婴儿双歧杆菌/重组人核心蛋白聚糖肿瘤靶向性基因治疗系统的构建

目的构建双歧杆菌表达重组人核心蛋白聚糖(rhDCN)基因载体。方法利用pGEX-4T-1原核载体系统,用EcoRΙ和NotΙ酶对PCR扩增后DCN基因和PGEX-4T-1质粒分别进行双酶切,琼脂糖电泳凝胶分离并用凝胶重回收试剂盒回收酶切的1.1kbp和5.0kbp两个目的片段。T4 DNA连接酶连接,构建成PGEX-4T-1-DCN重组质粒。电穿孔法将重组质粒转化婴儿双歧杆菌,挑选阳性克隆菌落,提取质粒,双酶切鉴定及测序验证分析。结论成功构建婴儿双歧杆菌/rhDCN肿瘤靶向性基因治疗系统。     

核心蛋白聚糖抑制肿瘤生长的研究进展

核心蛋白聚糖(decorin)是一种主要存在于结缔组织中与胶原纤维相关的蛋白多糖(proteoglycan,PG),是蛋白多糖家族中富含亮氨酸的一个小分子组分,具有多种生物活性,可以调节和控制组织形态发生、细胞分化、运动、增生及参与胶原纤维形成等过程,对防止组织和器官纤维化的发生有重要意义[1-5].此外,decorin可通过影响细胞生长中几个关键环节包括基质装配、与生长因子作用、调节酪氨酸激酶受体的活性而影响细胞的生长[6].近年来大量的证据表明decorin无论在体内过度表达或作为重组蛋白均可抑制不同组织来源的肿瘤细胞的生长[7-10].Decorin的水平在大多数细胞中较低,但在肿瘤组织周围基质中显著性增高,这可能是机体对抗肿瘤细胞侵袭的一种自然的生物学反应.本文就近年来decorin抑制肿瘤生长方面的研究进展综述如下.     

肿瘤基因治疗的现状与展望

针对肿瘤发生的遗传学背景,将外源目的基因引入肿瘤细胞或其它体细胞内以纠正过度活化或补偿缺陷的基因,而从达到治疗肿瘤的目的,即为肿瘤基因治疗（CGT）。分为针对肿瘤细胞的CGT策略和针对机体的CGT策略。前者有包括针对抑癌基因的CGT、针对癌基因的CGT、针对肿瘤细胞的免疫基因治疗、自杀基因治疗、耐药基因治疗;后者包括免疫效应细胞介导的CGT、树突状细胞介导的CGT、抗血管生成CGT。虽然CGT不太可能完全治愈肿瘤,但随着它的不断完善,能提高恶性肿瘤晚期的治疗的有效性,改善患者的生存质量。     

肿瘤的联合基因治疗

1 不同目的基因之间的联合应用 1.1自杀基因与免疫基因之间的联合应用 将HSV-tk基因与能增强抗瘤免疫力的免疫基因联合应用可提高疗效.Chen等于结肠癌肝转移模型上,直接瘤体内注射含mIL-2基因和HSV-tk基因和HSV-tk基因的重组腺病毒后发现,单用tk基因或与mIL-2基因联合均有明显的肿瘤坏死和消退.     

肿瘤基因治疗的研究进展

癌症是基因治疗的主要对象,本文介绍了肿瘤基因治疗的方法,在基因治疗中存在的关键问题,近十几年来基因治疗的临床试验进展,并对基因治疗的安全性进行了阐述,同时分析了基因治疗的前景及未来的发展趋势。     

脂质体复合物与肿瘤的基因治疗

目的介绍脂质体 DNA(liposome DNA)复合物在肿瘤基因治疗中的应用和新的研究方向。方法通过查阅近年来国内外有关脂质体复合物介导的肿瘤基因治疗的文献 ,对复合物的形成、作用机制及临床应用进行综述。结果与结论脂质体作为一种新型的药物载体 ,在体内可生物降解 ,并具有一定的靶向性 ,正日益成为药物及基因转移的有效手段。     

核心蛋白聚糖和细胞因子的相互作用

核心蛋白聚糖（decofin）为蛋白聚糖（PG）的一种，属分泌型的富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖家族，由于其能修饰胶原原纤维因此也称为饰胶蛋白聚糖。decofin由富含亮氨酸的核心蛋白和一条糖胺聚糖链组成．在调节细胞黏附、迁徙、增殖，胶原纤维形成及对转化生长因子（TGF）-β活性调节中起重要作用。近来发现decofin高表达可以使TGF—β和白细胞介素（IL）-1β的水平降低，相反，使IL-4和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平升高，说明decorin在细胞因子产生的调节中起着重要作用。细胞因子是由免疫细胞、成纤维细胞和内皮细胞等产生的调节细胞功能的高活性多功能蛋白多肽分子。     

肿瘤化疗耐药与其基因治疗药物的研究进展

通过对国内外文献的分析、整理和归纳,较为系统的介绍肿瘤耐药性发生的机制,以及基因治疗药物用于逆转肿瘤耐药的发展研究现状。笔者认为基因治疗技术的发展,将对逆转肿瘤耐药性起到推动作用,也将为肿瘤耐药性的研究和肿瘤基因治疗药物的发展提供参考依据。     

简化提取核心蛋白聚糖的方法及扩大活性检测范围

目的简化分离、纯化核心蛋白聚糖的程序 ,了解其对瘤细胞生长的抑制作用。方法经匀浆、溶解沉淀、透析、研磨等步骤制备核心蛋白聚糖 ,MTT染料结合法检测A5 49、BT32 5等四种癌细胞体外生物学活性。结果简化法制备的核心蛋白聚糖得率为 3mg/g大鼠肌肉 ,SDS PAGE显示在相对分子质量 36～ 38kD间有两条带 ,除明显抑制A5 49生长外 ,对Hela、胃 790 1及BT32 5三者同样具有抑制生长活性 ,抑制率依次为 6 9.19%、48.19%、5 4.47%、6 7.80 %。结论此法成本低、纯度好、收获量及生物学活性略有提     

核心蛋白聚糖的分离、纯化及活性鉴定

为研究、开发治疗肺、肝等纤维化疾病的一种天然白蛋白多糖——核心蛋白聚糖（Ｄｅｃｏｒｉｎ）,综合归纳了国外研制Ｄｅｃｏｒｉｎ的技术、方法,供从事Ｄｅｃｏｒｉｎ研究及有兴趣开发Ｄｅｃｏｒｉｎ新药的科技人员或制药公司参考。     

基因治疗:肿瘤未来的克星

<正> 基因治疗从20世纪80年代起至今,经历了3个阶段:一是准备期(1980年～1989年);二是狂热期(1990年～1995年)。随着1990年9月基因治疗的第一例应用获得成功,带来了医学生物学领域的一片狂热,但由于一些关键技术还没有解决,在临床应用中碰壁是必然的。三是理性期(1996年之后)。在对过去几年基因治疗临床试验进行初步评估的基础上,提出必须对基因治疗的关键问题组织研究,使基因治疗从狂热转入理性化的正常轨道。基因治疗要取得突破,必须解决以下3个关键问题,即基因导入系统、基因表达的可控性以及更多更好的治疗基因。     

反义寡核苷酸在肿瘤基因治疗中的研究

基因治疗为彻底攻克肿瘤带来了新希望,反义技术是基因治疗的一个重要内容。本文概述了近年来肿瘤反义基因治疗方面取得的一些实验成果,包括对某些癌基因（c－myc,c－myb,bc1－2,mdm2,ras家族）、肿瘤自分泌生长因子及其受体（TGFβ,IGF－I,IGF－IR）等所开展的反义基因治疗。     

鼠肌核心蛋白聚糖的研制

目的 :从动物组织中提取纯化核心蛋白聚糖 (Decorin) ,检测其活性。方法 :以大鼠肌肉为原料 ,采用匀浆、透析、层析等步骤分离、纯化Decorin ,经SDS PAGE检测其分子量和纯度 ,并经细胞株A5 49检测生物学活性结果 :Decorin在SDS PAGE显示分子量约为 37～ 38kD两条带 ,得率约为 2mg/g组织 ,对A5 49具有明显的抑制生长活性 ,抑制率 >5 0 %。结论 :此法获得的Decorin将有可能作为天然药物用于治疗肿瘤。     

核心蛋白聚糖诱导L-02和HSC-T6细胞凋亡的初步观察

目的　探讨核心蛋白聚糖 (decorin)对正常肝细胞和肝星形细胞诱导凋亡的作用。方法　以正常人肝细胞株 (L 0 2细胞 )和大鼠肝星形细胞株 (HSC T6细胞 )为研究靶细胞 ,通过HE染色、流式细胞仪分析、TUNEL标记和电镜观察等方法证实decorin对肝细胞和肝星形细胞凋亡的诱导作用。结果　Decorin能够诱导两种靶细胞出现典型的凋亡细胞特征 ,细胞核浓缩、边聚 ,胞膜皱褶 ,凋亡小体形成。而且其诱导凋亡作用呈现剂量和时间效应。结论　Decorin能够诱导肝细胞和肝星形细胞凋亡 ,提示可以通过凋亡途径减少因损伤刺激而过度增生的细胞 ,以利于肝纤维化治疗     

RNAi在肿瘤基因治疗药物研究中的应用

肿瘤是多种基因突变的累积以及这些基因相互作用形成的基因网络调控的结果,目前RNA干扰技术越来越多地拓宽到肿瘤医学的研究领域。本文就RNA干扰技术在肿瘤基因治疗、在候选基因的发现和筛选中的应用以及临床研究进展方面做一综述。     

肝素酶与肿瘤转移

肿瘤细胞的侵袭、转移必须具备两个条件：(1)肿瘤血管生成；(2)肿瘤细胞穿越由细胞外基质(extracellular matrix，ECM)和基底膜(basement membrane，BM)组成的屏障。该屏障主要由2种成分构成：一是结构蛋白；二是糖氨聚糖。其主要成分是硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan，HSPG)。HSPG主要由一个蛋白核心和数个与之共价连接的线性硫酸乙酰肝素(heparan sulfate，HS)侧链组成，参与一系列生理和病理过程。     

肿瘤特异性凋亡基因对荷瘤小鼠基因治疗的实验研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因对肿瘤的基因治疗作用，以S-180肉瘤细胞的荷瘤小鼠为模型，用克隆了肿瘤特异性凋亡基因的真核表达载体直接进行基因治疗。同时以生理盐水、真核载体为对照。结果表明。与对照组相比，基因治疗组小鼠一般生长状态良好，体内肿瘤生长明显减缓(P&;lt;0．01)。生存期延长。体重增加，在肿瘤组织中可检测到肿瘤特异性凋亡基因mRNA的表达。结沦：肿瘤特异性凋亡基因在体内具有明显的抗肿瘤作用，对开展肿瘤的基因治疗有一定的临床意义。     

rAd-P53基因治疗概况及在妇科肿瘤领域的应用进展

基因治疗是上世纪80年代发展起来的疾病对因治疗新技术。随着对恶性肿瘤生长的分子机制的研究不断深入,恶性肿瘤的基因治疗技术迅速发展。其中重组人p53腺病毒(rAd-p53)作为当前肿瘤基因治疗的新热点发展较快。本文对rAd-p53基因治疗概况及在治疗妇科肿瘤方面的应用进展作一综述。1肿瘤基因治疗概况肿瘤是一种基因病,是在外在环境因素的作用下,人体细胞内多种癌基因被激活和抑癌基因失活的长期演变的结果。基因治疗是指以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗,其过程是通过一定的方式,将人的正常基因或有治疗作用的基因片段导入人体靶细胞…     

治疗肿瘤的新方法——基因治疗

随着近代分子生物学的迅速发展和肿瘸发病分子机理的深入研究，一种治疗肿瘤的新方法——基因治疗，已开始由理论研究向临床试验过渡。基因治疗是指在DNA(RNA)水平上对疾病的控制与治疗，就是通过基因递呈(转移)包括转入外源正常DNA顺序以矫正缺失或突变的DNA序列，导入细胞因子或其他功能基因诱发免疫应答反应发挥抗细胞增殖作用，导入某些基因调控以控制基因的异常表达等方式来进行治疗。     

超敏C反应蛋白与肿瘤研究的进展

超敏C反应蛋白是目前最有研究价值的诊断肿瘤的急性时相反应蛋白,对于肿瘤患者的及早确诊和治疗具有重要的意义。本文主要总结了超敏C反应蛋白与多种肿瘤疾病的关系,以期为今后临床上肿瘤的诊断提供参考依据。