多西紫杉醇白蛋白纳米粒的制备及体外评价

目的：制备多西紫杉醇白蛋白纳米粒，考察白蛋白和多西紫杉醇的处方量及乙醇加入量等因素对其形态、粒径、Zeta电位、收率、包封率、载药量和体外释药特性的影响，并对处方工艺进行优化。方法：采用去溶剂化-化学交联法制备多西紫杉醇白蛋白纳米粒，透射电镜观察纳米粒形态，马尔文激光粒度仪测定其粒径分布及Zeta电位，考马斯亮兰-酶标仪法测定纳米粒收率，HPLC法测定纳米粒包封率和载药量；以累积释药百分率为指标，通过方程拟合释药曲线，考察制剂的体外释药特性。处方优化采用星点设计-效应面优化法，应用SAS统计软件对数据进行处理。结果：优化处方制得的纳米粒为类球形，平均粒径65．3nm，Zeta电位-31．4mV，纳米粒收率95．0％，包封率74．3％，载药量4．65％，制剂24小时体外累积释药百分率为74．4％。结论：难溶性抗癌药物多西紫杉醇可以采用去溶剂化-化学交联法制备成白蛋白纳米粒，其粒径小，稳定性高，可显著提高多西紫杉醇在水相中的浓度。其优化处方中药物的释放显著慢于原料药磷酸盐缓冲溶液的释放，具有缓释效果。     

蚓激酶白蛋白纳米粒中的酶活力测定

目的:测定蚓激酶白蛋白纳米粒中蚓激酶的活力.方法:以对甲基苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐(TAME)为底物测定蚓激酶的活力,通过载药量与包封率2个指标进行质量评价.结果:白蛋白测定方法的RSD均小于0.3%,高、中、低浓度平均回收率分别为(99.47±0.93)%,(98.51±1.42)%,(98.69±2.43)%;蚓激酶测定方法的高、中、低浓度的RSD分别为0.62%,0.37%,1.82%,平均回收率分别为(99.25±1.98)%,(97.61±1.13)%,(97.15±2.21)%.蚓激酶白蛋白纳米粒的载药量为(4.84±0.41)%,包封率为(84.14±3.41)%.结论:通过测定蚓激酶白蛋白纳米粒中蚓激酶活性和白蛋白的含量,确定蚓激酶载药量与包封率,所建立的酶学测定方法快速简便、适用可行.     

肝细胞靶向甘草酸表面修饰白蛋白纳米粒的制备工艺

目的研究能主动靶向于肝实质细胞的甘草酸表面修饰白蛋白纳米粒的制备工艺。方法去溶剂化法制备普通纳米粒，以高碘酸盐氧化法制备甘草酸-白蛋白纳米粒偶联物。用2,4,6-三硝基苯磺酸显色法与凝胶柱色谱法验证是否偶联成功，HPLC法测定修饰纳米粒表面甘草酸密度。结果修饰纳米粒表面活性氨基数量较对照组减少19.6%；偶联于纳米粒表面的甘草酸密度为9.2%。纳米粒形态圆整，平均粒径为73 nm，在25 ℃和37 ℃条件下放置10 d后，性质稳定。结论甘草酸表面修饰白蛋白纳米粒制备成功，为进一步研究其对肝细胞的靶向性奠定了实验基础。     

硫鸟嘌呤白蛋白纳米粒的制备

目的用白蛋白包裹硫鸟嘌呤制成纳米粒,并通过纳米球的形态、载药量、包封率等考察纳米球的质量。方法以白蛋白纳米球为载体材料,硫鸟嘌呤为模型药物,采用乳化一交联固化法制备硫鸟嘌呤白蛋白纳米球。用扫描电镜观察纳米球的形态及其粒径,用紫外分光光度法测定纳米球的载药量和包封率。结果制得硫鸟嘌呤白蛋白纳米球外观呈米黄色,粉末状,球形圆整,粒径分布在189—205nm。载药量为7．31％,包封率为62．40％。结论硫鸟嘌呤白蛋白纳米球具有缓释作用。     

靶向递药系统白蛋白纳米粒的研究进展

白蛋白纳米粒作为一种新型制剂,显示出独特的靶向肿瘤机制,且本身具有可生物降解、无毒、无抗原性、病人耐受等特点而表现出良好的应用前景。该文通过对白蛋白纳米粒国内外研究近期文献的归纳整理,较为系统的介绍了白蛋白纳米粒及其制备工艺、质量评价、药代动力学研究等。     

制备工艺对多柔比星白蛋白纳米粒理化性质、体外释放及药动学的影响

分别采用去溶剂化法和乳化交联法制备多柔比星牛血清白蛋白(BSA)纳米粒,以BSA收率、包封率、载药量和粒径等为评价指标,优选处方工艺,并比较两种制备工艺所得制品的差异.结果表明,去溶剂化法和乳化交联法所得纳米粒外观均呈球形,差异不大,BSA收率、包封率、载药量、粒径及ζ电位分别为96.5％、92.9％,98.5％、97.4％,4.3％、3.6％,132.4、172.9 nm,-27.7、-19.9 mV.但制备工艺对体外释放行为和大鼠体内药动学行为影响较大,去溶剂化法和乳化交联法制备的多柔比星BSA纳米粒在生理盐水中48 h累积释放率分别为44.2％、63.8％;大鼠尾静脉给药后,去溶剂化法和乳化交联法所得制品的AUC分别是原药的1.5倍(P＜0.05)和1.1倍(P＞0.05),前法所得纳米粒在大鼠体内具有一定的缓释效果,而后法所得制品没有.     

姜黄素白蛋白纳米粒的制备与评价

目的:优化姜黄素白蛋白纳米粒的处方工艺并对其特性进行表征。方法:以牛血清白蛋白为载体、通过反溶剂沉淀法制备载姜黄素纳米粒,以粒径为评价指标优选制剂处方及工艺,并考察所得纳米粒的放置稳定性、饱和溶解度及体外溶出度。结果:当有机相和水相体积之比为1∶20、药物与白蛋白用量之比为1∶1.5、保护剂为0.5%(V/V)甘露醇时,所得纳米粒冻干粉平均粒径约为320 nm。其在水、p H 6.8、p H 7.4 PBS中的溶解度显著高于原料药及物理共混物,体外溶出更快,且冻干粉的放置稳定性优于纳米混悬液。结论:白蛋白纳米粒处方能够改善姜黄素的水溶性及溶出度,放置稳定性较佳。     

替莫唑胺白蛋白纳米粒的制备及其脑内递药特性研究

以牛血清白蛋白为载体,采用高压均质法制备替莫唑胺白蛋白纳米粒,并运用脑微透析技术,考察该纳米粒经大鼠尾静脉注射给药后的脑内递药特性.结果表明,白蛋白纳米粒形态圆整,平均粒径为(117.60±3.40) nm,ξ电位为(14.70±3.51)mV,包封率与载药量分别为(52.16±2.23)％和(5.33±0.10)％.替莫唑胺白蛋白纳米粒组的tmax和AUC0→1比其溶液剂组显著提高,但Cmax无显著差异.结果提示本品可延长药物在脑内的持续时间,促进药物的脑内吸收,有望成为替莫唑胺脑部递药的有效载体.     

载米托蒽醌PLA-PLL-RGD纳米粒的制备

采用乳化-溶剂蒸发法制备载盐酸米托蒽醌的聚乳酸-聚赖氨酸-精氨酰-甘氨酰-门冬氨酸纳米粒,以粒径和包封率为评价指标,用正交设计优化制备工艺.结果表明,照优化方案制备的纳米粒呈大小均匀的圆球形,平均粒径(186±2.37)nm,平均包封率(94.7±1.46)%,在pH 7.4磷酸盐缓冲液中192h累积释放量为61%.     

HPLC法测定苦参碱白蛋白纳米粒的包封率

建立苦参碱白蛋白纳米粒药物包封率测定的 HPLC 法。方法:采用离心超滤法分离苦参碱白蛋白纳米粒中的游离苦参碱,以 HPLC 为分析手段对纳米粒包封率进行测定评价。色谱条件:采用 Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-0.02mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(6:94);流速:1.0 mL·min~(-1);检测波长:210 nm;温度:25℃。结果:采用离心超滤法分离,HPLC 法测定,可达到游离苦参碱与纳米粒的有效分离,苦参碱峰与溶剂峰分离良好,苦参碱浓度在6～100μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率在95.06%～100.9%之间,日内 RSD 和日间 RSD 均小于2%(n=5)。结论:本方法准确可靠,简单快速,可用于苦参碱白蛋白纳米粒药物包封率的测定。     

Mannose 6‐phosphate‐modified bovine serum albumin nanoparticles for controlled and targeted delivery of sodium ferulate for treatment of hepatic fibrosis

Objectives The aim was to prepare neoglycoprotein‐based nanoparticles for targeted drug delivery to hepatic stellate cells, and to evaluate their characteristics in vitro and in vivo. Methods The neoglycoprotein of bovine serum albumin modified with mannose 6‐phosphate was synthesised from mannose, and used as wall material to nanoencapsulate the model natural antifibrotic substance sodium ferulate using a desolvation method. The morphology, drug loading capacity, release in vitro and biodistribution in vivo of the nanoparticles were studied. Selectivity of the nanoparticles for hepatic stellate cells was evaluated by immunohistochemical analysis of fibrotic rat liver sections. Key findings The spherical nanoparticles were negatively charged with zeta potential ranging from ?2.73 to ?35.85 mV, and sizes between 100 and 200 nm with a narrow size distribution. Drug entrapment efficiency of about 90% (w/w) and loading capacity of 20% (w/w) could be achieved. In vitro, the nanoparticles showed an initial rapid continuous release followed by a slower sustained release. After intravenous injection into mice, the nanoparticles showed a slower elimination rate and a much higher drug concentration in liver compared with the sodium ferrate solution, and less distribution to the kidneys and other tissues. Immunohistochemistry indicated that the neoglycoprotein‐based nano‐particles were taken up specifically by hepatic stellate cells. Conclusions The nanoparticles may be an efficient drug carrier targeting hepatic stellate cells.     

Interaction of allylisothiocyanate with bovine serum albumin

The interaction of allylisothiocyanate with bovine serum albumin was monitored by “available” lysine estimation, electrometric and spectrophotometric titration, u.v. absorption and difference spectroscopy and electrophoresis. “Available” lysine estimation and electrometric titration indicated that the interaction increased with the reaction pH. Spectrophotometric titration indicated that at least two of the tyrosine groups became masked, probably via H-bonding, upon interaction of the protein with allylisothiocyanate. The pK_int values of the unreacted ?-amino groups of lysine and the titrable phenolic groups of tyrosine did not alter upon interaction. The electrophoretic mobility of the protein increased with the interaction. Difference spectral studies suggested thiourea formation.     

超声法制备齐多夫定碳酸胆固醇酯牛血清白蛋白纳米粒

目的建立一种不使用交联剂制备白蛋白纳米粒的新方法。方法以牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)为材料,以本实验室合成的齐多夫定的前药—齐多夫定碳酸胆固醇酯(cholesteryl carbonate azidothymidine,AZTC)为主药,采用超声法制备齐多夫定碳酸胆固醇酯牛血清白蛋白(AZTC-BSA)纳米粒及其冻干制剂。以粒径为考察指标确定纳米粒的最佳处方及工艺;以冻干制剂外观、水化时间及复溶后粒径为考察指标确定冻干制剂的处方及工艺。结果成功制备了AZTC-BSA纳米粒,最佳超声时间为6 min,纳米粒平均粒径为137.9 nm,zeta电位为-54.6 mV,包封率为98.6%;冻干制剂外观良好,复溶后平均粒径为148.9 nm。结论超声法制备AZTC-BSA纳米粒新颖、简单、可靠。     

曲克芦丁与牛血清白蛋白的相互作用研究

目的采用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究曲克芦丁与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的特征。方法将曲克芦丁对BSA内源性荧光的猝灭数据分别应用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程计算反应的荧光猝灭常数和结合常数,应用双对数方程计算结合位点数,热力学公式计算二者结合主要作用力类型,在此基础上应用Frster非辐射能量转移理论,计算曲克芦丁与BSA相互结合时给体-受体间的距离和能量转移效率。结果结果表明曲克芦丁能够有效降低BSA的内源性荧光,其猝灭机制属于静态猝灭,二者之间的结合力为疏水作用力,二者的结合常数为106数量级,结合位点数为1,作用距离为1.97nm,能量转移效率为0.529。结论曲克芦丁可与BSA通过疏水作用结合为复合物,经静态猝灭机制引起BSA内源性荧光的猝灭。     

应用荧光光谱法和紫外光谱法研究士的宁与牛血清白蛋白的相互作用

目的研究士的宁与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。方法采用荧光光谱法(FS)和紫外光谱法(UV)。结果确定了静态猝灭和非辐射能量转移是士的宁导致BSA荧光猝灭的主要原因；求得了士的宁与BSA之间的表观结合常数k_a分别为3.72×10³(27 ℃)，4.27×10³(37 ℃)，4.47×10³(47 ℃)；以及它们之间的结合位点数n为1.01±0.03；根据Frster非辐射能量转移机制求得给体与受体间的结合距离r为3.795 nm和能量转移效率E为0.033 8。结论牛血清白蛋白与士的宁分子间有结合作用，且结合力以疏水作用为主。     

扩张床吸附直接从牛血中快速分离牛血清白蛋白

目的研究扩张床吸附技术直接从牛血中快速分离血浆蛋白。方法用葡萄糖等张液与牛血按4∶1混合,混合液的渗透压在2 80～30 0mOsmo范围内,与血浆的总渗透压相近;pH值降至6 .8,黏度从全血4 .7mPa·s降至1.0mPa·s以下,再用扩张床StreamlineDEAE对血浆蛋白进行吸附洗脱。结果扩张床洗脱液中单体牛血清白蛋白(BSA)的纯度接近70 % ,全血进料时血浆蛋白吸附容量为纯BSA进料的2 1.4 4 %。结论扩张床技术直接从未经固液分离的牛血血浆中分离BSA ,只经一步操作,实现了BSA的有效快速分离     

白皮杉醇与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的应用荧光光谱法和紫外光谱技术对白皮杉醇（piceatann01）与牛血清白蛋白（BSA）之间的相互作用进行研究。方法计算白皮杉醇与BSA的结合常数K、结合位点数及热力学函数△G、△S、△H,分析白皮杉醇对BSA的荧光淬灭过程及其与BSA的相互作用类型;运用Foerster’S偶极．偶极非辐射能量转移原理测定了白皮杉醇与BSA的结合距离。结果随着白皮杉醇浓度升高,BSA内源荧光强度有规律的下降;随温度的升高,静态淬灭常数和结合常数均下降;热力学函数△G〈0、△S〉0、△H〈0。结论白皮杉醇对BSA的荧光淬灭属于自发的以疏水作用力为主导的非辐射能量转移的静态淬灭过程。     

木犀草素、芹菜素与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的研究木犀草素、芹菜素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。方法主要应用荧光猝灭法及非辐射能量转移原理。结果测得不同温度下，木犀草素、芹菜素与牛血清白蛋白的结合常数，确定两种黄酮小分子对牛血清白蛋白荧光的猝灭是静态猝灭过程，并依据能量转移原理求得其结合距离和能量转移效率。结论木犀草素、芹菜素与牛血清白蛋白间有较强的结合作用，且结合力以疏水作用力为主；B(3′)-OH，B(4′)-OH邻位对黄酮与牛血清白蛋白的结合具有增强作用。