紫外分光光度法测定盐酸美普他酚片的体外溶出度

目的建立盐酸美普他酚片溶出度的测定方法。方法采用转篮法，0.1 mol·L^-1盐酸为溶出递质，转速75 r·min^-1，272 nm波长处用分光光度法检测。结果盐酸美普他酚浓度范围在50.0～300.0 μg·mL^-1内线性关系良好（r＝0.999 7）；平均回收率为99.73%，RSD为0.71%（n＝9）。结论该方法简便快速，准确、重现性好。     

高效液相色谱法测定复方盐酸阿替卡因注射液的含量

目的 建立高效液相色谱法测定复方盐酸阿替卡因注射液中盐酸阿替卡因、肾上腺素含量及其有关物质的方法。方法采用两种色谱条件，分别进行系统适用性、回收率和精密度等方法学研究。其中盐酸阿替卡因检测采用C8色谱柱，检测波长274 nm，流动相为乙腈 0.03 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（pH值2.0）（25∶75），流速1.0 mL·min^-1;肾上腺素检测采用C18色谱柱，检测波长260 nm，流速1.5 mL·min^-1。流动相是水和甲醇以梯度洗脱程序洗脱。结果盐酸阿替卡因、肾上腺素线性范围分别为0.20～2.00 μg·μL^-1，2.5～40.0 μg·mL^-1，回收率分别为99.99%，99.81%，RSD分别为0.40%(n＝9)，1.02%(n＝9)。结论该法准确，简便，也能对其有关物质进行控制，适用于复方盐酸阿替卡因注射液的含量测定。     

中空纤维分离-高效液相色谱法测定复方痤疮凝胶中主药的含量

目的 建立中空纤维分离-高效液相色谱(HPLC)法测定复方痤疮凝胶剂中主药含量的方法. 方法 采用中空纤维处理凝胶样品,含量测定以Venusil XBP-C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)为固定相,以磷酸盐缓冲液(取0.015 mol.L^-1磷酸二氢钾溶液,磷酸溶液调节pH至3.0)-乙腈为流动相进行梯度洗脱;进样量:20 μL;柱温:30 ℃;流速:1.0 mL.min^-1;紫外检测波长:克林霉素磷酸酯:210 nm,维A酸:350 nm. 结果 主成分峰与相邻杂质峰分离度＞1.5. 克林霉素磷酸酯在48.00～480.00 μg.mL^-1范围内线性关系良好,r＝0.999 8,平均回收率为99.96%,RSD为0.69%(n＝6),维A酸在1.00～20.00 μg.mL^-1范围内线性关系良好,r＝0.999 7,平均回收率为99.99%,RSD为1.24%(n＝6). 结论 该方法简单、可靠,可用于复方痤疮凝胶剂中的样品处理和含量测定.     

高效液相色谱法测定克咳胶囊中盐酸麻黄碱的含量

目的建立测定克咳胶囊中盐酸麻黄碱的高效液相色谱法。方法固定相： Alltima C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈 0.02 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺和0.1%磷酸)(22∶78)；检测波长：210 nm。结果盐酸麻黄碱的线性范围为0.353 22～1.766 10 μg，r＝0.999 8。平均加样回收率为99.47% ，RSD＝1.21%。结论该法简便、准确、重复性好，可作为克咳胶囊中麻黄碱的含量测定方法。     

反相高效液相色谱法测定人血浆奋乃静浓度

目的 建立反相高效液相色谱法测定人血浆中奋乃静的浓度。方法 以钻石C₁₈反相柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)为色谱柱,流动相为0.03 mol·L-1醋酸铵-甲醇（23：77）；流速：1.0 mL·min^-1；柱温：40 ℃;检测波长: 254 nm。以醋酸乙酯与二氯甲烷(80：20)为提取剂。结果 奋乃静的高、中、低（1 000.0, 400.0,10.0 μg·L^-1）3种浓度平均回收率分别为104.28%,97.60%,98.40%,日内、日间差RSD均<7%（n=5）;分析方法的检测限为5.0 μg·L^-1;线性范围为10.0～1 000.0 μg·L^-1。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

反相高效液相色谱法测定复方达克罗宁搽剂中二组分的含量

目的建立同时测定复方达克罗宁搽剂中盐酸多塞平和盐酸达克罗宁含量的反相高效液相色谱法。方法固定相为Kromasil-C18色谱柱，流动相为甲醇-水相［0.01 mol·L^-1磷酸二氢钾与三乙胺混合溶液(100∶1， V/V)，用85%的磷酸溶液调pH值至3.0］(60∶40)，流速：1.0 mL min 1，检测波长：297 nm。结果盐酸多塞平和盐酸达克罗宁在5～80 μg·mL^-1范围内线性关系良好(r＞0.999)，平均回收率分别为103.50%和98.81%。结论该方法特异性强，精密度高，准确可靠，操作简便快速，可作为该制剂的质量控制方法.     

高效液相色谱法测定诺甲滴耳液的含量

目的建立测定诺甲滴耳液中诺氟沙星和甲硝唑含量的高效液相色谱法。方法固定相为Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为0.025 mol·L^-1磷酸(用三乙胺调pH值至3.0) 甲醇 乙腈(2∶1∶2)，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长为278 nm。结果诺氟沙星在 20.0～50.0 μg ·mL^-1范围内，峰面积与浓度线性关系良好，r＝0.999 8，平均回收率为99.9%，重复性试验RSD为1.3%(n＝5)；甲硝唑在10.0～25.0 μg ·mL^-1范围内，峰面积与其浓度线性关系良好，r＝0.998 2，平均回收率为99.2%，重复性试验RSD为1.5%(n＝5)。结论该法准确、简便、快速，具有专属性强、灵敏度高的特点，适用于诺甲滴耳液的质量控制。     

大鼠盆总神经节腺苷三磷酸释放的调节

用荧光素-荧光素酶方法测定大鼠盆总神经节腺苷三磷酸(ATP)释放. 钠通道阻断剂河豚毒素(1 μmol·L^-1)抑制电刺激诱发的盆总神经节ATP的释放. 灌流液中去除Ca^2＋并加入EGTA(1 mmol·L^-1)后消除ATP的释放. 腺苷(100 μmol·L^-1)，A₁腺苷受体激动剂环戊腺苷 (0.1 μmol·L^-1)，毒蕈碱性受体激动剂氧化震颤素(1 μmol·L^-1)和5-羟色胺(100 μmol·L^-1)减少ATP的释放. A₁腺苷受体拮抗剂8-环戊基-1，3-二丙基黄嘌呤(10 nmol·L^-1)，α₂肾上腺素受体拮抗剂育亨宾(3 μmol·L^-1)，D₂多巴胺受体拮抗剂舒必利(20 μmol·L^-1)和组胺(100 μmol·L^-1)增加ATP的释放.　结果提示， 在大鼠盆总神经节存在着作为神经递质参与突触传递的ATP释放. A₁腺苷受体，毒蕈碱性受体，α₂肾上腺素受体，D₂多巴胺受体，5-羟色胺受体及H₁组胺受体激动剂或拮抗剂可以通过节前机制影响ATP的释放.     

高效液相色谱法测定胃康宁片中盐酸小檗碱的含量

目的测定胃康宁片中盐酸小檗碱的含量。 方法采用高效液相色谱法。固定相：Spherigel C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：乙腈 1%磷酸溶液(含1%三乙胺和0.3%十二烷基磺酸钠)(40∶60)；检测波长：350 nm；柱温：40℃；流速：1.0 mL·min^-1。结果盐酸小檗碱在19.40～194.00 mg·L^-1浓度范围内线性关系良好，r＝0.999 8，样品平均回收率为99.75%，RSD＝2.09%(n＝5)。结论该法简单易行，可用于胃康宁片中盐酸小檗碱的含量测定。     

小儿止咳合剂中盐酸麻黄碱含量的测定

［摘要］目的 建立小儿止咳合剂中盐酸麻黄碱含量测定方法.方法 使用内标法,内标物质为盐酸苯丙醇胺.色谱条件为：Shim-pack VP-ODS柱（150 mm×4.6 mm, 5 μm）; 流动相：甲醇-水相（22：78）（0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液磷酸调pH值=3.0）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长205 nm. 结果 盐酸麻黄碱在12.106～72.636 mg·L^-1范围内线性关系良好（r＝0.999 8）,平均回收率为100.41%,RSD=2.58 %（n＝5）.结论 该方法简便、灵敏、准确,重现性好,可用于该制剂的含量测定和质量控制.     

吡格列酮对脂多糖诱导星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用

目的 研究吡格列酮(Pio)对脂多糖 (LPS) 诱导星形胶质细胞(AC)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的抑制作用及其作用机制。方法 AC分别加入Pio 0.1, 1.0和10.0 μmol·L^-1, c-Jun氨基端激酶(JNK)抑制剂SP600125 20.0 μmol·L^-1, p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580 20.0 μmol·L^-1或过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制剂GW9662 10.0 μmol·L^-1,1 h以后加入LPS 10.0 mg·L^-1, 继续作用24 h。Griess法测定培养AC上清液中一氧化氮(NO)含量。免疫印迹法和免疫荧光法检测iNOS的表达水平。结果 与正常对照组相比,LPS 10.0 mg·L^-1组iNOS表达水平和NO分泌水平均显著增高(P<0.01)。Pio 0.1, 1.0和10.0 μmol·L^-1可明显抑制LPS诱导的iNOS表达上调及NO分泌增加(P<0.05),Pio 10.0 μmol·L^-1组iNOS蛋白表达水平由LPS组1.711±0.283下降到0.157±0.082(P<0.01),NO分泌量由LPS组(16.63±2.25)μmol·L^-1下降到(6.92±1.30)μmol·L^-1(P<0.01)。GW9662 10.0 μmol·L^-1可抑制Pio 1.0 μmol·L^-1的上述作用,iNOS蛋白表达水平由Pio 1.0 μmol·L^-1组0.562±0.100增加到0.847±0.088(P<0.01),NO分泌量由(9.27±1.23)μmol·L^-1增加到(15.54±2.30)μmol·L^-1(P<0.01)。SB203580 20.0 μmol·L^-1和SP600125 20.0 μmol·L^-1的作用与Pio作用相似,使iNOS蛋白表达水平降低到0.434±0.082和0.434±0.076,NO分泌量下降到(11.53±2.40)μmol·L^-1和(8.81±0.58)μmol·L^-1;而单独应用SB203580 20.0 μmol·L^-1和SP600125 20.0 μmol·L^-1对AC的iNOS表达和NO分泌没有影响。结论 Pio能通过抑制LPS诱导的大鼠皮质AC的iNOS表达,从而减少NO的分泌,这种抑制作用可能与其激活PPARγ和阻断JNK和p38MARK信号转导通路有关。     

6-［4-(4′-吡啶)氨基苯］-4，5-二氢-3(2H)哒嗪酮对大鼠胸主动脉环收缩功能的影响

目的 研究新型钙增敏强心剂6-［4-(4′-吡啶)氨基苯］-4，5-二氢-3(2H)哒嗪酮(MCI-154)的扩血管作用机制。方法 采用生物张力换能器及生理记录仪测定大鼠离体胸主动脉环和蜕膜胸主动脉环的收缩张力。结果 MCI-154可浓度依赖性抑制1 nmol·L^-1~10 μmol·L^-1去甲肾上腺素（pD₂′为4.21±0.23）和80 mmol·L^-1 KCl（IC₅₀为7 μmol·L^-1）引起的血管环收缩，提示其可通过抑制血管平滑肌细胞膜上受体操纵性和电压依赖性钙通道而减少胞外钙内流。在无Ca²⁺ K-H液中，MCI-154预处理可浓度依赖性降低3 μmol·L^-1苯肾上腺素（IC₅₀为5 μmol·L^-1）及20 mmol·L^-1 咖啡因（IC₅₀为16 μmol·L^-1）引起的血管环收缩张力，提示其可抑制血管平滑肌细胞胞内钙释放。在1 μmol·L^-1 Ca²⁺溶液中，MCI-154可显著降低蜕膜血管环收缩张力（IC₅₀为10 μmol·L^-1)，提示其可降低血管平滑肌对Ca²⁺的敏感性。结论 MCI-154可通过抑制血管平滑肌胞外钙内流、胞内钙释放和降低其对Ca²⁺敏感性来降低血管平滑肌收缩张力，体外具有扩血管效应。     

黄柏胶囊中盐酸小檗碱的含量测定

目的采用高效液相色谱法测定黄柏胶囊中盐酸小檗碱的含量。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以乙腈-磷酸二氢钾(0.05 mol·L^-1)(28∶72)为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长349 nm。结果盐酸小檗碱进样量在0.04～0.20 μg范围内与峰面积具有良好的线性关系，r＝0.9995，回收率为99.99%，RSD＝0.56%(n＝5)。结论该方法操作简便，精密度好，结果准确可靠，适用于黄柏胶囊中盐酸小檗碱含量的测定。     

洛美利嗪片体外溶出度研究

目的建立洛美利嗪片体外溶出度的测定方法。方法以0.1 mol·L^-1盐酸溶液为溶出递质，采用小杯法，转速为75 r·min^-1，温度为(37.0±0.5)℃，进行累积溶出百分率测定。用紫外分光光度法在225 nm的波长处测定。结果洛美利嗪在盐酸溶液中8～20 μg·mL^-1范围内线性关系良好，平均回收率为100.4%，RSD＝0.7%(n＝5)。洛美利嗪片15 min内溶出＞90.0%，45 min时溶出度RSD＜2.0%。结论洛美利嗪片溶出速度快，溶出均一性好。     

溶血磷脂酰胆碱刺激脑微血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导途径

通过测定［³H］胸腺嘧啶核苷(［³H］TdR)参入和结晶紫染色法测定平滑肌细胞增殖,研究了溶血磷脂酰胆碱(LPC)刺激牛脑微血管平滑肌细胞(BCMSMC)增殖的细胞内信号转导途径. 结果显示,LPC能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC摄取［³H］TdR,在LPC的浓度为10 μmol·L^-1时作用达最大,cpm由366±142升至1761±296(P<0.01);LPC亦能浓度依赖性(1 nmol·L^-1-10 μmol·L^-1)诱导BCMSMC增殖,在LPC浓度为1 μmol·L^-1时促增殖作用达坪值,A_{595 nm}由0.060±0.009增至0.100±0.015(P<0.01). 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD 98059(2-50 μmol·L^-1),血小板衍生生长因子受体抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂AG 1296(2-50 μmol·L^-1)以及蛋白质酪氨酸激酶抑制剂除莠霉素A(2-10 μmol· L^-1)能浓度依赖性地抑制LPC的上述作用. 表明LPC能促进BCMSMC增殖,其细胞内信号转导与MAPK途径有关.     

高效液相色谱法测定思康达胶囊中乌头碱的含量

目的建立思康达胶囊中乌头碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，Zorbax SB-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：乙腈∶0.04 mol·L^-1三乙胺 (35∶65)，流速：1.0 mL·min^-1，检测波长为235 nm。结果线性范围10～500 mg·L^-1（r＝0.999 9），平均回收率100.91%，RSD＝1.48%。结论该方法简便、快速、准确。     

用选择性可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂研究大鼠小脑内NO-cGMP神经通路

应用清醒大鼠脑微透析技术以选择性可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1H-［1,2,4］噁二唑［4,3-a］喹喔啉-1-酮（ODQ）为工具药研究大鼠小脑NO-cGMP神经通路. 小脑内局部灌流ODQ(5,10,50,100 μmol·L^-1,5 μL·min^-1)可剂量依赖性降低细胞外基础cGMP水平, 最大可使细胞外基础cGMP水平降低80%. ODQ 100 μmol·L^-1可完全对抗N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA, 200 μmol·L^-1）或α-氨基羟甲基异噁唑丙酸（AMPA,100 μmol·L^-1）引起的细胞外cGMP水平增加,ODQ也可抑制NO供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺（SNAP,1.5 mmol·L^-1)引起的细胞外cGMP水平增加. 说明在基础条件下小脑内cGMP 80%来源于可溶性鸟苷酸环化酶激活. 进一步证明了NO通过激活可溶性鸟苷酸环化酶使cGMP增加.     

高效液相色谱法测定菝葜醋酸乙酯提取物中白藜芦醇的含量

目的建立高效液相色谱法测定菝葜醋酸乙酯提取物中白藜芦醇含量的方法。方法Zirchrom Kromasil C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水(30∶70)；流速：1.0 mL·min^-1；柱温：室温；检测波长303 nm。结果白藜芦醇对照品线性范围18.8～94.0 μg·mL^-1，r＝0.999 6(n＝5)，样品平均回收率为101.10 %，RSD＝0.64 %(n＝5)，菝葜醋酸乙酯提取物中白藜芦醇的平均含量为29.59 μg·mg^-1。结论该方法简便、快捷、重现性好，为菝葜醋酸乙酯提取物的质量控制提供依据。     

反相高效液相色谱法测定甲硫氨酸注射液中甲硫氨酸与维生素B1的含量

目的建立测定甲硫氨酸注射液中甲硫氨酸和维生素B1含量的反相高效液相色谱法。方法采用NUCLEODUR C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以甲醇-0.002 5 mol·L^-1庚烷磺酸钠溶液(含0.25%三乙胺溶液，用磷酸调节pH值至4.5)(27∶73)为流动相，流速：1.0 mL·min^-1，检测波长：220 nm。 结果甲硫氨酸和维生素B1的线性范围分别为34.40～172.00 μg·mL^-1(r＝0.999 9)和3.43～17.15 μg·mL^-1(r＝0.999 5)，平均回收率分别为99.67%和99.80%(n＝9)，精密度良好。结论该法简便、灵敏、准确，适于注射用甲硫氨酸中甲硫氨酸和维生素B1的质量控制。     

去甲斑蝥素降低人胃癌细胞程序性细胞死亡因子4的表达

目的 研究去甲斑蝥素(NCTD)降低程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的机制。方法MTT法测定NCTD 5~640 μmol·L^-1与人胃癌BGC-823细胞作用24,48和72 h细胞存活率;Western蛋白质印迹法测定NCTD 0, 6, 30和60 μmol·L^-1作用BGC-823细胞24 h PDCD4蛋白表达水平;NCTD 60 μmol·L^-1作用20 h后加入MG132 10 μmol·L^-1作用4 h对PDCD4蛋白表达的影响;逆转录PCR法测定NCTD 60 μmol·L^-1作用BGC-823细胞24 h后PDCD4 mRNA表达的变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定NCTD 60 μmol·L^-1作用BGC-823细胞6, 12和24 h后microRNA-21(miR-21)的表达。Western蛋白质印迹法测定细胞转染miR-21抑制剂对PDCD4蛋白表达的影响。结果 NCTD作用后BGC-823细胞存活率明显下降,NCTD作用BGC-823细胞24, 48和72 h IC₅₀分别为74.5, 35.0和10.3 μmol·L^-1。NCTD 6, 30和60 μmol·L^-1作用于BGC-823细胞24 h,PDCD4蛋白分别降低9%, 47%和62%。NCTD对PDCD4 mRNA表达无影响。与NCTD处理组相比,MG132和NCTD共处理对PDCD4蛋白表达无明显影响。NCTD 60 μmol·L^-1作用BGC-823细胞12和24 h后,细胞中miR-21的表达显著升高(P<0.01)。细胞转染miR-21抑制剂后,可抑制NCTD降低PDCD4蛋白表达的作用。结论 NCTD通过调控miR-21降低PDCD4蛋白的表达。