冻干无血清培养基检测人染色体试剂盒的研究

研制一种与传统培养液效果相当，不含小牛血清的外周血淋巴细胞培养液，并制成冻干试剂盒，用于染色体检测。通过批内和批间试验与传统培养液比较，采用“转化淋巴细胞百分率”和“分裂指数”两项指标评估二者的应用效果，结果显示二者间差异均无显著性意义，淋转率变异系数实验组均小于对照组，提示试剂盒具有可靠性和稳定性。由于试剂盒成本低，培养时间仍为７２小时，效果稳定，可完全替代传统培养液用地外周血染色体制备，尤适于     

检测SARS患者血清中抗-SARS-CoV IgG的四种试剂盒比较

目的比较4种试剂盒检测SARS患者血清中抗-SARS-CoX IgG的灵敏度和特异度。方法用2种酶联免疫吸附试验(EIA)和2种间接免疫荧光法(IFA)试剂盒分别检测18例SARS患者的99份系列血清及123份阴性参比血清标本中抗-SARS-CoV IgG。结果在患者发病第1周，4种试剂盒均未检出抗-SARS-CoX IgG；自发病第2周，除EIA甲未能检出外，EIA乙和2种IFA均从血清中检出抗-SARS-CoV IgG，其阳性率分别为57．1％(4／7)、57．1％(4／7)和42．9％(3／7)。4种试剂盒最早检出时间分别为发病后第16、12、13和9天。于发病后第3周该4种试剂盒的检出率分别为52．6％(10／19)、94．7％(18／19)、78．9％(15／19)和84．2％(16／19)。但自发病第4周后，该4种试剂盒的检出率相同。检测123份阴性参比血清表明，除EIA乙的特异度为94．9％外，其余3种试剂盒的特异度均为100％。结论2种IFA的灵敏度和特异度均较2种EIA高；2种国产EIA试剂盒质量尚需进一步提高。     

5-Br-PADCAP直接光度法测定血清锌试剂盒的研制与评价

目的 :研制、评价 5 -Br-PADCAP直接光度法测定血清锌试剂盒。方法 :在表面活性剂存在下 ,用 2 - (5-溴 - 2 -吡啶偶氮 ) - 5 - [(N ,N -二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 -Br-PADCAP)作显色剂手工分析法和自动分析法测定血清锌。结果 :该法线性范围 0～ 80 μmol/L ,手工分析法和自动分析法平均回收率为 99 8%和 10 0 3% ,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为 0 0 2 1、 0 0 16和 0 0 2 9、 0 0 2 4 ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,线性回归方程和相关系数分别为Y =1 0 0 4X - 0 2 84 ,r =0 995 2和Y =0 9917X - 0 175 ,r =0 996 8。 82例健康人血清锌含量分别为9 0 2～ 2 2 34μmol/L和 8 4 9～ 2 2 14 μmol/L ( x± 2s)。 结论 :用 5 -Br-PADCAP直接光度法试剂盒测定血清锌方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用。     

荧光原位杂交法检测人精子染色体非整倍体

荧光原位杂交法(FISH)是检测精子非整倍体的简便快速的方法。本文综述了国外采用FISH方法检测精子非整倍体的最新进展。最新的研究表明，精子形态特别是某些特殊畸形如巨头或大头伴多尾的精子与精子非整倍体存在相关性；无精症患者中非阻塞性无精症睾丸精子的非整倍体率显著高于阻塞性无精症附睾精子和正常射精精子；化学物质如丙烯腈、吸烟、睾丸癌化疗等均可导致精子非整倍体率增加。     

用试剂盒中的阳性对照血清配制艾滋病初筛实验室室内质控品的试验

〔目的〕探索1种既能节约资金,又能保证质量的配制实验室室内质控品的方法,加强HIV初筛实验室的质量控制。〔方法〕用正常人血清稀释试剂盒中的阳性对照,配制成弱阳性的质量控制品。〔结果〕经过9个月的实验证明,质控结果相对稳定,变异系数为3.52%。〔结论〕用试剂盒剩余的阳性对照配制实验室的室内质控物,经济方便,切实可行。     

应用血清标记物在孕早期筛查染色体异常的研究进展

<正> 染色体疾病是导致新生儿出生缺陷最多的一类遗传性疾病,约占新生儿出生数的1/200,目前多数染色体疾病尚无法治疗,故只有进行及时的产前诊断,终止妊娠,才能达到优生的目的。 1984年Markaty等首先报道了胎儿为Down综合征(先天愚征,21-三体)的孕妇血清中甲胎蛋白(AFP)浓度明显低于正常,1988年Wald等提出在孕中期联合检测孕妇血清中AFP、人绒毛膜促性腺激素-β(β-hCG)、游离雌三醇(uE_3)等三项指标筛查Down综合征的胎儿,其检出率可达60％;从此,利用     

人精子染色体异常的检测

对人精子染色体的研究,可以推测父方染色体异常的情况。通过用人精子和仓鼠卵融合的方法对人精子的核型进行分析及用特殊染色体DNA探针进行荧光原位杂交(FISH)可以对人精子染色体进行研究。两种方法的研究显示人精子中每一条染色体成为双体的机率接近0.1％,而全部染色体是非整倍体的机率约5％～6％。精子染色体中整倍体的分布并不均匀一致,核型分析和FISH分析结果均表明:21号染色体和性染色体成为非整倍体的机率均明显升高。在睾丸癌患者化疗前和化疗后2～13年间,其精子核型分析结果显示染色体数量和结构异常的机率在化疗前后无明显差异。同样对精子中1号、12号、X和Y染色体进行FISH分析,显示它们双体的机率在治疗前后也无显著差异。在不育男性精子中1号、12号、XX、YY和XY染色体进行了FISH分析,显示1号、13号、21号和XY染色体双体的机率比对照组有显著升高。     

应用聚合酶链反应检测细胞培养液中支原体污染的初步研究

支原体污染是细胞培养中普遍存在的突出问题．它直接影响到培养细胞的各项参数．致使细胞培养失败。而传统的支原体检测方法则由于操作繁锁、费时、周期长而受到限制．我们通过用聚合酶链反应技术(PC0)检测1640液、小牛血清和全细胞培养等共34份，共检出支原体阳性率达47%．并得出细胞培养液中的主要污染来自小牛血清。这为细胞培养工作中检测支原体的污染提供了一个敏感、简便、快速的方法。     

人精子染色体异常的检测

对人精子染色体的研究，可以推测父方染色体异常的情况。通过用人精子和仓鼠卵融合的方法对人精子的核型进行及用特殊染色体ＤＮＡ探针进行荧光原位杂交可以人精子染色体进行研究。     

国产与进口试剂检测人血清中乙型肝炎表面抗体结果差异分析

目的分析国产试剂与进口试剂检测乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)结果差异。方法选取新乡市中心医院住院和门诊病人血清标本44份,分别用罗氏全自动化学发光试剂和郑州安图生物化学发光试剂测定抗-HBs浓度,挑选阴阳性结果有差异的样本,再用国内主流试剂进行复测。结果郑州安图生物和罗氏试剂检测结果一致的百分比为95.5%,其中2份样本罗氏阴阳性结果与国内试剂存在反差。结论国产试剂与进口试剂检测抗-HBs结果存在一定的偏差,在一定程度上与包被和标记用HBsAg有关。     

沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用

[目的]建立一种快速、灵敏、准确的检测方法,预防沙门菌食物中毒。[方法]根据沙门菌保守基因序列fimY基因设计合成了引物和TaqMan探针,建立快速检测沙门菌的实时荧光定量方法,并对反应条件进行了优化,组装成快速检测试剂盒。[结果]其检测灵敏度达到4．5efu,比常规PER高100倍,而且稳定性良好,冷冻至少可以保存9个月。[结论]通过临床样品的检测,该试剂盒具有操作简便快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性强等优点,很适合大量样品的检测。     

血清不同稀释度检测慢性乙型肝炎血清HBeAg和HBsAg的研究

目的 :为观察慢性乙型肝炎患者HBeAg和HBsAgS/N测定值在原血清与稀释血清所占的比例 ;如何使双份血清S/N测定值具有可比性 ;HBeAg、HBsAg滴度与转阴的关系。方法 :将慢性乙型肝炎患者血清从 1 0 0 — 1 0 - 5稀释检测HBeAg ;从 1 0 0 — 1 0 - 9稀释检测HBsAg。双份血清对比在同等条件下检测。结果 :HBeAgS/N值在 1 0 0 者占 4 .1 % ,在 1 0 - 1 — 1 0 - 5者占95 .9% ;HBsAgS/N值在 1 0 0 占 1 3 .4% ,在 1 0 - 1 — 1 0 - 9者占 86 .6 %。 2 8份血清HBeAgS/N值在 1 0 0 者转阴率为 85 .7% ;72份血清S/N值在 1 0 - 1 — 1 0 - 5者转阴率为 5 .6 % ,P <0 .0 0 5。31份血清HBsAgS/N值在 1 0 0 者转阴率为 38.7% ,86份血清HBsAgS/N值在 1 0 - 1 — 1 0 - 9者转阴率为零 (P <0 .0 0 5)。结论 :原血清检测HBeAg、HBsAgS/N值只表示有无感染 ,不能衡量患者血清内病毒抗原量的多少 ;HBeAg、HBsAgS/N值在 1 0 0 者转阴率明显高于 1 0 - 1 以上者 ;双份血清在同等条件下的不同滴度S/N值对比是考核HBeAg、HBsAg量变的较理想的指标     

入境旱獭皮鼠疫危险陛及快速侦检实验研究

[目的]研究中蒙边境口岸入境旱獭皮感染鼠疫的风险性,建立实用于口岸的快速有效的入境旱獭皮鼠疫检测方法。[方法]采用反向间接血凝试验（RIHA）、聚合酶链反应（PCR）、胶体金和免疫层析（UCP）方法检测旱獭皮携带的鼠疫杆菌,并进行对比分析。[结果]检测样品8060份,反向间接血凝试验（RIHA）检出鼠疫F1抗原阳性120份,经复判阳性60份,阳性率0．74％;PCR方法检出阳性样品70份,阳性率0．87％;UCP检测到阳性样品45份,阳性率0．56％;胶体金快速试纸检测,未获得阳性结果。对新鲜旱獭皮样90份经过处理后进行细菌学检验,未发现阳性结果。经统计学处理,PCR与RIHA阳性率间差异无显著性（P〉0．05）;UCP与RIHA阳性率间差异有显著性（0．01〈P〈0．05）;PCR与UCP阳性率间差异有极显著性（P〈0．01）。重复性试验结果分别为：PCR100％;RIHA98．6％;UCP80％。[结论]采用的几种检测方法都揭示被检入境旱獭皮鼠疫抗原标志物呈现不同程度的阳性。PCR的检测结果灵敏性较好、特异性好,假阳性较少,漏检率较低,试验过程中对操作者要求较低,对旱獭皮样品不失为一种快速、准确、实用的检测方法。     

二硫化碳接触对粘胶工人血清铜、锌和硒含量的影响

目的 探讨CS₂接触与血清微量元素铜、锌、硒之间的关系,为CS₂接触致心血管系统疾病的毒作用机理提供依据.方法 选择某化纤厂纺丝车间年龄在45岁以下,接触CS₂5年以上76名CS₂作业工作为接触组;在同一工厂棉浆车间选择曾经接触过CS₂但现在已停止CS₂接触5年以上的33名工人作为干预组;从未接触过CS₂的23名工人作为对照组进行流行病学横断面调查.结果 接触组SCu、SZn和SSe含量均低于对照组(P=0.0001);多元逐步回归分析进一步显示,CS₂对SCu、SZn和SSe含量均有负贡献(偏回归系数β分别为-10.4173,-8.973和-15.5098).结论 提示CS₂接触能降低血清铜、锌、硒含量.     

气相色谱法检测人血清中7种游离脂肪酸的研究

目的 建立人血清中7种游离脂肪酸的测定方法. 方法人血清中的硬脂酸、油酸、亚油酸、十八碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸通过加入正十七酸内标,经硫酸/甲醇甲酯化,正己烷萃取浓缩,气相色谱法定性定量. 结果 7种脂肪酸甲酯化后可完全分离,重复性好,在5.0～500/μg/ml范围内相关系数r>0.999,检出限≤1.1 μg/ml,20、100、300 μg/ml三个浓度的加标试验平均回收率在91.7%～98.1%之间,RSD 1.9%～4.1%之间.结论 本法适掰于人血清中游离脂肪酸测定.     

血清标本存放时间和存放方式对嗜肺军团菌抗体测定结果的影响

目的探讨血清标本存放时间和存放方式对嗜肺军团菌抗体测定结果的影响,为人群流行病学实际工作中嗜肺军团菌抗体的测定工作提供依据。方法采集120份健康人群血样分为三组,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒,分别在采样当日,以及在室温、冷藏与冷冻条件下保存不同时间后检测。然后进行统计学分析。结果室温组与冷冻组血清抗体LP1—7IgG在不同存放时间和存放方式条件下定性结果相同,冷藏组除1份阳性标本在第3天测定时落在临界值范围外,其定性结果也无变化。但室温组样品放置24h、48h和72h后定量结果与采样当日测定结果有统计学差异,冷冻组样品放置5周、7周后定量结果与采样当日测定结果有统计学差异。结论血清标本室温保存72h,在2～8℃冰箱保存5天和-20℃冰箱保存9周对血清中LP1—7IgG测定定性结果无明显影响,但定量结果不稳定,特别当抗体活性值≥40U／mL时,波动较大。     

营养性缺铁性贫血血清铁蛋白与红细胞铁蛋白的测定及其意义

目的：测定缺铁性贫血（IDA）患儿血清铁蛋白（SF）与红细胞铁蛋白（EF）水平和在IDA治疗过程中的变化及意义。方法：102例IDA患儿随机分为三组,应用元素铁10mg/d进行干预,A组为12周疗程组、B组为6周疗程组、C组为病例对照组,并设立正常对照组;A、B、C各组分别于投药前、服药后第12周采末梢血测定Hb,ZPP,SF,EF,第8周时仅测定Hb。Hb、ZPP采用常规方法,SF与EF测定采用末梢血放射免疫法。结果：治疗12周后SF与EF水平均显著高于治疗前（P均＜0．01）,与正常对照组相比,SF仍低于正常对照组水平（P＜0．05）,而EF水平则已达到正常对照组水平（P＞0．05）,治疗前后各组EF与SF均呈正相关关系,EF与Hb存在正相关关系,但与ZPP存在负相关关系。结论：EF对IDA的治疗反应较SF敏感,且影响EF的因素较少,可作为治疗IDA早期疗效评价指标。     

普通车用汽油和E10乙醇汽油对汽车尾气排放的影响调查

[目的]了解济南市使用E10乙醇汽油对汽车尾气排放的影响。[方法]于2006年2月在济南市区选取10辆汽油车，分别燃烧普通车用无铅汽油和E10乙醇汽油，检测汽车使用不同燃料时的一氧化碳（CO）、碳氢化合物（HC）、一氧化氮（NO）的排放量，对比试验结果并进行汽车尾气排放检测分析；比较使用不同车用燃料对汽车尾气排放的影响。[结果]燃用E10乙醇汽油较燃用普通车用无铅汽油，汽车排放中的CO（g／km）和HC（g／km）的排放量均有明显地减少，NO（g／kin）排放量的平均值无明显变化。[结论]E10乙醇汽油对车辆尾气排放的削减作用主要对CO和HC，对NO的作用不明显。     

甲醛致人血淋巴细胞DNA-蛋白质交联作用的定量研究

目的　探讨甲醛致 DNA-蛋白质的交联作用以及交联的检测方法。方法　以人血淋巴细胞为材料 ,设定 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5、0 .1 2 5、0 .6 2 5 mmol/ L 五个甲醛浓度梯度 ,采用 KCl- SDS沉淀法来检测染毒后细胞中 DNA-蛋白质交联的含量。结果　甲醛浓度在 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5 mm ol/ L 时 ,交联现象不明显或不能诱导DPC(P>0 .0 5 ) ;在 0 .1 2 5、0 .6 2 5 mm ol/ L 时交联程度显著增加 (P<0 .0 1 ) ,并有较好的剂量 -效应关系。结论　在低浓度时 ,甲醛诱导 DNA-蛋白质交联现象不明显或不诱导该现象 ,在高浓度时可显著诱导交联现象。KCl- SDS沉淀法检测 DNA-蛋白质交联的含量是有效的