大鼠自体血管搭桥后血管桥VEGF mRNA表达及意义

目的 :探讨搭桥后血管桥VEGFmRNA表达情况 ,为临床预防内膜增生及血管桥的选择提供理论依据 .方法 :建立大鼠自体血管移植模型 ,每组 80只 ,分成静脉组 (V组 ) ,游离动脉组 (A组 ) ,非游离动脉组 (nA组 ) ,分别于不同时间切取搭桥血管 .应用免疫组织化学和原位杂交方法进行指标检测 .结果 :V组织内膜增生比A组明显 ,V组VEGFmRNA及蛋白信号明显比A组弱 (2 8%vs 5 6 % ,P <0 .0 1 ) .结论 :自体血管移植后VEFGFmRNA表达异常 ;促进血管壁VEGFmRNA表达将有助于抑制内膜增生的发生     

前凝血状态下激素性股骨头缺血坏死血管壁骨代谢相关基因差异表达的实验研究

目的：运用基因芯片技术,对前凝血状态下激素影响的血管壁中的骨代谢相关基因进行筛选,发现相关基因的差异表达情况,为进一步探讨前凝血状态下激素导致股骨头缺血坏死的发病机理提供新的思路。方法：选健康中国大白兔25只,分为对照组、内毒素组、模型组,利用大肠杆菌内毒素及激素诱导兔典型前凝血状态下激素性股骨头缺血坏死模型,取主要供应股骨头血供的旋股内侧动、静脉,提取组织总RNA,与含有82个兔基因的寡核苷酸基因芯片杂交,洗涤,染色和扫描,分析检测的数据。结果：在检测的82个基因中,下调的基因动脉有51个,静脉有56个,其中表达差异显著的基因动脉有7个,静脉有23个。结论：（1）激素在导致股骨头发生缺血坏死的过程中降低或增高了某些血管壁中主要的骨代谢相关基因的转录。进而影响了其在血管壁中的生物活性。所有这些可能都会影响到股骨头局部的骨代谢,从而加重或导致了股骨头坏死。（2）利用基因芯片大通量筛选的技术,在短时间内可以迅速准确的分析激素影响的血管壁中众多骨代谢相关因子及其受体的基因表达情况,为进一步研究激素性股骨头坏死机制提供了有效的手段。     

自体血管移植后内膜增生与PDGF-A表达的变化及意义

目的 观察血小板源性生长因子A链（PDGF-A）在自体动静脉移植后不同时期的表达情况。探讨其与移植后血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的关系和在内膜增生（IH）中的作用。方法 建立大鼠自体动静脉移植模型。应用组织形态学方法观察移植血管内膜增生的动态变化特点和采用免疫组织化学方法观察PDGF-A在移植后不同时期的表达情况。结果 游离动脉和静脉移植后发生内膜增生，静脉较游离动脉内膜增厚明显；PDGF-A在移植后持续表达至10周，高峰在4-6周，静脉较游离动脉表达更显著，非游离动脉无明显变化。结论 移植血管中，静脉内膜增生最明显，而非游离动脉无明显内膜增生；PDCF-A与VSMCs的增殖关系密切；另外可能有促进移植后晚期细胞外基因质（ECM）堆积而引起IH的作用。     

普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfa1表达的影响

目的 研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内Cbfal基因表达的影响．方法 54只新西兰白兔随机分为正常组（A组）、模型组（B组）和普伐他汀治疗组（C组），每组18只．B、C两组应用大肠杆菌内毒素及甲强龙造成股骨头坏死模型，C组于造模后4周开始用普伐他汀灌胃，A、B两组以等量蒸馏水灌胃．分别于喂药后第4、8、12周分批取兔股骨头行实时荧光定量PCR检测股骨头内Cbfal mRNA的表达．结果 B、C两组各时相点Cbfal mRNA的表达水平均低于A组，但C组喂药后第8、12周的表达量明显高于B组，差异有显著性（P〈0．01）．结论 普伐他汀可促进激素性坏死股骨头内Cbfal mRNA的表达，有可能成为临床治疗激素性股骨头坏死的有效药物．     

川芎嗪对血管再狭窄大鼠血小板源生长因子受体与细胞外信号调节蛋白激酶表达的影响

目的:观察血小板源生长因子(PDGF)受体与细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)在再狭窄血管中的表达及川芎嗪(TMP)对其的影响,探讨TMP防治血管再狭窄的作用机制。方法:制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的川芎嗪干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉PDGF-β受体与ERK1/2的表达。结果:假手术组动脉各层结构正常、清晰,无明显血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,颈总动脉损伤大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)大量增殖,内膜显著增厚,川芎嗪处理后,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖程度降低;与假手术组比较,再狭窄大鼠颈总动脉PDGF-β受体与ERK1/2表达显著增强(P<0.01),中、高剂量川芎嗪明显降低PDGF-β受体及ERK1/2的表达(P<0.01,P<0.05)。结论:TMP抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞PDGF受体及ERK1/2表达有关。     

体外冲击波对兔激素性股骨头坏死血中ET-1含量及表达的影响

目的观察体外冲击波疗法对兔激素性股骨头缺血坏死血浆中血管内皮素-1（endothelin-1,ET-1）的变化及表达的影响。方法健康成年雄性日本大耳兔54只,随机选取18只为正常对照组（A组）,余36只造模后随机分为模型组（B组）、冲击波治疗组（C组）各18只,C组给药后第2周行兔股骨头冲击波干预,A组、B组不干预。各组于第4、6、8周随机选取6只兔耳动脉采血后处死,ELISA法测血ET-1含量。留取股骨头标本,HE染色法观察股骨头病理组织学变化,免疫组化染色观察股骨头中ET-1阳性表达,并进行半定量分析。结果 4周时B组与C组血浆中ET-1含量无差别（P〉0.05）,但均较A组偏高（P〈0.05）;6周、8周时血浆中ET-1含量B组较A组、C组更高（P〈0.05）,A组、C组间无差别（P〉0.05）。结论冲击波干预兔激素性股骨头坏死后,血浆中ET-1含量减低,促进濒临坏死骨的修复和再生,防止了骨塌陷的出现。     

早期激素性股骨头坏死动物模型的建立

目的:应用激素联合内毒素脂多糖建立兔股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)模型。方法:将40只4月龄新西兰大白兔随机分成2组,每组20只,A组为对照组,B组为造模组。第1周B组开始造模,采用大剂量激素肌肉注射联合内毒素脂多糖(Lps)静脉注射诱导动物模型;A组注射等剂量生理盐水。分别于第2,4,6,8,10周将A、B两组各处死4只动物,取双侧股骨头标本行HE染色,测定骨髓腔内脂肪细胞面积百分比、空骨陷凹率、骨小梁面积百分比。结果:1)大剂量激素联合LPS引起B组动物股骨头内脂肪细胞肥大,第4周后脂肪细胞面积百分比大于A组(P0.05),第6周后B组空骨陷凹率大于A组(P0.05),第8周后B组可见骨小梁面积百分比小于A组(P0.05)。结论:大剂量激素联合脂多糖可以很好的复制股骨头坏死模型。     

体外冲击波对兔激素性股骨头坏死中OPG含量及表达的影响

目的观察体外冲击波对兔激素性股骨头缺血坏死血浆中骨保护素（osteoprotegerin,OPG）的变化及表达的影响。方法健康成年雄性日本大耳兔54只,随机选取18只为正常对照组（A组）,余36只造模后随机分为模型组（B组）、冲击波治疗组（c组）各18只,c组给药后第二周行兔股骨头冲击波干预,A组、B组不干预。各组于第4、6、8周随机选取6只兔耳动脉采血后处死,ELISA法测血OPG含量。留取股骨头标本,HE染色法观察股骨头病理组织学变化,免疫组化染色观察股骨头中OPG阳性表达,并进行半定量分析。结果4周时B组与C组血浆中OPG含量无差别（P〉0．05）但均较A组降低（P〈0．05）;6周、8周时血浆中OPG含量B组较A组、C组降低（P〈0．05）,A组、c组间无差别（P〉0．05）。股骨头中OPG阳性表达：4、6、8周时B组较A组、c组低（P〈0．05）,A组、c组间无差别（P〉0．05）。结论兔激素性股骨头坏死冲击波干预后,血浆中OPG含量增高,局部坏死区OPG表达增强。     

激素性骨坏死血管变化的实验研究

目的观察激素性骨坏死动物血管功能障碍,血管损伤,血流粘滞和血管再生障碍变化的规律和过程。方法选用中国白兔随机分2组。A组：马血清加用甲基强的松龙组;B组：单用甲基强的松龙组。A、B组分别于用药前及最后一次用激素后3、7、21d测定血浆内皮素（ET）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和血栓调节蛋白（TM）。A组动物于首次注射血清1周,首次应用激素后1、3、5、7周;B组动物于首次注射激素后1、3、5、7周分批处死取双侧股骨头。常规HE染色和VEGF免疫组化染色。结果血清加激素组的变化较单纯应用激素组有更强的变化;血清加激素组动物ICAM-1和TM在应用激素后3周时已开始回复,而ET未见回复;2组动物的VEGF表达都表现为降低后逐渐回复的过程。结论应用激素后,股骨头普遍存在前坏死状态,这种情况具有一定的可恢复性,但恢复结果可能受多种因素影响,因而应对这类情况进行长期的观察。     

ESWT对兔激素性股骨头缺血坏死GMP-140、TM、OPG表达的影响

目的:观察兔激素性股骨头缺血坏死体外冲击波疗法(ESWT)干预后,血浆中血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)、血栓调节蛋白(TM)及骨保护素(OPG)的表达。方法:选取健康成年雄性日本大耳兔50只,激素造模后随机处死2只验证造模成功,其余按随机数字表法分为模型对照组(A组)24只和冲击波治疗组(B组)24只。干预前,两组随机选取8只兔耳动脉采血测血浆GMP-140、TM、OPG含量;ESWT干预第2、4、8周时A、B组各随机选取8只兔,耳动脉采血后处死,测血浆GMP-140、TM、OPG含量;留取股骨头标本行HE染色观察大体病理变化,免疫组化观察股骨头中OPG阳性表达,并进行半定量分析。结果:ESWT干预2、4、8周后,B组血浆中的GMP-140、TM含量较A组均降低(P0.05);ESWT干预4周、8周时B组血浆中OPG含量较A组均升高(P0.05)。ESWT干预2、4、8周时B组股骨头中的OPG阳性表达较A组均升高(P0.05)。结论:兔激素性股骨头坏死ESWT干预可使血浆中OPG含量增高,GMP-140、TM含量降低,局部坏死区OPG表达增强。     

左旋多巴联合葛根素对兔激素型股骨头缺血坏死修复过程的影响

目的研究左旋多巴联合葛根素对兔激素型股骨头缺血坏死修复的影响。方法选用40只大耳白兔造模8周,成功后随机分为4组:对照组(A组,给生理盐水),左旋多巴组(B组,每日口服左旋多巴0.2g/kg),葛根素组(C组,每日肌注葛根素0.2ml)),联合组(D组,每日口服左旋多巴0.2g/kg和肌注葛根素0.2 ml);分别于8周时抽血检查血脂含量及断头取长骨干垢端检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因表达水平。结果与A组比较,B、C、D组IGF-1DNA的表达和血脂的水平均显著改善(P<0.01),D组与B、C组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合应用左旋多巴和葛根素能促进胰岛素样生长因子-1的分泌、降低血脂的含量,对激素性股骨头坏死有一定的防治作用。     

辛伐他汀预防激素性股骨头坏死的实验研究

目的探讨辛伐他汀预防糖皮质激素性股骨头缺血坏死的可行性和机制.方法将36只新西兰兔随机分为空白对照组(A组),模型组(B组)、激素加辛伐他汀组(C组),每组12只.8周后检测血清中胆固醇、甘油三酯及一氧化氮(NO)含量,并对股骨头组织行HE及脂肪染色.结果①B组的血清胆固醇及甘油三酯含量显著高于其他2组,而NO含量显著低于其他2组(P＜0.05).②B组股骨头骨小梁空骨陷窝百分比显著高于另外2组,骨小梁面积分数均显著低于另外2组(P＜0.05).③B组骨髓腔中脂肪组织增多,脂肪细胞直径和面积显著大于A、C组.④A、C组间上述指标差异无统计学意义(P＜0.05).结论辛伐他汀可减轻激素所致的脂肪代谢紊乱和骨质疏松,提高血清中NO含量,从而起预防糖皮质激素性股骨头缺血坏死的作用.     

两种不同方法治疗股骨头缺血坏死的实验研究

目的 观察股骨头坏死的病理变化。观察带血运骨瓣移植术与带血运骨瓣与骨膜生发层细胞复合移植术的疗效。比较两种治疗方法之间是否有差别。探讨血供重建与骨重建相结合的可能性。方法 ２２只哈白兔分为３组。均将股骨头截下后埋于胸部皮下,制成股骨头坏死模型。３周后,Ａ组对照组６只,无处置;Ｂ组８只,将带血运肋骨瓣植入已坏死的股骨头内,Ｃ组８只,将带血运肋骨瓣与骨膜生发层细胞复合植入已坏死的股骨头内,１２周后,光镜、透射电镜观察股骨头的软骨及骨小梁的结构。结果 Ａ组出现典型骨坏死而无修复,Ｂ组出现成骨细胞及红细胞,修复反应出现,Ｃ组出现修复反应,且修复效果优于Ｂ组。结论 应用哈白兔将股骨头截古后埋藏于皮下,可以制作出 血运肋骨诱发了骨重建,从而加快坏死骨修复,实验性血供重建与骨重建复合移植组对骨坏死的修复优于单纯血供重建组。     

实验性动脉粥样硬化中PDGF-B的表达

目的 :探讨动脉粥样硬化 (AS)的体内机制。方法 :建立兔动脉粥样硬化模型。将雄性大耳白兔 (体重1 .5～ 2kg) 1 2只随机分为 2组 :空白对照组 (NC组 ,n =6 )和动脉粥样硬化组 (AS组 ,n =6 )于第 1 ,3,5 ,7周酶法测血清总胆固醇、甘油三脂。 7周后主动脉苏丹Ⅳ染色测AS斑块面积 /总面积 ,HE染色观察主动脉形态学改变。用原位杂交法测血小板生长因子 β(PDGF B)的表达程度。 结果 :主动脉粥样硬化斑块面积NC组低于AS组 (P <0 .0 5 )。PDGF B的表达NC组低于AS组 (P <0 .0 5 )。结论 :PDGF B可能是促使VSMC增生、AS进展的主要原因     

联合用药预防激素性股骨头坏死对骨细胞凋亡和Bcl-2表达的影响

目的观察联合用药预防激素性股骨头骨细胞凋亡的可能性。方法30只兔随机分成三组：对照组同期肌注生理盐水;激素组是给予糖皮质激素肌注;治疗组在给予同剂量糖皮质激素同时,每日使用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠;用末端原位标识（TUNEL）法及免疫组化技术分别检测骨细胞凋亡和bcl-2表达情况,电镜观察股骨头组织学变化。结果电镜下激素组骨细胞核体积缩小,染色质边聚和浓密多见于对照组和治疗组;激素组凋亡细胞比率显著高于治疗组,而其Bcl-2表达则较治疗组低。结论联合应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠能抑制兔激素性股骨头细胞凋亡。     

骨髓间充质干细胞治疗早期股骨头坏死的实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)治疗早期股骨头坏死的疗效及机制. 方法:60只新西兰大白兔造模后选取其中确诊为股骨头坏死的36只,随机分为3组:对照组:不予以任何处理;单纯减压组和减压+MSC移植组.术后4周及8周各组随机挑选6只兔先行MRI扫描,之后处死动物取股骨头行常规H-E染色及CD34免疫组化染色,用扫描电镜观察超微结构. 结果:术后第8周,减压+MSC移植组MRI示低信号区明显缩小,组织病理学及扫描电镜表现空骨陷窝减少,成骨细胞多,新骨形成,空骨陷窝阳性数和微血管密度与单纯减压组和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论:MSC移植能促进兔股骨头坏死的修复.     

兔激素性股骨头坏死造模中的致死因素与干预分析

目的:探讨单纯糖皮质激素诱导建立兔股骨头坏死动物模型中的致死因素与干预思路,以优化造模方式。方法:新西兰大白兔40只随机分为四组,A组为单纯激素注射组,每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙,每次8mg/kg,连续6周;B组为激素+青霉素注射组,在A组基础上每周2次肌肉注射青霉素钠4万U/只;C组为激素+青霉素+雷尼替丁注射组,在B组基础上每周2次肌肉注射雷尼替丁25mg/只;D组为空白对照组,肌肉注射生理盐水5mL。观察各组一般形态学、死亡率、组织病理学。结果:A、B、C组均造模成功,其中C组生存状况最好,体重减轻最少。三组动物死亡率分别是50%、30%、10%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:单一激素醋酸泼尼松龙可以成功诱导兔激素性股骨头坏死动物模型,通过预防性应用抗生素与制酸剂,可以显著减少模型动物死亡率。     

干细胞体外培养关节镜下髓芯减压回植治疗早期股骨头坏死的实验研究

目的 研究髓芯减压关节镜监视下骨髓间充质干细胞在治疗股骨头缺血性坏死中的作用及价值.方法 建立兔右侧股骨头缺血件坏死模型,并分为3组,A组为空白骨坏死对照组,B组为单纯髓芯减压组,C组髓芯减压并植入骨髓间充质干细胞组.关节镜监视并对坏死骨清除后植入骨髓间允质干细胞,术后4周和8周对股骨头行组织学检查.结果 组织形态学检测发现术后4、8周C组术后各时相点血管数量及修复区新骨面积比显著高于两个对照组,差异有统计学意义(F=20.32、16.97,81.32、67.32;均P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞的成骨作用较强,可使股骨头缺血性坏死的修复加强,对股骨头缺血性坏死的治疗意义较大.