激光微孔脱细胞基质在尿道缺损修复中应用的体外实验研究

目的：研究不同脉宽的超脉冲CO2激光对尿道脱细胞基质的热损伤以及微孔脱细胞基质的生理降解和孔隙率。方法：对尿道脱细胞基质用不同脉宽的CO2激光器进行激光打孔,比较微孔洗涤前后孔径变化,评价热损伤率;并对制备的微孔基质生理降解和孔隙率比较;结果：60ms的超脉冲CO2激光对尿道脱细胞基质的热损伤轻,制备的微孔脱细胞基质生理降解性能和细胞生长增殖生长曲线趋势一致,孔隙率合适。结论：超脉冲CO2激光对尿道脱细胞基质进行精细的加工出合适性能的脱细胞基质。     

脱细胞基质在组织工程气管移植中的研究进展

目的综述脱细胞基质在组织工程气管中的研究现状、进展及未来前景。方法广泛查阅脱细胞基质在组织工程气管研究中的相关文献,对不同脱细胞基质修复人和动物气管病损的研究现状进行综合分析。结果气管组织工程应用的脱细胞基质包括空肠、膀胱、主动脉和气管。结论脱细胞膀胱基质及空肠基质在修复气管小范围非环形病损中具有较好效果,脱细胞主动脉基质在长段气管病损中的应用还需进一步研究,脱细胞气管基质在长段气管病损中具有良好的应用前景。     

异种(猪)脱细胞真皮基质移植后炎症免疫反应的实验研究

目的：研究异种（猪）脱细腻真皮基质与薄自体皮复合移植后炎症反应的变化规律及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠，分别于移植后1，2，3，4，8，12，16周取标本，采用组织学观察及RT-PCR技术动态检测异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植后炎症反应及Th1/Th2细胞因子的变化，同时以单纯薄自体皮移植作对照。结果：异种（猪）脱细胞真皮与薄自体皮复合移植后早期存在炎症反应，并随着创面愈合的进行而逐渐消失，Th2细胞因子的表达明显高于对照组。结论：异种（猪）脱细胞真皮基质仍具有一定的免疫原性，Th2细胞因子的高表达说明机体对异种（猪）脱细胞真皮基质的免疫反应主要以体液免疫为主，也可能是异种（猪）脱细胞真皮基质移植后未被排斥的原因之一。     

利用不同支架材料构建人工真皮的研究

目的 探讨脱细胞基质、胶原蛋白基质网架、胶原凝胶的不同支架材料上构建人工真皮的可行性。方法 采用酶消化法分离幼儿包皮成纤维细胞，并进行传代培养；将第3代成纤维细胞种植于三种不同支架上，14天后利用HE染色、透射电镜和扫描电镜对构建的人工真皮结构进行鉴定。结果 ①酶消化法得到皮肤成纤维细胞，可在含有10％小牛血清的DMEM中传代培养；②成纤维细胞在三种不同支架上形成单层细胞，并可向胶原膜和胶原凝胶内部生长；③成纤维细胞在胶原膜和脱细胞基质内增殖不如胶原凝胶内活跃，但人工真皮收缩不明显，而胶原凝胶构建的人工真皮收缩明显。结论 利用脱细胞基质、胶原蛋白基质网架、胶原凝胶支架材料构建的人工真皮具有较好的组织结构，是一种较理想的皮肤替代物，可作为移植物进行深入研究。     

复合型脱细胞真皮基质的研究进展

脱细胞真皮基质作为一种良好的组织修补材料,现已在多学科领域得到广泛应用,但单纯脱细胞真皮基质却很难很好的满足多学科领域的不同要求.复合型脱细胞真皮基质是在脱细胞真皮基质结构基础上研发的新型生物材料,具有更加优良的特性,可以更好的满足不同的移植环境.本文对近几年复合型脱细胞真皮基质的研究进展作一综述.     

骨髓间充质干细胞复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤

目的：体外培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs），复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤，为进一步临床应用奠定基础。方法：将SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增后，以生长状态良好的骨髓间充质干细胞接种于制备好的组织工程化脱细胞真皮支架上，进行体外联合培养，构建组织工程皮肤。观察细胞生长情况及组织工程皮肤结构。结果：体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞生长良好，传代扩增容易，组织工程化脱细胞真皮基质去细胞完全，骨髓间充质干细胞在脱细胞真皮基质中生长良好，可体外构建组织工程皮肤。结论：利用体外扩增培养的骨髓间充质干细胞及制备的组织工程化脱细胞真皮基质可以体外联合构建组织工程皮肤。     

不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的研究

目的：探讨不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的可行性。方法：将激光微孔猪脱细胞真皮分成两组即干燥组和湿润组，每组36片。将成纤维细胞悬液分别滴加在两组真皮表面，培养不同时间点后，每组分别随机留取6个孔的培养液，采用双抗体夹心ELISA法测定上清液中人TGF-β1、bFGF含量。结果：随着培养时间的延长，TGF-p。和bFGF分泌量逐渐增多，第8天达到稳定水平，第10、12天与第8天的含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）；各时间点干燥组各因子的含量均高于湿润组（P〈0．05）。结论：激光微孔猪脱细胞真皮可用为支架构建活性基质，其冷冻干燥后更有利于成纤维细胞的粘附与增殖。     

脱细胞血管基质和间充质干细胞构建组织工程血管

目的 探讨利用异种脱细胞血管基质和间充质干细胞体外构建小口径血管移植物的方法.方法 采用去垢剂和胰蛋白酶去除猪髂动脉血管壁的细胞成分,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估.分离培养犬骨髓问充质干细胞,种植到脱细胞基质上,并进一步在搏动性生物反应器内培养,采用HE染色和扫描电镜对构建的组织工程血管进行检测.结果 脱细胞处理后,猪髂动脉的细胞成分完全去除,细胞外基质保存完好,力学强度轻度下降;脱细胞基质的孔隙率为94.9%.间充质干细胞能够种植到脱细胞基质上,在剪切力的作用下细胞基本融合,高度伸长并且其排列与流体的方向一致.结论 小口径血管移植物可以通过将间充质干细胞种植到异种脱细胞血管基质并在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建.     

器官特异性无细胞基质移植物的研究进展

同种器官供体十分有限和随机 ,且受到组织配型的限制。去除器官组织中的细胞成分 ,使宿主对移植物的抗原反应程度降到最低 ,有望使随机的器官特异性无细胞异体或异种基质移植物成功。 1 964年Grillo等[1 ] 最先对皮肤组织进行脱细胞处理 ,1 977年Oliver等[2 ] 通过胰蛋白酶处理皮肤得到无细胞真皮胶原用作临床创面敷料 ,1 989年BadylakSF用猪小肠制备成无细胞基质移植物(acellularmatrixgrafts,AMGs)成功地进行狗动脉血管搭桥 ,直至 1 995年Wainwright[3] 研制出无细胞真皮基质(ADM ,商品名“AlloDerm”)充当复合皮永久性真皮替代物并…     

全生物化组织工程血管的体外构建

目的 探讨组织工程血管的体外构建:脱细胞血管基质的制备.血管平滑肌细胞和血管内皮祖细胞的体外诱导培养和种植方法.方法 处理猪胸主动脉来获得脱细胞血管基质,采用二步种植法先后种植体外培养的平滑肌细胞和内皮细胞.结果 动脉管壁细胞全部脱除,脱细胞基质胶原蛋白含量与新鲜动脉相似,胶原纤维、弹性纤维呈网状排列,无断裂,基质保持完好.脱细胞血管基质的极限应力比新鲜动脉绀织减小20%[新鲜动脉:(1.1510±1.2870)×10-2,脱细胞血管基质:(0.9215±1.7000)×10-2,t=34.137,P<0.01].种植的平滑肌细胞和内皮细胞生长良好.结论 平滑肌细胞和内皮细胞种植于脱细胞血管基质后生长良好,可体外构建组织工程血管.     

脱细胞异种(猪)真皮基质作为填充材料的初步研究与应用

目的：为临床修复体表凹陷畸形寻求良好的填充材料。方法：用自制脱细胞异种（猪）真皮基质，植入兔皮下，定时进行测量，并进行光镜及电镜观察。临床应用2例。结果：脱细胞异种（猪）真皮基质植入后观察1年，仅在4周内有极轻微的炎性反应，无排斥反应，2周左右有成纤维细胞及毛细胞血管长入，吸收率低于对照组。2例临床应用填充效果较满意，质地较软，无破溃、外露。结论：脱细胞异种（猪）真皮基质组织相容性好，吸收率低，质地软，是一种有良好前景的软组织填充材料。     

脱细胞异体真皮基质补片治疗巨型脐膨出

目的探讨使用脱细胞异体真皮基质生物补片修补术治疗新生儿巨型脐膨出的优势。方法回顾性分析我院近期采用脱细胞异体真皮基质生物补片治疗的巨型脐膨出病例3例,探讨在适应症、手术操作、呼吸机使用、术后并发症等方面的优缺点。结果 3例患儿中,除1例患儿因复杂先心病,家属要求放弃治疗自动出院外,2例患儿恢复良好,痊愈出院,随访至今,无并发症发生。结论脱细胞异体真皮基质补片修补治疗巨型脐膨出效果良好,为巨型脐膨出与腹壁广泛缺损的Ⅰ期修补提供了一种良好的外科治疗方法。     

异种(猪)脱细胞真皮基质微粒注射填充研究

目的：探讨一种新型的注射填充材料，方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质微粒（简称ADM微粒）注入兔耳背皮下并形成皮丘，定时对植入物进行测量，光镜及电镜观察，临床应用于4例面部凹陷畸形整复。结果：ADM微粒注射后从外围向中央细胞化及血管化，12周左右体积基本稳定，48周时吸收率为26．93％左右，临床应用结果满意。结论：ADM微粒安全性好，吸收率低、使用方便，微创。     

低浓度胰蛋白酶消化加反复冻融法制备猪脱细胞真皮基质

目的建立一种新的制作脱细胞猪真皮基质的方法。方法采用0．5g／L胰蛋白酶消化断层猪皮，去除表皮和真皮中部分细胞成分，然后反复冻融进一步去除真皮内残留的细胞成分。分别行大体观察、组织学观察及免疫组织化学等检测。结果制备的猪脱细胞真皮基质内细胞成分可被完全去除，表面保留完整的基底膜，胶原结构排列紧密。结论低浓度胰蛋白酶消化加反复冻融，是制备异种脱细胞真皮基质较为简便、有效的方法。     

猪脱细胞真皮基质修复兔腹壁缺损的实验研究

目的研究猪脱细胞真皮基质修复兔腹壁缺损的效果,探讨异种脱细胞真皮基质应用的可行性。方法健康小白猪1头,取背部及两侧皮肤制备脱细胞真皮基质。26只日本大耳白兔,雌雄不限,体重2.2～2.3 kg,随机分为对照组(n=6)和实验组(n=20)。对照组制备5.0 cm×0.5 cm腹壁缺损,单纯缝合关闭缺损。实验组制备5.0 cm×2.5 cm腹壁缺损,用同样大小的猪脱细胞真皮基质补片(简称"补片")修复,补片基底膜面朝向肠管。术后观察是否有疝形成,比较两组腹腔内脏器粘连情况,以及对照组腹壁肌筋膜单纯缝合处和实验组补片-腹壁肌筋膜吻合处的最大张力,组织学观察补片是否有纤维血管组织长入及其在体内的生物学转归。结果实验动物均无疝形成。术后5周,实验组补片和腹壁融为一体,补片皮肤面和脏器面均有纤维血管组织长入,补片处于新生组织掺入重建过程。实验组1只动物补片和腹腔内脏器粘连较重(2级),5只发生了轻微粘连(1级),12只无粘连(0级);对照组1只轻微粘连(1级),5只无粘连(0级);两组粘连分级比较差异无统计学意义(Z=—0.798,P=0.425)。术后5周,实验组补片-腹壁肌筋膜吻合处的最大张力为(13.0±5.5)N,对照组腹壁肌筋膜单纯缝合处为(13.6±4.0)N,差异无统计学意义(t=—0.410,P=0.683)。组织学观察显示,术后5周,实验组补片中有大量小血管,并有中性粒细胞及淋巴细胞为主的炎性浸润,补片边缘偶见巨噬细胞,补片-腹壁肌筋膜吻合处由纤维结缔组织连接;术后6个月,补片及周围炎性反应消退,胶原纤维结构发生了改建,补片和肌筋膜层由有纤维结缔组织愈合。结论补片修复兔腹壁缺损取得了较好效果,补片-腹壁肌筋膜层愈合,其吻合处的力学强度达到了自体腹壁单纯缝合吻合的力学强度,补片胶原纤维结构发生了改建。     

异体脱细胞组织补片修复即刻牙种植软组织创面的临床研究

目的 评价异体脱细胞组织补片（又称异体脱细胞真皮基质补片，简称补片）修复即刻牙种植创面的临床疗效。方法 应用异体脱细胞组织补片修复51例患者、67个牙位的即刻种植后口腔黏膜缺损创面，将补片的基底面向上，覆盖于种植体及牙槽嵴上，并插入黏骨膜瓣下，碘仿纱包或预成基托固定。术后随访4～6个月，对口腔补片修复创面的愈合情况及组织病理结果观察。种植体骨结合情况随访6个月～4年。结果 术后创面完全封闭愈合54个牙位，部分封闭愈合11个牙位，未封闭愈合2个牙位。无排斥反应。经4～6个月后组织病理检查补片已完全黏膜上皮化，67颗种植体情况经1年观察，无一例失败。结论 异体脱细胞组织补片具有良好的即刻种植创面封闭作用，不影响种植体与骨的结合，且具有手术创伤小、修复美学效果好等优点，可以作为牙即刻种植创面的修复材料。     

异种(猪)脱细胞真皮基质一次性包扎治疗深Ⅱ度烧伤

目的探讨应用异种(猪)脱细胞真皮基质一次性包扎治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床应用效果。方法1997年1月—2004年1月,应用异种(猪)脱细胞真皮基质一次包扎治疗50%~95%总体表面积(TBSA)、深Ⅱ度烧伤的患者67例[异种(猪)脱细胞真皮基质治疗组];同期保痂治疗的50%~95%TBSA、深Ⅱ度的患者10例(保痂治疗组),观察创面愈合时间和愈合质量及其并发症发生情况。治愈患者经过3个月~2年的随诊,观察瘢痕增生情况。结果异种(猪)脱细胞真皮基质治疗组深Ⅱ度创面中途基本不需换药,创面愈合时间缩短,平均(12.2±2.6)d,而保痂治疗组愈合时间为(27.4±3.5)d,差异具有统计学意义(P<0.05);同时,异种(猪)脱细胞真皮基质治疗组瘢痕增生情况较保痂治疗组明显减轻或者无瘢痕增生。结论一次性覆盖异种(猪)脱细胞真皮基质可有效地治疗深Ⅱ度烧伤创面,能加快创面愈合,减轻瘢痕增生,从而降低烧伤感染和炎症反应综合征的发生。     

生物补片人工阴道成形术治疗先天性无阴道

目的探讨生物补片人工阴道成形术治疗先天性无阴道的疗效。方法2010年3月～2013年3月,行生物补片人工阴道成形术治疗21例先天性无阴道,于直肠及尿道膀胱间隙人工造穴,百得塞补片置入造穴腔,并指导患者定期更换模具。结果21例手术均获成功,术后8周人工阴道即完全黏膜化,阴道壁柔软、红润,阴道深度〉8cm,宽度〉3横指。随访9～18个月,有性生活患者（14例）性生活满意。结论生物补片人工阴道成形术是治疗先天性无阴道的可行方法。     

脱细胞真皮基质移植联合固体硅胶假体在隆鼻术中的应用

目的:探讨应用脱细胞真皮基质联合固体硅胶假体在隆鼻术中的运用。方法:将脱细胞真皮基质修剪成合适厚度及形状缝合在硅胶假体鼻尖部,置于患者鼻背筋膜下,进行隆鼻。结果:本组40例,术后随访6个月~1年,没有发生假体移位、下滑、外露,效果满意。结论:应用脱细胞真皮基质联合硅胶假体可以在患者鼻尖部形成"保护垫"增加皮肤厚度,避免假体移位、下滑以及外露等并发症。