5-ASA对大鼠溃疡性结肠炎NF-κB表达的影响

目的:观察NF-κB在溃疡性结肠炎模型大鼠中的表达并探讨其可能机制。方法:采用2,4-二硝基氯苯法制备溃疡性结肠炎模型,分正常对照组、模型对照组和5-ASA组,5-ASA组给5-ASA溶液灌肠治疗7d,检测血清IL-4、IL-6水平,分析结肠黏膜NF-κB的表达。结果:与正常对照组相比较,模型对照组、5-ASA组血清IL-6、结肠黏膜NF-κB的表达显著增加(P<0.05),IL-4水平降低(P<0.05);治疗后,5-ASA组血清IL-6、结肠黏膜NF-κB的表达比模型对照组明显降低(P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.05),IL-4水平比模型对照组显著升高(P<0.05),但仍低于正常对照组(P<0.05)。结论:NF-κB过度激活,能增加致炎因子IL-6产生,抑制抗炎因子IL-4释放,参与溃疡性结肠炎的发生。     

己酮可可碱对小鼠溃疡性结肠炎NF-κB的影响

目的:观察己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)治疗小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,探讨PTX对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠UC NF-κB的影响.方法:用TNBS局部灌肠法建立小鼠UC模型,随机分为正常组、模型组、PTX组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组,评价疾病活动指数(DAI),观察结肠组织学损伤,用ELISA法测定结肠组织NF-κB的水平.结果:用TNBS灌肠可使小鼠结肠炎性改变;PTX治疗可使小鼠疾病活动指数、结肠黏膜大体形态学损伤评分及组织学评分、结肠黏膜组织NF-κB的表达明显下降,与SASP相比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:PTX对以TNBS诱发的小鼠UC有良好的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制小鼠结肠黏膜组织NF-κB的表达而减轻其炎症性损害.     

TLR9和NF-κBp65在大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织中的表达

目的观察TLR9(Toll样受体9)、NF-κBp65(核因子-κBp65)在大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型结肠组织中的表达。方法应用复合法(2,4-二硝基氯苯+乙酸)制备大鼠UC模型,观察和评估结肠黏膜的大体形态和组织学变化。以免疫组化Elivision法检测TLR9、NF-κBp65的表达。结果造模后可见大鼠肠黏膜有大量炎性细胞浸润,累及黏膜下层和固有层。与正常对照组相比,模型组结肠组织TLR9、NF-κBp65表达显著升高(P0.01)。结论 TLR9、NF-κBp65在UC发病机制中具有重要作用。     

半夏泻心汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中TLRs/NF-κB通路相关因子表达的影响

目的:观察半夏泻心汤对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织中核转录因子κB p65(NF-κB p65)、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)及Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨其治疗UC的可能机制。方法:将大鼠随机分为正常组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、柳氮磺吡啶肠溶片(SASP,阳性对照,0.3 g/kg)和半夏泻心汤低、中、高剂量组(3.9、7.8、11.7 g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均采用三硝基苯磺酸-乙醇法复制UC模型。成模后,ig给药,每天1次,连续3周。给药结束后,检测各组大鼠结肠组织中NF-κB p65、IκB-α、TLR4 mRNA及蛋白的表达。结果:与正常组比较,其余各组大鼠结肠组织中NF-κB p65、IκB-α、TLR4 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠结肠组织中NF-κB p65、IκB-α、TLR4 mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);半夏泻心汤具有一定的剂量依赖性,且高剂量组大鼠结肠组织中上述水平的降低程度均高于SASP组(P<0.05)。结论:半夏泻心汤可下调UC大鼠结肠组织中NF-κB p65、IκB-α及TLR4 mRNA及蛋白的表达,这可能是其治疗UC的作用机制之一。     

乌司他丁对溃疡性结肠炎大鼠结肠炎症及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 观察乌司他丁对溃疡性结肠炎的作用,以及对Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）信号通路的干预作用,以探讨其可能的作用机制。方法 采用三硝基苯磺酸灌肠法制备溃疡性结肠炎大鼠模型。SD大鼠80只随机分成空白组、模型组、乌司他丁组（乌司他丁50 000 U·kg^-1·d^-1腹腔注射）、激素组（泼尼松片6 mg·kg^-1·d^-1灌胃给药）,每组20只。造模7 d后处死,检测各组大鼠结肠黏膜大体评分（CMDI评分）和病理组织学评分变化;ELISA法检测各组大鼠血清TNF-α水平;免疫组化法观察大鼠结肠组织TLR4及NF-κB蛋白的表达。结果 模型组大鼠结肠大体形态损伤及病理组织学评分均高于空白组（P均<0.01）,大鼠造模成功;与模型组比较,乌司他丁组CMDI评分及病理组织学评分均减低（P均<0.05）,与激素组比较,乌司他丁组CMDI评分及病理组织学评分则无差异。模型组大鼠的血清TNF-α与空白组比较,水平明显上升（P<0.01）;而乌司他丁组与模型组比较,大鼠血清TNF-α水平则明显下降（P<0.05）,乌司他丁组与激素组比较则无明显差别。与空白组比较,模型组大鼠肠黏膜中TLR4、NF-κB均呈明显高表达（P<0.01）,乌司他丁组TLR4、NF-κB表达较模型组则明显下降（P均<0.05）,而乌司他丁组中NF-κB的表达则又低于激素组（P<0.05）,TLR4的表达则与激素组无明显差异。结论 乌司他丁能减轻溃疡性结肠炎大鼠肠道炎症反应,具有治疗作用;其机制可能与通过下调TLR4及NF-κB的表达,减少炎症因子TNF-α的释放有关。     

苦参素对溃疡性结肠黏膜细胞NF-κB表达的影响

目的探讨苦参素对溃疡性结肠黏膜细胞中NF-κB mRNA表达的影响机制。方法 SPF级SD大鼠随机分成正常对照组,UC模型组,UC+苦参素组,UC+柳氮磺胺吡啶组,实验结束时,剖取病灶结肠,RT-PCR方法检测各实验组动物结肠黏膜细胞中NF-κB mRNA表达水平。结果苦参素可显著抑制NF-κB mRNA在溃疡性结肠炎症细胞中的表达(P<0.01)。结论苦参素可干预NF-κB mRNA在炎症性结肠黏膜细胞中的表达,进而抑制溃疡性结肠炎症反应。     

NF-κBp65在甲状腺肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨NF-κBp65在甲状腺肿瘤中的表达、临床意义及其机制。方法:收集武汉大学人民医院及十堰市太和医院病理科1999年至2004年存档蜡块40例,均为手术切除后诊断明确的甲状腺肿瘤,按照WHO标准组织学分类:乳头状腺癌(PTC)12例,滤泡性腺癌(FTC)10例,髓样癌(M TC)10例,未分化癌(UTC)8例;按照A JCC标准临床病理分期:Ⅰ期12例,Ⅱ期10例,Ⅲ期11例,Ⅳ期7例;同时取甲状腺瘤旁组织15例及正常甲状腺组织5例作对照。患者术前均未行放疗或化疗。采用组织学及免疫组织化学S-P法,分别对乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌、甲状腺瘤旁组织及正常甲状腺组织的组织学结构变化、相关NF-κBp65因子进行了观察,利用HP IA S-2000图像分析系统测定了NF-κBp65和ICAM-1在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:NF-κB p65在乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞浆内有强表达;NF-κB p65在甲状腺瘤旁组织中表达极弱或无表达;NF-κB p65在正常甲状腺组织中表达极弱或无表达。经单因素方差分析,各组间的差异有显著性意义(P<0.05)。经q检验,乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与甲状腺瘤旁组织、正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.01);甲状腺瘤旁组织与正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>0.05)。结论:NF-κB p65与甲状腺肿瘤的发生、发展、转移及预后有密切的联系。     

黄芩提取物治疗大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

为探讨黄芩提取物对实验性溃疡性结肠炎的治疗效果和作用机制,采用三硝基苯磺酸法制备大鼠实验性溃疡性结肠炎模型。将60只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性药物对照组以及中高低黄芩提取物3个治疗组,每组10只,以超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)含量作为观察指标。结果表明,与正常组比较,模型组SOD显著降低,MAD显著升高(P<0·01);黄芩提取物中剂量组与模型组比较能显著降低MAD含量,而提高SOD含量(P<0·01)。结论:黄芩提取物通过改善自由基水平而对大鼠溃疡性结肠炎具有促进修复作用。     

参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κB p65表达影响

目的建立复发性口疮(RAU)大鼠动物模型,探讨参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κBp65表达影响。方法大鼠脊柱两侧注射大鼠口腔黏膜抗原乳化液,建模后将溃疡大鼠随机分为3组:正常组(GroupN)不建模;对照组(GroupC)建模正常饮食水;参芪扶正注射液组(GroupS)大鼠按8ml.Kg-1.d-1剂量灌胃20天。检测给药后大鼠RAU炎性细胞因子TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果实验大鼠于最后一次抗原注射6d后开始出现口腔溃疡。口腔溃疡炎症细胞因子TNF-a表达水平均明显低,炎性细胞胞核内NF-kB P65低表达。结论参芪扶正注射液对RAU大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制炎性细胞NF-kB P65的活化及减少炎性细胞因子的分泌有关。     

玉屏风散对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜NF-κBp65、GATA-3表达的影响

目的通过研究变应性鼻炎大鼠鼻黏膜NF-κBp65、GATA-3表达的影响,探讨玉屏风散治疗变应性鼻炎的可能机制。方法 60只SD大鼠按体质量随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、治疗组(玉屏风散低、中、高剂量组)、对照组。除正常组外,其余的大鼠均建立卵清蛋白诱导的变应性鼻炎模型。分组给药干预1周。应用HE染色检测鼻黏膜组织结构变化,应用western-blot及Realtime PCR技术检测NF-κBp65、GATA-3在鼻黏膜组织中的表达。结果模型组鼻组织病理学表现以组织重塑、上皮细胞脱落、杯状细胞化生、组织水肿、大量嗜酸性粒细胞浸润为主;治疗组的表现以鼻黏膜存在组织重塑表现,鼻黏膜上皮细胞脱落、组织间质轻度水肿、固有层可见少量嗜酸性粒细胞浸润,两组比较,有统计学差异(P<0.05)。模型组鼻黏膜中NF-κBp65、GATA-3蛋白及其mRNA呈高表达变化;给予玉屏风散治疗后,NF-κBp65、GATA-3蛋白及其mRNA表达下降,经统计学比较,有显著性差异(P<0.05)。结论变应性鼻炎鼻黏膜存在组织重塑,玉屏风散可能通过下调NF-κBp65、GATA-3表达,发挥防治变应性鼻炎的效应。     

胃癌中NF-κBp65、Caspase8的表达及临床意义

目的:探讨NF-κBp65、Caspase8在胃癌中的表达及与胃癌临床病理特征之间的关系.方法:采用免疫组化PV-9000二步法检测60例胃癌组织标本中NF-κBp65、Caspase8两种蛋白的表达.结果:胃癌组织中NF-KBp65阳性表达率为63.3%,明显高于癌旁胃组织的30.0%P<0.05),Caspase8在胃癌中的阳性表达率为35.0%,明显低于癌旁胃组织的83.3%(P<0.05);胃癌组织分化程度越低,NF-κBp65阳性表达率越高,而caspase8阳性表达率越低P<0.05);NF-κBp65的表达率随肿瘤的浸润深度增加而增高,有淋巴结转移者比无转移高(P<0.05),而caspase8的表达与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移均无明显关系(P>0.05);二者在胃癌中的表达呈负相关(P<0.05).结论:NF-κBp65、Caspase8通过调节细胞凋亡,参与胃癌的发生发展过程,且在胃癌中NF-κBp65能够下调Caspase8的表达.     

黄芩苷经TLR2/NF-κB途径减轻类风湿关节炎大鼠滑膜炎

目的评价不同剂量黄芩苷对SD大鼠类风湿关节炎的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法制备SD大鼠类风湿关节炎模型,测量后足的肿胀度;通过不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察膝关节滑膜HE染色切片病理变化;实时荧光定量PCR测定膝关节滑膜组织TLR2及MyD88mRNA表达;Westernblot测定滑膜组织TLR2、MyD88及NF-κBp65蛋白表达。结果黄芩苷30、60mg·kg~(-1)均能明显减弱滑膜组织中成纤维细胞的增殖及炎性损伤程度,明显降低滑膜组织TLR2及MyD88mRNA表达(P<0.01),明显减弱TLR2、MyD88及NF-κBp65蛋白表达(P<0.05)。结论黄芩苷具有良好的抗类风湿关节滑膜炎作用,其可能是通过抑制TLR2-NF-κB信号通路的活化来实现的。     

银屑病皮损中PKB、NF-κBp65、Bcl-xL的表达及相关性研究

目的探讨PKB、NF-κBp65、Bcl-xL与寻常型银屑病发病的相关性。方法采用S-P免疫组织化学法检测30例寻常性银屑病患者皮损及10例正常人皮肤石蜡包埋组织标本中PKB、NF-κBp65、Bcl-xL的表达与定位。结果与正常对照组相比,银屑病皮损角质形成细胞中PKB、NF-κBp65、Bcl-xL的表达均明显上调,其差异有统计学意义(P<0.05)。在银屑病皮损组织角质形成细胞中,随着PASI评分的增加,PKB、NF-κBp65、Bcl-xL的表达逐渐增强,其表达水平与患者PASI评分之间均存在正相关,有统计学意义(P<0.01)。PKB与NF-κBp65、PKB与Bcl-xL、NF-κBp65与Bcl-xL之间的表达水平均存在正相关,有统计学意义(P<0.01)。结论 PKB、NF-κBp65、Bcl-xL可能与银屑病发病及银屑病疾病严重程度有关。     

早期百草枯中毒大鼠肺和肝组织NF—κBp65、MCP-1mRNA表达的变化

目的探讨百草枯（PQ）中毒的分子机制。方法应用半定量RT-PCR法检测PQ中毒大鼠染毒4h后肺、肝组织核因子-κBp65（NF-κBp65）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA的表达,并与正常对照组比较。结果大鼠PQ染毒4h后,肺、肝组织NF-κBp65、MCP-1mRNA的表达明显上调,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PQ中毒大鼠4h内肺、肝组织NF—κBp65、MCP-1mRNA表达就已明显上调,提示在PQ致机体中毒的毒性过程中,早期就有细胞因子的参与。     

复方苦参汤对溃疡性结肠炎模型大鼠的干预及作用机制研究

摘 要 目的：探讨复方苦参汤对溃疡性结肠炎（UC）大鼠的作用及机制。方法: 采用2,4,6 三硝基苯磺酸（TNBS）诱导溃疡性结肠炎大鼠模型,用不同剂量的复方苦参汤进行干预,检测结肠组织丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（iNOS）和一氧化氮（NO）水平,以及髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）活性,观察UC大鼠一般情况和结肠组织形态变化。结果: UC大鼠结肠组织MDA（P＜0.05）、iNOS（P＜0.01）和NO（P＜0.01）水平及MPO（P＜0.01）活性显著高于正常对照组,SOD（P＜0.01）和GSH Px（P＜0.05）活性显著低于正常对照组;复方苦参汤高剂量组治疗后可明显降低UC大鼠结肠组织中MPO（P＜0.01）、MDA（P＜0.05）、iNOS（P＜0.05）和NO（P＜0.01）水平,增加SOD（P＜0.01）和GSH Px（P＜0.05）活性,其疗效呈剂量依赖性。同时大鼠的一般情况及结肠组织形态亦得到明显改善。结论:复方苦参汤能显著抑制UC大鼠氧化应激反应,减轻结肠炎症损伤,具有较高的临床治疗价值。     

RKIP、NF-κBp65蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究乳腺癌组织中Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitor protein,RKIP）、核转录因子-κBp65（nuclear factor-kappaB p65,NF-κBp65）蛋白的表达,探讨其表达与乳腺癌发生、发展的相关性。方法应用免疫组织化学染色方法（S-P法）检测54例乳腺癌组织、22例癌旁乳腺组织、14例乳腺增生症组织中RKIP、NF-κBp65蛋白的表达,并进行统计学分析。结果乳腺癌组织与癌旁乳腺组织、乳腺增生症组织中RKIP表达的阳性率为51.9%,81.8%,100%,乳腺癌组织与两者比较有显著性差异（P〈0.05）;NF-κBp65表达的阳性率分别为42.4%、13.6%、7.14%,与两者比较有显著性差异（P〈0.05）。乳腺癌RKIP的表达与腋窝淋巴结转移相关（P〈0.05）,NF-kBp65的表达与乳腺癌的组织学分级、TNM分期显著相关（P〈0.05）。RKIP与NF-κBp65在乳腺癌中表达负相关。结论 RKIP可能是NF-κBp65的一个重要调节因子,两者可能共同参与了乳腺癌的发生、发展过程。     

孕烷X受体/NF-κB信号通路在美沙拉嗪改善大鼠溃疡性结肠炎中的作用

目的研究孕烷X受体/NF-κB(PXR/NF-κB)信号通路在美沙拉嗪(Mes)干预溃疡性结肠炎(UC)大鼠中的作用。方法SPF级雄性SD大鼠一次性结肠灌注2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)每只0.8 mL,连续4 d。每天观察各组大鼠体质量,粪便性状,计算病变活动指数(DAI),DAI为正常组的2倍以上,则为造模成功。模型大鼠按照分组每天分别ig给予Mes 300 mg·kg^-1(模型+Mes组)、利福平(Rif)50 mg·kg^-1+Mes组(模型+Mes+Rif组)和酮康唑(Ket)35 mg·kg^-1+Mes组(模型+Mes+Ket组),均先给Rif和Ket、给药4 d后给予Mes,连续7 d。HE染色观察结肠病理改变;ELISA法测定血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-13含量;比色法检测结肠髓过氧化物酶(MPO)活性;实时PCR和Western印迹法检测结肠PXR,NF-κB,NF-κB p65和κB抑制因子α(IκB-α)蛋白和mRNA水平。结果模型组大鼠体质量明显下降,并伴有稀便和血便的症状。与UC模型组相比,模型+Mes组大鼠体质量明显升高(P<0.05),HE染色见结肠组织病变程度减轻;血浆TNF-α与IFN-γ含量、结肠组织中MPO活性、NF-κB mRNA及p-P65蛋白水平显著降低(P<0.05),而血浆IL-4和IL-13含量及结肠组织Pxr,NF-κB p65和IκB-αmRNA水平均显著升高(P<0.05)。与模型+Mes组相比,模型+Mes+Rif组结肠组织Pxr和NF-κB通路相关靶基因表达水平差异无统计学意义,而模型+Mes+Ket组结肠中Pxr和IκB-αmRNA水平显著下降(P<0.05)。结论Mes对UC的治疗效果很可能与激活PXR/NF-κB信号通路有关。     

心肌片通过抑制NF-κB p65信号通路发挥心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察心肌片对缺血再灌注引起的心肌损伤的保护作用,研究其分子作用机制。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支40min,再灌注2h,建立心肌缺血再灌注模型。cTnT、CK-MB、IL~(-1)、IL-6、TNF-α、MPO和ICAM-1的活性按照试剂盒说明书测定。采用蛋白质免疫印迹法检测心肌组织细胞浆和细胞核内NF-κB p65蛋白的表达情况。结果与模型组相比,心肌片预处理减轻了心肌损伤,降低了炎症因子水平,而这些保护作用可能与阻断NF-κB p65蛋白核转移有关。结论心肌片通过阻断NF-κB p65蛋白核转移从而减轻缺血再灌注引起的心肌炎症反应。     

白藜芦醇通过降低NF-κB p65乙酰化缓解大鼠神经病理性疼痛

目的观察白藜芦醇对腰5脊神经结扎(L5spinal nerve ligation,SNL)大鼠的镇痛作用及其相关机制。方法90只♂SD大鼠随机分为6组(n=15)。正常组;假手术组;疼痛组;高、中和低剂量白藜芦醇组。正常组不做处理,假手术组仅暴露腰5脊神经,其余各组行SNL。高、中、低剂量组分别将300、30、3μg白藜芦醇溶于10μL的100%二甲基亚砜溶剂中,于SNL术后d 4经鞘内导管给药,每天1次,连续给药4 d。术后1、3、5、7、9、11、14 d测定各组大鼠热缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)。行为学测试结束后处死大鼠,取腰段脊髓。Western blot检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和乙酰化p65蛋白的表达水平,采用免疫荧光法测定脊髓背角活化的核因子κB(NF-κB)表达。结果与假手术组比较,疼痛组大鼠术后PWL明显降低(P<0.05),SIRT1蛋白含量明显减少(P<0.05),乙酰化p65蛋白含量和活化的NF-κB表达明显增多(P<0.05)。与疼痛组比较,高、中剂量组大鼠给药后PWL和SIRT1蛋白含量明显升高(P<0.05),乙酰化p65蛋白含量和活化的NF-κB表达明显减少(P<0.05)。结论鞘内注射白藜芦醇可缓解神经病理性疼痛,其机制可能与激活SIRT1,促进p65去乙酰化,从而抑制NF-κB活化有关。