100株住院儿童大肠埃希菌Ⅰ类整合子研究

目的:了解Ⅰ类整合子在住院儿童分离大肠埃希菌中分布流行情况。方法:根据NCCLS推荐的纸片扩散法进行药敏试验;PCR扩增临床大肠埃希菌Ⅰ类整合子整合酶基因和可变区基因盒。结果:患者整合酶检出率68%,Ⅰ类整合子基因盒检出率为65%。Ⅰ类整合子的大小约为772 bp～2360 bp,100株细菌各含1～2个Ⅰ类整合子,整合子中最常见的基因盒排列为dfrA17+aadA5和dfrA12+aadA2。结论:Ⅰ类整合子在多重耐药大肠埃希菌中广泛流行,是介导细菌多重耐药性的重要分子机制,应加强基因水平耐药监测。     

大肠埃希菌中Ⅰ类整合子耐药基因的分析

目的 对临床分离大肠埃希菌株携带的Ⅰ类整合子及相关耐药基因进行筛选和分析.探讨Ⅰ类整合子在大肠埃希菌耐药中的作用.方法 对43株大肠埃希菌临床分离株做药敏试验;采用PCR扩增、DNA测序、DNA序列比对的方法 对其携带的Ⅰ类整合子相关耐约基因进行分析.结果 43株大肠埃希菌分离株对10种抗菌药物的耐药率依次为亚胺培南4.7%、阿米卡星18.6%、头孢他啶、27.9%、头孢吡肟37.2%、头孢呋辛55.8%、复方磺胺甲嗯唑58.1%、妥布霉素74.4%、庆大霉素79.1%、头孢噻肟81.4%和哌拉两林83.7%.在43株大肠埃希菌分离株中有25株含有Ⅰ类整合子,其中18株携带整合子相关耐药基因,如介导对磺胺类和氨基糖苷类约物的耐药基因等;某些菌株携带的整合子相关耐药基因相同.结论 Ⅰ类整合子在大肠埃希菌中广泛存在,整合子相关耐约基因在该菌耐药性的形成和播散中发挥作用.     

Ⅰ类整合子介导大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药机制的初步研究

目的了解临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中I类整合子的分布情况,探讨整合子与细菌耐药之间的关系。方法琼脂平皿稀释法进行药敏试验;双纸片法筛选出产ESBLs的菌株;运用PCR扩增、DNA测序及DNA序列比对等方法对其携带的I类整合子相关耐药基因进行分析。结果 36株大肠埃希菌与46株肺炎克雷伯菌对头孢克肟、头孢克洛、头孢氨苄、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢噻肟钠、阿莫西林纳/舒巴坦钠、氨苄西林钠/舒巴坦钠及头孢哌酮/舒巴坦钠等的耐药率分别为61%、86%、86%、50%、75%、64%、39%、47%、30%与65%、63%、78%、52%、67%、54%、48%、41%、28%;10株细菌检测出产ESBLs,其中大肠埃希菌4株,肺炎克雷伯菌6株,并全部检测出1类整合子,其整合子可变区的耐药基因排列顺序与GenBank登录号为NC010410的菌株达到100%相似,并且皆含有blaVEB-1耐药基因盒。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。     

产ESBLs大肠埃希菌Ⅰ类整合子与耐药性关系分析

目的 了解Ⅰ类整合子在产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌中分布流行状况,分析Ⅰ类整合子在细菌多重耐药中的作用.方法 根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,用双纸片协同试验检测产ESBLs菌,PCR扩增Ⅰ类整合酶基因.结果 大肠埃希菌ESBLs和Ⅰ类整合子的检出率分别为57.4%和45.4%,Ⅰ类整合子在产ESBLs菌的分布明显高于非产ESBLs菌.结论 Ⅰ类整合子的存在与细菌产生ESBLs相关,影响着临床分离株多重耐药率的高低.     

205株大肠埃希菌的耐药分析

目的：了解大肠埃希菌的耐药特点,探讨耐药性产生的原因。方法：常规细菌培养分离,采用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ进行鉴定和药敏试验。结果：２０５株大肠埃希菌从尿中分离出９２株（４４．８％）。对头孢类的耐药率为５．６￣７６．３２％对合成青霉素类为６０￣８７．２３％;在１２种抗生素中,对５种以上耐药的菌株有１４０株;耐环丙沙星８３株,并且至少４种药物。结论：大肠埃希菌为泌尿系统感染的首位细菌临床应重视它的多重耐药     

小儿大肠埃希菌临床分离株耐药性分析

目的：监测广东省梅县儿科大肠埃希菌对多种抗生素的耐药情况,为临床提供诊疗依据。方法：选取2006年3月～2008年2月住院的患儿进行检验分析,从其分泌物中分离出大肠埃希菌76株。并将分离出的菌株分为A组和B组,其中A组为2006年3月～2007年2月分离出的40株菌株,B组为2007年3月～2008年2月分离出的36株菌株,比较两组菌株产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）率和对16种抗菌药物敏感试验结果。结果：ESBLs检测结果,A组产ESBLs菌株检出率为47．2％,B组产ESBLs菌株检出率为50．0％,两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。两组药物敏感性试验结果比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。16种抗菌药物中除亚胺培南外,其他抗菌药物耐药率均有不同程度增高,增幅为14．7％-66.4％,差异有统计学意义（P〈0．01）。按耐药上升速度排序（快～慢）：头孢噻肟、头孢唑啉、头孢曲松、左氧氟沙星、环丙沙星。结论：大肠埃希菌在儿童感染中耐药性发展迅速,以对头孢菌素类抗菌药物耐药性上升最为显著。治疗上不宜选用头孢类抗生索,应选用加酶抑制剂复合抗生素（阿莫西林,克拉维酸）和头霉素类抗生素（头孢西丁）以及亚胺培南。     

产ESBLs大肠埃希菌I类整合子与耐药性关系分析

目的了解I类整合子在产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌中分布流行状况,分析I类整合子在细菌多重耐药中的作用。方法根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验,用双纸片协同试验检测产ESBLs菌,PCR扩增Ⅰ类整合酶基因。结果大肠埃希菌ESBLs和I类整合子的检出率分别为57.4%和45.4%,I类整合子在产ESBLs菌的分布明显高于非产ESBLs菌。结论I类整合子的存在与细菌产生ESBLs相关,影响着临床分离株多重耐药率的高低。     

295株大肠埃希菌的耐药性分析

目的 探讨大肠埃希菌的耐药性.方法 采用头孢西丁、头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋辛、头孢吡肟、哌拉西林、环丙沙星、阿米卡星、丁胺卡那霉素和亚胺培南共10种抗菌药物对本院临床分离的295株大肠埃希菌的耐药性进行检测分析.结果 295株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌株105株,检出率为35.6%.产ESBLs菌株和非产ESBLs菌株对亚胺培南均敏感、没有耐药株,对丁胺卡那霉素的耐药率无显著性差异(P>0.05).产ESBLs菌株对其余8种抗菌药物的耐药率均高于非产ESBLs菌株,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 产生ESBLs是导致大肠埃希菌多重耐药的重要原因.亚胺培南是治疗产ESBLs大肠埃希菌的首选药物.临床治疗时应根据药敏试验结果合理地使用抗菌药物,以减少耐药菌的产生.     

多重耐药大肠埃希菌rmtB基因检测与整合子初步研究

目的对2010年临床分离的125株大肠埃希菌进行rmtB基因及整合子进行分析筛选。方法针对住院儿童大肠埃希菌采用KB法对氨基糖苷类药物及其他药物进行敏感性测定,并采用PCR方法扩增3种氨基糖苷类耐药基因和整合子。结果显示对12种药物耐药率达30%~75%。其中16S rRNA甲基化酶基因rmtB检出率12%,氨基糖苷乙酰转移酶基因aac(3)-Ⅱ和氨基糖苷类核苷转移酶基因aadA1检出率1.6%。rmtB阳性菌株携带I类整合子的检出率66.7%,主要携带了dfrA12+aadA2+orfF、dfrA17+aadA5两种排列形式。结论 rmtB基因及I类整合子在大肠埃希菌中广泛存在,其在耐药性播散中发挥着重要的作用。     

287株临床分离大肠埃希菌耐药性分析

目的了解大肠埃希菌耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法对2011年从临床分离的287株大肠埃希菌的耐药情况进行回顾性分析。结果 287株大肠埃希菌对常用抗菌药物均产生不同的耐药性,对氨苄西林的耐药率最高,达91.1%,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南敏感率为100%;产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检出率为12.8%。结论大肠埃希菌存在比较严重的耐药性,应继续加强其耐药监测,合理使用抗菌药物。     

临床分离志贺菌耐药性分析及1类整合子的检测

目的了解2007年至2010年安徽省临床分离志贺菌耐药性和1类整合酶基因(intⅠ1)、qacE△1-sul1基因及整合子携带的耐药基因盒的分布。方法琼脂稀释法检测21种抗菌药物对志贺菌的最低抑菌浓度。PCR扩增intⅠ1和qacE△1-sul1基因,对阳性菌株可变区基因盒序列进行分析。结果 137株志贺菌对萘啶酸、氨苄西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率均80.0%以上,且多重耐药率达94.2%,但对三代头孢菌素和氟喹诺酮类耐药率在33.0%以下。intⅠ1的检出率为89.1%(122/137),检出dfrA17-aadA5和aar-3-aacA4两种基因盒,首次在志贺菌中检测到aar-3-aacA4基因,GenBank登录号JF271916。结论安徽省临床分离志贺菌多重耐药现象严重。临床仍可选用氟喹诺酮类和三代头孢菌素作为本地区细菌性痢疾的经验性治疗。1类整合子与志贺菌的耐药具有一定的相关性。     

奇异变形菌中整合子分布及耐药性分析

目的 了解院内奇异变形菌中各类整合子的携带分布情况、阳性菌株可变区基因盒类型以及其与宿主菌耐药表型的相关性,从而为临床治疗和院内感染控制提供参考。方法 采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳等方法,将本院2016年1月—2018年12月份从临床标本中分离得到的150株奇异变形菌进行第1、2和3类整合子的筛选,并对整合子阳性菌株可变区进行测序分析以及宿主菌的耐药性进行相关性分析。结果 150株奇异变形菌中携带整合子的菌株共有91株,阳性率为60.7%,其中第1类整合子阳性菌株有30株,占20.0%;第2类整合子阳性菌株22株,占14.7%;同时携带第1和2类菌株39株,占26.0%;未筛出第3类整合子;在91株整合子阳性菌株中,86株可变区出现扩增产物条带,其余5株可变区未见扩增产物;第1类整合子阳性菌株可变区携带的耐药基因盒主要为AadA2、DfrA32,第2类整合子阳性菌株可变区携带耐药基因盒主要为DfrA1;可变区携带AadA2的菌株对庆大霉素和妥布霉素的耐药率显著高于整合子阴性菌株(P<0.01),可变区携带DfrA1或DfrA32的菌株对复方磺胺甲噁唑(即甲氧苄啶/磺胺甲噁唑)的耐药率也明显高于整合子阴性菌株(P<0.01);91株整合子阳性菌株对氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、环丙沙星、庆大霉素、头孢曲松、妥布霉素和左氧氟沙星的耐药率均显著高于整合子阴性菌株(P<0.01)。结论     

奇异变形菌中整合子分布及耐药性分析

目的 了解院内奇异变形菌中各类整合子的携带分布情况、阳性菌株可变区基因盒类型以及其与宿主菌耐药表型的相关性,从而为临床治疗和院内感染控制提供参考。方法 采用PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳等方法,将本院2016年1月—2018年12月份从临床标本中分离得到的150株奇异变形菌进行第1、2和3类整合子的筛选,并对整合子阳性菌株可变区进行测序分析以及宿主菌的耐药性进行相关性分析。结果 150株奇异变形菌中携带整合子的菌株共有91株,阳性率为60.7%,其中第1类整合子阳性菌株有30株,占20.0%;第2类整合子阳性菌株22株,占14.7%;同时携带第1和2类菌株39株,占26.0%;未筛出第3类整合子;在91株整合子阳性菌株中,86株可变区出现扩增产物条带,其余5株可变区未见扩增产物;第1类整合子阳性菌株可变区携带的耐药基因盒主要为AadA2、DfrA32,第2类整合子阳性菌株可变区携带耐药基因盒主要为DfrA1;可变区携带AadA2的菌株对庆大霉素和妥布霉素的耐药率显著高于整合子阴性菌株(P<0.01),可变区携带DfrA1或DfrA32的菌株对复方磺胺甲噁唑(即甲氧苄啶/磺胺甲噁唑)的耐药率也明显高于整合子阴性菌株(P<0.01);91株整合子阳性菌株对氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、环丙沙星、庆大霉素、头孢曲松、妥布霉素和左氧氟沙星的耐药率均显著高于整合子阴性菌株(P<0.01)。结论 临床分离的奇异变形菌携带整合子的比例较高,其可变区所携带的耐药基因主要为编码氨基糖苷类和甲氧苄氨嘧啶类抗菌药物的基因,整合子的携带与宿主菌产生的耐药性呈高度相关。     

临床分离革兰阴性菌整合子研究

目的 了解临床分离革兰阴性菌整合子的产生情况及整合子在细菌耐药中的作用.方法 E实验测定细菌对11种抗生奈及抗生素复合制剂的最低抑菌浓度,PCR扩增三种整合酶基因及Ⅰ型整合子的可变区,并对可变区的扩增产物进行克隆、测序.结果 16株革兰阴性菌中,6株含Ⅰ型整合子,所含基因盒主要是妒dfr/dhf及aadA基因盒.结论 整合子在不同革兰阴性菌中广泛存在,与细菌的多重耐药尤其是对氨基糖苷类抗生素的耐药密切相关.     

821株临床分离大肠埃希菌的耐药性分析

目的探讨我院大肠埃希菌对抗菌药物的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集我院2015年1月~2016年12月间临床分离的821株大肠埃希菌,采用革兰氏阴性细菌药敏卡AST-GN13进行药敏试验,并对药敏结果进行分类分析和总结。结果住院和门诊患者分离菌株耐药率最高的3种抗菌药物分别为氨苄西林(75.2%、64.1%)、氨苄西林-舒巴坦(50.0%、38.7%)、复方新诺明(46.2%、38.5%);住院分离株对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、复方新诺明、头孢唑琳、头孢曲松、庆大霉素等抗菌药物的耐药性显著高于门诊患者分离株(P<0.05);住院和门诊分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为41.1%和22.3%,差异有统计学意义(P<0.05);除呋喃妥因和派拉西林-他唑巴坦外,产ESBLs株对常用抗菌药物的耐药性均高于不产酶菌株(P<0.05);共检出3株耐碳青霉烯类药物菌株,均为住院分离株。结论我院大肠埃希菌对抗菌药物呈现不同程度的耐药,住院患者分离大肠埃希菌对抗菌药物的耐药性显著高于门诊患者,应重点加强住院患者细菌耐药的监控。     

1916株连续分离的肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性变迁

目的分析医院肺炎克雷伯菌感染的临床分布及其耐药性变迁,为抗生素的临床应用提供实验室依据。方法采用回顾性分析方法,分析2013年1月~2016年12月送检至检验科微生物室的各类标本中分离出的肺炎克雷伯菌的病例及药敏资料,采用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 4年间共分离出肺炎克雷伯菌1916株,在ICU检出率最高(22.60%),其次为呼吸内科(21.24%)、肾内科(8.82%)、肿瘤内科(8.35%)。临床标本主要来源于痰液(60.59%)和尿液标本(19.62%)。肺炎克雷伯菌对哌拉西林的耐药率高达54.44%,对哌拉西林/三唑巴坦的耐药率为49.22%,对第三至第四代头孢菌素类抗生素的耐药率波动在38.52%~48.07%,对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为26.77%、29.80%,对复方磺胺甲恶唑的耐药率逐渐下降,平均为49.90%。肺炎克雷伯菌产ESBLs率平均为39.14%。产ESBLs菌株耐药性显著高于非产ESBLs菌株。结论肺炎克雷伯菌的临床分离率逐渐增加,仅次于大肠埃希菌,其产超广谱β-内酰胺酶亦逐年增加,应引起临床医生重视,加强其耐药性监测,合理选择抗生素。     

铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子相关基因的解析和定位

目的对4株铜绿假单胞菌临床菌株携带的Ⅰ类整合子相关基因进行解析和定位,探讨Ⅰ类整合子相关基因在细菌耐药性形成和耐药基因播散中的作用。方法采用PCR扩增、DNA测序、DNA序列比对的方法对4株铜绿假单胞菌临床菌株携带的Ⅰ类整合子相关基因进行解析,采用接合试验对该类整合子进行定位分析。结果4株铜绿假单胞菌I类整合子都含有耐药基因,该耐药基因在相应菌株中发挥耐药作用;该菌整合子位于质粒上。结论Ⅰ类整合子耐药基因在铜绿假单胞菌耐药性形成和耐药基因的播散中发挥作用。     

健康人群中大肠埃希菌耐药整合子的检测

目的 了解上海市浦东新区健康人群中肠道大肠埃希菌的耐药情况,并检测其耐药整合子的携带情况和结构.方法 采用纸片扩散法(E-B法)检测17种抗生素药物的敏感性;PCR法扩增1、2、3类整合酶,对1类整合酶阳性样本进一步扩增整合子;扩增产物经限制性内切酶分析测序后,分析其所携带的基因盒结构和可能的功能.结果 浦东新区健康人群中肠道大肠埃希菌多重耐药率为63.5%,耐药性主要集中在老一代抗生素,对较新的抗生素仍然敏感.1、2类整合酶的检出率分别为38.5%、4%,且有1%同时检测到1、2类整合酶,未检测到3类整合酶.结论 健康人群中肠道大肠埃希菌耐药现象已非常普遍,耐药整合子在人群中分布也比较广泛,已成为耐药基因的储存,但和临床相比还有差别.