分支杆菌不同菌型的耐药结果分析

目的 对1992、1996、2000、2004年抗酸分支杆菌不同菌型耐药情况进行分析,了解引起结核病的分支杆菌的主要类型及耐药情况,为临床提供准确的病原学诊断和合理用药依据.方法 采用绝对浓度法进行分支杆菌的培养和药敏试验,以培养基上菌落数≥1 为培养阳性.结果 四年中,引起结核病的人型结核分支杆菌的比例分别为76.4%、93.3%、93.6%、91.9%;牛型结核分支杆菌的比例分别为21.9%、3.6%、1.8%、3.1%;非结核分支杆菌(非典型)的比例分别为1.7%、3.1%、4.6%、5.0%.耐药率分别为:人型结核分支杆菌为68.6%、76.5%、72.4%、50.5%;牛型结核分支杆菌为29.0%、64.3%、16.7%、9.1%;非结核分支杆菌为50%、83.3%、73.3%、83.3%.结论 人型结核分支杆菌仍然是引起结核病的主要病原菌,有少数患者感染非结核分支杆菌,虽然比例小,但耐药率较高,应引起重视.     

基于基因芯片技术对耐利福平或异烟肼结核分枝杆菌基因突变位点的检测分析

目的：分析基因芯片技术对耐利福平或异烟肼结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）基因突变位点的检测情况,为耐多药结核的临床诊断提供依据。方法：收集2020年—2023年在苏州市第五人民医院就诊的395例结核患者的痰液标本,采用基因芯片技术对利福平耐药基因ropB(511、513、516、526、531、533)和异烟肼耐药基因KatG(315)、inhA(-15)突变位点进行检测,以罗氏固体培养绝对浓度法作为金标准,分析基因芯片技术对MTB耐利福平或异烟肼的准确性。结果：基因芯片技术对利福平耐药诊断的Kappa值为0.80,符合率为92.15%,灵敏度为87.74%,特异度为93.77%,阳性预测值为83.78%,阴性预测值为95.42%,而对异烟肼耐药诊断的Kappa值为0.87,符合率为93.42%,灵敏度为98.82%,特异度为89.38%,阳性预测值为87.43%,阴性预测值为99.02%。结论：基因芯片技术可以快速、高效地检测MTB耐利福平和耐异烟肼基因突变,与罗氏固体培养绝对浓度法高度一致,可为临床诊疗提供依据。     

基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的研究

目的探讨基因芯片技术在检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的应用。方法收集21例临床诊断结核病患者体液标本经培养得到的分离菌液,进行基因芯片检测,包括利福平的rpoB基因位点和异烟肼的KatG和inhA基因位点,从而判断其耐药性。结果 21例样本中,利福平rpoB基因有10例突变,总突变率为47.6%,其中9例为531位点的（C-T）突变,1例526位点的（C-G）突变。与药敏试验的符合率为81.0%。异烟肼基因突变有6例,总突变率为28.6%,其中4例为KatG 315（G-C）突变,2例为inhA-15（C-T）突变。与药敏试验的符合率为90.5%。利福平的11例耐药株中,基因芯片检测8例为突变型,突变率为72.7%,在利福平的10例敏感株中,基因芯片检测2例为突变型,突变率为20.0%。在异烟肼的6例耐药株中,基因芯片检测5例为突变型,突变率为83.3%,在异烟肼的15例敏感株中,基因芯片检测1例为突变型,突变率为6.7%。结论基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,快速准确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

结核分支杆菌耐药基因检测结果分析

目的 分析肺结核患者结核分支杆菌获得性耐药情况,比较两种耐药性检测方法的检测效果.方法 用药敏试验(绝对浓度法)检测结核分支杆菌株对利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)、吡嗪酰胺(PZA)和乙胺丁醇(EMB)的耐药情况,采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测结核分支杆菌耐药rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变.结果:400例肺结核耐药患者常规药敏试验耐药316例(79.8%);耐药基因检测耐药株288株,突变率72.0%.RFP耐药例数和耐药率明显高于SM、PZA和EMB(耐药例数:F=2.45,2.56,2.69,P＜0.05;耐药率:F=2.55,2.66,2.79,P＜0.05),rpoB突变株和突变率明显高于katG、rpsL、pncA和embB(突变株:F=2.28,2.46,3.19,3.33,P＜0.05～0.01;突变率:F=2.36,2.61,3.25,3.45,P＜0.05～0.01),高浓度药物耐药菌株的突变株和突变率显著高于低浓度药物耐药菌株,随着不规律用药时间的延长,耐药率和突变率均逐渐上升(耐药率:F=2.77,2.88,P＜0.05;突变率:F=2.72,2.85,P＜0.05).结论 PCR-SSCP是一种快速检测结核杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变敏感、特异的方法.     

rpoB基因检测在结核分支杆菌感染及利福平耐药分析中的应用

目的 探讨rpoB基因检测在结核分支杆菌(Mtb)感染及利福平(RFP)耐药分析中的应用。方法 以人型复合分支杆菌特异的rpoB基因为靶基因的套式PCR(nested PCR,nPCR)扩增痰、胸水、外周血标本中的Mtb rpoB;并对7株RFP耐药的rpoB nPCR产物进行了直接DNA序列测定。结果 (1)14例痰标本9例阳性(64.3％)、4例胸水标本3例阳性(不计百分率)、176例外周血标本22例阳性(12.5％);(2)7株RFP耐药菌均存在有义突变。其中密码子516位由GAC→GTC、GAC→TAC各1例;526位由CAC→CGC2例、CAC→TAC1例;531位由TCG→TTG2例。结论 对患者临床标本进行rpoB nPCR扩增有望辅助诊断结核病,对rpoB nPCR产物直接DNA测序有望判别耐RFP与否。这将大大缩短结核病诊断和药敏试验所需时间。     

利用GeneXpert检测结核分支杆菌及其利福平耐药性的研究

目的研究GeneXpert检测在结核分支杆菌及其利福平耐药性检测中的应用。方法选取2014年7月至2015年11月我院所收治的116例涂片阳性的肺结核患者的痰液标本。对痰液标本中的结核分枝杆菌及福平耐药性行GeneXpert检测,均与传统的罗氏培养结果和药敏试验结果比较。结果 GeneXpert检测对结核分支杆菌的诊断符合率为93.1%,对利福平耐药性的诊断符合率为97.2%。结论 GeneXpert检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性,具有快速而准确的特点,为结核病的诊断和治疗提供可靠的依据。     

基因芯片技术检测结核分枝杆菌耐药性的临床价值

目的探讨基因芯片技术检测结核分枝杆菌耐药性的临床价值。方法回顾性分析685例结核病临床疑似病例的临床资料,采用晶芯结核分枝杆菌生物芯片技术进行检测。结果本组685例临床疑似病例中,阳性135例,阳性率为19．7％,基因芯片检测结果显示结核131例,非结核4例,阳性率为19．1％。耐药基因检测68例,利福平和异烟肼基因突变12例。总突变率为17．6％,其中11例为利福平和异烟肼均耐药,双重基因突变率为16．2％,另1例只耐利福平。利福平总突变率为17．6％,异烟肼总突变率为16．2％,耐多药率为16．2％。结论晶芯结核分枝杆菌生物芯片技术用于临床诊断结核病及其耐药性,能够缩短诊断时间,提高临床时效性,值得推广应用。     

基因芯片与传统罗氏培养检测结核分支杆菌药敏结果分析

目的 分析基因芯片检测与传统罗氏培养检测结核分支杆菌药敏的结果.方法 用罗氏药敏培养法检测分离培养的结核杆菌菌株84株及痰标本结核杆菌菌株64例的耐药性,采用异烟肼和利福平耐药基因检测法检测以上菌株,统计分析两者检测结果.结果 在对临床分离菌株和痰标本的检验中,耐药基因检测法与罗氏培养的敏感性和特异性差异无统计学意义(P>0.05).耐药基因突变片段以531Mct为主,其次为516Mat、526Mcg以及526Mct、526Mag、516Mgt等.结论 结核杆菌耐药基因芯片检测技术检测结果与罗氏培养药敏试验结果无明显差异,且用时较培养短,值得在临床推广.     

六安市某县结核病细菌学检测及耐药相关因素分析

目的 了解六安市某县结核病耐药状况及相关因素,为制订全市耐药结核病控制策略提供参考依据。 方法 随机抽取我市辖区1县(区),将2013年1月至12月所有登记肺结核病例作为研究对象,进行痰涂片镜检、细菌培养、药敏实验及菌种鉴定,并分析相关影响因素。 结果 结核分枝杆菌总耐药率(单耐药率)为25%(37/148),耐多药率为8.1%(12/148),广泛耐药率为2.03%(3/148);非结核分枝杆菌总耐药率(单耐药率)为100%(5/5) 耐多药率为80%(4/5),广泛耐药率为80%(4/5);单因素及多因素分析显示,复治是单耐药及耐多药结核病的危险因素,20～50岁年龄是耐多药结核病的独立危险因素。涂片阳性率为16.27%(95/584),痰培养阳性率为26.20%(153/584)。 结论 六安市某县结核病耐药疫情形势严峻,需加强对初治病例及青壮年病例的管理,提高其治疗依从性和治疗成功率,减少耐药结核发生。同时需加强结核病的细菌学检测工作,提高菌阳肺结核和耐药结核分枝杆菌的发现率。     

基因芯片与液体快速培养技术诊断耐药结核病的对比研究

目的 对比研究基因芯片与液体快速培养技术诊断耐药结核病的效果。方法 1156例疑似肺结核及肺结核患者的同一痰样本,同时应用基因芯片技术(芯片组)与液体快速培养技术(快培组)进行结核菌耐药检测,对两组检测结果进行对比分析。结果 对两组实验检测结果进行对比分析,结核菌检出率:芯片组270例,阳性率为23.36%,快培组237例,阳性率为20.50%。结核菌耐药结果 :芯片组46例,耐药率为17.04%,快培组43例,耐药率为18.14%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。芯片组与快培组同时检出结核菌阳性时,二者耐药符合率达80%。结论 基因芯片检测结合聚合酶链式反应(PCR)技术和反向杂交技术(RDB)诊断结核病及耐药结核病,具有简便、快速、灵敏、准确的特点,及时检出结核病及耐药结核病,指导临床针对性制定个性化抗结核方案,避免盲目制定抗结核方案而导致医源性耐药结核病的出现,真正有效控制结核病及耐药结核病。     

镇江地区结核分枝杆菌DNA指纹图谱分型及耐药性分析

目的：分析镇江地区结核分枝杆菌的DNA指纹图谱分型及耐药情况。方法收集174例疑似结核病患者痰液标本,通过鉴别培养基对硝基苯甲酸（ PNB）和噻吩－2－羟酸肼（ TCH）进行分枝杆菌菌型初筛,再通过本室建立的PCR－ELISA法明确鉴定结核杆菌菌种,用比例法进行药敏实验,用DNA随机扩增多态性（ RAPD）指纹分型法,对其中44株耐药人型结核分枝杆菌进行DNA指纹图谱分型。结果从174份标本中分离出人型结核分枝杆菌141株（81．03％）,牛型结核分枝杆菌20株（11．49％）,非结核分枝杆菌13株（7．47％）,总耐药率42．53％;耐药率由高到低依次为异烟肼（INH）＞氧氟沙星（OFX）＞利福平（RFP）＞链霉素（SM）＞乙胺丁醇（EMB）＞卡那霉素（KM）＞卷曲霉素（ CPM）＞阿米卡星（ AKM）;非结核分枝杆菌对EMB、RFP、SM、INH的耐药率显著高于结核分枝杆菌（ P＜0．01）。复治组对EMB、RFP、SM、INH的耐药率显著高于初治组的耐药率（P＜0．01）。中、老年患者耐药率明显高于青年患者（P＜0．05或P＜0．01）。将44株耐药人型结核杆菌,用RAPD－PCR分型,并用NTsys 2．10e软件作聚类分析,共分为5型（Ⅰ型-Ⅴ型）,其中以Ⅰ-Ⅲ型为主,占84．09％。各型的耐药率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论本地区肺结核以人型结核分枝杆菌为主,结核杆菌总体耐药率和耐多药率相对较高。 RAPD指纹分型结果显示,该地区结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,成簇类型是主要流行菌株。各型与耐药性无明显相关性。     

汕头市住院肺结核患者结核分枝杆菌耐药情况分析

目的分析汕头市住院肺结核患者结核分枝杆菌耐药情况。方法回顾性抽样分析2008年1月-2010年12月100例住院肺结核患者结核分枝杆菌对INH、RFP、SM和EMB的耐药性试验结果,观察初治组和复治组对抗结核药物的耐药率。结果复治组INH、RFP和EMB耐药率明显高于初治组（分别为：59．5％vs．25．4％、40．5％vs．7．9％和43．2％vs．11．1％,）,2组比较差异均有极显著性（P〈0．01）;复治组SM耐药率与初治组比较,差异无显著性（18．9％vs．20．6％,P〉0．05）。结论抗结核药物耐药性试验对肺结核患者特别是复治患者是必需的,要重新重视SM的应用。     

基因芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性

目的研究基因芯片在检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性中的应用。方法根据与利福平和异烟肼耐药相关的4条基因上的11个位点和30种单核苷酸多态性设计制作芯片,用芯片检测结核分枝杆菌的基因突变,从而判断其耐药性。结果用基因芯片在110株异烟肼耐药株中检测出85侏（73．3％）,在30株异烟肼敏感株中检测出22株（73．3％）,在94株利福平耐药株中检测出77株（81．9％）,在46株利福平敏感株中检测出40株（87．0％）。芯片检测结果与部分样本的测序结果完全相符。结论用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性,该法快速、精确,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

糖尿病合并初治肺结核患者结核分枝杆菌耐药性分析

目的 分析糖尿病合并初治肺结核患者对一线、二线抗痨药耐药情况,以及不同糖化血红蛋白（HbA1c）水平时的耐药率。方法 收集2017年1~12月安徽省胸科医院住院患者中痰培养阳性初治肺结核患者296例,按是否患糖尿病分为单纯初治肺结核（对照组）170例和糖尿病合并初治肺结核（观察组）126例。比较两组患者对4种一线药物异烟肼（H）、利福平（R）、乙胺丁醇（E）、链霉素（S）和5种二线药物丁胺卡那（Am）、卷曲霉素（Cm）、左氧氟沙星（Lvfx）、对氨基水杨酸钠（Pas-Na）、丙硫异烟胺（Pto）的耐药率。同时,观察组患者按照HbA1c值不同分为3组：HbA1c < 7%组、7%≤HbA1c < 9%组、HbA1c≥9%组,比较观察组不同HbA1c水平时对上述4种一线药物和5种二线药物的耐药率。结果 观察组患者总耐药率、单耐药率、任一耐异烟肼率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组患者耐多药率、多耐药率和任一耐R、S、E、Am、Cm、Lvfx、Pas-Na、Pto率均高于对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）;观察组中,不同HbA1c水平下的耐药率分别为13.79%、34.15%、85.19%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 糖尿病合并初治肺结核患者耐药率高;HbA1c水平越高,耐药率越高。     

复合PCR-膜芯片技术对结核分枝杆菌链霉素耐药性的快速检测

目的　应用复合聚合酶链反应 (复合 PCR) -膜芯片技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素 ( SM)的耐药性。方法　设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐 SM基因 rps L和 rrs的寡核苷酸探针制作膜芯片 ,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的 rps L和 rrs基因复合 PCR产物进行反向斑点杂交 ,并与 PCR-单链构象多态性 ( PCR- SSCP)和 PCR-直接测序 ( PCR- DS)结果比较。结果　 5 2株结核分枝杆菌临床分离株中 ,9株敏感株rps L和 rrs基因的 SSCP图谱、膜芯片杂交结果与标准株完全相同 ;4 3株耐 SM菌株中 ,33株存在 rps L 基因4 3位密码子 AAG→ AGG突变 ,5株有 rrs基因 5 13位 A→C突变 ,1株有 rrs基因 5 13位 A→ T突变 ,突变率为 90 .7%。结论　膜芯片技术检测结核分枝杆菌耐 SM基因型灵敏度高、特异性强、简便、快速 ,可用于临床耐药性检测     

耐药肺结核患者结核分枝杆菌菌型分布及耐药研究

目的 研究肺结核耐药患者结核分枝杆菌菌型分布及耐药情况。方法 收集2011年4月至2012年7月肺结核患者痰液标本,分离培养后进行菌种鉴定和药敏试验。结果 人结核分枝杆菌约占83.91%,牛结核分枝杆菌约占15.70%;患者对一线抗结核药物耐药率显著高于对二线抗结核药物耐压率,差异有统计学意义(P<0.05);一类抗结核药物单一耐药率显著高于二类抗结核药物(χ²=4.281,P<0.05)。结论 肺结核耐药患者菌型以人结核分枝杆菌最多,对一线抗结核药物的耐药率显著高于对二线抗结核药物的耐药率。     

铜陵市2017~2018年初治与复治结核病患者耐药情况分析

目的 分析铜陵市初治与复治结核病耐药现状和特点,掌握结核分支杆菌的耐药谱,为铜陵市结核病疫情制定防控策略提供依据。方法 选取2017~2018年铜陵市耐药监测点的888例初治与复治结核病患者的痰标本进行萋尼氏抗酸染色、结核分支杆菌培养、药物敏感性试验以及菌群鉴定。采用比例法对结核分支杆菌复合群进行药物敏感性试验,并进行统计学分析。结果 在888例初治与复治结核病患者样本中,319例为结核分支杆菌复合群,其中初治结核病患者262例,复治结核病患者57例。总耐药率为19.75%（63/319）,初治结核病患者耐药率为15.65%（41/262）,复治结核病患者耐药率为38.60%（22/57）。总耐多药率为10.66%（34/319）,初治结核病患者耐多药率为6.11%（16/262）,复治结核病患者耐多药率为31.58%（18/57）。8种抗结核药耐药率顺位依次为异烟肼（10.34%）、链霉素（7.52%）、利福平（6.90%）、卷曲霉素（6.90%）、对氨基水杨酸钠（4.70%）、氧氟沙星（3.76%）、卡那霉素（2.82%）、乙胺丁醇（2.19%）。结论 铜陵市初治和复治结核病耐药疫情依然严重,仍需要采取更加有效、全面、及时的干预管理办法,减少结核病耐药性产生。     

用DNA芯片检测结核分枝杆菌耐乙胺丁醇基因突变的研究

目的利用DNA芯片快速检测结核分枝杆菌耐乙胺丁醇embB基因突变。方法根据结核分枝杆菌embB基因序列设计探针并制作DNA芯片。根据结核从分枝杆菌embB基因突变的热点片段设计引物，该片段用TAMRA荧光标记PCR扩增增后与DNA芯片杂交，同时以PCR-SSCP和DNA测序法为对照。结果120株结核分枝杆菌临床分离株中，35株敏感株DNA芯片杂交结果与标准株完全相同；85株耐乙胺丁醇临床分离株中有50株检测到embB基因突变[58．8％（50／85）]，均为306位密码子突变，该突变与PCR．SSCP和测序结果完全一致；85株耐药株中后有35株未检测到突变，占41．2％（35／85）。结论用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分离株的embB基因突变，可协助临床医生制定合理的治疗方案，特别是复治患者，可帮助选择有效药物。     

分枝杆菌菌种鉴定DNA微阵列的初步研究与应用

目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列。方法根据19种分枝杆菌标准株的16SRNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物。结果该DNA微阵列与9种非分枝杆菌标准株不杂交,具有分枝杆菌特异性;可将19种分枝杆菌标准株鉴定到群或种,具有较高的分枝杆菌种特异性。应用PCR-SSCP分枝杆菌初步菌种鉴定方法对31株分枝杆菌临床分离株进行初步的鉴定,9株为结核分枝杆菌复合群和22株为非结核分枝杆菌。应用DNA微阵列进一步进行菌种鉴定,9株与探针a杂交阳性,为结核分枝杆菌复合群;2株与探针c杂交阳性,为胞内分枝杆菌;8株与探针d杂交阳性,为堪萨斯分枝杆菌或瘰疬分枝杆菌或猿猴分枝杆菌或胃分枝杆菌;1株与探针k杂交阳性,为戈登分枝杆菌;2株与探针p杂交阳性,为龟分枝杆菌脓肿亚种;2株与探针r杂交阳性,为偶然分枝杆菌;1株与探针s杂交阳性,为草分枝杆菌;2株与探针a和p杂交阳性,为结核分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种复合感染株;1株与探针a和r杂交阳性,为结核分枝杆菌和偶然分枝杆菌复合感染株;3株与该芯片杂交阴性。2株临床分离株经基因测序也证实DNA微阵列鉴定的特异性。结论该DNA微阵列有可能简便、快速、准确地     

DNA芯片技术用于贝母的基因分型和种类鉴别

目的通过对贝母几个种遗传多态性的研究来开发在分子水平上用于鉴别贝母基因型及不同种类的DNA芯片技术。方法用PCR扩增法和DNA直接测序法确定核苷酸多态性,用DNA芯片进行基因检测。结果首先提取来自多种贝母根茎的基因组DNA,对26S rDNA基因D2与D3区的多态性片段进行扩增和测序,然后将不同种属多态性片段的特异性寡核苷探针点置于经多聚赖氨酸处理包被的芯片。用来自不同种贝母的荧光素标记的PCR产物与DNA芯片进行杂交,可在芯片特定位置检测到不同种贝母的荧光信号。结论本研究显示DNA芯片技术可为植物种属的验证与质量控制提供一种快速、高通量的检测工具。