大肠癌多药耐药基因的定量分析及其临床意义

目的：探讨多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）基因及其编码的糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，Ｐ－ｇｐ）在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量分析ｍｄｒ１基因在不同分化程度、不同Ｄｕｋｅ’ｓ分期的癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达量；应用免疫组化方法检测相应的Ｐ－ｇｐ表达率。结果：大肠癌组织、癌旁组织正常组织的ｍｄｒ１基     

RT-PCR法定量检测恶性淋巴瘤多药耐药基因的表达

目的：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者多药耐药基因表达情况，以探讨NHL患者的抗药性与临床化疗的关系。方法：对30例淋巴瘤患者采用RT－PCR技术检测多药耐药基因（MDR）表达情况。结果：30例患者MDR1阳性表达13例，这13例MDR1阳性的淋巴瘤患者，没有1例经1个疗程化疗即能完全缓解。结论：RT－PCR是一种敏感性高、特异性强，可定量检测MDR1表达。MDR1表达可作为一个临床化疗耐药指标，有助于淋巴瘤患者个体化疗方案制定。     

RT-PCR定量检测急性白血病多药耐药基因(MDR1)的表达

 用定量RT一PCR方法检测了急性白血病在初治、复发时MDRI的表达水平,并探讨其临床意义。     

用RT—PCR法检测新鲜癌组织中多药耐药基因（mdr—1）表达的体会

目的：恶性肿瘤细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）已普遍受到关注，其分了学基础之一是ｍｄｒ－１基因的过表达，检测ｍｄｒ－１基因的方法较多。本研究旨在介绍反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１基因表达的经验。方法：选取安阳市肿瘤医院１９９４年１１月～１９９５年９月术前未作治疗的恶性肿瘤切除标本１５１份。以ＲＴ－ＰＣＲ检测其ｍｄｒ－１基因的表达情况，评价ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ－１基因中的注意事项及优点     

多药耐药基因（mdr—1）RT／PCR检测方法的影响因素

多药抗药性是肿瘤化疗失败的主要原因，在多药耐药基因（mdr-1）检测方法中，PCR具有简便、灵敏、特异性强等特点，我室建立了检测mdr-1mRNA的逆转录／多聚酶链反应（RT／PCR）方法，并用KB耐药细胞对其进行了验证，检测灵敏度达8×104个细胞．在实验过程中摸索了RNA提取及反转录PCR过程的技术关键，为临床mdr-1检测提供了一种实用、稳定的手段。     

多药耐药基因mdr-1在肝门部胆管癌组织中的表达及其意义

目的：检测肝门部胆管癌新鲜组织中多药耐药基因（ｍｄｒ－１）ｍＲＮＡ表达，探讨其与肝门部胆管癌临床病理间的关系。方法应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对２６例术前未作治疗的肝门部胆管癌，１２例正常胆管组织的ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ表达进行了检测，并与癌组织的分化程度，病理类型、部位、浸润转移作对比研究。结果：２６例肝门部胆管癌组织中ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ的阳性表达率为６５．４％（１７／２６），正常胆管     

贲门癌组织中多药耐药基因和多药而药相关蛋白基因表达的临床

目的 了解多药耐药基因（ＭＤＲＩ）和多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ）在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了５６例贲门癌及癌旁组织中ＭＤＲＩ和ＭＲＰ的表达。结果 癌组织 ＭＤＲＩ和ＭＲＰ表达的阳性率分别６３％和５０％,均高于癌旁组织（Ｐ〈０．０５）有化疗的ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ和ＭＤＲ１和ＭＲＰ表达的水平高于未化疗者（Ｐ〈０．０５）;中低分化肿瘤的的ＭＤ     

初治卵巢癌组织MDR1表达水平的定量测定及其意义

目的:探讨初治卵巢癌组织多药耐药基因(MDR_1)表达水平及其对相关药物抗肿瘤作用的影响.方法:用逆转录酶链聚合反应(RT—PCR)法对37例初治卵巢癌组织MDR_1表达水平进行了定量测定.结果:37例卵巢癌组织均有MDR_1表达,其中浆液性癌的表达水平为0.75±0.22,粘液性癌为1.03±0.28,内膜样癌为0.57±0.11,3种病理类型之间MDR_1的表达水平有显著性差异(P<0.05);34例卵巢癌的小鼠肾包膜下移植肿瘤药敏测定(SRCA)肿瘤药敏试验成功,此34例的MDR_1表达水平与ADM及VCR在SRCA中的抗肿瘤作用呈负相关,与VP16的抗肿瘤作用无相关关系.结论:初治卵巢癌存在固有的MDR_1表达,MDR_1的表达降低相关药物的抗肿瘤作用.     

卵巢癌多药耐药基因的表达及其逆转

目的　探讨特异性靶向ＭＤＲ１基因的ｓｉＲＮＡ逆转耐药型卵巢癌细胞株多药耐药的可行性。方法　设计靶向于ＭＤＲ１基因的３条ｓｉＲＮＡ,用脂质体转染试剂分别转染Ｐ ｇｐ阳性表达的卵巢癌ＳＫＯＶ３／ＡＲ细胞,ＲＴ ＰＣＲ检测转染后４８小时ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的变化,流式细胞技术检测转染后７２小时Ｐ ｇｐ的表达情况;ＭＴＴ法检测转染前及转染后４８小时ＳＫＯＶ３／ＡＲ细胞对阿霉素、紫杉醇的敏感性。结果　与空白对照组相比,含靶向ＭＤＲ１基因的ｓｉＲＮＡ-１组、ｓｉＲＮＡ-２组、ｓｉＲＮＡ-３组的ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达水平均有显著下降（Ｐ＜０.０５）,对ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的抑制率分别为４３.３％、４1.３％和５８.５％,其中ｓｉＲＮＡ-３组对靶基因的抑制作用较强,而空白对照组、脂质体组和阴性对照ｓｉＲＮＡ组靶基因表达水平则无明显变化。将ｓｉＲＮＡ／ＭＤＲ１-３转染细胞７２小时后可观察到Ｐ-ｇｐ阳性表达率显著降低（Ｐ＜０.０５）,其抑制率为３７.９５％,而空白对照组、脂质体组及阴性对照ｓｉＲＮＡ组Ｐ-ｇｐ表达无明显降低（Ｐ＞０.０５）。ｓｉＲＮＡ ３干扰ＳＫＯＶ３／ＡＲ细胞后,阿霉素和紫杉醇的ＩＣ５０分别下降为干扰前的１／３.５６和１／３。结论　ＲＮＡｉ在体外实验能有效逆转卵巢癌细胞的耐药,为其在实体瘤耐药逆转的运用提供了实验依据,值得进一步研究。     

非小细胞肺癌多药耐药基因表达及环孢菌素A对其逆转作用

研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达与化疗疗 间的关系,观察环孢霉素逆转ＭＤＲ１的疗效及毒性。方法利用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４６例ＮＳＣＬＣ患者肿瘤细胞和外周血淋细胞ＭＤＲ１表达,根据检测结果将患者分成ＭＤＲ１阳性逆转组、ＭＤＲ１阳性对照组和ＭＤＲ１阴性组。所有患者接受至少２个周期的化疗,阳性逆转组患者在化疗同时给予ＣｓＡ,剂量为４ｍｇ／ｋｇ。结果肿瘤细胞同阳性率为６５．２     

大肠癌组织及结肠癌细胞系中FHIT基因的异常表达

目的：探讨ＦＨＩＴ基因与大肠癌的关系。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ及ＰＣＲ产物直接测序法,对３０例大肠癌组织及其配对正常组织,４个结肠癌细胞系的ＦＨＩＴ基因进行检测。结果：在８例（２６．７％）大肠癌组织和２个（５０％）结肠癌细胞系中检测到异常ＦＨＩＴ转录本,配对正常组织均无异常ＦＨＩＴ转录本;测序证实异常转录本缺失１￣３个ＦＨＩＴ外显子。异常ＦＨＩＴ转录本与大肠癌患者的年龄,性别、血清ＣＥＡ水平、肿瘤部     

MDRI基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测多药耐药基因MDR1 mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床应用价值。方法 选择卵巢癌组织30例、卵巢良性肿瘤组织30例、正常卵巢组织30例。采用RP－PCR复合定量技术检测卵巢癌组织中的耐药相关基因MDR1 mRNA的表达水平及分析其表达与临床化疗的相关性。结果 正常卵巢组织不表达MDR1基因;卵巢良性肿瘤组织MDR1基因表达率为10．0％;卵巢癌组织表达率为73．3％,其中高表达率占77．3％。卵巢癌组织中MDR1基因表达与卵巢良性肿瘤的比较,有非常显著性差异（P＜0．01）。卵巢癌术前化疗组MDR1基因表达率为83．3％;术前末化疗组MDR1基因表达率为58．3％,2组比较无显著性差异（P＞0．05）。定量分析表明化疗可以诱导MDR1基因表达水平增高,与非化疗组比较有非常显著性差异（P＜0．01）。结论 MDR1基因表达与卵巢癌有关。MDR1表达与卵巢癌化疗与否无关,但化疗可诱导MDR1基因表达水平增高。因此检测MDR1基因表达水平的变化可以预测继发耐药性。在判断卵巢癌临床用药时,检测MDR1耐药相关基因的表达情况可得到一定的耐药信息,对临床化疗方案的制定有较大的应用价值。     

应用RT-PCR方法定量分析大肠癌患者多药耐药基因表达水平及其临床意义

目的：探讨大肠癌患者多药耐药与组织学分级和临床病理学Ｄｕｋｅｓ分期之间的关系。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法检测了６０例大肠癌患者肿瘤组织的ｍｄｒ－１表达水平,同时检测了其中２０例大肠癌患者的正常大肠组织作为对照。结果：高、中、低分化大肠癌组织之间ｍｄｒ－１表达水平具有极显著差异,大肠癌组织和正常大肠组织之间ｍｄｒ－１表达水平具有极显著差异,Ｄｕｋｅｓ分期的不同期之间ｍｄｒ－１表达水平无显著差异。结论：临床检测大肠癌患者ｍｄｒ－１基因的表达,可以预测患者对化疗的敏感性,从而进行有针对性的治疗,使化疗个体化。     

ERK信号传导抑制逆转大肠癌多药耐药的研究

促分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的信号传导途径,是细胞生长和分化的重要环节.Ras/Raf-1/Mek1/2/Erk1/2,即ERK1/2信号传导通路,是MAKP众多通路中的一个.肿瘤细胞在化疗药物作用下,出现P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达增加的同时,也发现了MAPK活性的增加.     

中医药逆转大肠癌耐药的实验研究进展

0引言 在世界范围内,大肠癌的发病率男女均处于恶性肿瘤的第3位,在我国,大肠癌的发病率亦呈上升态势,居恶性肿瘤的第4位[1].虽然目前该病仍以手术治疗为主,但术后5年生存率却一直停留在50%左右[2].对于手术后及失去手术机会或术后复发的肠癌,化疗是重要的治疗手段.但在化疗药物不断更新的今天,疗效仍不理想.     

环孢霉素A联合他莫昔芬对大肠癌耐药逆转的研究

目的探讨应用环孢霉素A(CsA)联合他莫昔芬(TAM)逆转大肠癌多药耐药的临床疗效.方法用免疫组织化学技术对大肠癌的P-蛋白表达进行检测,筛选阳性病例同时进行骨髓微小转移检测,选择二者皆为阳性患者作为研究对象,并随机分为两组,比较CsA联合TAM加化疗组与单纯化疗组疗效.结果在大肠癌中P-蛋白表达阳性率为66.6%(56/84),在P糖蛋白(P-gp)阳性病例中,骨髓微小转移(BMM)阳性率为57.1%(32/56).CsA联合TAM对逆转大肠癌多药耐药有一定作用,加逆转剂组疗效高于不加逆转剂组(P＜0.05).结论在大肠癌中P-gp有较高的表达率,CsA联合TAM对逆转大肠癌多药耐药的临床应用安全,且有一定疗效.     

肺癌耐药相关基因在肺癌组织和肺癌细胞株中的表达

背景与目的：我们已经通过抑制消减杂交技术发现了一条新的长494bp的肺癌耐药相关基因片段,并克隆了它的全长cDNA序列。本研究旨在研究该肺癌耐药相关基因（lung cancer drug resistance-related gene,LCDRG）在肺癌组织、癌旁组织及5种肺癌细胞株中的表达。方法：应用半定量RT－PCR检测38例肺癌组织、12例癌旁组织和5种肺癌细胞株中该基因的表达。结果：肺癌组织中LCDRG mRNA的表达明显高于癌旁组织（P＜0．001）,但在肺腺癌和鳞癌之间差异无统计学意义。该基因在肺腺癌细胞株SPC－A－1和A549、大细胞肺癌细胞株H460、小细胞肺癌细胞株H446和SH77中的表达依次递减。结论：LCDRG是一条肺癌相关基因,该基因可能与肺癌的发生、发展密切相关。     

载体表达小干扰RNA逆转卵巢癌的多药耐药

目的:探讨载体表达的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)逆转卵巢癌细胞多药耐药的可行性。方法:浓度梯度诱导法建立人卵巢癌阿霉素耐药细胞株OVCAR/AR;脂质体介导将MDR1特异性siRNA的表达载体(pSN/mdr1a和pSN/mdr1b)转染OVCAR/AR细胞;实时定量RT-PCR检测MDRlmRNA的表达;流式细胞术检测P-gp的表达,罗丹明试验检测P-gp的药物转运功能;MTT法检测OVCAR/AR细胞对化疗药的抵抗性。结果:转染pSN/mdr1a和pSN/mdr1b后,OVCAR/AR细胞的MDR1mRNA和P-gp的表达均显著下降,P-gp的转运功能减少,OVCAR/AR细胞对阿霉素、泰素的耐药性逆转。结论:载体表达的siRNA可持久有效地抑制卵巢癌耐药细胞MDR1mRNA和P-gp的表达,并逆转其多药耐药。     

大肠癌DCC基因mRNA表达的频发缺失

我们应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术检测25例大肠癌组织中DOC基因mRNA表达状况,结果发现:该基因表达缺失在大肠癌组织中发生率为52.0％(13/25),其中高、中、低分化大肠癌中分别为28.6％(2/7),50.0％(4/8),70.0％(7/10)(P<0.05)。在有转移肿瘤中为76.9(10/13),无转移肿瘤为25.0％(3/12)(P<0.05),结果表明:该基因是影响大肠癌发生,发展的重要因素之一。对该基因表达的检测可望作为判断大肠癌恶性表型及预后的一项分子生物学指标。