微阵列比较基因组杂交分析一例足月小样儿的染色体畸变

目的 分析一例足月小样儿的染色体畸变,探讨患儿低出生体重的原因.方法 采集临床已确诊的足月小样儿外周血并抽提基因组DNA,进行微阵列比较基因组杂交,分析患儿基因组拷贝数的改变.培养患儿及其父母外周血淋巴细胞,进行染色体核型分析并确定患儿染色体畸变的来源.结果 微阵列比较基因组杂交显示患儿在10q125.2→qter区域存在长22 Mb片段的重复,同时在15q26.2→qter区域存在长5 Mb片段的缺失.核型分析显示患儿核型为46,XY,-15,+der(15)t(10;15)(q25;q26)pat.结论 患儿在10q25.2→qter区域存在部分三体,而在15q26.2→qter区域存在部分单体,这两种染色体畸变可能均是导致患儿表现为足月小样儿的病因之一.     

应用微阵列比较基因组杂交技术精确诊断不平衡染色体畸变

目的 探讨微阵列比较基因组杂交技术(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)在诊断不平衡染色体畸变中的应用价值.方法 选取4例常规G显带染色体核型分析未能确诊的不平衡染色体畸变病例,按照标准的Affymetrix SNP 6.0微阵列的操作手册进行杂交、洗涤及全基因组扫描,并通过相应的计算机软件分析结果.结果 通过array-CGH技术分析,明确了所有4例染色体不平衡畸变的诊断并且进行精确定位,其中对2例患者镜下染色体出现无法确定来源的额外条带进行了自身直接重复的确诊;对2例患者G显带无法识别的缺失合并重复的衍生染色体进行了精确诊断.结论 array-CGH技术在DNA水平上对染色体不平衡畸变的诊断具有独特的高分辨率、高敏感性和高特异性,并且能够精确定位,对染色体疾病作出基因型-表型关系的诊断具有重大的应用价值.     

18例闭经患者的分子-细胞遗传学研究

目的探讨荧光原位杂交（fluorescencein situhybridization,FISH）和高分辨比较基因组杂交（highresolution-comparative genomic hybridization,HR-CGH）技术在闭经研究中的应用价值。方法17例原发闭经和1例继发闭经患者经常规妇科检查、B超及内分泌功能检查后,应用染色体核型分析,部分染色体异常患者采用FISH和HR-CGH技术相结合的分子-细胞遗传学检查诊断结果,并对其临床症状及发病机制进行了探讨。结果17例原发闭经患者中,7例为46,XX的正常女性核型;10例携带有异常染色体核型,所占比例为58.8%,其中3例为46,XY的女性患者,2例为45,X及45,X/46,XX的Turner＇s患者;其余5例均为携带有X染色体结构异常,包括X染色体部分单体、X等臂染色体和X/Y嵌合体等异常核型患者;1例继发性闭经患者为X染色体与常染色体易位的异常核型。结论应用FISH和HR-CGH技术与高分辨染色体显带技术,精确诊断患者的染色体核型,可为临床的诊断和治疗提供医学遗传学依据。     

微阵列——比较基因组杂交技术及其应用

微阵列一比较基因组杂交技术是一种集基因芯片和传统比较基因组杂交为一体的新技术。近年来，该技术已成为遗传学家探索生命科学，特别是肿瘤和遗传性疾病基因和染色体异常的有力工具。本文就微阵列一比较基因组杂交技术的特点、分类和实际应用以及未来的应用前景作一简要介绍。     

微阵列比较基因组杂交技术对一例胎儿染色体复杂易位的产前诊断

目的对1例5条染色体发生复杂易位的胎儿作出产前诊断,评价微阵列比较基因组杂交（array—CGH）技术在产前诊断中的应用价值。方法应用G显带分析羊水细胞染色体及夫妇双方外周血染色体,应用array—CGH技术对羊水细胞进行全基因组高分辨扫描分析,了解是否有微小缺失和重复。结果羊水细胞染色体结果为46,XX,t（5;7;12）,t（14;21）,夫妻双方外周血染色体核型正常,羊水细胞array—CGH结果显示胎儿染色体未发生微缺失或微重复。结论array—CGH技术与传统细胞学技术相结合,大大提升产前诊断技术水平。     

应用荧光原位杂交技术测定不同的染色体畸变

应用荧光原位杂交技术测定不同的染色体畸变王明荣，王秀琴，吴旻ＢｅｒｎａｒｄＰｅｒｉｓｓｅｌＰａｕｌＭａｌｅｔ染色体分析已成为产前诊断、先天性畸形诊断及癌症诊断的主要方法之一。传统的核型分析一直采用染色体显带的手段，但用单纯的显带法常难确定标记染色体、...     

微阵列--比较基因组杂交技术及其应用

微阵列-比较基因组杂交技术是一种集基因芯片和传统比较基因组杂交为一体的新技术.近年来,该技术已成为遗传学家探索生命科学,特别是肿瘤和遗传性疾病基因和染色体异常的有力工具.本文就微阵列-比较基因组杂交技术的特点、分类和实际应用以及未来的应用前景作一简要介绍.     

荧光原位杂交检测卵巢癌8号染色体畸变

目的：探讨卵巢癌染色体改变与卵巢癌发生、发展及预后的关系。方法：应用荧光原位杂交技术对卵巢癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢标本各12例进行8号染色体检测。结果：本组12例卵巢癌8号染色体出现单体、三体或四体畸变，畸变率100％（12／12）；卵巢良性肿瘤8号染色体出现三体畸变，畸变率25％（3／12）；正常卵巢8号染色体无畸变，卵巢癌与卵巢良性肿瘤及正常卵巢比较，差异有显著性（P＜0．001）。结论：卵巢癌第8号染色体畸变与卵巢癌发生、发展密切相关，其改变发生在卵巢癌早期，与患者临床分期、病理分化相关。     

光谱核型分析联合微阵列比较基因组杂交诊断15号环状染色体综合征

目的 探讨联合应用光谱核型分析技术(spectral karyotyping,SKY)和微阵列比较基因组杂交技术(microarray-based comparative genomic hybridization,array-CGH)在诊断复杂疑难的环状染色体畸变中的价值.方法 对1例常规G显带染色体核型分析疑诊为46,XY,r(15)?的8岁男性生长发育迟缓患儿依次应用SKY及array-CGH技术常规进行制片杂交,并通过相应的显微摄像系统和计算机软件分析结果.结果 SKY技术明确了该患儿环状染色体来源于15号染色体,array-CGH技术明确患儿15q26.3末端存在约594 kb的缺失,染色体基因位点编码范围为99689349-100282878.结论 联合应用现代分子细胞遗传学技术可以从细胞到分子水平精确诊断复杂疑难的环状染色体病例,是常规染色体核型分析的有益补充,也有利于细胞遗传学向分子水平深入.     

荧光原位杂交检测慢性粒细胞白血病的染色体畸变

目的 检测费城染色体（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，Ｐｈ染色体）阴性，变异型Ｐｈ染色体及伴有其它染色体异常的慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＭＬ）的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因。方法 双色荧光原位杂交技术，检测伴有８种不同的骨髓细胞染色体畸变ＣＭＬ患者的ｂｃｌ／ａｂｌ融合基因。结果 ３例变异型Ｐｈ和７例有标准型Ｐｈ的ＣＭＬ患者均为ｂｃｒ／ａｂｌ融合     

Array—CGH技术用于产前诊断可疑胎儿染色体异常

目的探讨微阵列比较基因组杂交技术（array—based comparative genomic hybridization,array—CGH）在产前诊断胎儿染色体异常中的应用价值。方法产前诊断发现4例常规G显带染色体核型分析不能明确的胎儿染色体异常,按照标准的array—CGH操作分析对这些病例进行全基因组检测。结果通过array—CGH技术分析,明确了4例胎儿可疑染色体异常的诊断并且进行精确定位,1例染色体部分缺失,1例正常,1例染色体部分重复,1例不平衡易位。结论array—CGH技术对产前诊断胎儿染色体异常具有高分辨率,能够精确定位异常片段,明确胎儿预后,对产前诊断具有重要应用价值。     

G-显带技术、荧光原位杂交和比较基因组杂交技术在产前诊断中的应用

目的 探讨G显带、荧光原位杂交(fluorescencein situ hybridization,FISH)和比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)技术在产前诊断中应用的程序及意义.方法 采集102例妊娠16周～24周胎儿的羊水,采用G显带、G显带/FISH和G显带/FISH/CGH三阶梯的核型诊断程序,并分析其在产前诊断中的意义.结果 102例胎儿中,经第1阶梯诊断核型98例,诊断困难2例,失败2例;第2阶梯诊断核型2例,诊断困难1例,失败1例;第3阶梯诊断核型2例.经3阶梯诊断程序核型的诊断率达100%(102/102例),异常核型7例(7/102例,6.68 0A),其中第1、第2和第3阶梯分别诊断异常核型4例(4/7例,57.1 oA)、1例(1/7例,14.3%)和2例(2/7例,28.5%).结论 在产前诊断中实施3阶梯诊断程序有助于提高核型的确诊率,规范染色体诊断流程.     

微阵列芯片比较基因组杂交技术在植入前遗传学诊断中的应用研究

目的 建立适用于植入前遗传学诊断的微阵列芯片比较基因组杂交技术(array comparative genomic hybridization,array CGH).方法 对以下3种来源的细胞进行array CGH分析:(1)经胰酶消化的核型分别为46,XX、46,XY、47,XX,+13的B2、C38、A1的3株人胚胎干细胞,分离后获取3～5个细胞;(2)在本中心进行体外受精与胚胎移植(in-vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的正常受精来源的废弃胚胎卵裂球;(3)源自5对罗氏或相互易位携带者的夫妻、在本中心进行植入前遗传学诊断的10个废弃胚胎,其中8个胚胎经荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断为异常,1枚无信号,1枚诊断正常但胚胎发育停滞.经全基因组扩增后,对扩增产物进行24sure V3或24sure+芯片检测,采用BlueFuse Multi软件进行数据分析.结果 (1)对来自B2、C38、A1系干细胞株的3～5个细胞进行array CGH分析,结果与核型鉴定一致;(2)对来自2枚正常受精胚胎的6个卵裂球的扩增产物行24sure V3分析,1枚胚胎的2个卵裂球分别为非整倍体和正常核型,另1枚胚胎的4个卵裂球中2个正常,另外2个均为-22,+13.用24sure+重复上述实验,其结果与前一致;(3)对来自染色体易位行植入前遗传学诊断的10枚胚胎进行array CGH分析,4枚胚胎在array CGH分析时与FISH诊断结果相符,其中2枚FISH与array CGH结果完全一致,2枚通过array CGH分析发现除FISH发现的异常外的其他多条染色体数目异常.1枚胚胎FISH检测无信号,而array CGH诊断为13三体.5枚与FISH诊断结果不符的胚胎中,1枚来自罗氏易位FISH诊断为13单体,两种array CGH芯片均诊断为14三体及其他多条染色体非整倍体改变,1枚胚胎碎片多且发育停滞(该易位患者另2枚胚胎诊断均相符),其余3枚结果不相符的胚胎均来源于染色体(p13;q11)的相互易位.结论 应用array CGH可同时完成对胚胎染色体结构检测及全染色体组非整倍体筛查,但在断裂点距离着丝粒位置较近的染色体1区的易位应选择分辨率高的24sure+芯片.     

荧光原位杂交技术在染色体异常中的应用研究

目的应用荧光原位杂交（FISH）技术及细胞学对照,研究FISH产前诊断染色体异常的临床应用。方法应用5种（21、13、18、X和Y）FISH探针,平行细胞染色体分析进行565名孕妇产前诊断检测。结果565例产前诊断病历,共检出非整倍体异常核型19例,FISH检测与细胞染色体分析结果一致。结论荧光原位杂交（13,18,21,X和Y）探针,能有效检测间期羊水细胞的绝大多数非整倍体异常,且24～48h出结果。能缓解妊娠妇女的焦虑情绪。     

应用荧光原位杂交技术检测肺癌患者染色体数目的改变

目的应用荧光原位杂交(FISH)技术研究肺癌患者染色体数目改变及其意义。方法用人的全套染色体特异探针与肺癌患者中期染色体进行杂交检测。结果肺癌患者细胞为异倍体,染色体数目以亚二倍体居多,常见2、5、7、8、10、11、14和17号染色体增多及1、4号染色体的丢失。结论 FISH技术可检测肺癌患者染色体数目的改变,肺癌遗传学变异主要是2、5、7、8、10、11、14、17号染色体的增加,并对肺癌的发生、发展和预后有一定的提示作用。     

Fluorescence in situ hybridization, comparative genomic hybridization, and other molecular biology techniques in the analysis of effusions

Over the last 20 yr, the introduction of immunocytochemistry as a diagnostic tool has dramatically revolutionized diagnostic pathology. With the introduction of molecular methods as part of the diagnostic armamentarium, the practicing pathologist is facing the new challenge of grasping novel concepts of the molecular cytogenetics era. Herein, we review the diagnostic contribution of ancillary molecular techniques, including fluorescent and chromogenic in situ hybridization, telomerase assays, loss of heterozygosity, comparative genomic hybridization (CGH), and microarray-based CGH, for the practicing cytopathologists and discuss how these techniques will help pathologists in decision-making.     

Array-based comparative genomic hybridization of ductal carcinoma in situ and synchronous invasive lobular cancer

It has been increasingly recognized that ductal carcinoma in situ (DCIS), lobular carcinoma in situ (LCIS) and invasive cancer of the breast are often closely associated with one another. However, the genomic relationship between these histologically distinct entities has not been well characterized. Refinements in high-resolution comparative genomic hybridization (CGH) techniques allow for a detailed comparison of genomic alterations in synchronously occurring tumors. The following case illustrates how array CGH may be used to better understand whether synchronous neoplasms share a common origin.