外周血Tg mRNA的检测及诊断甲状腺癌的临床意义

目的：探讨检测外周血中甲状腺球蛋白mRNA对甲状腺癌的诊断价值。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术，对55例患者（39例甲状腺癌，7例甲状腺良性肿瘤，9例非甲状腺肿瘤）进行循环血中甲状腺球蛋白mRNA检测，39例甲状腺癌中34例乳头状癌，2例滤泡癌，3例髓样癌。结果：39例中12例发现Tg mRNA（31％），其中11例为乳头状癌，1例滤泡癌，7例甲状良性肿瘤和9例非甲状腺肿瘤未发现Tg mRNA 。40％颈淋巴结转移和100％远处转移的病例Tg mRNA阳性，而无转移的病例无论原发肿瘤切除与否Tg mRNA均阴性。结论：外周血中Tg mRNA可作为甲状腺癌的肿瘤标志物，特别对颈部或远处转移具有一定的临床诊断价值。     

血清Tg 、TGAb 与分化型甲状腺癌关系的临床分析

目的：探讨甲状腺球蛋白（Tg）及甲状腺球蛋白抗体（TGAb）在分化型甲状腺癌术后效果评价及随访中作用。方法：采用放射免疫分析法对192例甲状腺癌、68例甲状腺良性病变及31例正常人血清中的Tg、TGAb检测。结果：甲状腺癌组Tg、TGAb阳性率均高于甲状腺良性病变组及正常对照组（P〈0．05）；对135例甲状腺癌手术前后Tg、TGAb对比，术后Tg、TGAb水平均低于术前（P〈0.05）；甲状腺癌并淋巴结转移组的Tg高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论：Tg、TGAb可作为评价分化型甲状腺癌手术疗效及术后随访的指标。     

甲状腺结节中TPO mRNA表达与Ret、半乳糖苷凝集素3及黏蛋白1表达的相关性研究

目的探讨甲状腺结节性病变中甲状腺过氧化物酶（TPO）mRNA的表达及与Ret、半乳糖苷凝集素3（Gal-3）和黏蛋白1（MUC1）表达的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术，对55例甲状腺结节组织的TPO mRNA表达进行了定性检查。用光密度扫描仪测定并计算样品的TPO／β-actin比值，代表TPO mRNA丰度的相对含量。采用免疫组织化学（SP）法，同步进行了Ret、Gal-3和MUC1蛋白的检测。结果55例中，恶性肿瘤TPO mRNA的表达率低于良性病变（P〈0.05）。有表达的43例TPO RT—PCR产物的光密度值，良性病变组TPO mRNA明显高于恶性病变组（P〈0．01）。Ret、Gal-3和MUC1在良恶性病变间的表达差异有显著性（P均为0．000），恶性病变组明显高于良性病变组。TPO mRNA定性、半定量结果与Ret、Gal-3和MUC1的表达呈负相关（P〈0.01或P〈0．05）；Ret、Gal-3、MUC1互为正相关（P〈0．01）。结论甲状腺过氧化物酶mRNA在甲状腺结节的高表达可视为良性病变的标记之一，Ret、Gal-3、MUC1在甲状腺癌有较高的表达率，4种标记物的联合检测有助于甲状腺良、恶性结节的鉴别诊断。     

肺癌患者胸水中MOC-31 mRNA的表达及临床意义

目的探讨MOC-31mRNA在肺癌患者胸水中的表达及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR），检测74例肺癌和40例肺良性疾病患者胸水中MOC-31mRNA的表达，并与常规细胞学诊断进行对比。结果肺癌组胸水中MOC-31mRNA的阳性表达率为91．9％（68／74），肺良性疾病组胸水中MOC-31mRNA的阳性表达率为10．0％（4／40），差异有统计学意义（Χ^2=74．83，P〈0．01）：肺癌组胸水中MOC-31mRNA的表达与病理分型无关（P〉0．05）；MOC-31mRNA的检测对恶性胸水诊断的敏感度和准确度均明显高于常规细胞学检查（P〈0．01），但两种诊断方法的特异度差异却无统计学意义（P〉0．05）。结论MOC-31mRNA可作为检测肺癌患者胸膜微转移的分子标志物，是判断肺癌患者胸水中是否存在脱落癌细胞和肺癌临床分期的辅助参考指标。     

乳腺癌患者外周血中CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨RT—PCR法检测乳腺癌患者外周血中的CEA mRNA表达的情况及在乳腺癌外周血微转移诊断中的应用。方法采用RT—PCR法,检测46例乳腺癌患者外周血中CEA mRNA表达情况,以良性乳腺疾病患者及健康志愿者外周血标本作为对照。结果46例乳腺癌患者外周血中CEA mRNA阳性率为32．6％。对照组中CEA mRNA表达均为阴性。CEA mRNA的阳性表达与患者的TNM分期、腋淋巴结状况差异有统计学意义（P〈0．05）,而与患者的年龄、原发肿瘤大小、病理类型以及激素受体状况等差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论CEA mRNA可作为标志物来检测乳腺癌患者外周血中微转移,有助于指导临床治疗及判断预后。     

Survivin—mRNA在肺癌纤维支气管镜活检组织中的表达

目的：探讨纤维支气管镜活检组织Survivin—mRNA的表达对肺癌诊断的价值。方法：纤维支气管镜活检组织常规病理检查分为肺癌组和良性病变组,同时活检组织用RT—PCR方法检测Survivin—mRNA的表达。结果：46例肺癌组Survivin—mRNA表达明显高于17例肺部良性疾病组（P〈0．05）;肺癌纤支镜活检组织Survivin—mRNA表达与年龄、性别及组织类型无关（P〉0．05）;低分化NSCLCSurvivin—mRNA表达高于高、中分化NSCLC（P〈0．05）;m＋Ⅳ期NSCLCSurvivin—mRNA表达高于I＋Ⅱ期NSCLC（P〈0．05）;SCLC广泛期和局限朗Survivin-mRNA表达礁著陛．差异（P〉0．05）。结论：检测纤维支气管镜活检组织Survivin—mRNA的表达对肺癌的诊断,恶性程度判断及预后判断有一定的价值。     

两种方法检测myc基因表达水平在乳腺癌诊断中的应用

目的：比较荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）对乳腺癌相关基因一核内原癌基因（c—mvc）的检测灵敏度和特异性，探讨其在乳腺癌诊断中的应用。方法：采用荧光定量聚合酶链反应，并以β2-微球蛋白为内对照，检测乳腺癌和良性乳腺疾病等不同病种患者139例及健康志愿者40例外周血中mycmRNA水平，同时采用逆转录聚合酶链反应进行对比研究。结果：若以myc／β2-微球蛋白高于正常对照组x＋2s为阳性，78例乳腺癌患者myc mRNA基因表达阳性数为32，阳性率41．0％，良性乳腺疾病组和其它肿瘤组阳性数为0。mvc mRNA在乳腺癌组表达高于良性乳腺疾病组和其它病种组（P〈0．01），在正常对照组和良性乳腺疾病组间差异无显著性意义（P〉0．05）。132-微球蛋白在四组间差异无显著性意义（P〉O．05）。FQ—PCR对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性为41．0％，82．2％，RT—PCR则分别为32．1％，75．2％，FQ—PCR均显著高于RT—PCR法。结论：FQ—PCR检测myc对乳腺癌诊断灵敏度和特异性较高，具有高精确性、高效率和污染小等特点，而且标本来源容易，FQ—PCR对myc的检测可有效辅助诊断乳腺癌。     

实时荧光定量RT—PCR检测NSCLC患者外周血CK19mRNA和LUNXmRNA实验研究

[目的]应用实时荧光定量RT—PCR检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19mRNA和LUNXmRNA,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。[方法]选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT—PCR检测外周血CK19mRNA和LUNXmRNA相对定量分析结果。[结果]（1）肺癌组与健康对照组的CK19mRNA阳性表达率及相对表达量均有显著差异;肺癌组阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性,其相对表达量鳞癌患者高于腺癌患者（P〈0．05）。（2）肺癌组与健康对照组的LUNXmRNA阳性表达率有显著差异,其表达与临床病理特征无相关性。[结论]CK19mRNA和LUNXmRNA作为实时荧光定量RT—PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标志物,具有一定临床应用价值。     

LunX和CK19基因定量表达在肺癌诊断及疗效观察中的应用研究

目的：探讨采用荧光定量RT—PCR检测肺癌患者外周血LunX和CK19基因的表达，以及在肺癌诊断和疗效观察中的应用价值。方法：建立定量检测LunX和CK19 mRNA的荧光定量RT—PCR技术，检测在肺癌患者外周血的表达及治疗前后的表达水平的比较。结果：外周血标本中治疗前病例、治疗后病例和肺部良性病例LunX mRNA的表达分别为83．87％（26／31）、46．67％（7／15）和10％（1／10）。治疗前肺癌组和肺部良性病例组LunX mRNA的表达差异有统计学意义，X^2=15．2，P〈0．001；肺癌治疗前后LunX mRNA的表达也有统计学意义，X^2=4．9，P〈0．05。正常对照10例和非肺癌的肿瘤患者4例LunX mRNA的表达均为阴性，与LunX基因相比较，CK19基因灵敏度相近，但特异性较差。结论：荧光定量RT—PCR检测LunX基因的表达可以作为肺癌诊断及治疗前后疗效考核的重要参考指标，应用价值优于CK19基因。     

巢式PCR检测CK19 mRNA和LUNX mRNA诊断肺癌淋巴结微转移

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）淋巴结微转移的基因诊断方法，并分析CK19 mRNA、LUNX mRNA作为肺癌微转移检测分子标记物的可行性。方法：采用巢式RT—PCR技术检测39例NSCLC患者的149枚淋巴结和20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中的细胞角蛋白19（CK19 mRNA）、肺特异性X蛋白（LUNX mRNA）的表达。结果：39例NSCLN患者的149枚淋巴结中，46枚（30．9％）淋巴结存在CK19 mRNA阳性表达，56枚（37．6％）存在LUNX mRNA阳性表达，常规病理组织学检出20枚（13．4％）有癌转移，巢式RT—PCR方法和常规病理方法比较差异有统计学意义（P〈0．01）；20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中CK19 mRNA和LUNX mRNA表达均为阴性，与肺癌组比较均有统计学意义（P〈0．01）。淋巴结微转移与病理类型、细胞分化程度和临床分期有密切关系（P〈0．05）。结论：CK19 mRNA、LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标记物，联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床个体化治疗。     

Detection of circulating Tg-mRNA in the follow-up of papillary and follicular thyroid cancer: how useful is it?

To investigate the usefulness of thyroglobulin mRNA (Tg-mRNA) detection in peripheral blood in the follow-up of papillary and follicular (differentiated) thyroid cancer, a literature study was performed. Both evidence for and evidence against the usefulness of Tg-mRNA detection were found. Also, evidence for the expression of Tg-mRNA in cells other than normal or neoplastic thyroid follicular cells was found. It is concluded that currently Tg-mRNA detection is not a useful tool in the follow-up of differentiated thyroid carcinoma, but that the concept of using RT-PCR measurements during follow-up still warrants further research.     

妊娠中期因子在甲状腺癌中的表达及其意义

目的 研究妊娠中期因子（MK）在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法 应用RT-PCR、原位杂交方法对50例人甲状腺癌组织、30例良性肿瘤组织、30例正常口腔组织进行了MKmRNA表达的研究。结果 RT-PCR分析显示MKmRNA在甲状腺癌组织表达量远高于良性肿瘤组织（P<0.01）。本实验中缩短型MK（tMK）仅表达于癌组织。 原位杂交结果显示MK的阳性产物位于癌细胞胞浆中;甲状腺癌组织中MK的表达率明显高于良性肿瘤组织（P<0.01）;转移组MK的表达率明显高于未转移组（P<0.01）。分类及分期观察,MK表达量随着甲状腺癌分期级别的递增呈上升趋势。结论 MKmRNA在甲状腺癌组织中高表达,并与疾病的恶性度密切相关;tMK可以作为恶性肿瘤标记物;检测MK对临床疾病诊治方案的确定具有参考价值。     

彩色多普勒超声对甲状腺腺瘤与甲状腺癌的鉴别诊断价值

目的：探讨彩色多普勒超声对甲状腺腺瘤与甲状腺癌的鉴别诊断价值。方法回顾性分析甲状腺腺瘤患者60例及甲状腺癌患者60例的超声资料,进行鉴别诊断分析。结果两组患者在结节数量、结节形态、结节边界、内部回声及后方回声方面进行比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。甲状腺腺瘤患者最大峰值流速及阻力指数均显著低于甲状腺癌患者,差异具有统计学意义（P＜0．05）。甲状腺腺瘤患者血流分级以Ⅰ级为主（65．00％）,而甲状腺癌患者血流分级以Ⅲ级为主（51．67％）,两组患者在血流分级方面比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论彩色多普勒超声对甲状腺腺瘤与甲状腺癌的鉴别诊断具有重要的临床价值。     

分化型甲状腺癌患者血清TNF-α、IL-6和VEGF表达与侵袭转移的相关性分析

目的:探讨分化型甲状腺癌患者血清TNF-α、IL-6和VEGF的浓度变化与甲状腺癌分期及侵袭转移的相关性。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定64例分化型甲状腺癌患者（甲状腺癌组）和42例甲状腺腺瘤患者（甲状腺腺瘤组）的血清TNF-α、IL-6和VEGF浓度,并与40例健康成年人（对照组）作为对照。结果:甲状腺癌组血清TNF-α、IL-6和VEGF水平均高于甲状腺腺瘤组和对照组（P均<0.01）;甲状腺癌患者其水平Ⅳ期组>Ⅲ期组>Ⅰ、Ⅱ期组（P均<0.01）;且伴有颈部淋巴转移的甲状腺癌患者其水平显著高于无颈部淋巴转移的患者（P＜0.01）;在甲状腺癌患者不同性别之间和不同年龄组之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论:外周血TNF-α、IL-6和VEGF水平与甲状腺癌的侵袭、转移密切相关,检测其表达水平对判断甲状腺癌患者病情进展有重要意义。     

Minimal residual disease in thyroid carcinoma.

The detection of disseminated tumor cells in differentiated (DTC) and medullary thyroid carcinomas (MTC) is one of the main topics in current thyroid cancer research. Immunocytochemistry and polymerase chain reaction (PCR) provide the tools for the identification of a small number of thyroid cancer cells in peripheral blood and cervical lymph nodes. Thyroid-specific markers, such as thyroglobulin (Tg) mRNA and thyroid peroxidase (TPO) mRNA, have been detected with RT-PCR in blood samples of tumor patients and healthy control subjects. To prevent false-positive results, quantitative PCR systems were established. Tumor-specific markers, such as telomerase activity and cytokeratin 20 (CK20), have been detected in various epithelial tumors. Amplification products of these markers were found in blood samples and in fine-needle aspiration (FNA) biopsies of patients with thyroid carcinomas. Using molecular detection of disseminated tumor cells in cervical lymph nodes with CK20 RT-PCR, a higher percentage of involved lymph nodes was detected compared to immunohistochemistry. The results of the presented studies may help researchers to develop more sensitive methods for early tumor cell dissemination, and refine risk groups that might benefit from more extensive surgical procedures or adjuvant therapy. However, the prognostic value of minimal residual disease (MRD) in thyroid carcinoma has to be confirmed in large or multicenter prospective studies.     

散发性甲状腺癌中BRCA1和BRCA2的表达情况

目的 探讨乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)和乳腺癌易感基因2(breast canc-er susceptibility gene 2,BRCA2)在散发性甲状腺癌中的表达和意义.方法 应用免疫组化法,检测散发性甲状腺癌中BRCA1和BRCA2的表达...     

Detection of telomerase RNA in the plasma of patients with breast cancer, malignant melanoma or thyroid cancer

The crucial step in cellular immortalisation seems to be the activation of telomerase, the enzyme that synthesizes telomere repeat ending sequences. Since the telomerase activity has been detected in almost all types of cancer tissue it has been proposed as new reliable tumor marker. This study was conducted to evaluate the significance of appearance of circulating RNA for telomerase subunits hTR and hTERT in the plasma of cancer patients. Seven healthy volunteers, 25 primary breast cancer patients (stage I-III), 29 patients with advanced malignant melanoma (stage III-IV), and 4 patients with advanced thyroid cancer (stage III-IV) were included in the study. The total RNA was extracted from plasma samples, reverse transcribed to cDNAs, and specific cDNAs for hTR and hTERT were amplified by semi-nested PCR. In healthy volunteers, the control GAPDH was positive in all, hTR was positive in 3 cases, and hTERT was negative in all 7 tested cases. Among 25 breast cancer patients, hTR was positive in 23, and hTERT in 12 patients. Two cases, that were hTR and hTERT negative, were at the same time negative also for GAPDH. Of the 29 patients with malignant melanoma, 24 were positive for hTR, and 17 for hTERT. Again, the 5 patients that were negative for hTR and hTERT, were negative also for the control GAPDH. In all plasma samples from thyroid cancer patients, hTR and hTERT were positive. In conclusion, the RT-PCR followed by semi-nested PCR is a highly sensitive method for detection of circulating RNA in the plasma. Among the telomerase subunits, only hTERT could serve as an unspecific tumor marker in the plasma of cancer patients.     

47例食管癌伴发甲状腺病变的临床病理分析

目的了解食管癌伴发甲状腺病变的临床病理特点。方法从活检库中筛选同时进行食管癌根治术和甲状腺结节切除术的病例,并观察食管癌伴发甲状腺病变的情况。结果 5 158例食管癌根治术患者中,同时切除部分甲状腺病变者47例,病理结果示,结节性甲状腺肿29例,甲状腺腺瘤5例,桥本氏甲状腺炎2例,正常甲状腺组织7例,甲状腺乳头状癌2例,甲状腺鳞癌2例。2例甲状腺鳞癌均为食管胸上段鳞癌伴发,并且分别伴有结节性甲状腺肿和桥本氏甲状腺炎。2例甲状腺乳头状癌均为食管胸中段癌伴发。不同部位食管癌合并甲状腺病变的概率由上至下逐渐减小,差异有统计学意义(P<0.05)。胸上段食管癌伴发甲状腺鳞癌概率高于胸中段和胸下段食管癌(P<0.05)。结论食管癌发生甲状腺转移罕见,甲状腺慢性疾病的基础可能是导致转移性鳞癌的一个重要因素。