HCN2阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛内的分布

目的探讨超级化激活环核苷酸调控的阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 2,HCN2)阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛的分布。方法成年昆明小鼠的胃肠道,包括胃、小肠、结肠,制作全层铺片,免疫细胞化学染色HCN2阳性细胞、胆碱能神经及Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)。结果成年小鼠胃肠道肌间神经丛的HCN2阳性细胞成簇紧密排列,多数阳性细胞为DogielⅡ型神经元,阳性产物分布在细胞质和细胞膜,每个神经节内可见数个至数十个阳性细胞;神经突起虽可见HCN2阳性产物,但主要存在于较粗的突起。HCN2阳性神经元分布密度在胃肠道各段存在较大差异(P<0.05):以结肠密度最高,胃次之,小肠略低。利用胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶(ChAT)和ICCs的标志物(c-kit蛋白)分别与HCN2通道进行双重免疫染色,可见HCN2存在于胆碱能神经元,未见HCN2存在于ICCs的胞体,ICCs的突起与HCN2阳性神经元距离很近。结论HCN2离子通道广泛表达于肌间神经丛,主要表达于胆碱能神...     

婴儿空肠肌间神经丛及神经节细胞的形态学观察

目的：用镀银染色铺片法对婴儿空肠肌间神经丛进行了形态学观察,为空肠的ENS发生以及生理、病理学研究提供形态学依据。方法：大体解剖新鲜婴尸,取空肠应用镀银染色铺片法观察。结果：婴儿空肠肌间神经丛由神经纤维束和神经节组成,呈与肠管共同始终的连续网格状结构,神经节细胞形态呈高度的异质性,神经细胞平均密度为878个／cm^2。结论：婴儿空肠肌间神经元数低于成人和其他实验动物。婴儿空肠肌间神经丛的形态和其他实验动物及成人基本相似。但从神经细胞的形态来看,则存在明显的异质性,空肠粘膜内神经元是ENS中粘膜神经丛的一部分。     

多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛氮能神经元的定位

目的研究5种多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元的分布。方法本文主要采用冰冻切片和全层铺片的免疫荧光组织化学方法观察胃体肌间神经丛中多巴胺受体的分布,以及与一氧化氮能神经元的共定位情况。结果 5种多巴胺受体亚型的免疫荧光和一氧化氮合酶的免疫荧光在胃体肌间神经丛均有分布,而且在一氧化氮合酶免疫阳性的神经元上存在有多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5的免疫阳性,而D_4没有明显的免疫阳性表达。结论多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5分布在胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元上,可能通过调节一氧化氮的合成和释放进而调节胃体平滑肌的运动。     

双重染色显示Cajal细胞和NOS神经在胎儿小肠肌间神经丛的分布

目的研究Cajal细胞与NOS神经在胎儿小肠肌间神经丛的分布模式.方法采用18～26周龄胎儿小肠全层铺片和冰冻切片的NADPH-黄递酶(NADPH-d)组织化学法和c-kit免疫细胞化学双重染色.结果胎儿肌间神经丛周围Cajal细胞体为梭形或卵圆形,核周胞质较少,常见2～3个细长的突起,彼此间形成完整的独立细胞网络.NOS阳性神经广泛分布于小肠的肌间神经丛和环肌内,其中,以肌间神经丛最为丰富,构成神经节、节间束及三级神经纤维网的主要神经成分.肌间神经节内的NOS阳性神经元轮廓较清晰,多数为DogielⅠ型神经元,成簇密集分布,每个神经节内含有数个至数10个NOS阳性神经元.NADPH-d和c-kit免疫细胞化学双重染色未发现NOS阳性神经和Cajal细胞有共存现象,但NOS阳性神经纤维的走行与Cajal细胞及突起间的距离较近.结论本研究结果提示在胚胎发育中晚期,肌间神经丛的抑制性神经递质NO可能已具备对Cajal细胞及胃肠平滑肌调控的结构基础.     

大黄对慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛胆碱能神经的影响

目的 研究大黄治疗慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能(AchE) 神经的变化,从神经病理学角度初步探讨大黄治疗慢传输型便秘的机制.方法 建立大鼠慢传输型便秘模型,大黄治疗后利用铺片技术制作结肠肌间神经丛标本,采用组织化学技术行结肠肌间神经丛内AchE神经染色.结果 结肠肌间神经丛铺片组化染色发现便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能神经分布较稀疏,数量较少,但胞体增大,染色加深.大黄治疗组大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,胆碱能阳性神经元较多(阳性细胞数25.71±5.36与便秘组14.32±4.60,P<0.01;核浆比例0.71±0.21与便秘组0.58±0.19,P<0.01).结论 慢传输型便秘大鼠结肠传输功能障碍与肠壁内胆碱能的病理改变和(或) 功能障碍有关.大黄使便秘大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,可能是其调节结肠功能、治疗慢传输型便秘的机制之一.     

胃—幽门括约肌—十二指肠整封标本的制作

器官组织形态学研究常依赖于切片技术 ,但胃肠道由于其壁层组织具有特异型器官结构性 ,除了常规切片方法以外 ,可采用撕片方法制作整封标本 ,完整显示壁内神经丛及其神经元 (包括肌间神经丛和粘膜下神经丛 )及丛内与丛间的联系。如外丛肌撕片整封标本保存肠肌间神经丛铺片技术已成为我们研究肠神经系统 (ｅｎｔｅｒｉｃｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ ,ＥＮＳ)的重要方法。1　材料与方法成年大鼠 ,水合氯醛腹腔麻醉 ,暴露心脏 ,经升主动脉灌流 ,温生理盐水约 10 0ｍｌ灌流冲洗血液 ,再以冷的 4 0ｇ/Ｌ多聚甲醛———磷酸缓冲液灌注约 1ｈ ,剖腹…     

CRF1 IR神经元在豚鼠胃肠道神经系统中的分布

【目的】研究促皮质激素释放激素受体1免疫阳性(corticotrophin releasing factor receptor 1 immunoreac-tive,CRF1 IR)神经元在豚鼠胃肠道神经系统的分布及CRF1与其他神经元标志物的共存情况。【方法】RT-PCR、Western blot检测CRF1在肠道神经系统中的表达,免疫荧光组织化学染色或双重染色观察细胞形态和分布。【结果】小肠黏膜下层和肠肌层神经丛均有CRF1表达;CRF1 IR神经元分布于从胃、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠和远端结肠的黏膜下神经丛及肠肌层神经丛;细胞形态为Dogiel Ⅱ型;CRF1与Calbindin、P物质、NF200可共同表达于同一神经元。【结论】CRF1 IR神经元可能是肠道神经系统的内在初级感觉神经元,参与应激时胃肠道功能的调节。     

大鼠和小鼠阴道组织神经血管层的全层铺片技术探索

目的 通过不同实验条件建立一种稳定、可重复的用于显示阴道神经与血管的全层铺片技术。方法 雌性SD大鼠和ICR小鼠各20只,麻醉后分离出阴道组织,分别用中性缓冲福尔马林和丙酮固定,每种固定液分别固定24 h和48 h后,在显微镜下逐层剥离出阴道肌层制作铺片,观察不同固定方式制作铺片的脱片率,并行HE染色、Masson染色、嗜银染色和免疫组化观察组织的形态、肌纤维、血管和神经组织。结果 同种固定液固定24 h和48 h在制作铺片的难易程度上无明显差别。不同的固定液和不同的固定时间在是否容易脱片方面无显著差异(Fisher确切概率法,P_小鼠=0.893和P_大鼠=0.429)。中性缓冲福尔马林固定后组织较韧,更易剥离各层组织,而丙酮固定的组织易碎,组织不完整。不同的固定方法对HE染色、Masson染色和嗜银染色结果影响不大,但对免疫组化染色会产生较大影响,即中性缓冲福尔马林固定使抗体更容易结合。结论 两种固定液都能很好地对阴道组织起固定作用,中性缓冲福尔马林固定液用于制作阴道肌层全层铺片优于丙酮,该铺片技术能很好地显示阴道组织中的肌肉、神经与血管组织...     

重症急性胰腺炎大鼠胃窦肌间神经丛一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的 观察胃窦肌间神经丛一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元变化与重症急性胰腺炎(SAP)的关系.方法 SD大鼠采用逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠方法 制作SAP模型,进行胃排空率测定及双重免疫荧光染色法对胃窦肌间神经丛进行染色及计数,并对胰腺进行评分.结果 SAP大鼠胃排空率减低(P<0.01),胃窦肌间神经丛NOS阳性神经元数目增多(P<0.05).结论 SAP大鼠胃窦肌间神经丛NOS阳性神经元增多,推测胃窦肌间神经丛NOS阳性神经元参与了肠神经系统的重塑.     

人胚胎发育中期结肠神经系统的研究

目的：观察人胚胎发育中期（4个月－6个月）结肠神经系统的发育。方法：人胚胎结肠切片和铺片，用抗PGP9．5和抗S－100蛋白的PAP免疫组织化学以及NADPHd酶组织化学。结果：①中期结肠肌间神经明显增多，PGP9．5阳性反应神经弥散分布，S－100蛋白反应阳性神经呈竹篓样分布。粘膜下层中阳性神经逐渐分化，形成粘膜下深丛和浅丛。②氮能神经弥散分布于整个结肠壁肌间，环行肌层中阳性神经纤维与平滑肌纤维相平行。在粘膜下深层中偶见氮能核周体。③铺片可见，反应阳性神经纤维形成复杂的肌间神经网络。结论：中期是结肠神经系统发育的重要时期。     

Improvement of mount preparations in showing myenteric nerve plexus from intestines of mice

Objective: The whole mount preparations of digestive tract is an effective experimental way to study the appearance and distribution of nerve plexus in digestive tract. Although myentric nerve plexus preparations technique was reported very early. But we have done experiment over and over during our research work in order to improve this traditional method and to meet the needs of our research work, we made some progresses in regular mount preparations after many experiments, which helped offer better situation in observing myentric nerve plexus. Methods: Five healthy male adult Kunming mice (20 -30 g in weight) were used in this study. After intraperitoneal injection of muscle relaxant,with dislocation of cervical vertebra method, the abdominal cavity was exposed through abdominal median incision. After several steps of mount preparations the mucous layer and longitudinal muscle layer mount preparations with myentric nerve plexus were stripped under anatomical microscope. Immunohistochemical staining was also used in our study.Results: The mount preparation samples with myentric nerve plexus from intestines of mice showed positive SP immunoreaction. The positive cells were dark brown. Many of the cytons appeared circular and oval, while some appeared triangular or irregular. Conclusion: Our improved method is really a good method to show enteric nerve plexus. The method has many advantages and is particularly applied to small animals such as Kunming mice and BALB/c mice,weighing from 20 g to 30 g.     

舌下神经核神经元内白细胞介素2受体、孕激素受体和谷氨酸受体共存

为了探讨一个神经元同时受到免疫，神经内分泌物质调节的可能性，在大鼠舌下神经核的两张相邻切片上一张切片用PAP法与SABC法相结合，显示白细胞介素2受体（IL-2R0和孕激素受体（PR），另一张用SABC法显示代谢型谷氨酸5亚型受体（mGluR5)。结果表明，在舌下神经核的IL-2R/PR双标切片上，可见3类阳性反应细胞，IL-2R免疫反应单标细胞，PR免疫反应单标细胞，IL-2R/PR免疫反应双标细胞，后者约占舌下神经核阳性反应细胞的45%，在另一张相邻的显示mGluR5的切片上，有较多的免疫反应阳性细胞，将两张相邻切片的照片进行对合检查证明，在大鼠舌下神经核存在IL-2R/PR/mGluR5三类物质受体共存的神经元，它们约占IL-2R/PR双标细胞总数的25%，提示免疫，神经，内分泌物质可能通过共存于同一神经元上的相应受体共同调节神经元的功能。     

Distribution of Autonomic Nerves in Gall Bladder and Extrahepatic Biliary Ducts in Cats

The autonomic innervation of the gall bladder and theextrahepatic biliary ducts were studied on whole mount stretchpreparations and cryostat sections with acetylcholinesterase staining,glyoxylic acid induced fluorescence histochemical method andimmunohistochemical method. The cholinergic nerve of the gall bladder incats consists of subserous ganglionated plexus and submucousganglionated plexus. In the biliary ducts, the adrenergic nerves aredistributed in the subserosa and lamina propria along the blood vessels.The adrenergic nerves surround the non-fluorescent neurons forming abasket-like structure. The density of adrenergic nerves and theconcentration of noradrenaline are higher in the collum than in the fundusof the gall bladder. The highest density of adrenergic nerves andconcentration noradrenaline are found in the cystic duct.Immunohistochemical study revealed that there are 4 kinds ofimmunoreactive nerves, that is, vasoactive intestinal polypeptide, substanceP, L-enkephalin and somatostatin nerves distributed in the wall of thewhole bile duct system. They participate in the formation of nerveplexuses. Among the peptidergic nerves, vasoactive polypeptideimmunoreactive nerve is the richest, while the other 3 are rarely seen.Peptidergic nerves are densely distributed in the sphincter of Oddi.Finally, the physiological significance of peptidergic nerves in the billaryduct system was discussed.     

Downregulation of metabotropic glutamate receptors mGluR5 and glutamate transporter EAAC1 in the myenteric plexus of the diabetic rat ileum

Objective: To study the morphologic abnormalities of the myenteric plexus in diabetic rats and to explore the mechanism of their effect on gastrointestinal motility. Methods: Forty rats were randomly divided into a diabetic group and a control group, Gastric emptying and small intestine transit rates were measured and histologic and molecular changes in glutamatergic nerves in the ileal myenteric plexus were observed, mGluR5 receptor and EAAC1 transporter changes in the diabetic rats were studied using fluorescence immunohistochemistry and RT-PCR. Results:Eighteen weeks after the establishment of the diabetic rats model, gastric emptying and small intestine transit rates were found to be significantly delayed in the diabetic group when compared with the control group. The density of glutamatergic ganglia and neurons in the ileal myenterie plexus were significantly decreased in the diabetic group when compared with control group(P < 0.05) and the mGluR5 receptors and EAAC1 transporters were downregulated in the diabetic rats(P < 0.05). Conclusion: Decreased glutamatergic enteric ganglia and neurons and decreased mGluR5 receptors and EAAC1 transporters in the intestinal myenteric plexus is one of the mechanisms of diabetic gastroenteropathy in rats.     

牙髓淋巴管网的酶组织化学研究

目的 :观察实验动物和人的牙髓淋巴管网的结构与分布特点。方法 :将非脱钙组织和用EDTA溶液脱钙的组织冰冻切片 ,分别应用光镜和电镜HE、5′ Nase单染和 5′ Nase ALPase双重染色作比较观察。结果 :HE染色切片光镜观察仅见管腔样结构 ;5′ Nase单染可见呈深棕色、形状不规则的淋巴管 ;而在同一切片上 5′ Nase ALPase双重染色观察到呈深棕色的淋巴管和呈蓝色的血管。扫描电镜和透射电镜观察牙髓的组织切片 ,见到丰富的呈 5′ Nase染色强阳性的淋巴管 ,5′ Nase反应产物存在于淋巴上皮细胞表面 ,牙髓中央部淋巴管较外围的成牙本质细胞层丰富。结论 :5′ Nase ALPase双重染色对研究牙髓毛细淋巴管网分布具有特异性且能定位     

小巨核细胞APAAP染色在MDS与其他全血细胞减少症鉴别诊断中的意义

目的：了解小巨核细胞对MDS与其他全血细胞减少症的鉴别诊断意义，方法：以全血细胞减少症为研究对象，用CD41a(-抗）与标本巨核细胞抗原作用，再用羊抗鼠第二抗体联接单克隆抗体和APAAP复合物，加底物和苏木素染色后光镜下观察。结果：APAAP染色与瑞氏染色在识别小巨核细胞方面采用两样本率的U检验，两者比较，有显著性差异（P＜0．01），结论：APAAP染色明显优于瑞氏染色，特异性强，灵敏度高，结果稳定，可作为MDS与其他全血细胞减少症的重要鉴别诊断依据之一。     

棘阿米巴角膜炎的实验室诊断及实验研究

目的 :找出快速诊断和鉴定棘阿米巴角膜炎的方法 ,建立棘阿米巴角膜炎的动物模型。方法 :10 %氢氧化钾 (KOH)湿封片镜检、棘阿米巴原虫培养、倒置显微镜观察、病理切片作HE染色和PAS染色检查。通过家兔应用激素 3天后 ,经角膜基质内注射棘阿米巴原虫悬液。结果 :角膜刮片及手术切除的角膜材料 ,经 10 %氢氧化钾 (KOH)湿封片镜检 ,前者查到 8例棘阿米巴角膜炎病例 ,后者确诊 5例 ;手术切除的角膜材料经原虫培养 ,分离出 6株棘阿米巴原虫 ;应用倒置显微镜直接观察 ,见到棘阿米巴原虫的包囊、滋养体和棘刺。建立了家兔棘阿米巴角膜炎动物模型。结论 :应用 10 %KOH湿封片镜检以及通过倒置显微镜直接观察培养的原虫可对棘阿米巴角膜炎作快速诊断 ;倒置显微镜可直接观察和鉴定棘阿米巴原虫 ,方法简便、不污染、快速 ;家兔棘阿米巴角膜炎的动物模型建成快速及实用     

谷氨酸钠致痫大鼠大脑皮质mGluR5的表达变化

目的探讨谷氨酸钠(GluNa)致痫时大鼠大脑皮质代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)的表达变化。方法将动物随机分为正常对照组、生理盐水组、GluNa致痫组。在GluNa诱导大鼠癫痫发作2h后，进行SABC法免疫组织化学染色。结果正常对照组大鼠大脑皮质各层均有丰富的mGluR5表达，特别是第V层锥体细胞。生理盐水组mGluR5表达同正常对照组相比没有明显改变。而GluNa致痫组mGluR5表达明显下调。结论在癫痫发作早期mGluR5表达下降可能是神经细胞的一种自我保护作用。     

治疗淋菌性宫颈炎的临床分析

目的观察116例淋菌性宫颈炎患者的临床表现，比较诊断方法并评价临床效果。方法采用革兰氏染色涂片法和聚合酶链法检测宫颈拭子，确诊病例分别采用口服阿莫西林、诺夫沙星、红霉素，肌注大观霉素、庆大霉素，青霉素等方法治疗。结果涂片检查的阳性率为70％，PCR法为90％，PCR法准确性高，检查结果与取样技术有关。结论以上抗菌治疗均有效，口服优于肌注，短程疗法优于多次长时间治疗。