单克隆抗体对肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

我们试图采用ＣＤ11ｂ、ＣＤ18、ＣＤ54单克隆抗体(单抗)调节博莱霉素(ＢＬＭ)大鼠肺纤维化1周的肺泡巨噬细胞(ＡＭ)的靶位抗原表达,观察其分泌ＩＬ8、血小板衍生生长因子(ＰＤＧＦ)、一氧化氮(ＮＯ)水平的变化,初步探讨其改善肺损伤以及抑制成纤维细胞增殖的机制,为通过抗粘附分子的抗炎治疗来防治肺纤维化的发生奠定实验依据。一、材料与方法1ＢＬＭ肺纤维化大鼠模型的制备:用硫苯妥钠(2ｍｇ/100ｇ)麻醉大鼠,固定,逐层暴露气管,将抽取含ＢＬＭＡ5(天津河北制药厂)05ｍｇ/100ｇ或单纯生理盐水(02～03ｍｌ)1ｍｌ经两气管软骨环间隙向心端刺…     

新型免疫抑制剂--抗CD25单克隆抗体

免疫抑制剂的发现和发展,促进了器官移植科学的兴起。器官移植免疫学的飞速发展,使器官移植排斥反应的作用机制日益清楚,促使新的免疫抑制剂相继问世,其中最受关注的是抗CD_(25)单克隆抗体。下面将对CD_(25)单抗进行探讨。     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达，以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型，观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管，角膜水肿、混浊，基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达；在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达，可能与免疫排斥反应有关。     

FK506对人淋巴细胞CD69,CD25表达的影响

目的 研究ＦＫ５０６对淋巴细胞活化分子表达的影响。方法 实验分３组,（１）对照组：血标本,（２）ＰＨＡ组;血标本＋ＰＨＡ（２０μｇ／ｍｌ）：（３）ＦＫ５０６＋ＰＨＡ组：血标本＋ＦＫ５０６（１μｇ／ｍｌ）＋ＰＨＡ（２０μｇ／ｍｌ）。随机取１６例健康成人新鲜血、每例按上述３组行全血培养,流式细胞仪检测培养后的淋巴细胞活化分子ＣＤ６９、ＣＤ２５的表达。结果 培养后对照组、ＰＨＡ组、ＦＫ５０６＋ＰＨＡ组２     

细胞因子对视网膜色素上皮细胞CD44表达的影响

目的:探讨细胞因子对视网膜色素上皮(RPE)细胞CD44表达的影响及可能的调节机制.方法:取体外培养的第二代兔眼RPE细胞,消化接种于12孔板,分别加入不同浓度(10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L)的碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、血小板源生长因子(PDGF)和肝细胞生长因子(HGF,共同培养12 h后,用流式细胞仪观察RPE细胞膜上CD44的表达情况.以不加任何因子的培养液作阴性对照.结果:正常兔RPE细胞可表达少量CD44.经各种细胞因子诱导后, RPE细胞CD44表达均增加,尤其4种细胞因子联合作用时表达上调最明显,表达水平与细胞因子浓度呈剂量依赖关系.结论:细胞因子b-FGF、TNF-α、PDGF、HGF能诱导RPE细胞CD44表达增强,从而可能促进RPE细胞的黏附及迁移.     

CD25单克隆抗体治疗皮质激素耐药的重度移植物抗宿主病

目的：观察白细胞介素（IL）－2受体α链（CD25）单克隆抗体治疗激素耐药重度移植物抗宿主病（GVHD）的疗效。方法：对异基因造血干细胞移植后诊断皮质激素耐药重度GVHD体17例患者（18例次）,在诊断确立后第1、4（3）、8、15、22天将CD25人源化单克隆抗体（赛尼派）50mg溶于100ml生理盐水中静脉点滴治疗。观察治疗后GVHD缓解情况,副作用以及合并感染情况。结果：（1）18例次中11例GVHD完全缓解,5例GVHD部分缓解,2例无效。（2）7例出现感染。（3）完全缓解11例患者中GVHD复发4例。（4）无输注相关毒副作用。结论：IL－2受体α链（CD25）单克隆抗体治疗重度皮质激素耐药GVHD疗效显著。     

FK506对人淋巴细胞CD69、CD25表达的影响

目的 研究FK506对淋巴细胞活化分子表达的影响。方法 实验分3组,（1）对照组：血标本;（2）PHA组：血标本+PHA（20μg/ml）;（3）FK506+PHA组：血标本+FK506（1μg/ml）+PHA（20μg/ml）。随机取16例健康成人新鲜血,每例按上述3组行全血培养,流式细胞仪检测培养后的淋巴细胞活化分子CD69 、CD25 的表达。结果 培养后对照组、PHA组、FK506+PHA组24 h CD69表达率分别为（2.38±0.47）%、（9.45±2.23）%、（4.71±1.29）%; 72 h CD25表达率分别为（2.60±0.47）%、（20.39±1.78）%、（6.88±1.66）%。经GB-State统计软件分析,FK506+PHA组与PHA 组的CD69、CD25表达率比较存在显著差异（P＜0.01）。结论 FK506能明显减少淋巴细胞活化分子CD69 、CD25的表达,即明显抑制淋巴细胞的活化。     

免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响

目的 探讨免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响.方法 选取2017年1月至2019年4月本院收治的重型再生障碍性贫血患儿74例,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组37例.对照组采用环孢素A(CsA)治疗,研究组在对照组基础上采用抗淋巴细胞球蛋白(ALG)治疗,比较两...     

绿脓杆菌菌毛制剂对人PBMC表达CD2、CD25、CD69抗原的促进作用

目的 :探讨含Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛的绿脓杆菌制剂 ,在体外对正常人外周血单个核细胞 (PBMC)的活化作用。方法 :以绿脓杆菌菌毛制剂 ,作用于体外培养的人PBMC ,采用生物素 -链霉亲和素 (BSA)免疫细胞化学法 ,检测人PBMC表面CD2、CD2 5、CD6 9的表达。结果 :该制剂在实验最适条件下 ,可使PBMC上CD2表达率增加15 2 % ,CD6 9表达率增加 2 9.1% ,CD2 5的表达率增加 18.7% ,这与对照组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :绿脓杆菌菌毛制剂在体外能有效地促进单个核细胞的活化 ,提示该制剂可增强机体的细胞免疫功能。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

抗CD25单抗联合ATG在非血缘造血干细胞移植激素耐药重度aGVHD治疗的应用

目的 探讨抗CD25单抗(antiCD25)联合兔抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)在非血缘造血干细胞移植(UD-HSCT)耐激素重度急性移植物抗宿主病(aGVHD)治疗的效果.方法 回顾性分析10例(12例次)白血病患者在UD-HSCT过程出现耐激素重度aGVHD后,接受标准剂量antiCD25与中低剂量ATG联合治疗后的效果以及生存率、感染、复发等情况.结果 10例患者中有8例完全缓解,2例获得部分缓解;完全缓解的8例中,有2例分别在移植后3～3.5月再出现aGVHD达Ⅲ度,经再应用antiCD25联合ATG治疗均获完全缓解;12例次联合用药,中位起效时间5 d(3～10d).在完全缓解的10例次中,中位达到完全缓解时间12 d(8～30 d).生存时间超过3月以上的8例患者中,7例患者出现慢性移植物抗宿主病(cGVHD),其中广泛性cGVHD4例;未见白血病复发情况.联合治疗后5例患者出现真菌感染,反复CMV-Ag检测阳性者2例.移植后随访2年余,仍存活5例,生存时间均超过2年;有5例死亡,其中1例生存时间超过1年,4例生存时间小于6月.死亡原因包括:aGVHD2例,cGVHD引致多器官功能衰竭1例,真菌感染2例.结论 antiCD25联合中低剂量ATG治疗UD-HSCT后耐激素重度aGVHD,可能有较好的治疗缓解率及长期生存率.     

Expression of Anti-CD4 Human/Murine Chimeric Antibody and Their Killer Tumor Activity

MonoclonalantibodiesagainstCD4molecule(anti-CD4McAb)ofhumanTlymphocyteshavebeensuccessfullyusedforthetreatmentofautoimmunediseasesandpreventionoforgantransplantationrejectioninhuman[1'Zj.However,murinemonoclonalantibodies(Ahs)haveimmunogenicityonhumanandproduceneutralizinghumananti-mouseantibodies(HAMA).ToreducetheimmunogenicityofmurineMcAbinhuman,chimericAhshavebeenproduced,inwhichtheVregionsofthemouseantibodywiththedesiredspecificityarecombinedwithhumanCregions["4j.Inthisstudy,anti-C…     

IL-1ra抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的　观察白细胞介素 - 1受体拮抗剂 (IL 1ra)对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响。方法　建立大鼠同种异体穿透性角膜移植动物模型 ,受者随机分为生理盐水对照组 ,CsA治疗组 ,IL - 1ra治疗组。术后连续观察 2周 ,对各组大鼠角膜植片存活情况进行评分比较 ,评价药效。结果　IL - 1ra组与CsA组角膜植片存活时间分别为 (19.5 83± 0 .2 88)d和 (16.667± 0 .43 2 )d ,与对照组 (11.0 0 0± 0 .3 2 6)d相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组和CsA组排斥反应指数 (RI)均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组新生血管评分明显低于对照组和CsA组 (P <0 .0 1)。结论　IL - 1ra可明显抑制角膜移植术后免疫排斥反应 ,减轻炎性反应 ,减少新生血管生成 ,延长角膜植片的存活时间     

抗CD3单抗增强激活骨髓抗白血病效应的研究

目的：为了研究增强ｒＩＬ－ ２ 激活的骨髓细胞（激活骨髓ＡＢＭ）的抗白血病效应。方法：应用抗ＣＤ３ 单抗与ｒＩＬ－ ２ 联合作用体外激活骨髓细胞,采用ＭＴＴ比色分析法测定不同条件下ＡＢＭ杀伤肿瘤细胞活性。结果：ｒＩＬ－ ２、抗ＣＤ３ 单抗＋ ｒＩＬ－ ２ 体外诱导３ ｄ 的ＡＢＭ 杀伤活性分别为５６．４％ ±９．０％ ,６５．８％ ±９．２％ ,两组相比差异显著（Ｐ＜ ０．０１）;体外诱导７ ｄ 细胞增殖倍数分别为３．７,６．０ 倍。结论：在合理的诱导条件下,能够增强ＡＢＭ 的杀伤活性,扩大ＡＢＭ 的增殖效应,从而使有限的骨髓细胞在短期内达到有效的治疗剂量     

肾移植术后单剂应用人源化抗CD3单克隆抗体的临床观察

目的 研究肾移植受者体内应用人源化抗CD3单克隆抗体(OKT3)注射液单次剂量递增给药后的短期和长期安全性.方法 2008年6-12月,共29例肾功能稳定的尸体肾移植受者入选该研究.每位受试者按入组顺序随机分至2.5 mg(n=9)、5.0 mg(n=10)、10.0 mg(n=10)3个剂量组,并于移植术后7～14 d内接受相应剂量的OKT3单次给药.同时选取同期未参加试验的30例肾移植受者作为对照组.所有患者至少随访2年,随访期间监测肝功能、肾功能、血常规等指标,并观察有无其他不良事件.结果 各剂量组受试者在给药后48 h内,出现低热(7/29)、畏寒(4/29)、肝功能损害(2/29)、上呼吸道感染(1/29)和头痛(1/29),未出现明显的首剂效应,其余的不良反应轻微,发生率与剂量无关.随访期间内,试验组和对照组2-年人/肾长期存活率分别为100%/100%和100%/97%;移植肾活检证实的急性排斥发生率分别为6.9%(2/29)和10.0%(3/30),肺部感染发生率分别为10.3%(3/29)和13.3%(4/30).术后1周及3、6、12、24个月监测血肌酐值显示,两组差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 人源化OKT3不同剂量单次给药在肾移植受者体内安全性良好,其有望成为一种抗排斥能力强、毒副作用较小的免疫抑制剂.

Abstract：

Objective To evaluate short-term and long-term safety of using single-dose escalation of recombinant humanized anti-CD3 monoclonal antibody (OKT3) in kidney transplantation recipients.Methods A total of 29 recipients of cadaveric kidney transplant from June 2008 to December 2008 were sequently assigned to receive single-dose intravenous injection of OKT3 with different doses of 2. 5 mg( n =9) , 5.0 mg (n = 10) and 10. 0 mg (n = 10) at Days 7 - 14 post-operation. Meanwhile, a control group was established by selecting kidney transplant recipients, who did not participate in the trial in the same period.All patients were followed up for at least 2 years. During this period, liver function, kidney function,hemoglobin and other biochemical indicators were monitored and adverse events recorded over time. Results No obvious first dose effect was observed,except low heat (7/29), chills (4/29) , mild liver damage (2/29) , upper respiratory tract infection and headache (1/29) across all doses. Other adverse reactions were mild, unrelated with doses. The 2-year patients/ grafts survival rates of treatment goup and control group were 100% / 100%, and 100% / 97%, respectively. The incidence of acute rejection confirmed by renal biopsy was 6. 9% (2/29) and 10. 0% (3/30) in treatment group and control group, respectively. The incidence of lung infection was 10. 3% ( 3/29 ) and 13.3% ( 4/30 ), respectively. The values of serum creatinine at 1 week and 3, 6, 12, 24 months showed no statistically significance in two groups ( all P ＞0. 05). Conclusion It is safe to use single-shot OKT3 intravenously in kidney transplant recipients. The recombinant humanized OKT3 may be an effective immunosuppressive agent with milder toxicity for solid organ transplantation.     

穿透性角膜移植术后角膜内皮细胞变化的临床观察

目的 :观察穿透性角膜移植术后角膜内皮细胞变化的规律及其影响因素。方法 :角膜移植术后植片透明 88眼 ,分别按有无术后排斥反应、术前疾病种类及病变程度分组观察。结果 :未发生明显排斥反应组术前植片与术后 1年对比变化明显 (P <0 .0 1) ;排斥反应前后角膜内皮细胞对比变化显著 (P <0 .0 1) ;不同疾病及病变程度术后角膜内皮细胞对比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :术后 1年内角膜内皮细胞的各项数据明显改变 ,而且与术后排斥反应及术前疾病种类、病变程度密切相关。     

抗Ia单克隆抗体对异基因小鼠皮肤移植物的影响

目的　探讨抗Ia抗体对移植皮片存活期的影响。方法　用A .TL鼠 (H 2 k)皮肤及淋巴细胞免疫A .TH鼠(H 2 S) ,取脾细胞与骨髓瘤细胞 (P3U1 )融合后 ,经HAT培养基选择性培养 ,得到杂交瘤细胞 ,用补体依赖的细胞毒试验检测上清中的抗体与人B细胞反应的活性 ,阳性孔细胞以有限稀释法进行克隆化 ,得到抗Ia单克隆抗体 ,预先将抗Ia抗体注入异基因皮肤移植的受体小鼠腹腔后 ,观察移植皮片存活期。结果　实验组皮肤移植物存活期与对照组相比明显延长 (P <0 .0 1 )。结论　抗Ia单克隆抗体能延长异基因移植皮片存活期     

不同方法收集单克隆抗体浓缩后的结果分析

[目的 ]寻找一种尽可能保持单克隆抗体效价的方法。 [方法 ]两种收集方法通过PP - 6蠕动泵浓缩抗体同为 2 5 6 ( ) ,看弃液量。 [结果 ]培养瓶收集的上清液效价比盐水瓶收集的上清液效价高 ,但两者浓缩后达到相同的效价弃液量相差不多。 [结论 ]单克隆抗体效价保存存在平台期 ,应冷冻保存 ,等浓缩时再复苏 ,这样下降能缓慢些     

鼠抗CD71单抗轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析

目的 获得鼠抗人CD71分子单抗的轻链及重链可变区基因。方法 用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠重、轻链可变区的通用引物,通过PCR扩增基因．分别克隆人pMD18－T载体中,作核苷酸序列分析。结果用重链引物扩增获得长约350bp的片段,用轻链引物扩增获得长约330bp的片段,序列测定获得它们的DNA序列。结论克隆的重链可变区基因长度为348bp,属于小鼠H链可变区IA亚组;克隆的轻链可变区基因长度为336bp,属于小鼠K轻链可变区Ⅱ亚组。