节制饮食增强猫视皮层γ-氨基丁酸和脑源性神经营养因子的表达

目的探讨节制饮食对猫初级视皮层内抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 Nissl染色示初级视皮层分层并用于神经元计数;免疫组织化学方法标记6只猫GABA和BDNF免疫阳性神经元。切片于Olympus光学显微镜下观察摄片,用Image-Pro Express 6.0软件进行细胞计数和免疫阳性反应的吸光度值统计。结果与正常饮食对照猫相比,节制饮食组猫的初级视皮层神经元平均密度无显著变化,GABA免疫阳性神经元密度显著增大,阳性反应的平均吸光度值显著升高;BDNF免疫阳性细胞的密度和阳性反应的平均吸光度值亦明显增大。结论节制饮食能显著增强猫视皮层内GABA和BDNF的表达,这可能对视皮层神经元的结构和功能有保护作用,从而延缓衰老进程。     

猫初级听皮层γ-氨基丁酸能神经元和星形胶质细胞年龄相关变化

目的探讨青年猫和老年猫初级听皮层（AI）的年龄相关变化及可能产生的生理作用。方法Nissl染色示两组猫初级听皮层的分层结构并进行细胞计数;免疫组织化学染色示两组猫7．氨基丁酸（GABA）能神经元和星形胶质细胞的形态、密度及分布。结果与青年猫相比,老年猫的初级听皮层细胞平均密度无显著的年龄相关变化,GABA-IR细胞的密度显著下降（尤其是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层）,阳性胞体较小,阳性反应明显减弱;老年猫的GFAP-IR细胞密度显著增大,阳性胞体膨大,突起稠密粗大,阳性反应明显增强,其中的Ⅰ层和白质尤为明显。结论GABA能神经元显著的年龄相关性改变可能为老年性听觉功能衰退的神经机制在皮层水平提供了直接的形态学证据;而星形胶质细胞活动增强可能是导致GABA能神经元及GABA递质含量减少的重要原因之一。     

硫酸软骨素蛋白多糖对视皮层γ-氨基丁酸能神经元表达及其抑制性突触传递功能的影响

目的:通过体外观察硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)对γ-氨基丁酸(GABA)能神经元表达及其抑制性突触传递功能的影响,为探索CSPGs抑制视皮层可塑性的机制提供实验依据。方法:运用硫酸软骨素酶(ChABC)处理体外培养的胎鼠视皮层神经元,降解其CSPGs后应用免疫荧光显色检测CSPGs降解情况及GABA能神经元的表达变化,并用膜片钳检测其自发性微小性抑制性突触后电流(mIPSCs)以观察其抑制性突触传递功能变化情况。结果:0.1 U/ml ChABC处理神经元后,CSPGs被成功降解,GABA能神经元细胞密度、mIPSCs幅度和频率均显著低于正常对照组。结论:CSPGs能促进GABA能神经元表达及其抑制性突触传递功能的成熟,这可能是CSPGs抑制视皮层可塑性的作用机制之一。     

GABA能神经元在大鼠、树运动皮层的分布及其电镜观察

选取进化上种风差异较大的两种动物大鼠和树　为研究材料，在光镜和电镜下观察运动皮层的GABA能神经元．两种动物运动皮层中GABA能神经元的数量、大小及所占的比例都有明显的差异．大鼠运动皮层中GABA能种经元的平均密度为140．0±49．2个／mm2，树　则为214．0±82．9个／mm2，树　的密度明显高于大鼠．大鼠从Ⅱ层到Ⅵ层GABA能神经元的数量逐层降低，而树　从Ⅱ层到Ⅴ层逐层降低，Ⅵ层的密度则高于Ⅴ层，二者密度最高的都是在Ⅱ层．大鼠GABA能神经元的最长在平均为14．2±1．2μm，树　为11．9±1．6μm．大鼠最长径在15μm以上的占29．8％；而树　仅占11．3％，树　的GABA能神经元比大鼠的要小．所以在进化较高等的动物－树　的运动皮层中，GABA能神经元的密度较高，大的GABA能神经元较少．电镜观察显示GABA能神经元表面既接受对称型突触又接受非对称型突触，两种动物非对称型突触的数目都不与GABA能神经元的周长及截面积呈线性相关．对称型突触既有GABA能的也有非GABA能的；大鼠GABA能的及非GABA能的对称型突触，和树　非GABA能的对称型突触都与GABA能神经元的周长及截面积呈线性关系．     

衰老时大鼠大脑皮质枕叶神经肽Y阳性神经元的变化

目的　　研究衰老时神经肽Ｙ（ＮＰＹ）阳性神经元在大鼠大脑皮质枕叶中的变化情况。方法　　选用青年组（１～２个月）、中年组（１１～１２个月）和老年组（２２～２４个月）三组Ｗｉｓｔａｒ大鼠，采用免疫组化ＳＡＢＣ法结合计算机图像分析技术进行研究。结果　　ＮＰＹ阳性细胞属于非锥体形神经元，在枕叶皮质Ⅱ—Ⅵ层均有分布；比较三个年龄组阳性细胞的数量和平均截面积的变化，发现老年组与青年组及中年组相比，两项指标都显著减小（Ｐ＜０．０１），而青年组和中年组相比，两项指标都没有显著性变化（Ｐ＞０．０５）。结论　ＮＰＹ作为神经调节物，可能与大脑皮质枕叶功能的调节有关；随着衰老其阳性神经元的变化可能影响ＮＰＹ发挥正常的生理功能。     

大鼠杏仁体基底外侧核GABA和ACh能中间神经元的突触

目的：揭示杏仁体基底外侧核(BL)中的γ-氨基丁酸(GABA)能和乙酰胆碱能(ACh)2种中间神经元树突上的突触联系。方法：用抗GABA和抗胆碱乙酰转移酶(ChAT)抗体对BL做光镜和电镜免疫组化染色。结果：光镜下，GABA免疫反应阳性神经元多为圆形多极神经元；CHAT免疫阳性神经元多为双极神经元。两者数量比约为(7-9)：1。电镜下，支配GABA免疫阳性神经元的突触52．7％为非对称性(兴奋性)，47．3％为对称性(抑制性)，而ChAT免疫阳性神经元则分别为44．9％和55．1％。结论：在情绪性学习记忆的处理过程中，杏仁体GABA能中间神经元起主要的功能作用，可能为抑制作用；而ACh能中间神经元作为辅助的均衡调节作用。     

衰老时大鼠大脑皮质枕叶一氧化氮合酶阳性神经元的变化

本实验采用免疫组化 SABC法结合计算机图像分析技术 ,研究了衰老时大鼠大脑皮质枕叶一氧化氮合酶阳性神经元的分布及形态特征变化。结果发现 :一氧化氮合酶阳性细胞在枕叶皮质 ～ 层均有分布 ,属于非锥体形神经元 ;比较三个年龄组阳性细胞的数量和平均截面积的变化 ,发现老年组与幼年组及中年组相比 ,两项指标都显著减小 (P<0 .0 1)。而幼年组和中年组相比两项指标没有明显差别 (P>0 .0 5 )。提示 ,一氧化氮作为神经递质 ,可能与大脑皮质枕叶功能的调节有关 ;随着衰老 ,其阳性神经元的变化可能影响其发挥正常的生理功能     

大鼠杏仁体基底外侧核中DA能与GABA能神经元之间突触关系的免疫电镜研究

目的 了解杏仁体中多巴胺(DA)能神经末梢和7-氨基丁酸(GABA)能神经元之间的相互关系、探索两者在精神分裂症中作用的神经解剖学机制。方法 用免疫电镜双标技术，分别以抗DA和抗谷氨酸脱羧酶(GAD、GABA的合成酶)标记大鼠杏仁体基底外侧核中DA能神经末梢和GABA能神经元，在电镜下观察DA能神经末梢和GABA能神经元之间的突触联系。结果 由DA免疫阳性神经末梢形成的突触中，有43％直接或间接形成于DA免疫阳性神经末梢与GAD免疫反应阳性树突结构之问，其中单一性突触为38％、汇聚性突触为30％、连续性突触为20％、末梢间突触样联系为12％。另外的57％由DA免疫阳性神经末梢与未标记的神经结构形成，其中在未标记的神经元胞体形成10％、树突上82％、轴突末梢上8％。由DA免疫反应阳性末梢形成的所有突触均为对称性即抑制性突触。结论 在大鼠杏仁体基底外侧核中，DA能神经末梢系统以对称性突触支配着GABA能中间神经元，同时，又与核内的谷氨酸能投射神经元形成突触联系．并影响其活动。     

大鼠展神经核和前庭神经核内GABA反应神经元向动眼神经核的投射

用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)逆行标记结合γ-氨基丁酸(γ-amino-butyric acid,GABA)的免疫组织化学双标技术观察大鼠的展神经核和前庭神经核内GABA阳性神经元的分布,以及其向动眼神经核的投射。结果表明:注射HRP于大鼠动眼神经核内直肌亚核后,在对侧展神经核区以及前庭神经核、脑桥旁正中网状结构中发现HRP单标记细胞;在前庭神经核内,可见HRP单标记、GABA阳性和HRP/GABA双标记三类神经元,其中HRP/GABA双标记细胞占HRP标记细胞总数的47.1%。结果表明GABA在前庭神经核向动眼神经核的抑制性投射中起一定作用,而在展神经核向动眼神经核投射的核间通路中,可能不是起主要作用的抑制性神经递质。     

纯视细胞移植术后RCS鼠视皮质内γ—氨基丁酸的分布

目的：通过成功地纯视细胞移植,观察RCS鼠视皮质内抑制性神经递质γ-氨基丁酸（GABA）的分布和变化。方法：取同龄Wistar/皇家外科学院（Royal College of Surgeon,RCS)鼠为供／受体,准分子激光切削法制备视细胞层,外路途径移入RCS鼠的视网膜下腔,术后2周取RCS鼠手术组眼、手术对照组眼、RCS对照组眼及其视皮质分别做冰冻切片、免疫组织化学染色染法色、普通光学显微镜下观察。结果：视细胞细胞术后2周,移植视细胞存活,外丛状层重建,与手术对照眼,RCS对照相相比,重视高膜受体RCS鼠对侧视皮质内GABA免疫反应神经元数量较多,而同侧视皮质内无GABA免疫反应神经元。结论：成功纯视网细胞移植可以重建RCS鼠的视传导通路,移植的纯视细胞使RCS鼠视皮质内GABA免疫反应的分布发生变化。     

NGF、BDNF及受体trkA、trkB、trkC在正常猴脊髓的表达

采用免疫组织化学方法观察了神经生长因子 (NGF) ,脑源性神经营养因子 (BDNF)以及 NGF家族因子受体 trk A、trk B、trk C的免疫阳性反应在正常猴脊髓的分布。结果表明 :NGF免疫反应阳性的神经元在脊髓灰质各层中均有分布 ,灰、白质内也可见较多的 NGF免疫反应阳性的胶质细胞。 BDNF在脊髓各型神经无有明显的表达 ,特别是前角运动神经元。 trk A、trk B、trk C的免疫阳性反应产物主要分布在灰质的神经元及胶质细胞。本实验结果揭示了在正常猴脊髓中神经营养因子 (NGF、BDNF )及受体 trk A、trk B、trk C的表达状况 ,提示这些神经营养因子及受体在维持猴脊髓神经元的正常生理功能中具有重要作用。     

糖尿病大鼠下丘脑视上核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的：观察糖尿病大鼠下丘脑视上核神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数量的变化。方法：用链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型；免疫细胞化学染色显示nNOS免疫阳性神经元，并进行定量分析。结果：糖尿病视上核nNOS免疫阳性神经元着色深浅不一，着色较深的阳性神经元散在分布，神经元的形态多样，突起较少。对照组大鼠视上核nNOS免疫阳性神经元较稀疏，各时期无明显改变。糖尿病2w，nNOS免疫阳性神经元数量与对照组无显著差异；7w，nNOS阳性神经元较密集，明显多于对照组；12w，nNOS免疫阳性神经元数量略低于7w，但仍多于对照组。结论：糖尿病大鼠下丘脑视上核nNOS免疫阳性神经元数量明显增多。     

GABA能中间神经元在运输应激大鼠躯体感觉皮质的分布

目的:探讨运输应激对大鼠躯体感觉皮质γ-氨基丁酸(GABA)能中间神经元分布的影响。方法:采用摇床加束缚建立大鼠运输应激模型，将24只SD雄性大鼠随机分为对照组(Control)、运输应激1 d组(TS1d)、运输应激3 d组(TS3d)、运输应激7 d组(TS7d)。应用尼氏染色、免疫组织化学染色法观察运输应激状态下大鼠躯体感觉皮质GABA能不同亚型中间神经元的表达及分布。结果:在躯体感觉皮质，运输应激之后小清蛋白(PV)阳性神经元、生长抑素(SOM)阳性神经元、钙视网膜蛋白(CR)阳性神经元数量显著减少，在TS7d时下降最明显；PV阳性神经元数量在第Ⅱ～Ⅳ层显著减少；SOM阳性神经元数量在第Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ层显著减少；CR阳性神经元数量在第Ⅰ～Ⅵ层显著减少。结论:运输应激后，大鼠躯体感觉皮质GABA能中间神经元显著减少，其中PV和CR这两种钙结合蛋白类中间神经元数量下降最明显，提示钙结合蛋白在调节应激方面起关键作用。     

利用GAD67-GFP基因敲入方法显示小鼠脊髓内表达GFP的GABA能神经元的分布(英文)

γ-氨基丁酸 (GABA)是脊髓背角、前角内主要的抑制性神经递质。为了更好地观察脊髓背角内 GABA能神经元的形态和功能 ,本研究使用了两种谷氨酸脱羧酶 67-绿色荧光蛋白 (GAD67-GFP)基因敲入小鼠 ,并观察了敲入小鼠脊髓内的 GFP表达状况。用免疫荧光组织化学双标记方法显示脊髓内所有的 GF P阳性神经元基本上都呈 GAD67和 GABA阳性 ;GFP阳性神经元在脊髓背角的 ～ 层最为密集 ,背角深层内侧部及中央管周围呈中等密度分布 ,而在脊髓背角其它部位及前角则呈散在分布。脊髓内 GFP阳性神经元的分布与 GABA能神经元的分布一致。本文作者等还进一步在 GAD67-GFP敲入小鼠中观察了 GFP和神经元标志物神经元核蛋白 (Neu N )的共存状况。脊髓背角内 GFP阳性神经元分别占 、 和 层的 Neu N阳性神经元的 3 1.5 %、3 3 .3 %和 44 .7% ,与以往的 GABA免疫组化研究结果基本一致。本研究表明 GAD67-GFP基因敲入小鼠脊髓内的 GFP在GAD67启动子的调节下正确地表达于 GABA能神经元 ,该基因敲入小鼠可用于脊髓 GABA能神经元的形态学特征和生理学特性及其发育规律等方面的研究     

猫初级视区急性毁损对高级视区刺激诱导的c-fos蛋白表达的影响

目的:研究初级视区急性毁损对猫的高级视区刺激诱导的c-fos蛋白表达的影响,探索初级视区毁损后的残留视觉(称盲视)可能机制。方法:本研究采用免疫组织化学检测了初级视区(包括17和18区)急性毁损对猫的高级视区(包括19、20和21区)中立早基因c-fos蛋白基础表达量和刺激诱导的c-fos蛋白表达量的影响,以正常猫为对照。结果:急性毁损初级视区后,高级视区内c-fos免疫阳性神经元密度及c-fos免疫阳性反应的光吸收值(OA)在初级视区毁损猫和正常对照猫之间无显著差异;然而,双侧初级视区毁损猫的高级视区中刺激诱导的c-fos免疫阳性神经元密度比正常猫下降了92%以上,c-fos蛋白免疫阳性反应的OA值下降了78.9%以上。结论:初级视区急性毁损后高级视区的绝大多数神经元失去了对视觉刺激的反应性,因此,初级视区毁损后出现的盲视现象可能主要与皮层下中枢至高级视区的神经通路重组有关。     

成年大鼠骶髓后连合核神经元对与伤害性信息传递和抑制有关的神经递质的反应──脊髓片盲膜片钳全细胞记录法研究(英文)

以成年大鼠脊髓片骶髓后连合核（DCN）为模型，应用盲膜片钳全细胞记录法，研究了DCN神经元对与伤害性信息传递和抑制有关的递质的反应。证明：谷氨酸在DCN神经元引起了由NMDA和非NMDA受体介导的内向电流；P物质激发的内向电流可被spantide或CP－99994阻断；GABA激发的外向电流由GABAA和GABAB受体介导；甘氨酸激发的外向电流可被士的宁完全阻断。本研究结果提示DCN神经元既表达兴奋性神经递质受体又表达抑制性神经递质受体，即谷氨酸和P物质介导的外用伤害性信息与GABA和甘氨酸介导的抑制性信息可能在DCN神经元水平进行整合，从而起到了抑制伤害性信息传入的作用。本研究为进一步探索DCN参与伤害性信息的传递和镇痛作用的机理提供了电生理学基础。     

组织胚胎学

Schwann细胞在壳聚糖纤维上的立体培养；大鼠杏仁复合体向听皮层的神经投射；大鼠脑缺血后突触体素与突触密度的关系；雌性大鼠去卵巢后下丘脑CREB阳性神经元的形态学变化；糖尿病大鼠下丘脑视上核nNOS免疫阳性神经元的变化；高血压大鼠中脑导水管周围灰质内nNOS样阳性神经元的变化；人胎儿和新生儿脊髓和DRG内nNOS阳性神经元的表达和分布；慢性低氧时小鼠肺组织低氧诱导因子-1α的表达；Dahl高血压大鼠睾丸中eNOS的表达；人胎胃壁瘦素及瘦紊受体的免疫组织化学；慢性复合应急对大鼠学习与记忆及海马NMDA受体NR1亚基表达的影响；雷公藤多苷对大鼠海马内注射β-淀粉样蛋白后星形胶质细胞增生的影响；海洛因成瘾复吸大鼠脑组织超微结构和部分神经递质的变化；具生殖系嵌合能力的C57BL／6J小鼠胚胎干细胞系的建立；衰老对小鼠睾丸结构和精子发生的影响；小鼠囊胚在子宫内膜体外共培养模型上着床的超微结构观察；银杏叶对阿尔茨海默病（AD）治疗作用的实验研究；在黑色素瘤组织中免疫细胞的形态学观察；癫痫发作敏感大鼠齿状回苔状纤维侧支发芽；骨髓间充质干细胞定向诱导成类软骨细胞的实验研究；VEGF、bFGF在高血压大鼠不同时期心肌细胞表达变化；EF-Tu mt和EF-Fs mt在实验性癫痫大鼠脑内的表达；前庭神经核纤维与投射至纹状体的束旁核神经元的突触联系；热休克蛋白在高温处理后鼠胚心脏的表达；碘缺乏对大鼠大脑锥体细胞的影响；骨髓源干细胞向损伤脑组织迁移的可能性；施万细胞和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响；白细胞介素1β致痫对脑内Gas蛋白和cAMP含量变化的影响；局灶性脑梗死引起谷氨酸转运体在星形胶质细胞的表达；帕金森病大鼠模型额叶皮质内突触素与神经丝蛋白的表达变化；神经生长因子及其高亲和力受体在脊髓损伤大鼠大脑运动皮质及皮质脊髓束的表达；难治性癫痫患者脑组织胶质原纤维酸性蛋白和多药耐药基因蛋白的免疫电镜观察。     

马桑内酯和糖皮质激素对培养脑神经元Glu和GABA免疫反应阳性的影响

为了探讨糖皮质激素与抗癌作用的关系，本研究利用培养的大鼠大脑皮质神经元，在经致痫剂马桑内酯和糖皮质激素处理后，进行Glu和GABA免疫细胞化学染色，观察它们对免疫反应阳性细胞的影响，并对实验结果进行了图象分析。结果发现：马桑内酯处理可使Glu免疫反应阳性神经元增多，使GABA免疫反应阳性神经元减少；而先加马桑内酶再加糖皮质激素，则可使Glu阳性神经元大为减少,GABA阳性神经元比只加马桑内酯组增多。上述改变均有统计学意义。此结果提示：马桑内酯诱发的癫痫可能与Glu和GABA的含量变化有关，糖皮质激素在致痫状态下，可能有降低Glu升高GABA含量的作用，从而具有抗痫效应．     

大鼠黑质胆碱能神经元形态学的增龄变化

目的：探讨大鼠中脑黑质胆碱能神经元的增龄变化规律。方’法：SD大鼠分为1～2月龄、3～4月龄、11～12月龄、≥24月龄4组，常规石蜡中脑黑质连续冠状切片，HE染色、尼氏染色、胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫组织化学染色，图像分析仪测量ChAT免疫阳性产物的光密度和ChAT免疫反应阳性神经元的多种参数。结果：随着年龄增长，大鼠中脑黑质神经元数量减少，ChAT免疫反应阳性神经元平均光密度减少，ChAT免疫反应阳性神经元多种形态学参数均减少，呈增龄衰老性变化。结论：黑质胆碱能神经元随年龄增长而出现的衰老性变化，可能是黑质病变的原因之一。     

老龄大鼠海马结构脑源性神经营养因子表达的改变

目的：探讨大鼠海马结构脑源性神经营养因子（BDNF）表达的老龄性改变，为脑衰老提供可靠的免疫组织化学资料。方法：选用雌性Wistar大鼠24只，分为青年组和老龄组。应用免疫组化方法结合图像分析技术对2组大鼠海马结构BDNF阳性产物进行定性、定量分析。结果：老龄组海马CA3和CA1区神经元BDNF含量比青年组分别下降了13．3％、10．4％，然而，齿状回从青年到老年变化不显著。结论：老龄时海马CA3和CA1区神经元的BDNF表达发生了明显的变化，其含量明显降低。提示老龄大鼠海马CA3和CA1区神经元BDNF表达的改变，可能是老龄动物海马结构营养及学习记忆障碍的形态学基础。