组织病理学切片制作过程中脱片原因分析

在组织学和病理学教学及临床诊断中,观察的绝大多数都是用常规染色的石蜡切片.在制作石蜡切片的染色过程中,作者经常遇到组织片从载玻片上脱落的现象,这不仅造成材料的浪费,而且造成前期取材、固定、切片、贴片等大量工时的浪费.     

介绍一种改良分化液

在常规病理制片工作中,造成组织片染色脱片的原因有:①载玻片不清洁;②切片太厚;③捞贴片后片子未烤干;④染色时蜡未脱净.除了上述原因外,在退色时也会发生脱片现象,为此我们分析原因进行了改进,收到了很好的效果.     

介绍一种免疫组化防脱片的制作方法

由于免疫组织化学染色步骤多 ,水洗时间长 ,组织切片容易从载玻片上脱落 ,所以免疫组织化学染色时载玻片需要防脱片处理。防脱片处理方法很多 ,但到目前为止还没有较满意及较规范的方法。我们在长期的实践中总结出一种防脱片的制作方法 ,此法以最小剂量的防脱片制剂制作大量的防脱载玻片 ,而且操作简便 ,效果满意。具体方法介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　多聚 -Ｌ -赖氨酸 (福州迈新公司提供 ) ,清洁干燥的载玻片 15 0张 ,1ｍｌ注射器 1支 ,6 号注射针头 1支。1.2　方法　接好注射器与针头 ,取多聚 -Ｌ -赖氨酸 0 1ｍｌ,蒸馏水 0 9…     

HE染色细胞核发灰的处理方法

常规石蜡切片及细胞学涂片时 ,ＨＥ染色镜检出现细胞核发灰 ,即细胞核内染色质及核仁显示不清 ,呈一片淡兰色云雾状 ,此现象严重时影响病理诊断。细胞核发灰的原因 ,一是石蜡切片的组织固定不及时 ,或组织块取材太厚 ,影响组织固定、脱水、透明和浸蜡所致。二是细胞学涂片中细胞脱落时间过久 ,或在制片过程中人为造成涂片干涸。为此我们经多次试验摸索出一种处理方法 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　ＨＥ染色细胞核发灰的石蜡切片及细胞学涂片。1.2　方法1.2 .1　用酒精灯加热取下切片及涂片上盖玻片 ;1.2 .2　二甲苯 1、2除去树胶 ;…     

防脱片剂在免疫组织化学染色中的应用

目的 对多聚-L-赖氨酸(Poly-L-Lysine)及APES进行比较,讨论哪种防脱片剂更实用.方法 任意选取2006年10月～2007年1月间100例需要进行免疫组织化学染色的常规石蜡组织,做4 μm连续切片,利用多聚-L-赖氨酸及APES处理过的玻片作为载玻片,行免疫组织化学染色,对防脱片效果进行比较.结果 经多聚赖氨酸及APES处理的载玻片掉片率分别为5%及1%.结论 APES更加经济、实惠,经其处理的载玻片保存时间更长,防脱片效果相对更好.在客观条件比较复杂的情况下,APES在防脱片效果方面优势更加明显,推荐应用APES作为免疫组织化学染色防脱片剂.     

纱布覆盖法防止组织切片染色卷脱

以往用涂抹蛋白甘油等粘着剂的方法很难避免某些组织如骨骼、皮肤及血凝块等在切片染色过程中的卷脱现象．对此我们采取在组织切片上覆盖纱布方法彻底解决了这一难题，具体方法是：     

组织病理学切片制作过程中脱片原因分析

在组织学和病理学教学及临床诊断中,观察的绝大多数都是用常规染色的石蜡切片.……     

常规HE染色中蓝化方法的改进

HE染色是病理技术人员的基本功,是生物学尤其是病理学及细胞学诊断工作中必不可少的染色方法。病理组织学的基本知识,绝大部分都是从观察HE染色标本中得来,其染色是否成功直接影响其他方法的选择与进行。但是在临床工作中我们发现,一些前期处理均好的切片,一旦进入氨水中进行蓝化时会出现个别脱片现象,尤其像脱钙后的骨组织、冷冻切片中的脂肪组织、平滑肌组织及甲状腺等纤维成分或脂肪成分多的组织更甚。为了克服其影响因素,减少或不出现脱片现象,我们对常规应用的1%氨水进行了改进,选用免疫组化染色常用的PBS(即磷酸盐缓冲液)替代氨水…     

128例乳腺肿块术中组织印片与快速石蜡切片病理诊断对比

手术中肿块组织印片细胞学检查是病理诊断的重要手段之一。现将我院三年来128例乳腺肿块术中组织印片细胞学检查与快速石蜡切片进行对照观察。1材料与方法128例术中乳腺肿块,新鲜标本立即用锐刀剖面,持载玻片在组织上印压,10％甲醛酒精固定,HE染色。同时进行快速石蜡切片镜检。2结果见附表附表128例乳腺肿块术中组织印片与快速石蜡切片、常规切片病理诊断对比3讨论3．1术中组织印片细胞学检查与。决速石蜡切片同时进行,确实为一种简易、快速、直接、准确的诊断手段。其诊断正确率大部分为95％以上[1]。本组47例乳腺浸润性导管癌印片诊…     

多聚甲醛在免疫组织化学染色防止脱片中的应用

多聚甲醛在免疫组织化学染色防止脱片中的应用贺占国，胡雄，邓平非（白求恩国际和平医院病理科石家庄０５００８２）回顾性研究中，免疫组化染色多用石蜡切片。有些组织中的抗原经甲醛固定，有机溶剂处理后，抗原决定簇被遮盖，需用蛋白酶消化，但许多组织经消化易脱落，...     

术中细胞印片与冷冻切片诊断

术中病理诊断的方法包括冷冻切片、快速石蜡切片和术中细胞学诊断,其中以冷冻切片应用较为广泛,而细胞印片法检查也因其简便、快速广为应用。我们采用细胞印片与冷冻切片对照进行快速病理诊断,探讨印片法的可靠程度、适用范围及临床意义。1　材料与方法1.1　标本　标本均来源于本院住院病人,经石蜡切片确诊且细胞印片和冷冻切片资料完整的病例共230例。1.2　制片　将新鲜未固定的标本用锐刀作多个切面,在病变部位用载玻片上轻轻印数下,每次印片2张。再切取小块组织作冷冻切片1张。印片与切片均用苏木精-伊红染色。1.3　镜检　印片与冷冻切片…     

冰冻切片技术经验探讨

目的探讨冰冻切片制作过程中的常见问题及解决方法。方法针对8 126例甲状腺、子宫、乳腺、脂肪、脑、卵巢、淋巴结、肺、皮肤、肠息肉等不同组织在冰冻切片制作过程中出现的组织脱片、组织收缩、制片困难及冰晶过多和染色时间长、染色效果不佳等问题进行改进。结果通过对取材组织的预处理,包埋剂用量的把握,冷冻时间的控制以及酒精灯和胶片的配合使用,圆满地解决了冰冻切片制作过程中的冰晶过多、、组织收缩、组织脱片等问题。结论冰冻切片中对组织取材、包埋、冷冻及染色的改进,有助于及时准确地制作出优质的冰冻切片,为明确诊断提供了良好的技术支持和条件保障。     

牙胚组织中成釉蛋白表达免疫组织化学和原位杂交的特点

目的：观察人牙胚组织中成釉蛋白的表达特点。 方法：实验于2002—02／04在解放军第四军医大学口腔内科实验室完成。取孕5个月流产男性胎儿（产妇知情同意），截取上、下颌骨，常规方法制备人牙胚组织石蜡切片。用兔抗人AMBN多克隆抗体，对人牙胚组织石蜡切片和正常狗牙周组织石蜡切片进行免疫组织化学染色。标记人成釉蛋白cDNA探针，对人牙胚组织石蜡切片进行原位杂交。 结果：①免疫组织化学染色发现成釉蛋白由内釉上皮细胞在分化为成熟成釉细胞前开始表达，分泌期成釉细胞高度表达并持续整个釉质形成期，新形成的牙釉质染色阳性；成牙本质细胞在分泌牙本质基质之前开始表达成釉蛋白。在牙本质形成过程中成牙本质细胞持续表达成釉噩白，呈弱阳性，前期牙本质中呈弱阳性染色；上皮根鞘细胞染色阳性。狗牙周组织染色发现牙骨质表层细胞呈强阳性染色，新形成的牙骨质中可见阳性染色颗粒，呈网状分布。②对人牙胚组织石蜡切片的原位杂交显示，成釉蛋白在成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞中有表达，表达部位与免疫组织化学结果一致。 结论：内釉上皮首先表达成釉蛋白，之后前成牙本质细胞达成釉蛋白。成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞表达成釉蛋白。     

应用超声波快速石蜡技术制作细胞块切片

细胞病理学是一种常用的病理学检查方法，但工作中常常遇到难以诊断的病例，如少数情况下胸、腹水的细胞学定性，转移癌与间皮瘤的鉴别。细针穿刺中对一些少见疑难病难以定性和分类，细胞学却无能为力，常需要作进一步工作。有文献报道细胞块切片可一定程度地弥补细胞学诊断的局限性，因在制作细胞块切片过程中可部分恢复原组织结构，其中的微小组织碎片经切片也更清楚地显示其组织学特征，还可以作多种特染和免疫组化检查，对疾病的病理诊断、分类有一定的帮助。文献报道细胞块的制作常用琼脂细胞块技术及滴胶双重包埋方法，在工作中发现上述两种方法较繁琐。经试验，用超声波快速处理技术同样能制作出细胞块石蜡切片，弥补脱落细胞学检查的不足和满足细针穿刺细胞(fine needl easpiration cell，FNAC)的诊断，并且快捷，30min内就能完成，与细胞涂片一起观察，能快速作出病理常规诊断，并对提高细胞学检查的准确性有较大帮助。     

颅脑肿瘤细胞病理学研究

目的研究不同类型脑肿瘤细胞形态学特征，并探讨细胞学在术中快速诊断的临床价值。方法取术中或术后颅内肿瘤组织行细胞学印片作出性质与类型诊断，并与组织病理学结论作对比研究。结果不同类型脑肿瘤细胞形态学各具有主要鉴别特征，与常规组织学石蜡切片诊断进行比较，312例印片细胞病理学诊断显示对肿瘤组织分类准确率92.3％：与155例快速冰冻切片诊断准确率93.5％。结论术中印片细胞病理学诊断颅脑肿瘤与组织学诊断结果的符合率高，且两者具有互补性，是一种简便、快速及可靠的有效诊断手段之一，随着在立体定向技术和颅脑穿刺技术的发展与推广，应用细胞病理学快速诊断颅脑肿瘤具有重要意义。     

颅脑肿瘤细胞病理学研究

目的研究不同类型脑肿瘤细胞形态学特征，并探讨细胞学在术中快速诊断的临床价值。方法取术中或术后颅内肿瘤组织行细胞学印片作出性质与类型诊断，并与组织病理学结论作对比研究。结果不同类型脑肿瘤细胞形态学各具有主要鉴别特征，与常规组织学石蜡切片诊断进行比较，312例印片细胞病理学诊断显示对肿瘤组织分类准确率92.3％：与155例快速冰冻切片诊断准确率93.5％。结论术中印片细胞病理学诊断颅脑肿瘤与组织学诊断结果的符合率高，且两者具有互补性，是一种简便、快速及可靠的有效诊断手段之一，随着在立体定向技术和颅脑穿刺技术的发展与推广，应用细胞病理学快速诊断颅脑肿瘤具有重要意义。     

乳白胶作为粘片剂的应用

在病理HE制片及免疫组织化学制片工作中,经常遇到组织切片与载玻片粘合不牢而脱片的情况。既影响工作质量和速度,又造成试剂的浪费。尤其是在免疫组化染色中,因抗体试剂昂贵,若经常脱片,不仅影响病理诊断;也会降低经济效益。因此,使用好粘片剂以减少脱片提高制片质量是病理技术人员必需解决的问题,我们在长期的病理技术工作中,经过反复摸索和多种粘片剂的对比性试验,最后确认乳白胶是一种经济简便,防脱效果较好的粘片剂。现简介如下：三材料与方法1．1材料来源选用木工粘合层板使用的乳白胶。各建材市场都有销售,1．2配制及使…     

RapidCal．Immuno脱钙剂在石蜡组织制片中的应用

我们在日常石蜡组织切片时经常会遇到一些诸如子宫肌瘤、角化严重的皮肤纤维瘤等硬韧组织或脱钙不佳的骨组织石蜡标本.对此类组织往住不易获得较好的石蜡组织切片.我们在工作中试用了RapidCal.Immuno脱钙剂,可以迅速和方便地软化此类硬韧的石蜡组织块,也可以对脱钙不佳的骨组织石蜡标本直接重复脱钙,易于切取较好的组织切片,从而提高HE染色质量.     

病理切片加温快速干燥法

封固是制做常规组织切片的最后一道工序 ,即把盖玻片与载玻片用封固剂粘合在一起。常温下 ,切片中的封固剂彻底干燥需半年 ,然后才能叠加收藏 ,否则胶合物会从盖载玻片间被挤出 ,造成切片污损。目前国内病理实验室多采用常温自然干燥法 ,需将切片单层平放半年 ,不但费时 ,且占许多空间。现介绍一种简单快速的干燥方法。1　材料与方法将常规用的封固剂合成光学树脂 (即ＤＰＸ ,北京北郊化工厂生产 )用二甲苯稀释 (二甲苯用量与树脂之比多为 0 5—1 3∶1)。将刚封固好的切片放入电烤箱 ,6 5℃ ,烘烤 5ｄ ,封固剂即可完全干燥。2　结果干燥的…     

牙胚组织中成釉蛋白表达免疫组织化学和原位杂交的特点

目的:观察人牙胚组织中成釉蛋白的表达特点。方法:实验于2002-02/04在解放军第四军医大学口腔内科实验室完成。取孕5个月流产男性胎儿(产妇知情同意),截取上、下颌骨,常规方法制备人牙胚组织石蜡切片。用兔抗人AMBN多克隆抗体,对人牙胚组织石蜡切片和正常狗牙周组织石蜡切片进行免疫组织化学染色。标记人成釉蛋白cDNA探针,对人牙胚组织石蜡切片进行原位杂交。结果:①免疫组织化学染色发现成釉蛋白由内釉上皮细胞在分化为成熟成釉细胞前开始表达,分泌期成釉细胞高度表达并持续整个釉质形成期,新形成的牙釉质染色阳性;成牙本质细胞在分泌牙本质基质之前开始表达成釉蛋白,在牙本质形成过程中成牙本质细胞持续表达成釉蛋白,呈弱阳性,前期牙本质中呈弱阳性染色;上皮根鞘细胞染色阳性。狗牙周组织染色发现牙骨质表层细胞呈强阳性染色,新形成的牙骨质中可见阳性染色颗粒,呈网状分布。②对人牙胚组织石蜡切片的原位杂交显示,成釉蛋白在成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞中有表达,表达部位与免疫组织化学结果一致。结论:内釉上皮首先表达成釉蛋白,之后前成牙本质细胞达成釉蛋白。成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞表达成釉蛋白。