影响神经干细胞增殖分化的因素

传统认为哺乳动物和人脑神经细胞一经发育成熟即不再进行增殖、分化 ,不具备再生能力 ,只有细胞的不断退化和死亡 ,因此中枢神经系统损伤后基本上不能恢复。近年来的研究发现 ,胚胎早期脑室和脑室下区、成年脑室区、纹状体、海马齿状回、脊髓等部位神经干细胞分布广泛 ,这些神经干细胞可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。随着对干细胞研究的深入 ,人们已能利用无血清培养、单克隆技术及免疫荧光化学技术对干细胞进行分离、培养和纯化。深入研究脑发育过程中的神经干细胞的增殖分化机制 ,搞清神经干细胞在成年脑内增殖、分化的影…     

某些影响神经干细胞增殖分化的某些因素

1992年,Reynolds和Weiss首先从成年小鼠纹状体分离培养出能在体外不断增殖、具有多种分化潜能的细胞群.这些细胞具有以下一些特征：来自神经系统;能自我更新;通过不对称分裂产生一个新的干细胞和一个祖细胞,对称分裂则产生两个干细胞或祖细胞;可分化为中枢神经系统内神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞这三种主要细胞.     

细胞因子对神经干细胞增殖和分化的影响

目的　建立人胎大脑神经干细胞 (NSCs)分离培养的体外培养系统 ,鉴定其干细胞原始特征 ,观察上皮细胞生长因子(EGF)、碱性纤维母细胞生长因子 (FGF2 )和脑源神经生长因子 (BDNF)对NSCs分裂和分化的影响。方法　在含EGF和 (或 )FGF2的培养体系中分离培养NSCs。用定量RT PCR法检测干细胞巢蛋白表达丰度 ,用PCR ELISA法检测端粒酶活性 ,PC NA用免疫细胞化学染色检测干细胞增殖特征以及不同代数分裂的干细胞的比率。免疫细胞化学法证实NSCs分化后神经元和星形胶质细胞的比例趋势 (NF 2 0 0、MAP 2、synaptophysin、NeuN和GFAP染色 )。 结果　NSCs大量增殖呈球体状 ,PCNA阳性率高达 (71 6± 4 9) %、干细胞巢蛋白阳性、端粒酶活性为 6 3%。不同诱导因子对NSCs球体内细胞增殖数差异有显著性(P <0 0 5 )。证实EGF和 (或 )FGF2在培养基质存在下均能诱导NSCs分化 ,脑源神经生长因子 (BDNF)能维持神经元的存活和生长。分化后的神经元比例可达 (18 6± 2 5 ) %。结论　EGF和 (或 )FGF2可诱导NSCs分裂增殖并保持原始特性 ,在培养基质存在条件下 ,这些细胞因子可诱导NSCs分化。     

全反式维甲酸对人肺癌细胞增殖和生物大分子物质合成的影响

在体外观察全反式维甲酸对人肺腺癌细胞株ＳＰＣ－Ａ１的增殖和ＤＮＡ，ＲＮＡ以及蛋白质合成的影响，当细胞在含有５μｍｏｌ／Ｌ１０μｍｏｌ／Ｌ和２０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸的培养液中培养时，发现细胞生长均受到明显抑制，细胞在含有１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸的培养液中培养２天后，其＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－亮氨酸掺入率明显下降，而培养延长至４天后，＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ－ＵｄＲ和＾３Ｈ－亮氨酸掺入率都明显下降，通过流式     

微重力对干细胞增殖分化影响的研究进展

微重力环境会影响干细胞的生长、增殖和分化。既往的部分研究表明,微重力环境下培养的间充质干细胞的生长速度较正常重力条件下培养更快,其原因可能是细胞团体积的增大。但是有研究指出微重力能够通过影响细胞周期抑制间充质干细胞增殖。在分化方面,微重力能够抑制间充质干细胞的成骨分化,促进其成脂肪分化,但是对其成软骨分化影响仍存争议。有研究者对微重力培养的间充质干细胞进行基因测序提示其成骨分化相关基因表达降低,同时伴有成脂肪分化的基因表达增高。微重力可能通过整合素/丝裂原活化蛋白激酶和PPAR-这两条信号通路抑制干细胞成骨分化作用,而微重力如何影响成软骨分化以及成脂分化的机制仍缺乏相关研究。同时,微重力能够有效地维持间充质干细胞的多能性和自我更新能力。微重力对于间充质干细胞的影响为组织工程的进一步发展提供了探索依据。     

持续张应力对骨髓基质干细胞增殖及骨向分化的影响

目的通过体外加力装置研究持续牵张应力对大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)增殖及骨向分化能力的影响。方法选用3月龄健康SD雌性大鼠,采用全血贴壁培养法分离及培养BMSCs。取生长良好的第3～5代细胞接种于Flexercell应力加载系统(10%、1 Hz),根据应力作用时间不同分为1、6、12、24 h组和48 h组。观察并分析持续牵张力对于大鼠BMSCs形态、增殖活性以及成骨能力变化的影响。结果 (1)随着加力时间的延长,与对照组相比,实验组细胞形态呈现一定规律性,细胞长轴多垂直于受力径向。(2)10%持续张应力作用可抑制BMSCs增殖活性。(3)持续张应力可增高碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原(collagenI,COLⅠ)、核心结合因子Cbfa1(core binding factor a1,又名Runx2)mRNA的表达量,且呈现时间依赖性。其中实验组ALP表达量在24 h明显高于相应对照组,COLⅠ表达量在24 h及48 h均明显高于对照组,Runx2表达量在6 h与对照组相比显著增高(P<0.05)。骨钙素(osteocalcin,OC)含量在加力起始阶段显著高于对照组,随时间推移逐渐下降,48 h时明显低于对照组(P<0.05)。(4)持续张力可以促使Runx2蛋白水平增高,且在6 h实验组明显高于对照组(P<0.05)。之后缓慢下降,在24 h时显著低于对照组水平(P<0.05)。结论持续牵张力作用下BM-SCs细胞形态呈现一定规律性排列,其增殖活性受到抑制,但早期成骨向分化能力却显著提高。     

胰岛素对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

目的探讨胰岛素对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法培养大鼠大脑皮层NSCs,用胰岛素作用于培养的NSCs,3H-TdR掺入检测NSCs的增殖,免疫细胞化学和流式细胞仪检测NSCs的分化。结果胰岛素能明显促进NSCs对3H-TdR的摄入,明显促进细胞的增殖,并且胰岛素促细胞增殖作用具有一定的量效关系;免疫细胞化学和流式细胞仪结果显示,胰岛素对NSCs向神经元的分化有明显促进作用,并且NSCs分化后多巴胺能神经元数目明显增加。结论胰岛素可能具有促进NSCs增殖和向神经元包括多巴胺能神经元分化的作用。     

Notch和Wnt信号通路对神经干细胞增殖分化的影响

Notch和Wnt信号通路是调节神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化的重要通路,Notch信号通路的靶基因Hes1、Hes5及HES相关蛋白等分化抑制信号,通过旁侧抑制机制阻止NSCs的分化,并促进其自我更新;通过NICD与CSL DNA结合蛋白的直接结合,形成GFAP的转录激活复合物,上调GFAP的表达,从而促进NSCs向星形胶质细胞的分化。Wnt信号通过Wnt/β-catenin信号通路对细胞周期素D1和D2的转录调节,调控NSCs细胞周期的进程,使其量增殖;然而,过表达的Wnt3a和Wnt7a蛋白能够抑制NSCs的增殖,促进NSCs向神经元方向分化。     

神经干细胞增殖分化调控因素的研究进展

干细胞(stem cell)的研究是21世纪生命科学的热点。干细胞来自胚胎，胎儿或成人组织中，具有很强的自我保持及自我更新能力，在适当条件下进行分化增殖。神经干细胞(Nerval stem cell，NSCs)是中枢神经系统保持有分裂、分化潜能的细胞。传统认为哺乳动物及人脑神经细胞已经发育成熟即不再进行增殖分化，不具备再生能力，只有细胞的退化和死亡。然而近年来的研究发现，     

干细胞扩增及肝向分化过程中相关指标及其检测方法

文题释义：干细胞肝向分化：是指来自于胚胎、胎儿或成体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞,通过形态、功能的特殊变化,建立起肝细胞特征的过程。这一过程与细胞分裂共同发生,并伴随干细胞多能性的减弱与肝功能表达的增强。 生物人工肝：是以培养肝(样)细胞为基础的生物或混合生物人工肝支持系统。它的基本要素包括高活性和功能的肝(样)细胞、适合的生物反应器与外部控制系统、有效的体外循环系统,可通过暂时或部分替代肝脏功能,实现对肝脏功能不全或相关疾病的治疗。  摘要背景：干细胞在组织工程学、再生医学、细胞治疗以及药物研究方面具有巨大的应用前景。近年来,以生物人工肝为例的应用研究需要大规模扩增出高质量的干细胞并最终定向分化为肝(样)细胞。如何通过此途径高效获得一致性、功能性完好并且标志物均匀表达的分化细胞,是需要解决的关键问题。目的：对干细胞扩增及肝向分化过程相关检测指标与检测方法进行综述,总结已应用于在线检测的指标与方法,讨论部分指标与方法应用于在线检测的局限性,并对未来有望应用于在线检测的指标和检测技术进行展望。 方法：由第一作者检索1990至2019年PubMed数据库、Web of Science核心合集、Elsevier数据库、中国知网等收录的与干细胞扩增及肝向分化过程相关的文献。英文检索词为“stem cells,expansion,hepatic differentiation,monitoring,real-time online”,中文检索词为“干细胞,扩增,肝向分化,监测,实时在线”,共计检索93篇文章,最终筛选了符合标准的53篇进行综述。结果与结论：干细胞扩增及肝向分化过程的相关检测指标与检测方法众多,其中扩增过程的检测指标主要涉及干细胞多能性的保持、代谢活性、存活率以及转癌趋势。肝向分化过程因细胞种类而异,其中多能干细胞和中胚层谱系成体多能干细胞要先向内胚层定向分化,再分化为成熟肝(样)细胞,而以肝干/祖细胞为主的内胚层谱系成体多能干细胞可直接分化为成熟肝(样)细胞。分化过程不同阶段细胞的特异性标志物、存活率以及代谢活性是检测的重点。目前,基于大型生化检测分析设备的检测方法虽然可靠性高,但面临实时性差、成本高、难以集成小型化等问题。未来,干细胞扩增及肝向分化过程中关键检测指标的筛选、检测标准的量化以及自动化在线检测的实现,需要重点研究。ORCID: 0000-0002-3881-5577(吴昌哲);0000-0002-6052-8400(杨嘉屹)中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

胚胎源性干细胞分化研究的现状

目前,对于胚胎源性干细胞的分化研究已成为当今医学界研究的热点,但其分化的分子机制和定向分化的方法一直是人们需要解决的难点问题,近年来无论在分子机制研究还是在定向诱导分化研究方面都有了长足进展。将这三种胚胎源性干细胞从其分化机制及定向分化潜能等方面结合国内外研究进展进行综述。     

髓样细胞核分化抗原在强直性脊柱炎病人的表达

目的 通过比较强直性脊柱炎(AS)患者和健康志愿者的基因表达谱，寻找与AS相关的新基因并探讨其在病因和发病机制中的意义。方法 用含588个基因的cDNA微阵列，检测AS和健康志愿者的外周血单个核细胞的基因表达语，初步筛选出在AS中差异表达的基因，为了进一步验证cDNA微阵列差异表达基因结果，扩大各组病例数，再用RT-PCR技术同时检测、对比健康志愿者和AS患者外周血单个核细胞(PBMC)、关节液单个核细胞(SFMC)和关节滑膜细胞这些差异表达基因的变化。结果 和健康志愿者组的PBMC比较，AS病人骨髓样细胞核分化抗原(MNDA)、迁移抑制因子相关蛋白8(MRP8)和MRP14、粘附分子ICAM-1和integrin β1表达明显增高，其中MNDA和MRP8的变化相关系数为0．793。在AS的SFMC和关节滑膜细胞中，MNDA表达也显著增高(与健康志愿者组PBMC比较，P值分别为0．038和0．027)；MNDA区别AS和健康志愿者的统计学鉴别准确率达1。AS病人在接受抗TNF-α单克隆抗体治疗3个月后，MNDA在关节滑膜细胞的表达水平显著下降(P＝0．018)。结论 MNDA是AS发病过程中一个重要的并与单核／巨噬细胞致炎密切相关的免疫因子，其可能成为一种用于AS的诊断、治疗监控指标。     

胚胎干细胞、成体干细胞的基础研究及应用

对干细胞的研究现状及进展进行了综述。讨论了胚胎干细胞和成体干细胞的定义及判别标准,干细胞的分离及生物学特性,干细胞生长分化及定向诱导分化的条件,成体干细胞可塑性定义、机制及判定标准,干细胞的应用及存在的问题。     

A defined xeno-free and feeder-free culture system for the derivation,expansion and direct differentiation of transgene-free patient-specific induced pluripotent stem cells

A defined xeno-free system for patient-specific iPSC derivation and differentiation is required for translation to clinical applications. However, standard somatic cell reprogramming protocols rely on using MEFs and xenogeneic medium, imposing a significant obstacle to clinical translation. Here, we describe a well-defined culture system based on xeno-free media and LN521 substrate which supported i) efficient reprogramming of normal or diseased skin fibroblasts from human of different ages into hiPSCs with a 15–30 fold increase in efficiency over conventional viral vector-based method; ii) long-term self-renewal of hiPSCs; and iii) direct hiPSC lineage-specific differentiation. Using an excisable polycistronic vector and optimized culture conditions, we achieved up to 0.15%–0.3% reprogramming efficiencies. Subsequently, transgene-free hiPSCs were obtained by Cre-mediated excision of the reprogramming factors. The derived iPSCs maintained long-term self-renewal, normal karyotype and pluripotency, as demonstrated by the expression of stem cell markers and ability to form derivatives of three germ layers both in vitro and in vivo. Importantly, we demonstrated that Parkinson's patient transgene-free iPSCs derived using the same system could be directed towards differentiation into dopaminergic neurons under xeno-free culture conditions. Our approach provides a safe and robust platform for the generation of patient-specific iPSCs and derivatives for clinical and translational applications.     

Separately expressed T cell receptor α and β chain transgenes exert opposite effects on T cell differentiation and neoplastic transformation

Two aspects of T cell differentiation in T cell receptor (TCR)-transgenic mice, the generation of an unusual population of CD4^?CD8^?TCR⁺ thymocytes and the absence of γδ cells, have been the focus of extensive investigation. To examine the basis for these phenomena, we investigated the effects of separate expression of a transgenic TCR α chain and a transgenic TCR β chain on thymocyte differentiation. Our data indicate that expression of a transgenic TCR α chain causes thymocytes to differentiate into a CD4^?CD8^?TCR⁺ lineage at an early developmental stage, depleting the number of thymocytes that differentiate into the αβ lineage. Surprisingly, expression of the TCR α chain transgene is also associated with the development of T cell lymphosarcoma. In contrast, expression of the transgenic TCR β chain causes immature T cells to accelerate differentiation into the αβ lineage and thus inhibits the generation of γδ cells. Our observations provide a model for understanding T cell differentiation in TCR-transgenic mice.     

The novel murine B cell differentiation antigen Lp-3

The unique murine lymphocyte differentiation antigen, Lp-3,with a mol. wt of 125 kd, was found using a rat monocional antibody.The Lp-3 antigen was distributed on a wide variety of myelold,T cell, and B cell lineages in mice. However, the expressionwas only found in B cells at certain stages of differentiation.The pre-B and virgin B cells in the bone marrow from 2-montholdBALB/c mice were weakly positive for Lp-3, while the restingB cells in the spleen and lymph node were Lp-3 negative. Incontrast, the majority of B cells in the peritoneal cavity,mostly Ly-1 (CD5) B cells, had a brighter fluorescence for Lp-3than did bone marrow B cells. The Lp-3 antigen could be inducedin a high density in approximately one-half of lipopolysaccharidestimulated,large, blastic spleen B cells. Cell cycle analysis showed thatLp-3 is an early B cell activation antigen which is first expressedat the G_1A phase of the cell cycle. Therefore this novel B celldlfferentiation antigen will be useful for differentiating pre-Band virgin B cells in the bone marrow, restlng B cells, anda population of activated B cells in the periphery. In contrastto findings in BALB/c mice, there was an elevated populationof B cells with a bright Lp-3 expression in the spleen of autoimmune-proneNZB x NZW F₁, mice.     

Morphological studies on germ cell development and differentiation in mammals

The process of mammalian germ cell development from the early embryo through the adult entails a sequence of cellular events, including migration, proliferation, and differentiation. This paper is briefly reviewed our recent work concerning such fields. The 4C9 carbohydrate antigen as a reliable marker to study the origin, migration and differentiation of primordial germ cells is described. Further morphological data obtained by studying ectopic germ cells outside the fetal gonad is discussed. Moreover, evidence that both proliferation of spermatogonia and growth of oocytes are essentially dependent on c-Kit is reported. Still, a great deal of work remains in order to elucidate the fundamental mechanism controlling germ cell development and differentiation.