二步聚合酶链反应检测皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排

目的　应用二步聚合酶链反应 (PCR)检测皮肤T细胞淋巴瘤 (CTCL)的T细胞受体(TCR)基因重排 ,提高其准确性和特异性 ,并应用已知重排的cDNA序列 ,推测该病患者的特异肽链顺序 ,为免疫治疗提供新线索和途径。方法　先用TCR基因重排区域以外的部分为引物 ,做 1 0～ 30个循环扩增。取得一定数量的cDNA ,作为模板 ,再经 30～ 40个循环扩增 ,获得较纯的cDNA。然后将此产物放入质粒 ,进一步分析DNA序列。按照分析结果 ,制备出特异的分子探针 ,对二步PCR扩增产物进行分子杂交 ,推测出患者的特异性肽链顺序。结果　以Vβ8为特殊引物所显示的反应带明显 ,用Vβ8顺序制成的分子探针杂交 ,示明显的特异性结合。特异性分子探针只与CTCL患者的cDNA杂交 ,与对照组标本不发生交叉反应。结论　二步PCR可准确地检测CTCL的TCR基因重排 ,其特异性强 ,并可在此基础上应用已知重排的cDNA序列推测该病患者的特异性肽链 ,为免疫治疗提供新线索和途径     

皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因克隆性重排

目的 研究皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）早期诊断。方法 利用PCR方法，设计PCRVγ1-8,Vγ9,Jγ1/γ2特异引物，分析24例各类型CTCL，2例可疑CTCL及4例非特异性红皮病患者的33份示TCRVγ1-8,37份示Vγ9呈MCGR，BCGR或OCGR，尤其是13例早期蕈样肉芽肿，2例可疑CTCL和4例非特异性红皮病均呈TCRγ-GR克隆性扩增带，6例炎性病变标本示TCRγ-GR克隆性，提示他们为“克隆性皮炎”，需长期随访。结论 用PCR发现早期CTCL的PCRγ-GR克隆性，为诊断提供依据。     

原发性皮肤T细胞淋巴瘤T细胞受体基因重排检测

Southern印迹分析（SBA）和取和合酶链反应（PCR）法检测早期（IA）和组织学上未确诊的蕈样肉芽肿（MF）皮肤损害的T细胞受体基因重排（TCRGR）阳性率分别为50％以上和19％,有助于诊断。IIA期MF患者特别是伴浅表淋巴结肿大（组织学上大都是反应性增生）的外周血中TCRGR阳性率较高（65％－80％）,支持MF早期即为一系统性疾病的理论,但外周血中克隆T细胞和预后相关性则难于确定。Sezary综合征（SS）的TCRGR的发生率在皮肤、淋巴结和外周血中分别为70％、100％和86％。非MF／SS皮肤T细胞淋巴瘤的皮肤 损害和外周血中TCRGR亦较常见。淋巴瘤样丘疹病的皮肤损害和外周血中也可见TCRGR。     

原发性皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排分析

目的：评价Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析（ＳＢＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性皮肤Ｔ细胞淋巴瘤（ＰＣＴＣＬ）Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排（ＧＲ）的意义。方法：以ＰＣＲ扩增ＴＣＲγ的结合Ⅴ（可变区）－Ｊ（结合区）序列（ＴＣＲγＰＣＲ）和ＳＢＡ分析ＴＣＲβ链基因（ＴＣＲβＳＢＡ）检测克隆性ＧＲ。结果：蕈样肉芽肿（ＭＦ）：ＴＣＲγＰＣＲ和ＴＣＲβＳＢＡ检测６例ⅡＡ期和７例ⅡＢ期皮损标本的ＧＲ分别为５例和４例以及６例和５例，外周血分别有４例、２例和５例、３例示ＧＲ；而７例ⅠＡ期和１０例ⅠＢ期的ＴＣＲγＧＲ和ＴＣＲβＧＲ皮肤组织为４例、１例和７例、１例，外周血为３例、阴性和４例、１例。１例ＭＦⅡＡ表现为皮病性淋巴结病患者的淋巴结中证实有ＧＲ。疑诊ＭＦ：１１例患者的皮损和外周血标本经ＴＣＲγＰＣＲ检测５例皮肤和３例外周血见ＧＲ。非蕈样肉芽肿、Ｓéｚａｒｙ综合征的ＰＣＴＣＬ：ＰＣＲ和ＳＢＡ显示ＴＣＲＧＲ分别为皮肤组织占９例／１０例和６例／８例，外周血占９例／１０例和６例／１１例。Ｓéｚａｒｙ综合征和淋巴瘤样丘疹病：２例Ｓéｚａｒｙ综合征外周血和其中１例皮肤标本同时见ＴＣＲγＧＲ和ＴＣＲβＧＲ；２例淋巴瘤样丘疹病的皮肤标本     

原发性皮肤T细胞淋巴瘤的基因重排

原发性皮肤Ｔ细胞淋巴瘤的基因重排王平①综述邱丙森②审校对淋巴样细胞浸润的诊断和鉴别以往主要根据这类疾病的表现和组织病理形态的对照。随着单克隆抗体的应用，可确定淋巴细胞的系别、分化阶段和活化与否。根据淋巴样细胞表达单一型免疫球蛋白，虽可确定其为单克隆性...     

克隆性T细胞受体基因重排检测在皮肤T细胞淋巴瘤中的应用

 

年，卷(期)：

2009, 26(5) 

分类号：

R739.5 

关键词：

淋巴瘤    T细胞    皮肤    基因重排    抗原受体   

机标分类号：

R73 R39 

机标关键词：

克隆性细胞受体基因重排检测皮肤淋巴瘤细胞淋巴瘤单个淋巴细胞特异性识别组织淋巴判断预后机制研究分化过程恶性增殖诊断失调能力抗原疾病发病病变 

基金项目：

 

DOI：

 

参考文献(24条)

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TCR基因重排在皮肤T细胞淋巴瘤中的应用

T细胞在成熟过程中通过T细胞表面受体基因重排,从而具有特异性识别抗原的能力,在这一过程中的任何失调都会导致疾病。皮肤T细胞淋巴瘤是由于单个淋巴细胞的恶性增殖所导致的,病变组织表现出T细胞受体基因重排克隆性。蕈样肉样肿和Sézary综合征为最常见的皮肤T细胞淋巴瘤。T细胞受体基因重排的检测在皮肤T细胞淋巴瘤的发病机制研究、分类、诊断、判断预后上有重要的作用。     

皮肤T细胞淋巴瘤皮损与外周血中TCRγ基因重排的检测

目的：了解已确诊为皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）患者的皮损和外周血中T细胞受体γ链基因重排（TCRγGR）情况。方法：利用PCR测定21例CTCL患者皮损及外周血TCRγGR，扩增产物经琼脂糖及变性梯度凝胶电泳检测。结果：CTCL患者皮损中TCRγGR阳性率显著高于外周血（P〈0．05）；病程≥12个月的患者外周血中TCRγGR阳性率显著高于病程〈12个月的患者（P〈0．05）；年龄≥60岁患者皮损和外周血中TCRγGR阳性率显著高于〈60岁患者（P〈0．05）。结论：在CTCL患者中存在TCRγGR，早期出现在皮损中的TCRγGR可作为CTCL辅助诊断，并有益于CTCL的早期诊断，外周血中检测出TCRγGR可作为皮损阳性结果的补充。     

原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤T细胞γ受体、IgH基因重排

目的：探讨原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤(C-ALCL)临床病理特点和基因诊断方法。方法：对6例C-ALCL的临床表现、病理形态学和免疫组化染色进行观察,并用PCR方法对石蜡标本进行T细胞γ受体(TCRγ)和重链免疫球蛋白(1gH)基因重排检测。结果：临床起病以孤立性结节多见,病情进展缓慢,个别可自行消退。5例患者经治疗病情稳定,1例死于淋巴结及肝脏转移。镜下以75％以上CD30^ 间变性大细胞弥漫浸润真皮及皮下脂肪组织为特点,多数瘤细胞表达T细胞免疫表型。5例标本TCRγ基因重排阳性。结论：C-ALCL是少见的原发皮肤的低度恶性T细胞性淋巴瘤,预后较好。综合临床表现、组织病理改变、免疫组化及基因重排检测有助于本病的正确诊断。     

第四讲 皮肤淋巴瘤皮肤T细胞淋巴瘤向大细胞淋巴瘤转化

阐述皮肤T细胞淋巴瘤向大细胞淋巴瘤转化的临床表现、组织病理、免疫组织化学染色、分子生物学特征、诊断和鉴别诊断与治疗。     

细胞毒T细胞识别皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体个体基型肽抗原

目的 确定细胞毒Ｔ细胞是否能识别由第三互补决定区特异基因编码的肽。方法 选择两例皮肤Ｔ细胞淋巴瘤（ＣＴＣＬ）患者（ＳＳ和ＡＲ）和ＣＤ４＾＋、Ｖβ８＾＋恶性Ｔ细胞作为测定肽序列的细胞,ＣＤ８＾＋非恶性Ｔ细胞作为杀伤或反应性细胞,和转化的淋巴母细胞样细胞作为主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）抗原提呈的细胞。结果 患者ＳＳ的恶性Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）β链的个体基因型肽可刺激ＣＤ８＾＋Ｔ细胞产生肿瘤坏死因子（Ｔ     

皮肤T细胞淋巴瘤的治疗选择

皮肤Ｔ细胞淋巴瘤中的ＭＦ和Ｓｅｚａｒｙ综合征是最先表现在皮肤上的非何杰金病。早期病变局限于皮肤，最好选用局部治疗，例如局部外用氮芥，ＰＵＶＡ及全层皮肤电子束放疗等。对出现红皮病的患者首选体外光置换疗法；全身治疗通常用于病情顽固者及一开始就表现出皮外受累的病人；维甲酸类药物主要用于早期皮肤Ｔ细胞淋巴瘤；α－干扰素早期斑块内注射及对晚期病人均有效。     

细胞毒T细胞识别皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体个体基因型肽抗原

目的确定细胞毒T细胞是否能识别由第三互补决定区特异基因编码的肽。方法选择两例皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)患者(SS和AR)的CD4 、Vβ8 恶性T细胞作为测定肽序列的细胞 ,CD8 非恶性T细胞作为杀伤或反应性细胞 ,和转化的淋巴母细胞样细胞作为主要组织相容性复合体(MHC)抗原提呈的细胞。结果患者SS的恶性T细胞的T细胞受体(TCR)β 链的个体基因型肽可刺激CD8 T细胞产生肿瘤坏死因子(TNF) α ,但患者AR的MTC的TCR蛋白的个体基因型区的对照肽则不刺激产生TNF α。反之 ,患者AR的CD8 T细胞藉分泌TNF α而对自身肽应答 ,但对来源于对照患者SS和人类免疫缺陷病毒感染患者的其他肽不应答。结论细胞毒T细胞对CTCL的淋巴细胞个体恶性克隆独特的特殊的MHCⅠ类相关肽的识别和应答具有特异性 ,确定CTCL的肿瘤特异性定位 ,可进一步为能够激发对肿瘤细胞的CD8 T细胞参与的免疫应答的疫苗研制和治疗提供新线索     

原发性皮肤T细胞淋巴瘤外周血克隆性T细胞的检测与研究

为了解原发性皮肤Ｔ细胞淋巴瘤（ＰＣＴＣＬ）外周血中克隆性Ｔ细胞的存在及其与临床疗铲的相关性,分别对２５例ＰＣＴＣＬ患者经重组α干扰素治疗前后的外周血标本,应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法,以通用引物扩增Ｔ细胞受体（ＣＲ）γ链编码基因中Ⅴ（可变区）－Ｊ（连接区）的结合序列,检测代表克隆性Ｔ细胞分子标志的ＴＣＲ基因重排（ＧＲ）。结果发现,２５例ＰＣＴＣＬ外周血样品,１７例见克隆性Ｔ细胞（示ＴＣＲＧＲ）,     

蕈样肉芽肿皮肤冰冻组织中T细胞受体-Vγ基因重排的检测

目的: 评价蕈样肉芽肿(MF)冰冻组织基因组DNA T细胞抗原受体(TCR)Vγ基因克隆性重排法对MF基因诊断中的价值.方法: 一步法提取37例MF患者冰冻组织基因组DNA,用两套Vγ1-8/Jγ和Vγ9/Jγ基因重排的引物进行两次PCR扩增.结果: 在30例MF中Vγ1-8/Jγ引物检出420 bp条带TCR-γ基因克隆性重排;在28例MF中Vγ9/Jγ引物检出380 bp条带TCR-γ基因克隆性重排;同时出现Vγ1-8/Jγ和Vγ9/Jγ TCR-γ基因重排的有26例,阳性率为86.49%.结论: MF冰冻组织中T细胞受体γ基因的重排在诊断中简便快速、符合率较高;检测方法具有较高的灵敏度.     

原发性皮肤T细胞淋巴瘤1例

原发性皮肤Ｔ细胞淋巴瘤１例康定华患者蒋××，男，５６岁，已婚，干部，常州市人。右足底、脐部、腋部、右上肢、阴囊部相继出现暗红色斑４个月。初于右足底有红色小丘疹、丘疱疹，数目增多后融合成斑片，斑片中央逐渐消退，形成环状，伴有脱屑，自觉瘙痒。半年后，脐部...     

皮肤T细胞淋巴瘤治疗进展

随着对皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL）病理发生机制研究的深入，靶向治疗及免疫调节治疗逐渐成为进展期CTCL的重要治疗手段。近年来与之相关的新的治疗方法不断涌现，如维A酸类X受体激动剂、融合毒素、单克隆抗体、Toll样受体激动剂、基因治疗、细胞因子等。与传统药物相比，靶向治疗及免疫调节治疗具有更显著的疗效及较好的安全性，临床应用前景良好。该文对其作一综述。     

皮肤淋巴瘤 第四讲 皮肤T细胞淋巴瘤向大细胞淋巴瘤转化

阐述皮肤T细胞淋巴瘤向大细胞淋巴瘤转化的临床表现、组织病理、免疫组织化学染色、分子生物学特征、诊断和鉴别诊断与治疗。     

皮肤T细胞淋巴瘤分子生物学研究进展

皮肤T细胞淋巴瘤的经典类型是蕈样肉芽肿和Sézary综合征。近年来,其发病率有逐渐增高的趋势。目前国内外从不同角度对该病的分子生物学进行了较多研究。本文就皮肤T细胞淋巴瘤的肿瘤形成,皮肤浸润,以及预后指标等分子生物学研究进展作了综述。