患者PAIg水平显著增高，且存在T淋巴细胞亚群分布漂移。此方法简便易行，有助于ITP的诊断．     

Fas／FasL 在原发免疫性血小板减少症发病机制中的作用研究

目的：探讨Fas及FasL系统在成年原发免疫性血小板减少症（IT P）发病机制中的作用。方法收集成年初诊IT P患者及健康成年人外周抗凝静脉血。采用流式细胞术检测ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas及FasL的表达率、血小板表面Fas及FasL的表达率。结果与健康对照组相比,ITP组Th、Th1、Th2、Tc、Tc1、Tc2细胞表面Fas及FasL的表达率均明显升高（P＜0．05）;同时ITP组血小板表面 Fas的表达率明显升高（P＜0．05）,而血小板表面 FasL 的表达无明显变化（P＞0．05）。结论 ITP患者T细胞亚群及血小板表面Fas及FasL表达的异常,可能与ITP发病机制密切相关。     

Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群表达的研究

目的探讨Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜（rrP）患者T细胞亚群及血小板中的表达状况及其在ITP发病机制中的作用。方法收集ITP患者及健康人群外周抗凝静脉血,分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的anti-CRTH2mAb和cy5标记的anti-CD4、CD8mAb及FTTC标记的anti-Fas、FasL mAb做三色流式细胞术,分析ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化;以FITC标记的anti-Fas、FasL mAb作单色流式细胞术,分析ITP患者血小板Fas、FasL表达的变化。结果与健康人群相比,ITP患者外周血Th、Th1、Th2细胞百分率均明显下降（P〈0．05）,Tc、Tc1、Tc2细胞百分率均无明显变化（P〉0．05）;Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均明显升高（P〈0．05）;同时,111P患者血小板Fas的表达明显升高（P〈0．05）,而FasL的表达无明显变化（P〉0．05）。结论ITP患者存在免疫功能失调,T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP患者免疫病理机制有关。     

Fas-FasL信号途径在ITP患者血小板凋亡中的作用研究

目的探讨Fas-FasL信号途径在原发性免疫性血小板减少症（ITP）患者血小板异常凋亡中的变化及可能的作用机制。方法选取ITP患者32例为ITP组,另择行健康体检者32例为正常对照组。采用流式细胞术检测ITP组患者（用药治疗前）与正常对照组受检者外周血PLT表面Fas的表达,调节性T细胞（Treg细胞）比率、表面Fas配体（FasL）的表达,并进行比较,分析ITP组患者以上指标的相关性。结果ITP组患者CD4+FasL+细胞比率、CD41+Fas+血小板比率均高于正常对照组受检者（均P＜0.05）,PTL与Treg细胞比率均低于正常对照组受检者（均P＜0.05）。ITP组患者PLT与CD4+FasL+细胞比率、CD41+Fas+血小板比率均呈负相关（均P＜0.05）,与Treg细胞比率呈正相关（P＜0.05）,Treg细胞比率与CD41+Fas+血小板比率呈负相关（P＜0.05）。结论血小板高表达Fas可与激活的T细胞表面FasL结合,T细胞可通过Fas-FasL途径直接介导血小板凋亡。     

系统性红斑狼疮患者血清IL-10与T细胞凋亡的关系研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清IL-10与T细胞凋亡的关系.方法:采用ABC-ELISA法检测SLE患者血清IL-10含量;三色荧光流式细胞术检测患者外周血中CD3 、CD4 、CD8 T细胞亚群及其Fas、FasL的表达和早期凋亡,并分析其与血清IL-10水平的相关性.结果:SLE患者血清IL-10水平明显升高,并与SLE活动指数(SLEDAI)和血清中抗ds-DNA抗体呈正相关;外周血中T细胞CD4 亚群比例下降、CD4 /CD8 的比值降低,CD3 、CD4 、CD8 T细胞Fas、FasL的表达均增高,T细胞尤其是CD4 亚群凋亡增加,以上变化以活动性SLE更为显著;SLE患者血清IL-10水平与CD4 /CD8 细胞比值呈负相关,与T细胞FasL表达异常增加和CD4 T细胞亚群凋亡显著增多呈正相关.结论:SLE异常增高的IL-10促使T细胞高表达FasL,诱导CD4 T细胞凋亡,参与了SLE的病理进程.     

骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡与TNF—α和Fas／FasL系统关系的研究

目的：探讨TNF—α和Fas／FasL的表达及骨髓细胞凋亡与骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）发生发展的关系。方法：采用ELISA法检测MDS患者骨髓单个核细胞培养上清液中TNF-α浓度，采用流式细胞术测定骨髓CD34^＋细胞Fas、FasL的表达率和细胞凋亡率。结果：各型MDS惠者骨髓单个核细胞培养上清液中TNF-α浓度和CD34^＋细胞Fas、FasL的表达率均明显高于正常对照组（P〈0．01）。其中RA／RAS组的TNF-α浓度和CD34^＋细胞Fas^＋表达率均明显高于RAEB和RAEB-t组（P〈0.001），而RAEB与RAE-t组组间无明显差异（P值分别为0.115和0．239）；RAEB和RAEBt组细胞的CD34^＋ FasL^＋表达率明显高于RA／RAS组（P值分别为0．001和0．010）。RA／RAS和RAEB组的细胞凋亡率均高于对照组（P值均为0.000），而RAE-t组的细胞凋亡率与对照组相近（P=0.216）。各型MDS患者TNF-α浓度与CD34^＋Fas^＋表达率呈正相关（r=0．570，P=0．012）。而CD34^＋细胞凋亡率与TNF-α浓度或CD34^＋Fas^＋表达率之间均无直线相关关系（P值分别为0．103和0．091）。结论：MDS患者骨髓细胞的调亡受多因素的调节．TNF-α与Fas／FasL系统介导的凋亡以及机体对其调控的失常参与了MDS骨髓无效造血的病理生理过程。     

老年慢性特发性血小板减少性紫癜患者淋巴细胞凋亡蛋白的表达

目的 从细胞凋亡的角度探讨老年慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制。方法 用流式细胞仪检测了8例老年人慢性ITP患者治疗前后T淋巴细胞(CD3 )、B淋巴细胞(CD19 )Fas蛋白和Fas-L蛋白的表达。结果 治疗前T淋巴细胞的Fas蛋白表达明显低于正常(P<0.01),Fas-L蛋白表达明显高于正常(P<0.01);B淋巴细胞的Fas和Fas-L蛋白表达与正常对照相比差异无显著性意义。经治疗血小板恢复正常的患者T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调和Fas-L蛋白表达下调,与治疗前相比差异有极显著性意义,与正常对照相比差异无显著性意义。结论 治疗前老年慢性ITP患者体内Fas/Fas-L途径介导的T淋巴细胞凋亡异常,经治疗后T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调,有助于抗原活化的B淋巴细胞的凋亡。     

丁型肝炎重型化机制中Fas/FasL的作用

探讨Ｆａｓ／ＦａｓＬ途径介导的肝细胞凋亡在丁型肝炎重化机制中的作用。方法：采用兔疫组化双重染色和连续切征技术,检测４８例丁型肝炎病人肝组织丁型肝炎病毒抗原ＨＤＡｇ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达,以５４例乙型肝炎作疾病对照,结果：Ｆａｓ以肝细胞浆表达与为主,ＨＤＡｇ以核浆型表达为主,两抗原表达及分布有相关性,ＦａｓＬ主要表达在浸润淋巴细胞浆,肝细胞核,与ＨＤＡｇ表达及分布不全一致,丁型肝炎Ｆａｓ、ＦａｓＬ检     

肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡

目的：研究肝癌细胞表面Fas/FasL系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。方法：采用流式细胞术和RT-PCR检测肝癌细胞株HepG2、Hep3B和PLC/PRF/5Fas和FasL的表达;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞FasL表达及FasL表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株Jurkat细胞凋亡的作用。结果：HepG2、Hep3B和PLC/PRF/5肝癌细胞株Fas表达均阴性;HepG2 FasL mRNA的表达为阴性,而Hep3B 和PLC/PRF/5FasL mRNA的表达均阳性。经争光霉素（0.6mg/ml）诱导后,上述肝癌细胞Fas的表达无明显变化,而其FasL的表达却增加,与Jurkat细胞混合孵育则触发后发生显性调亡。结论：肝癌细胞可能一方面降低或不表达Fas而对Fas介导的凋亡耐受,另一方面又增强自身FasL的表达以诱发与之接触的T淋巴细胞凋亡,在完成免疫逃避的同时,可对周围的T细胞实施反攻击。     

桥本甲状腺炎组织中细胞凋亡相关蛋白表达的意义

目的　探讨细胞凋亡相关蛋白在桥本甲状腺炎（HT）发病机制及病理变化中的作用及意义。方法　采用TUNEL法检测HT及非毒性甲状腺肿（NTG）患者各17例甲状腺标本中的细胞凋亡水平,并用免疫组织化学方法检测凋亡相关蛋白Fas,FasL,Bcl-2和Bax的表达及分布。结果　HT组细胞凋亡百分率(32.5%±12.3%)比NTG组(1.3%±0.7%)显著增高（P<0.01）,其甲状腺细胞Fas、FasL、Bcl-2和Bax染色阳性率(88%～94%),也显著高于对照组(35%～47%,P<0.01）。HT中凋亡细胞及Fas、FasL和Bax染色强阳性甲状腺细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近,Bcl-2染色强阳性细胞则多分布于远离浸润淋巴滤泡的区域。浸润淋巴细胞中Fas,FasL,Bcl-2和Bax染色均较弱。结论　HT中有较高水平的细胞凋亡,凋亡相关蛋白Fas,FasL,Bcl-2和Bax在甲状腺细胞中呈特征性分布的高表达,而在浸润淋巴细胞中表达较少,这些改变与甲状腺滤泡萎缩、破坏及弥漫性淋巴细胞浸润有关。     

子宫内膜异位症在位及异位子宫内膜Fas、FasL的表达

目的：检测子宫内膜异位症（EM）患者在位及异位内膜中Fas，FasL蛋白的表达， 探讨其在子宫内膜异位症免疫发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学（SP）法分别测定了EM患者在位和异位内膜及正常对照子宫内膜中Fas，FasL蛋白的表达。 结果：1、EM患者在位内膜及正常对照子宫内膜中Fas及FasL的表达均呈周期性改变，增生期呈低水平表达，分泌期表达增高， 两组间同期别比较增生期无显著差异，分泌期EM患者在位内膜的Fas及FasL表达均低于正常对照组；2、异位子宫内膜中的Fas及FasL的表达都呈现低水平或不表达。结论：子宫内膜异位种植可能与Fas及FasL的表达障碍有关。