植骨气囊在人工关节松动动物模型实验研究中的应用

目的建立一种人工关节无菌性松动的实验动物模型并且定量评价磨损颗粒诱导的骨溶解。方法在8-10周大的近交系BALB/c小鼠背部注射无菌空气形成气囊，后将近交系小鼠颅骨植入气囊。实验组小鼠气囊内注入聚乙烯磨损颗粒，对照组气囊内注入生理盐水，植骨后14d处死小鼠，取出气囊组织和颅骨骨片进行炎性因子（IT-1、TNF、VEGF）和破骨细胞激活相关基因（RANK/RANKL）的分子生物学检测。结果聚乙烯颗粒刺激组气囊炎性反应较对照组明显，炎性细胞渗出增多，气囊囊壁变厚；在颗粒刺激组的囊壁和骨组织界面上可以观察到大量抗酒石酸酸性磷酸酶染色（TRAP）阳性的破骨细胞，HE染色可见骨表明有明显的点状侵蚀，图像软件分析显示两组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。ELISA法和RT-PCR法分别测量囊壁组织内炎性因子IL-1，TNF，VEGF含量和RANK的mRNA含量，两组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论植骨气囊模型是一种经济、快速、有效的模拟人工关节松动病理过程的实验动物模型。     

磨损颗粒诱导骨溶解的两种动物模型形态学比较研究

目的建立两种磨损颗粒诱导骨溶解模型,比较炎症水平、骨溶解情况以及破骨细胞计数等指标,为骨溶解相关实验动物模型的选择提供依据。方法分别采用小鼠颅骨模型、小鼠气囊植骨模型制备两组磨损颗粒诱导骨溶解模型。通过HE染色法进行形态学观察;利用扫描电子显微镜观察骨溶解情况;采用TRAP染色法进行破骨细胞计数。结果小鼠气囊植骨模型组骨吸收面积为(385.30±5.11)nm2,明显高于小鼠颅骨模型组的(288.60±4.89)nm2(P0.05);小鼠气囊植骨模型组破骨细胞数目为(16.75±0.53)个,明显高于小鼠颅骨模型组的(9.55±0.48)个(P0.05)。结论两种动物模型均构建成功;小鼠气囊植骨模型在炎症水平、骨溶解情况及破骨细胞计数等方面均优于小鼠颅骨模型,因此在模拟磨损颗粒诱导的骨溶解病理过程中小鼠气囊植骨模型模拟度更高。     

塞来昔布抑制大鼠颅骨内钛微粒引起骨溶解的实验研究

目的 探讨塞来昔布对关节磨损颗粒诱导的大鼠颅骨骨溶解的影响.方法 取健康雌性大鼠行颅骨手术,实验分为植入钛颗粒组、钛颗粒结合塞来昔布处理组和空白对照组,HE染色后通过测定骨小梁面积比计算骨吸收情况,并用实时荧光定量PCR,Western Blot检测COX-2、TNF-α的表达,ELISA法检测血清IL-1、IL-6、PGE2水平.结果 与对照组比较,钛颗粒组、钛颗粒结合塞来昔布处理组骨吸收明显,而钛颗粒结合塞来昔布处理组骨吸收较钛颗粒组改善;塞来昔布可明显下调钛颗粒植入大鼠颅骨后PGE2、TNF-α、IL-1和IL-6的表达.结论 塞来昔布可抑制钛颗粒诱导的大鼠颅骨骨溶解,有望成为防治人工关节无菌性松动的药物.     

红霉素抑制磨损颗粒诱发体内骨溶解的研究

[目的]通过小鼠体内磨损颗粒颅骨溶解模型研究红霉素(erythromycin,EM)抑制磨损颗粒诱发骨溶解的效果。[方法]24只8周龄的C57BL/J6雄性小鼠随机分为4组:聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl-methacrylate,PM-MA)组接受PMMA30 mg颗粒植入颅顶部,PMMA 2EM组接受30 mg PMMA颗粒植入加每天EM2 mg/kg腹腔内注射,PMMA 10EM组接受PMMA30 mg颗粒植入加每天EM10 mg/kg腹腔内注射,对照组接受假手术。7 d后取出颅骨进行病理学分析。[结果]颅骨破坏面积对照组为0.079 mm2±0.011 mm2,PMMA组0.335 mm2±0.129 mm2,PM-MA 2EM组0.094 mm2±0.019 mm2,PMMA 10EM组0.091 mm2±0.028 mm2。对照组颅骨实验区域内破骨细胞计数为5.3±1.0个,PMMA组为19.2±5.3个,PMMA 2EM组为6.6±1.1个,PMMA 10EM组为6.1±1.9个。与对照组相比,PMMA颗粒可以诱发骨溶解(P<0.001),而EM治疗可以抑制PMMA颗粒诱发的颅骨溶解(P<0.001),及破骨细胞生成(P<0.001)。[结论]EM可以抑制PMMA磨损颗粒诱发的骨溶解。     

IL-6对RAW264. 7细胞成熟分化的体外实验研究

目的探讨研究白介素-6(Interleukin-6,IL-6)对核因子NF-κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear kappa B ligand,RANKL)及对破骨前体细胞的成熟分化和溶骨效应。方法破骨前体细胞RAW264.7细胞经50ng/mL RANKL诱导1 d后将其分为:1、空白对照组(RANKL+PBS)2、低浓度IL-6组(RANKL+50ng/mL IL-6)3、中浓度IL-6组(RANKL+100ng/mL IL-6)4、高浓度IL-6组(RANKL+150ng/mL IL-6)。连续培养9 d后,进行HE染色检测成熟破骨细胞生成量;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞的情况;运用扫描电镜检测破骨细胞在骨片上的骨吸收陷窝形成情况。结果 HE染色中,成熟破骨细胞生成量中、高浓度IL-6组明显少于低浓度IL-6组(P0.05),低浓度IL-6组和空白对照组间无明显差别(P0.05)。②通过TRAP染色后,经染色阳性区域面积与视野面积的百分比计算,中、高浓度IL-6组与明显少于低浓度和空白对照组(P0.05)。③扫描电镜观察发现骨吸收陷窝面积与视野面积的百分比随着IL-6浓度的增高,相比空白对照组有显著减少,且高浓度IL-6组中陷窝形成最少(P0.05)。结论 IL-6能直接作用于经RANKL诱导的RAW264.7细胞,能明显抑制破骨细胞激活分化,并降低破骨细胞所致的骨吸收效应。当IL-6浓度超过50ng/mL时,其抑制破骨细胞的骨吸收效应更加明显。     

连续性肾替代治疗对多脏器功能不全综合征患者炎性介质清除及内皮细胞功能的影响

目的 研究连续性肾替代治疗（CRRT）对多脏器功能不全综合征（MODS）患者外周血炎性介质清除及内皮细胞功能的影响。 方法 选取我院30例MODS患者,行CRRT治疗,每次治疗时间不短于24 h,分别于治疗开始时（0 h）和治疗后3、6、12、24 h取血检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）1β、IL-4、IL-6、IL-10、E-选择素、可溶性血管细胞黏附分子（sVCAM-1）、可溶性细胞间黏附分子1（sICAM-1）和血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。 结果 CRRT 14 d存活19例（63.3%）,28 d存活17例（56.7%）。患者电解质和酸碱平衡于治疗6 h后恢复正常。IL-1β、IL-4于治疗开始后下降,TNF-α、IL-6、IL-10在12 h时浓度达峰值[（887.88±975.46） ng/L、（132.01±118.14） ng/L、（167.01±161.66） ng/L],与治疗前[（462.24±331.03） ng/L、（106.39±90.82） ng/L、（124.51±118.39） ng/L]比较,差异有统计学意义（均P < 0.05）。但TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10治疗前与治疗后24 h差异无统计学意义。治疗后,死亡组IL-6 [（145.45±14.28） ng/L]显著高于存活组[（106.03±10.86） ng/L]（P < 0.05）;死亡组IL-10[（94.93±16.09） ng/L]显著低于存活组[（143.06±12.24） ng/L]（P < 0.05）。内皮细胞E-选择素、sVCAM-1、sICAM-1于治疗开始后升高,于治疗12 h达峰值,但治疗前后差异无统计学意义。PAF-AH治疗后开始升高,治疗后水平高于治疗前。死亡组E-选择素[（287.13±42.70） μg/L比（266.26±65.26） μg/L]、sVCAM-1[（1697.25±475.24） μg/L比（1488.10±691.67） μg/L]、sICAM-1[（975.33±142.50） μg/L比 （835.40±332.41） μg/L]高于存活组;而PAF-AH低于存活组[（9.07±6.38） μg/L比 （16.32±8.95） μg/L]。 结论 CRRT能纠正MODS患者机体紊乱的内环境,并能部分纠正内皮细胞功能,但外周血炎性介质水平治疗前后差异无统计学意义。IL-6、IL-10水平可作为临床转归的预测指标。     

唑来膦酸钠在抑制钛颗粒诱导骨溶解中作用的体外实验研究

目的：研究唑来膦酸钠（ ZOL）对钛颗粒诱导的骨溶解的影响。方法分离6～8周C57BL/6J小鼠长骨中的前体破骨细胞（ OCP）并分为6组,A组：OCP＋细胞培养液,B组：OCP＋巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）＋NF-κB 受体活化因子配体（RANKL）＋细胞培养液,C组：OCP＋钛颗粒＋细胞培养液,D组：OCP＋上清液（钛颗粒刺激巨噬细胞24 h后上清液）＋细胞培养液,E组：OCP＋M-CSF＋RANKL＋ZOL＋细胞培养液,F组：OCP＋上清液＋ZOL＋细胞培养液。每组细胞分别接种在玻璃盖玻片、皮质骨磨片和含骨检测表面的96孔板上,10 d后检测玻璃盖玻片上细胞抗酒石酸磷酸酶（ TRAP）的表达及皮质骨磨片上骨吸收陷窝的形成,并以骨检测表面的骨吸收面积为指标比较各组破骨细胞的骨吸收活性。结果 B组、D组、E组和F组的OCP均能分化为能被TRAP染色成阳性的破骨细胞并形成骨吸收陷窝,其余组均未发现TRAP染色阳性的破骨细胞和骨陷窝。加入ZOL的F组骨吸收面积（5.54％±1.25％）较D组（10.34％±1.69％）明显减少,差异具有统计学意义（t＝5.61,P＜0.01）。结论在体外实验中钛颗粒并不能直接刺激前体破骨细胞向破骨细胞转化;唑来膦酸钠可以抑制钛颗粒诱导的骨溶解作用。     

Anti-CDllb单克隆抗体对超高分子聚乙烯磨损颗粒诱导骨溶解作用的研究

目的 通过建立小鼠颅骨溶解模型,探究anti-CDllb抗体对颗粒诱导骨溶解的作用。方法 取10周龄雌性C57BL/6J小鼠32只,平均分为4组,A(空白对照组）,切开颅顶皮肤后即缝合,于术后第二天灌胃生理盐水,并尾静脉注射PBS,B[脾酪氨酸激酶（Spleen tyrosine kinase,Syk)抑制剂组]、C( anti-CDllb单克隆抗体组）和D(颗粒组）组于烦骨骨膜外移植20μg超高分子聚乙烯磨损颗粒后缝合,B组术后第2大起以15 mg/kg灌胃Syk抑制剂,尾静脉注射PBS,C组术后第2天起尾静脉注射 anti-CDllb单克隆抗体,2 g/kg,灌胃生理盐水,D组术后第二天起每日灌胃生理盐水,尾静脉注射PBS。两周后颈椎脱臼法处死小鼠,摘眼球取血测血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)值,取颅骨做显微CT重建并测骨体积分数,取颅骨骨膜进行western blot分析。结果 建模小鼠全部存活,空白对照组、anti-CDl lb单克隆抗体组及Syk抑制剂组血清TNF-α值均低于颗粒组（P <0. 05);空白对照组、anti-CDllb单克隆抗体组与Syk抑制剂组骨体积分数均高于颗粒组（P < 0. 05 ) ; Syk抑制剂组及anti-CDllb单克隆抗体组Erk活性、c-fos及NFATcl表达均低于颗粒组而高于空白对照组（P < 0. 05 )。结论 Anti- CDllb单克隆抗体及Syk抑制剂均对颗粒诱导骨溶解具有抑制作用,CDllb分子通过激活Syk通路而发挥促破骨细胞分化作用。     

白细胞介素6对体外培养人脐动脉平滑肌细胞成骨样转化、钙化的影响

目的 研究白细胞介素6（IL-6）对体外培养人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）成骨样转化、钙化的作用及可能的信号通路。 方法 组织植块法原代培养HUASMC。培养基加入不同浓度重组人IL-6（rhIL-6）孵育细胞,设空白对照组。茜素红S钙沉积染色及甲氧-酚酞络合酮法检测细胞层钙盐含量。实时定量PCR、荧光定量法以及Western印迹法分别检测骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨桥蛋白（OPN）、骨形成蛋白2（BMP２）和骨保护素（OPG）基因以及蛋白表达。凝胶迁移滞后实验（EMSA）检测核心结合因子α1亚基（Cbfα1）的结合活力,以及分别应用p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580和蛋白激酶C二氢神经鞘氨醇（DHC）后Cbfα1的结合活力。 结果 rhIL-6 50 μg/L诱导12 d,细胞基质层茜素红S染色阳性。与对照组相比,细胞层钙盐含量在rhIL-6 10 μg/L组刺激9 d[（0.76±0.02） mmol/g蛋白]和12 d[（1.54±0.11） mmol/g蛋白]升高,50 μg/L组刺激6 d[（1.81±0.03） mmol/g蛋白]、9 d[（2.08±0.10） mmol/g蛋白]和12 d[（3.22±0.18） mmol/g蛋白]升高,并呈时间、剂量依赖地增加。rhIL-6 10 μg/L刺激12 h,BMP2 mRNA（3.04±0.07）和蛋白（8.14±0.41）及BAP mRNA（2.51±0.11）和蛋白（3.96±0.54）表达上调;刺激72 h,OPN mRNA（3.14±0.32）和蛋白（2.57±0.43）水平及OPG mRNA（4.06±0.24）和蛋白（3.46±0.34）水平上调。rhIL-6刺激6 h,Cbfα1结合活力增加;DHC能够部分抑制rhIL-6诱导的Cbfα1结合活力增加,SB203580没有明显作用。 结论 IL-6体外能够诱导HUASMC发生钙化和成骨样转分化,这可能是临床观察到IL-6与血管钙化相关的机制之一。IL-6的这一作用可能与细胞内蛋白激酶C通路的活化有关。     

伊班膦酸钠对钛颗粒诱导的骨溶解作用

[目的]通过建立钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解动物模型,研究伊班膦酸钠对骨溶解的影响,并探讨其作用机制.[方法]24只昆明系小鼠随机分成4组,每组6只,建立钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解模型.空白对照组进行假手术;钛颗粒组在小鼠颅顶植入30 mg钛颗粒;1单位伊班膦酸钠组和10单位伊班膦酸钠组分别于植入钛颗粒第2 d腹腔注射伊班膦酸钠10 mg、100 mg.手术后第10 d,取出颅骨进行病理学分析.[结果]空白对照组骨溶解面积为(0.070±0.009)mm2,没有发生明显骨溶解.钛颗粒组骨溶解面积为(0.369±0.050)mm2,和空白对照组相比发生了更大面积的骨溶解(P<0.05).1单位伊班膦酸钠组和10单位伊班膦酸钠组骨溶解面积分别为(0.164±0.018)mm2、(0.018±0.075)mm2,均小于钛颗粒组骨溶解面积(P<0.05).而且10单位伊班膦酸钠组比1单位伊班膦酸钠组骨溶解面积更小(P<0.05).骨溶解区域破骨细胞数量各组比较结果和骨溶解面积结果类似.[结论]伊班膦酸钠能够有效抑制钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解.     

脐带间充质干细胞调节炎性微环境干预急性肾损伤的效应研究

目的：观察移植外源性脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对小鼠急性肾损伤（AKI）炎性微环境的影响及对肾组织的修复作用。方法：分离培养孕后期C57BL/6雌性小鼠的UC-MSCs。另取雌性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组、AKI组、AKI＋MSC移植组,每组20只。AKI组和AKI＋MSC组用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45 min复制AKI模型,并于模型制备成功时腹腔内注射生理盐水0.2 ml（AKI组）或1＆#215;106 UC-MSCs（AKI＋MSC组）。于第2天和第7天每组活杀10只小鼠,取眼球血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（SCr）水平;肾组织行HE染色,观察组织病理学变化;ELISA法检测肾组织匀浆中促炎因子IL-1β、TNF-α、干扰素-1（IFN-1）及抗炎因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、IL-10、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的水平。结果：2 d时AKI组小鼠肾小管上皮细胞肿胀,胞质空泡性变,BUN和Cr均显著高于正常对照组,提示造模成功后肾小管受损严重,7 d稍有减轻;AKI＋MSC移植组小鼠肾功能在2 d时较AKI组有所恢复,肾组织病理学变化明显减轻（P＜0.01）,7 d基本恢复正常。ELISA结果显示,与正常对照组比较, AKI组各时间点肾组织匀浆中促炎因子的水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）,抗炎因子的水平均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,2 d较7 d更加明显。各时间点AKI＋MSC组抗炎因子的水平较AKI组明显升高,促炎因子的水平明显下降,但与正常对照组比较差异均有显著性（P＜0.01或P＜0.05）,7d较2 d改善更明显。结论：MSC可通过减轻AKI肾组织炎症反应,调节损伤肾脏组织微环境中的细胞因子水平发挥保护肾损害的修复作用。     

Implant wear induces inflammation, but not osteoclastic bone resorption, in RANK(-/-) mice.

Signaling of RANK (receptor activator of nuclear factor kappa B) through its ligand RANKL appears critical in osteolysis associated with aseptic loosening (AL). The purpose of this study was to investigate the role of RANK in a murine osteolysis model developed in RANK knockout (RANK(-/-)) mice. Ultra high molecular weight polyethylene (UHMWPE) debris was introduced into established air pouches on RANK(-/-) mice, followed by implantation of calvaria bone from syngeneic littermates. Wild type C57BL/6 (RANK(+/+)) mice injected with either UHMWPE or saline alone were included in this study. Pouch tissues were collected 14 days after UHMWPE inoculation for molecular and histology analysis. Results showed that UHMWPE stimulation induced strong pouch tissue inflammation in RANK(-/-) mice, as manifested by inflammatory cellular infiltration, pouch tissue proliferation, and increased gene expression of IL-1beta, TNFalpha, and RANKL. However, the UHMWPE-induced inflammation in RANK(-/-) mice was not associated with the osteoclastic bone resorption observed in RANK(+/+) mice. In RANK(+/+) mice subjected to UHMWPE stimulation, a large number of TRAP(+) cells were found on the implanted bone surface, where active osteoclastic bone resorption was observed. No TRAP(+) cells were found in UHMWPE-containing pouch tissues of RANK(-/-) mice. Consistent with the lack of osteoclastic activity shown by TRAP staining, no significant UHMWPE particle-induced bone resorption was found in RANK(-/-) mice. A well preserved bone collagen content (Van Gieson staining) and normal plateau surface contour [microcomputed tomography (microCT)] of implanted bone was observed in RANK(-/-) mice subjected to UHMWPE stimulation. In conclusion, this study provides the evidence that UHMWPE particles induce strong inflammatory responses, but not associated with osteoclastic bone resorption in RANK(-/-) mice. This indicates that RANK signaling is essential for UHMWPE particle-induced osteoclastic bone resorption, but does not participate in UHMWPE particle-induced inflammatory response.     

Antisense oligonucleotide targeting TNF‐α can suppress co‐cr‐mo particle‐induced osteolysis

The most common cause of implant failure in joint replacement is aseptic loosening due to particle‐induced osteolysis. TNF‐α has been shown to be one of the key factors in the process of osteoclastogenesis. Anti‐TNF agents are useful in the treatment of joint inflammation related to osteolysis. This study investigated the effect of a single subcutaneous dose of an antisense oligonucleotide (ASO) on particle‐induced osteolysis. We utilized the murine calvaria osteolysis model in C57BL/J6 mice. Bone resorption was measured by the toluidine blue staining. Osteoclasts were detected by tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) staining assay and were quantified by a TRAP quantification kit. Results show that bone resorption is 0.347 ± 0.09 mm² in mice with particle implantation, and decreased to 0.123 ± 0.05 mm² and 0.052 ± 0.02 mm² after ASO treatment with low and high doses, respectively. The number of osteoclasts in animal calvaria treated with ASO is reduced compared with that of untreated animals, and the quantification results indicate that about 90% of osteoclastogenesis is suppressed by the ASO. In addition, the osteoclastogenesis can be reestablished by the addition of TNF‐α. In conclusion, we demonstrate that the antisense oligonucleotide targeting to TNF‐α can suppress osteolysis induced by metal particles in a murine calvaria model. This new finding may be of value in the search for novel therapeutic methods for implant loosening. © 2008 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 26:1114–1120, 2008     

髓系触发受体-1在脆弱类杆菌诱导小鼠脓毒血症中的作用

目的 探讨小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体(Lentivector,LV)TREM-1 vshRNA对脆弱杆菌脓毒血症小鼠脾脏中促炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达及NF-κB通路的影响.方法 将清洁级BALB/c雄性小鼠分成4组,即正常对照组(C组),脆弱类杆菌脓毒症模型生理盐水组(S组),TREM-1 vshRNA干扰实验组(T组)和GFPvshRNA干扰实验组(G组).观察各组中小鼠脾内TREM-1,TNF-α,IL-1β,IL-6的蛋白表达以及IkBa,pDAP12,NF-κB p65的表达情况的变化.结果 与C组比,T组TREM-1 mRNA及蛋白表达均有显著增加(P＜0.01);T,G,S组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较C组显著增加(P＜0.01);T组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较S,G组明显降低(P＜0.01).S组脾细胞中的pDAPl2和核内NF-κB p65蛋白表达水平明显增强,IκBa蛋白表达水平降低;而T组与S组比较,pDAP12和NF-κB p65蛋白的表达水平显著下调.结论 小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体可选择性抑制TREM-1表达,下调脆弱类杆菌诱导的促炎症因子的分泌,而转染可能是通过下调DAPl2的表达,稳定IkBa/NF-κB复合物,抑制TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8基因的转录,而对脆弱类杆菌脂多糖炎症反应产生抑制作用.     

雷奈酸锶治疗人工关节磨损颗粒诱导骨溶解的实验研究

目的研究雷奈酸锶治疗人工关节磨损微粒诱导骨溶解的作用,探讨防治人工关节置换术后假体松动的可能性。方法采用小鼠建立Co—Cr-Mo微粒诱导骨溶解的颅骨模型,分为4组：A组为空白组,B组为颗粒对照组,C组为低剂量治疗组,D组为高剂量治疗组。28d后取出颅骨进行HE染色观察颅骨骨溶解面积,通过EUSA方法检测TNF—α和RANKL的表达,qRT-PCR方法检测RANKL和OPG的表达并分析RANKL／OPG比率变化。结果雷奈酸锶可以明显抑制微粒诱导的骨溶解,对下调TNF-α和RANKL蛋白有确切的疗效,而且这种改变与雷奈酸锶的剂量有关。虽然其对OPG基因转录的抑制作用不太明显,但是对RANKL基因转录和RANKL／OPG基因转录比率的调节与HE染色切片上骨溶解程度相一致。结论雷奈酸锶能够抑制小鼠颅骨骨溶解模型中TNF-α和RANKL的表达,并下调RANKL/OPG基因转录比率,从而抑制了由微粒诱导的骨溶解,为临床预防人工关节置换术后假体松动提供了理论依据。     

连续性血液净化对重症急性胰腺炎血浆炎症介质的影响

【摘要】　目的 探讨连续性血液净化(CBP)对重症急性胰腺炎(SAP)患者血浆炎症介质的影响。方法 对36例重症急性胰腺炎患者进行CBP治疗,使用ELISA法检测治疗前和治疗后24 h、48 h血浆TNF -α、IL -1β、IL -6、IL -8的浓度,并与同期健康人群做比较。结果 31例患者好转出院,存活率为86.1%,血生化指标明显改善;SAP患者血浆TNF -α、IL -1β、IL -6、IL -8浓度显著高于正常对照组,CBP治疗24 h后四种细胞因子明显低于治疗前水平(P<0.05),治疗48 h后有不同程度的回升,但仍低于治疗前水平(P<0.05)。结论 CBP可有效清除SAP患者血浆炎症介质,从而阻断全身炎症反应,改善预后。     

不同透析方式对维持性血液透析患者微炎症状态的影响

目的：比较低通量血液透析（LFHD）、高通量血液透析（HFHD）、血液透析＋血液灌流（HD＋HP）3种血液净化方式对维持性血液透析（MHD）患者微炎症状态的影响。方法：32例MHD患者,交叉对照设计,每例患者每隔4周随机接受LFHD、HFHD、HD＋HP3种之一治疗,每种治疗持续12周,清洗期4周。治疗前、后检测超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和β2微球蛋白（β2-MG）的水平。比较3种治疗对血清hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG的影响。结果：（1）3种治疗方式治疗前hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG、血清白蛋白（Alb）水平组间比较,差异无统计学意义。治疗12周后,LFHD组hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG水平均较治疗前上升;HFHD组及HD＋HP组hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG水平均较治疗前下降（P〈0.05或0.01）,HD＋HP组较HFHD组下降更明显,两组差异有统计学意义（P〈0.01）;三组Alb水平与治疗前相比差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）单次治疗前后,每两组之间相比hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG下降差异均有统计学意义（P〈0.01）,HD＋HP组下降最明显。结论：HFHD、HD＋HP可以降低MHD患者的血清hs-CRP、IL-6、TNF-α、β2-MG水平,改善微炎症状态,以HD＋HP效果最好。     

慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松时肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达及意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary diseases,COPD）患者骨密度（BMD）的变化与血清炎性细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的关系。方法选取稳定期COPD患者72例（COPD组）,另选匹配正常对照组60例,所有对象均测定腰椎（L2-4）的BMD、肺功能,并测定所有入选对象的血钙、血磷、血清碱性磷酸酶（ALP）、TNF-α、IL-6、骨钙素及尿吡啶啉/肌酐。结果 COPD组与对照组比较血钙、血磷、ALP差异均无统计学意义（P〉0.05）;COPD组BMD及骨钙素较对照组低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）,且COPD组血清TNF-α、IL-6及尿吡啶啉/肌酐较对照组高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。COPD患者的血清TNF-α、IL-6水平分别与BMD及骨钙素均呈负相关（均P〈0.05）,与尿吡啶啉/肌酐呈正相关（r=0.457,P〈0.05）,而与血钙、血磷、ALP无相关性（P〉0.05）。结论 COPD患者骨吸收增加、BMD减低与炎症因子TNF-α、IL-6的增高相关,COPD的全身炎症反应可能促进骨质疏松的发生。     

硫化氢在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用

目的：探讨硫化氢（H2S）在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用.方法：雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、脓毒症组、脓毒症＋Naris组、脓毒症＋DL-炔丙基甘氨酸（PAG）组和脓毒症＋氨基-羟乙酸（AOAA）组.除对照组行假手术外,其余各组采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制作大鼠脓毒症模型,术前30 min分别腹腔注射等量生理盐水、NariS（10 mg/kg）、PAG（50 mg/kg）、AOAA（20 mg/kg）.20 h后处死大鼠,取结肠组织,测定其H2S、肿瘤坏死因子-а（TNF-а）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量,髓过氧化物酶（MPO）活性和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）mRNA、胱硫醚-β-合成酶（CBS）mRNA表达水平,光学显微镜下观察结肠组织病理学变化.结果：①与对照组相比,脓毒症组结肠组织中H2S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性明显增强（P〈0.01）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平提高（P〈0.01）,其组织结构遭到破坏,炎性细胞浸润增多.②与脓毒症组相比,脓毒症＋NariS组结肠组织中H：S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性增强（P〈0.05）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平降低（P〈0.01）,结肠组织结构破坏加剧,更多炎性细胞浸润.与脓毒症组相比,脓毒症＋PAG组和脓毒症＋AOAA组结肠组织中H2S,TNF-а、IL-1β浓度降低,MPO活性减弱.但脓毒症＋PAG组各指标变化的差异无统计学意义,而脓毒症＋AOAA组各指标的变化差异有显著性（P〈0.01）;两组结肠组织结构破坏减轻.炎性细胞浸润减少.结论：脓毒症时,结肠组织内主要由CBS催化产生H2S,增多的H2S通过增强炎症反应加重结肠黏膜损伤.     

抑制低氧诱导因子-1α表达对小鼠肠缺血／再灌注所致肺损伤的影响

目的探讨通过低氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1α,HIF—1α）抑制剂YC-1预先抑制该基因表达对肠缺血,再灌注（ischemia／reperfusion,I／R）致急性肺损伤的影响。方法6周～8周龄健康雄性C57BL／6小鼠36只,采用随机数字表法随机分为3组（每组12只）：假手术组（S组）、I／R组和I／R±YC—I预处理组（YC—I组）。YC-1组于术前10min腹腔注入YC-1（1mg／kg）,采用夹闭C57BL／6小鼠肠系膜前动脉45min后再灌注6h的方法造成肠YR损伤模型,取小鼠肺标本称重后计算肺湿干重比,苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后观察肺组织病理学改变,分光光度法测定髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性、酶联免疫吸附测定法检测肺组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素（interleukin,IL）-1β表达,反转录-PCR法检测HIF-1α、Toll样受体4（toll—likereceptor4,TLR4）mRNA的表达。结果与I／R组比较,预先抑制HIFqct表达使肺实质水肿及中性粒细胞浸润聚集减少,肺组织病理学损伤减轻,肺湿干重比显著降低（RnOI）,MPO活性下调[（1．88±0．82）u／g],TNF-α[（187±20）ng／L）]、IL一1β[（536±54）ng／L）]、HIF-1α、TLR4mRNA的表达水平下降（P〈0．05）。结论YC-1预处理可使肺组织TLR4mRNA表达下调,抑制肠I／R肺组织中促炎细胞因子的释放,明显减轻小鼠肠I／R后急性肺损伤。