用间接免疫荧光法和PCR技术重新评价抗CMV－抗体检测的临床意义

为了正确评价临床常用的检测抗巨细胞病毒（ＣＭＶ）抗体的临床意义，用间接免疫荧光法（ＩＦＡ）和聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了５０例急性黄疸型甲型肝炎患儿血白细胞中ＣＭＶ早期抗原（ＥＡ）和晚期抗原（ＬＡ）、血白细胞及尿沉渣ＣＭＶ－ＤＮＡ，阳性率分别为５８％、２２％、６８％、６２％。同期检测抗ＣＭＶ－ＩｇＧ、抗ＣＭＶ－ＩｇＭ，并观察ＩｇＧ急性期／恢复期是否升高４倍以上（ＩｇＧ↑↑），阳性率分别为８６％、３４％及４６％。仅检测１次ＩｇＧ，１４％的患者会漏诊；动态监测ＩｇＧ，４３．９％的活动性ＣＭＶ感染者会漏判；仅检测１次ＩｇＭ，５８．５％的活动性ＣＭＶ感染者会漏判。７９％的ＩｇＧ阳性患者为活动性感染（ＥＡ、ＬＡ、ＩｇＧ↑↑或ＩｇＭ任何１项阳性）；原发性及继发性活动性ＣＭＶ感染者的ＩｇＧ↑↑、ＥＡ、ＩｇＭ阳性率分别为１００％、４２．９％、２８．６％和４７．０％、７６．５％、４４．１％，表明原发感染诊断主要依靠ＩｇＧ↑↑，而继发活动感染则需多种指标。同期检测了２２名健康ＣＭＶ感染儿童的上述指标，与之无显著差异。     

婴儿巨细胞病毒肝炎组织病原和病理检测

目的：对和巨细胞病毒肝炎病例作肝组织病原和病理检查，直接诊断ＣＭＶ肝脏感染及相应的病理变化。方法：１０例肝组织标本，其中５例血清抗ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性临床诊断为ＣＭＶ性黄疸肝炎者为实验组，另５例血清抗ＣＭＶ－ＩｇＭ阴性为对照组。采用ＰＡＰ法检测肝组织中ＣＭＶ－ＩＥＡ和ＥＡ。结果：１０例肝组织内检出ＣＭＶ－ＩＥＡ和ＣＭＶ－ＥＡ均阳性５例；ＣＭＶ肝炎实验组中，检出阳性４例；对照组阳性１例。     

多病毒感染时T细胞亚群、NK与LAK细胞活性的变化及其意义

目的：探讨多病毒感染时细胞免疫和ＮＫ,ＬＡＫ细胞活性的变化及其意义。方法：以１种或多种病毒抗原,或ＩｇＭ抗体阳性的住院患儿６１例为观察对象,其中单病毒组３８例,多病毒组２３例,另设对照组３０例,采用ＥＬＩＳＡ法测定柯萨奇病毒（ＣＶＢ）抗原和ＩｇＭ抗体、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）ＩｇＭ,巨细胞病毒（ＣＶＭ）ＩｇＭ、乙肝病毒（ＨＢＶ）血清标志物５项,单克隆抗体的间接ＡＢＣ免疫组化法测定Ｔ细胞亚群;＾３Ｈ－Ｔｄ     

抗－HEV检测对戊型病毒性肝炎诊断的意义

目的：探讨抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ阳性对急性戊型肝炎（急性戊肝）的诊断价值。方法：应用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测非肝炎住院患者血清抗－ＨＥＶＩｇＧ。结果：在３６９例非肝炎患者中，阳性３３例（８．９％），再经不同批号的试剂复测，此３３例血清仍阳性者２８例，符合率８５％，检测其抗－ＨＥＶＩｇＭ，阳性者４例。而确诊为急性戊肝的２０例患者，复检血清抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性率仍１００％，抗－ＨＥＶＩｇＭ阳性率８０％。结论：（１）急性戊肝早期抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ均可阳性。若ＩｇＭ阴性时，结合临床表现、肝功能检查、肝炎病毒感染标志检测，抗－ＨＥＶＩｇＧ阳性对急性戊肝仍有早期诊断意义；（２）在非肝炎患者或健康人中，可以出现抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ阳性，前者为既往隐性感染，后者为近期隐性感染。     

戊型肝炎病毒抗体检测及临床分析

采用ＥＬＩＳＡ法对２５５例肝炎病人分别检测抗－ＨＥＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＡＶ－ＩｇＭ、抗－ＨＣＶ及ＨＢＶ－Ｍ。结果显示：５５例中抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性乾６６例（２６．９＾），为检测例数中的第３位，男女比例为２：１，临表现类似甲型肝炎。一     

HCV核心抗原C33肽单克隆抗体的研制与初步鉴定

用ＨＣＶ核心抗原（Ｃ３３肽）与鼠血清白蛋白交联后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用杂交瘤技术获得有实用价值的二株ＭｃＡｂ。此二株ＭｃＡｂ除与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应外，与ＨＣＶ核心抗原ＣＰ１０也有很好的反应；但与ＨＣＶＮＳ３、ＶＳ５及核心区ＣＰ９抗原无反应性。在竞争ＥＬＩＳＡ中对抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。     

妊娠早期妇女巨细胞病毒感染状况的研究

目的：检查孕妇绒毛巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染，了解孕妇ＣＭＶ的早期感染状况。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、病毒分离方法检测３２例早孕妇女血清ＣＭＶ－ＩｇＭ、宫颈和绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ。结果：孕妇血清ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率９．３８％（３／３２）；宫颈ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率为１２．５％（４／３２）；绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性１例，分离阳性１例，阳性率为６．２５％（２／３２）；２例绒毛ＣＭＶ感染，但血清及宫颈检查正常。结论：妊娠早期绒毛的ＣＭＶ感染率为６．２５％，母亲血清和宫颈检查正常并不能排除胎儿先天感染的可能。     

献血员血清抗－HCV－IgM检测及其意义

目的探讨献血员血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ与ＨＣＶ感染的关联性。方法献血员血清８３６份。以ＨＣＶ混合抗原包被聚苯乙烯反应板微孔，以辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＭ单克隆抗体为酶标抗体，建立ＥＬＩＳＡ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。以第二代ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ，以ＰＣＲ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ或抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性样品中的ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果２－巯基乙醇破坏试验及ＨＣＶ抗原抑制试验结果显示，以所建立的ＥＬＩＡＳ检测到的为ＨＣＶ特异ＩｇＭ，批内变异系数为３．４７％，批间变异系数为７．０６％。８３６份献血员血清中，有２份抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性而抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论本研究中建立的ＥＬＩＳＡ可较好地用于检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、献血员筛选及防止丙型肝炎传播。     

抗原血症检测方法早期诊断白血病患儿的巨细胞病毒性肺炎

目的：了解白血病患儿巨细胞病毒（ＣＭＶ）肺炎的发生状况及ＣＭＶ抗原血症检测方法对ＣＭＶ肺炎的诊断意义。方法：实验组为３１例白血病患儿，对照组为３１例免疫功能正常的儿童，应用间接免疫荧光方法检测外周血白细胞ＣＭＶ抗原；应用ＥＬＩＳＡ方法检测血清抗ＣＭＶＩｇＭ、ＩｇＧ抗体。结果：白血病患儿中有９例发生活动性ＣＭＶ感染，感染率为２９１％，对照组为０，两者之间差异显著（Ｐ＜００１）。９例活动性ＣＭＶ感染患儿中，有６例为肺炎，临床表现无特异性，胸片表现多样化，病情轻重不一。６例ＣＭＶ肺炎患儿检测ＣＭＶ抗原血症均为阳性。结论：白血病患儿易发生ＣＭＶ肺炎。ＣＭＶ抗原血症检测技术可早期诊断白血病患儿ＣＭＶ肺炎，为临床早期治疗提供实验依据     

60例散发性急性病毒性肝炎的病原学分型

对６０例已排除甲型、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的急性病毒性肝炎患者，以酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测抗－ＨＣＶ、抗－ＨＥＶ、抗－ＨＥＶ－ＩｇＭ、ＨＤＶ－Ａｇ、抗－ＨＤＶ－ＩｇＭ，抗－ＨＤＶ、抗－ＣＭＶ－ＩｇＭ及抗－ＥＢＶ－ＩｇＭ，同时应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果表明：１３．３％（８／６０）为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染，６１．７％（３７／６０）为戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染，     

献血员血清抗－HCV－IgM检测及其意义

目的探讨献血员血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ与ＨＣＶ感染的关联性。方法献血员血清８３６份。以ＨＣＶ混合抗原包被聚苯乙烯反应板微孔,以辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＭ单克隆抗体为酶标抗体,建立ＥＬＩＳＡ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。以第二代ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ,以ＰＣＲ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ或抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性样品中的ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果２－巯基乙醇破坏试验及ＨＣＶ抗原抑制试验结果显示,以所建立的ＥＬＩＡＳ检测到的为ＨＣＶ特异ＩｇＭ,批内变异系数为３．４７％,批间变异系数为７．０６％。８３６份献血员血清中,有２份抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性而抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论本研究中建立的ＥＬＩＳＡ可较好地用于检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、献血员筛选及防止丙型肝炎传播。     

长沙地区孕妇CMV感染状况及其临床追踪观察

研究了７７例长沙地区孕、产妇的宫颈排毒（ＣＭＶ）情况及母、婴的免疫状态，并对宫颈排毒及ＣＭＶ一ＩｇＭ阳性的母亲所生小孩进行临床追踪。结果显示：孕妇宫颈排毒率为４．５％，抗ＣＭＶ－ＩｇＧ和抗ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率分别为７７％和１３％，５９例脐血ＣＭＶ－ＩｇＭ阴性。宫颈排毒的３例其抗体检测抗ＣＭＶ－ＩｇＧ均阳性，抗ＣＭＶ－ＩｇＭ仅一例阳性。作者认为，对妊娠期活动性ＣＭＶ感染的诊断，仅检测抗ＣＭＶ－ＩｇＧ和抗ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体滴度仍不足，尚须结合病毒分离和其它检测手段。     

抗HCV NS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴

目的：为研制抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的ＨＣＶＮＳ３抗原。方法：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的细胞株。结果：获得有实用价值的两株ＭｃＡｂ。两株ＭｃＡｂ与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶＮＳ４、ＮＳ５及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。结论：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。     

抗HCV-IgM抗体测定及临床初步应用

将市售ＨＣＶ－ＩｇＧ诊断试剂盒加以改良，建立了ＨＣＶ－ＩｇＭ抗体检测方法，与抗ＨＢｃ－ＩｇＭ，抗ＨＢｓ－ＩｇＭ，抗ＣＭＶ－ＩｇＭ，抗ＲＶ－ＩｇＭ，ＲＦ及抗核抗体（ＡＮＡ）阳性血清均不起反应。正常人群中抗ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性率为１．５％（１／６８），抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性的４３例血透患者检出抗ＨＣＶ－ＩｇＭ１４例（３２．６％），１２例输血后肝炎抗ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阳性。以上结果表明，抗ＨＣＶ－ＩｇＭ可作为输血后ＨＣＶ感染的一个敏感指标     

抗－HCV IgM检测方法的建立及初步临床应用

用一种简单的改良抗－ＨＣＶ免疫检测法检测抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ。３９例丙型肝炎中１７例抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ阳性，其中急性肝炎９例，慢性肝炎组５例，肝硬化组例３例。对照组的急性甲肝、急性乙肝、健康献血员无１例阳性；急性丙肝在临床症状出现时抗－ＨＣＶＩｇＭ、抗－ＨＣＶ　ＩｇＧ的阳性率分别为５０．０％（８／１６）、４３．８％（７／１６），慢肝、肝硬化组中５例抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ持续高水平出现，病情反复，一过性抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ阳性者病情稳定或缓解。结果提示，抗－ＨＣＶ　ＩｇＭ可作为病情活动性指标，有助于近期ＨＣＶ感染的早期诊断。     

EBV-EAIgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用

目的：探讨ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）ＩｇＧ抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用。方法：对４５４例鼻咽癌和３００例健康人的血清分别用免疫酶法测定抗ＥＡ抗原的ＩｇＡ／ＥＡ抗体,用ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ抗体,以及用抗酶率法测定抗ＥＢＶＤＮＡ酶抗体。并用免疫酶法测定ＩｇＡ／ＶＣＡ和ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ的方法对鼻咽癌高发区人群的９５３６例血清进行鼻咽癌筛查。结果：３种方法中ＥＬＩＳＡ法检测ＩｇＧ／ＥＡ诊断鼻咽癌的效率最高（９２５％）。以双项检测阳性（ＩｇＧ／ＥＡＡ值≥０１８和ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度≥１∶８０）为标准,鼻咽癌筛查的阳性预示值（鼻咽癌数／阳性血清数）为１６５％（１３／７９）,高于单项阳性标准,Ｐ＜００５。结论：ＥＬＩＳＡ检测血清ＩｇＧ／ＥＡ的方法适用于鼻咽癌的血清学诊断,与检测ＩｇＡ／ＶＣＡ的免疫酶法联合应用的双阳性标准适合于在鼻咽癌筛查中采用。为了提高筛查的敏感性,建议将双项阳性标准中的ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度定为≥１∶５。ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度从≥１∶８升高到≥１∶５。     

孕妇及新生儿感染人巨细胞病毒的检测和临床意义

孕妇感染人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）后，可造成流产、早产、死胎、胎儿宫内发育迟缓、婴儿先天畸形及新生儿病毒性肝炎等。采用ＥＬＩＳＡ法对５５例孕妇及其新生儿进行巨细胞病毒特异性ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体检测。结果表明孕妇血清ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体阳性率分别为２７．３％和９４．５％；新生儿脐血ＩｇＭ和ＩｇＧ阳性率分别为１０．９％和４５．５％；异常产儿６例中其母亲ＨＣＭＶ特异性ＩｇＭ抗体均为阳性，表明孕妇有ＨＣＭＶ近期感染对新生儿有一定影响。     

重型病毒性肝炎的血清病原学研究

为了解重病毒性肝炎（重肝）的病的分型及其与预后的关系，应用酶联免疫法对１２０例重肝患者进行了甲型肝炎病毒抗体（抗－ＨＡＶ）ＩｇＭ、ＨＢＶ标志（ＨＢＶＭ）、丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）的检测。结果显示，抗ＨＡＶ－ＩｇＭ阳性１９例（１５．８％）；ＨＢＶＭＢ阳性９０例（７５．０％）；抗－ＨＣＶ阳性２９例（２４．２％）其中１９例登工ＨＢＶ感染，单纯抗－ＨＣＶ阳性６例；三型病毒标志阴性者１６例（１３．３％     

肺部感染性疾病巨细胞病毒感染状态分析

目的 分析肺部巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染状况及其意义，方法 应用ＰＣＲ技术检测４５例肺部感染性疾病患者的肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ），保护性标本刷（ＰＳＢ）洗涤液及血白细胞ＣＭＶＤＮＡ，应用ＥＬＩＳＡ技术检测血清ＣＭＶＩｇＭ，结果 ＢＡＬＦ，ＰＳＢ，血白细胞ＣＭＶ－ＤＮＡ及血清ＩｇＭ的阳性率分别为３１．１１％，３５．５５％，１３．３３％和５１．１１％，肺部ＣＭＶ感染病毒血症的发生率为２８．５７％，肺癌与非     

上海地区急性散发性戊型肝炎的特异性诊断和调查──应用抗人μF（ab’）_2—HRP检测抗HEVIgM

以Ｇｅｎｅｌａｂｓ的ＨＥＶＩｇＧＥＬＩＳＡ试剂盒和抗人μＦ（ａｂ’）＿２—ＨＲＰ检测抗ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ，从上海地区４６７例急性病毒性肝炎病人和８４例健康人血清中分别检出抗ＨＥＶＩｇＧ阳性１０５例（２２％）和１１例（１３％）（Ｐ＞０．０５）。从上述病人共检出抗ＨＥＶＩｇＭ阳性６４例（１４％），其中３６例抗ＨＥＶＩｇＭ阳性出自１１１例急性非甲非乙非丙型肝炎，２８例抗ＨＥＶＩｇＭ阳性出自３３３例急性甲型肝炎病人，而２３例急性乙型和丙型肝炎病人，８４例健康人以及另外的２４例非病毒性肝炎（内４例类风湿因子阳性）病人血清均为抗ＨＥＶｌｇＭ阴性。结果表明：在检测抗ＨＥＶＩｇＭ的ＥＬＩＳＡ系统中，应用抗人μＦ（ａｂ’）＿２—ＨＲＰ作为酶标第二抗体，取得了满意的结果；上海地区急性非甲非乙非丙型肝炎中，３２％为戊型肝炎，急性甲型肝炎病人中８％同时感染了ＨＡＶ和ＨＢＶ。