灯盏花素对病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的作用

目的:研究灯盏花素从细胞凋亡方面对病毒性心肌炎的治疗作用。方法:建立病毒性心肌炎的模型。40只Balb/c雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、病毒感染组(n=15)和灯盏花素组(n=15),在感染后第9天处死小鼠,取其心脏进行检测。用HE染色法观察其心肌病理变化,免疫组化法观察Caspase-3情况,用TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况。结果:①治疗组心肌病理变化改变减轻(P<0.01);②治疗组Caspase-3的表达较感染组低(P<0.05);③治疗组心肌细胞凋亡少于感染组(P<0.01)。结论:细胞凋亡在病毒性心肌炎中发挥重要作用,灯盏花素对病毒性心肌炎有治疗作用。     

芪芍五味子复方制剂抗CVB3病毒抑制心肌细胞凋亡机制的研究

目的 研究中药芪芍五味子复方制剂抗柯萨奇B3病毒(CVB3)效果及抑制病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的机制.方法 采用细胞培养法观察细胞病变效应(CPE)与广谱抗病毒药物病毒唑对照,进行复方制剂体外抗病毒实验;BALB/c小鼠接种CVB3建立病毒性心肌炎动物模型,随机分为正常对照组、病毒对照组、复方制剂治疗组和维生素C与病毒唑联用组,观察各组心肌病理变化,Real-time定量PCR检测小鼠心肌CVB3RNA水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡和坏死率.结果 复方制剂体外最大无毒浓度为19.53g/L,预防给药、同时给药和治疗给药3种方式细胞培养所需有效药物浓度均低于病毒唑;与同期病毒对照组小鼠比较,复方制剂治疗组小鼠心肌炎症性病理变化明显减轻,CVB3RNA拷贝数降低(P<0.05),心肌细胞凋亡和坏死率显著降低(P<0.05).结论 芪芍五味子复方制剂可有效抗病毒,抑制病毒诱导心肌细胞凋亡,对CVB3感染小鼠心肌有良好的保护作用.     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制。方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTT法检测LSE对柯萨奇B3病毒(CoxB3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨。结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制CoxB3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC50值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL。该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用。LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51。LSE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性。结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现。     

天花粉热提取物抗柯萨奇B组病毒感染的研究

目的从体内、体外两方面对中药天花粉热提取物的毒性及抗病毒作用进行研究.方法采取HeLa细胞系,在96孔培养板上直接观察细胞病变;建立病毒性心肌炎小鼠模型,模型鼠经腹腔给予药物,记录小鼠的死亡情况,并从心肌中分离病毒,观察药物对病毒的清除作用;利用3H-UR标记CVB3m,对其作用机理作初步探讨.结果天花粉热提取物在高浓度时具有一定细胞毒性,在较低浓度时具有明显的抑制病毒致细胞病变效应的作用;天花粉热提取物对Balb/c鼠具有一定毒副作用,但小鼠耐受良好,并对病毒感染小鼠具有一定保护作用;天花粉热提取物可作用于病毒的吸附和穿入过程.结论天花粉热提取物具有抗病毒的临床应用潜力.     

天花粉热提取物抗柯萨奇B组病毒感染的研究

目的 从体内、体外两方面对中药天花粉热提取物的毒性及抗病毒作用进行研究。方法 采取HeLa细胞系，在96孔培养板上直接观察细胞病变；建立病毒性心肌炎小鼠模型，模型鼠经腹腔给予药物，记录小鼠的死亡情况，并从心肌中分离病毒，观察药物对病毒的清除作用；利用^3H-UR标记CVB3m，对其作用机理作初步探讨。结果 天花粉热提取物在高浓度时具有一定细胞毒性，在较低浓度时具有明显的抑制病毒致细胞病变效应的作用；天花粉热提取物对Balb/c鼠具有一定毒副作用，但小鼠耐受良好，并好病毒感染小鼠具有一定保护作用；天花粉热提取可作用于病毒的吸附和穿人过程。结论 天花粉热提取物具有抗病毒的临床应用潜力。     

苦瓜蛋白体外抗柯萨奇B3病毒感染

柯萨奇病毒B组(Coxsackievirus B group, CoxB)是病毒性心肌炎常见病原,目前尚无有效的治疗方法,近年来发现苦瓜核糖体失活蛋白(Ribosom e-inactivating protein, RIP)具有明显的抗病毒、抗肿瘤及调节免疫等多种生物活性[1],有很高的药用价值.笔者从苦瓜果肉中分离纯化苦瓜蛋白,并进行体外抗CoxB 3病毒感染作用的研究,旨在寻找高效抗CoxB3病毒感染作用的药物,现将结果报告如下.     

木芙蓉叶提取物抗病毒作用实验研究

目的:观察木芙蓉叶提取物体内、体外抗病毒的药理作用.方法:通过使用呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(Flu A)和副流感病毒(HPIVs)致细胞病变的体外感染模型,以治疗指数(TI)为指标,观察木芙蓉叶提取物体外抗病毒作用;通过使用呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠模型,以对小鼠病毒感染肺指数的抑制率为体内抗病毒活性指标,观察木芙蓉叶提取物体内抗病毒作用.结果:体外试验表明,木芙蓉叶提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(Flu A)和副流感病毒(HPIVs)这3种病毒均有不同程度的抑制作用;体内试验表明,木芙蓉叶提取物表现出一定的体内抗病毒活性,在一定浓度范围内,抗病毒活性随剂量的增大而增强.结论:木芙蓉叶提取物具有显著的抗病毒药理活性.     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用

目的 观察心肌康对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞的保护作用.方法 对清洁级Balb/c小鼠采用柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射染毒,制成慢性病毒性心肌炎动物模型,按照随机数字表法分为三组:A组为病毒性心肌炎(VMC)组、B组为心肌康组、C组氯沙坦组.另设20只腹腔接种不含病毒的Eagle's液小鼠为正常对照组,观察心肌康对模型鼠的生存率的影响及对CVB3 RNA表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响.结果 心肌康组、氯沙坦组小鼠的生存率明显高于病毒对照组,心肌康对CVB3感染鼠有保护作用,心肌康组对感染鼠的治疗作用要优于氯沙坦组.结论 心肌康可通过下调CVB3 RNA表达、抑制胶原增生而对心肌细胞产生保护作用.     

西洋参对小鼠病毒性心肌炎的疗效及机制

目的:探讨西洋参(Panax quinquefolium)对BALB/C小鼠Coxsackie B_3病毒性心肌炎的治疗作用。方法:雄性4周龄BALB/C小鼠腹腔接种CVB_3病毒液,建立VMC模型,接种30min后用西洋参煎剂灌胃每日1次,持续最长至4周。观察小鼠存活率、心肌病理改变、心肌内病毒滴度、心肌细胞凋亡坏死率、外周血T细胞亚群及抗心肌抗体的改变。结果:西洋参治疗组比病毒感染组存活率提高,心肌组织病理改变恢复加快,心肌细胞凋亡坏死率减低及外周血T细胞亚群比例改善,自身抗体减少(P<0.05)。结论:西洋参对CVB小鼠有较好的治疗作用。晚期效果好于黄芪。     

黄芪对病毒性心肌炎治疗作用浅析

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。是中医补气要药,味甘,微温,具有益气补中、补气固表、利尿排毒、托疮生肌等作用。现代研究发现其含有苷类、黄酮、多糖、氨基酸及微量元素等多种有效成分,其临床作用广泛,具有强心、抗心肌缺血、提高免疫力、降糖、抗衰老、保护脏器等作用。近年来该药被广泛应用于病毒性心肌炎的治疗,临床效果明显。本文就其对病毒性心肌炎的治疗作用分析如下。1抗病毒作用腹腔接种柯萨奇B5病毒(CVB5)致VMC的雄性BALB/C小鼠,应用黄芪甲苷治疗后,心肌组织中的病毒滴度和细胞中病毒核糖核酸(RNA)的复制水平均降低;大鼠培养心肌细胞感染CVB5 1 h后,经黄芪注射液处理48 h,CVB5 RNA含量也显著减少,说明黄芪在体内外均有抑制CVB5病毒复制的作用。2免疫调节作用病毒性心肌炎心肌免疫损伤以T细胞介导的细胞免疫反应为主,尽管细胞免疫在机体抗病毒感染中起重要作用,但病毒感染引起宿主免疫功能和病毒感染细胞的抗原性质改变,均可造成免疫反应对宿主细胞的攻击,而引起病理性损伤。研究发现,应用黄芪治疗病毒性心肌炎小鼠后,显示黄芪可能是通过抑制急性CVB5心肌炎Th1反应及激发Th2反应,影响Th1相关细...     

柯萨奇病毒B3感染小鼠早期TNF-α的表达与心肌细胞凋亡的关系

目的:探讨柯萨奇病毒B3(CVB3)感染小鼠肿瘤坏死因子的表达与细胞凋亡的关系。方法:用CVB3感染小鼠建立病毒性心肌炎感染模型,测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,CVB3感染小鼠血清中TNF-α的含量明显升高,感染后5d,心肌细胞凋亡率与对照组比较差异显著(P<0.0001)。TNF-α与细胞凋亡之间有关联性(r=0.8276,P<0.05)。结论:在CVB3感染中心肌细胞凋亡与TNF-α明显升高有关,两者在病毒性心肌炎发病的早期起到了重要作用。     

草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的大鼠心肌细胞抗氧化作用的影响

[目的]探讨草苁蓉提取物对柯萨奇B3病毒感染的大鼠心肌细胞的抗氧化作用。[方法]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞,培养48h后接种10^3TCID50柯萨奇B3病毒做为实验性病毒性心肌炎模型。[结果]草苁蓉提取物明显减轻感染柯萨奇B3病毒的心肌细胞病变,使细胞搏动增强,明显降低心肌细胞内的丙二醛含量,显升高超氧化物歧化酶活性。[结论]草苁蓉提取物对感染柯萨奇B3病毒的SD大鼠培养心肌细胞具有显的抗氧化作用。     

苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用

目的 在病毒性心肌炎心肌细胞模型上观察苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒(CVB3)感染SD大鼠心肌细胞的保护作用及其机制. 方法 体外原代培养SD大鼠心肌细胞,以CVB3感染培养大鼠心肌细胞,复制病毒性心肌炎心肌细胞模型,分别测定心肌细胞搏动百分比(PBC)、半数有效率(ED)、细胞病变(CPE)、心肌酶谱、半感染致死量(TCID50),分析其对心肌细胞的保护作用. 结果 苦瓜蛋白的ED值为0.045 mg/mL,80、40、20、10 μg/mL苦瓜蛋白可显著提高心肌细胞PBC、降低病毒的复制,80、40 μg/mL苦瓜蛋白可减少CPE,降低心肌酶水平. 结论 苦瓜蛋白对感染CVB3的心肌细胞有较强的保护作用.     

牛磺酸对培养大鼠心肌细胞感染柯萨奇B_3病毒的影响

[目的 ]探讨牛磺酸对由柯萨奇B3 病毒感染的大鼠心肌细胞的抗病毒和保护作用 ,为该药的临床应用提供理论依据 .[方法 ]取新生SD大鼠的乳鼠心室肌制备搏动心肌细胞 ,培养 48h后接种10 3TCID5 0的柯萨奇B3 病毒做为实验性病毒性心肌炎模型 .[结果 ]牛磺酸明显减轻感染柯萨奇B3 病毒心肌细胞的病变 ,使细胞搏动增强 ;提高心肌细胞的琥珀酸脱氢酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ;抑制心肌细胞感染柯萨奇B3 病毒后导致的乳酸脱氢酶和谷草转氨酶释放 .牛磺酸提高正常心肌细胞和感染柯萨奇B3 病毒的心肌细胞存活率 ,其作用具有剂量依赖性 .[结论 ]牛磺酸对感染柯萨奇B3 病毒的大鼠搏动心肌细胞具有一定的抗病毒和保护心肌细胞的作用     

反义寡核苷酸抑制柯萨奇病毒B_3致病作用的实验研究

目的 :观察在细胞培养系统和小鼠体内反义寡核苷酸 (AODN)抑制柯萨奇病毒B3(CVB3)致病作用。方法 :观察细胞病变效应 (CPE) ,常规微量法滴定病毒的50 %组织细胞感染量 (TCID50)以及观察感染小鼠心肌组织的病理改变。结果 :1 AODN可推迟和减轻CVB3 感染细胞CPE ,且随AODN浓度增高 ,对CPE的抑制作用增强 ;培养上清中病毒滴度随AODN浓度升高而降低。2 随AODN剂量增加 ,感染小鼠心肌组织病毒滴度逐渐降低 ;心肌细胞病变程度逐渐减轻 ;心肌炎发病率也逐渐降低。结论 :AODN可能通过抑制CVB3 复制来保护Vero细胞和小鼠心肌组织抵抗感染。     

四种中草药抗柯萨奇及埃柯病毒的实验研究

在培养的细胞上研究探讨了四种中草药(贯众、虎杖、金银花、连翘)对病毒性心肌炎及其抗病毒作用的机制。实验结果证明:四种中草药细胞外抑制 COX β_3V 及 ECHO19V 的作用很明显(P<0.05)。为治疗病毒性心肌病及其它病毒性疾病提供了用药依据。     

广州市儿童病毒性心肌炎与柯萨奇B组病毒病原关系的初步研究

病毒性心肌炎可由多种病毒引起,但以柯萨奇B组病毒(简称CoxB)为多见。本文报告广州市儿童医院病毒性心肌炎部分住院病人血清中CoxB中和抗体检查结果。一、材料和方法 1.血清标本:选择1984～1985年临床诊断为病毒性心肌炎住院病儿44例,采集血清标本62份。另选30例临床诊断为散发性脑炎血清标本作对照组。 2.病毒株:CoxB_(1～6)型标准毒株购自中国医学科学院医学生物研究所。本实验室用原代人胚肾细胞做毒株传代,病毒置-30℃保存备     

雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达的调控作用

目的:研究雷帕霉素对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的心肌细胞哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)和真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4 E, eIF-4E)表达的调控,探讨mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)的作用.方法:CVB3感染原代培养的SD大鼠心肌细胞建立病毒性心肌炎的细胞模型.根据细胞毒力实验筛选10 nmol/L的雷帕霉素干预CVB3感染的心肌细胞,采用RT-PCR和Western免疫印迹方法检测mTOR和eIF-4E mRNA表达及蛋白质水平.结果:CVB3诱导心肌细胞变性,雷帕霉素可减轻其变性;CVB3使大鼠心肌细胞的mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达上调,与对照组比较,有统计学差异(P<0.05),雷帕霉素可使CVB3感染的心肌细胞mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达明显下调,与CVB3组比较,有统计学差异(P<0.05).结论:雷帕霉素能明显抑制CVB3感染的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表述,提示mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎中可能起重要作用.     

黄龙口服液对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠白介素12水平及自然杀伤细胞活性的影响

目的 :探讨黄龙口服液干预柯萨奇B3 (CVB3 )病毒性心肌炎小鼠动物模型血清IL 12水平和NK细胞活性的影响。方法 :CVB3 诱导Balb/c小鼠心肌炎为研究对象 ,给予黄龙口服液进行干预 ,分别于用药后第 3,7和 14d测定小鼠血清IL 12水平和NK细胞活性。同时测定心脏组织中病毒滴度 ,进行心肌病理学检查。结果 :黄龙组小鼠血清IL 12水平明显升高 ,NK细胞活性增强 ,早期小鼠心脏组织中病毒滴度下降 ,心肌损害较轻。结论 :黄龙口服液干预病毒性心肌炎小鼠在免疫损伤中起到一定的保护作用 ,早期提高宿主对病毒免疫应答能力 ,能有效提高CVB3 感染小鼠血清IL 12水平和提高NK细胞活性 ,从而在早期降低心脏组织中病毒滴度 ,减轻心脏损伤程度 ,有效改善预后。     

双黄连抗柯萨奇B3型病毒感染大鼠原代心肌细胞的效应

目的观察双黄连抗柯萨奇B3病毒感染原代大鼠心肌细胞的作用,并初步探讨其机制.方法选用出生1～3天的Sprague-Dawley大鼠,取其心室肌组织,制备原代大鼠心肌细胞,培养72 h后,用不同浓度的双黄连对抗100TCID50柯萨奇B3型病毒感染细胞,观察细胞病变,测定感染36 h后细胞上清液中的病毒滴度及肌酸磷酸激酶.结果 0.5、 0.25、0.125 g/L双黄连均可明显减轻心肌细胞病变,降低细胞上清液的病毒滴度, 减少感染心肌细胞肌酸磷酸激酶的释放(分别和病毒对照组相比,P<0.01).结论双黄连对柯萨奇病毒感染的新生大鼠原代心肌细胞有保护作用.