地塞米松对急性肺损伤大鼠水通道蛋白1表达的影响

目的研究急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织中水通道蛋白1（AQP1）的表达变化,探讨地塞米松治疗ALI的可能机制,为临床治疗ALI开辟新的治疗措施提供理论依据和实践方向。方法30只SD大鼠随机分成3组（每组10只）,即油酸致ALI组（OA组）、地塞米松治疗组和生理盐水对照组（NS组）。观察6 h后测定动脉血氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、pH值、肺湿/干（W/D）比值,并采用免疫组化方法检测各组大鼠肺组织中AQP1的表达变化及对肺组织进行常规病理染色。结果与NS组相比OA组AQP1的表达显著降低（P〈0.05）,而地塞米松疗组AQP1的表达显著高于OA组（P〈0.05）,同时地塞米松治疗组能使血气明显改善（P〈0.05）,W/D比值下降（P〈0.05）,肺组织损伤减轻。结论地塞米松对ALI大鼠AQP1表达的调节可能是其治疗ALI的有效途径之一。     

急性支气管哮喘小鼠肺组织水通道蛋白1表达的变化及乙酰唑胺对水通道蛋白1表达的影响

目的通过水通道蛋白1（aquaporins1,AQP1）在急性过敏性支气管哮喘（简称哮喘）小鼠肺组织表达的变化,以及乙酰唑胺对AQP1表达的影响,探讨哮喘的分子发病机制,为哮喘防治提供新思路。方法40只C57BL／6小鼠随机分为A、B、C、D、E5组,其中A组为磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline,PBS）非哮喘组、其余4组建立哮喘模型,B组、C组、D组为乙酰唑胺干预组（300mg／kg、200mg／kg、100mg／kg）和哮喘对照组（E组）,干预组在激发阶段给予不同剂量的乙酰唑胺腹腔注射。5d后处死小鼠观察肺组织形态学改变;测肺湿干重比;支气管肺泡灌洗液的细胞总数、分类计数以及白介素5（IL-5）和γ干扰素（IFN-γ）水平;用RT—PCR、Western blot和免疫组织化学及免疫荧光法检测肺组织AQP1 mRNA及AQP1的水平和分布情况。结果①哮喘对照组肺组织的湿干重比值比非哮喘组明显增高（P〈0．05）;乙酰唑胺干预组肺组织的湿干重比值较哮喘对照组显著减低（P〈0．05）,与剂量呈负相关;②哮喘对照组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数和IL-5水平均高于非哮喘组（P〈0．05）,IFN-γ水平低于非哮喘组（P〈0．05）,治疗后细胞总数、嗜酸粒细胞数、中性粒细胞、淋巴细胞均明显下降（P〈0．05）,且与剂量呈正相关;③哮喘对照组AQP1在气管黏膜上皮、微血管内膜上皮、支气管周围血管床、炎症细胞呈强阳性表达,其表达水平明显高于非哮喘组（P〈0．01）,使用乙酰唑胺干预后表达明显低于哮喘对照组（P〈0．05）,下降的幅度与剂量呈正相关性;但AQP1 mRNA检测结果无明显差异（P〉0．05）;④哮喘对照组肺组织可见较弥漫的炎性改变;而乙酰唑胺干预组炎性改变则明显减轻。结论①AQP1在急性哮喘小鼠肺组织内及炎症细胞上过度表达,哮喘组呈强阳性表达;②乙酰唑胺对AQP1有?     

臭氧预处理对内毒素血症大鼠急性肺损伤的影响及其机制探讨

目的：观察臭氧预处理对脂多糖（ LPS）诱导的内毒素血症大鼠急性肺损伤（ ALI）的影响,并探讨其机制。方法将40只Wistar大鼠随机分成NS、LPS、OZ、OL组各10只。 OZ、OL组给予臭氧1 mg/kg（50μg/mL）,1次/d,连续10 d;LPS、OL组于第11天腹腔注射LPS 12．5 mg/kg;NS组仅腹腔注射等量生理盐水。给药8 h后处死所有大鼠,留取肺组织标本。测定肺组织湿/干重比值（ W/D）,电镜下观察肺组织病理变化,免疫组化SP法检测肺组织水通道蛋白1（AQP-1）表达。结果 NS、OZ、LPS、OL组肺组织W/D分别为3．87±0．14、3．92±0．21、5．78±0．15、4．32±0．25;LPS组高于NS组,OL组高于NS组但低于LPS组,P均＜0．01;NS组与OZ组比较,P＞0．05。电镜下,LPS组肺泡Ⅱ型上皮细胞出现明显病理改变, OL组病理损伤有所减轻。 NS、OZ、LPS、OL组肺组织AQP1蛋白表达量分别为0．215±0．032、0．207±0．041、0．165±0．013、0．194±0．011;LPS、OL组较NS组表达降低,OL组较LPS组表达增加,P均＜0．01。结论臭氧预处理可以减轻LPS血症大鼠ALI程度,增加肺组织AQP1表达可能是其作用机制之一。     

脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1、AQP-5表达变化及意义

目的探讨脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP-1）、AQP-5表达变化及意义。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组、假手术组、模型组,每组20只。模型组采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症急性肺损伤模型,假手术组腹部探查取出盲肠后还纳腹腔,空白对照组不做手术处理。在造模后3、6、12、24h,每组各取出5只大鼠,处死后取肺组织,采用实时荧光定量PCR和Westernblot法检测肺组织AQP-1、AQP-5mRNA和蛋白。结果模型组造模后6h光镜下可见肺泡壁增厚、毛细血管充血、肺间质肺泡水肿、灶性出血,12h时上述改变最明显;空白对照组和假手术组肺组织无明显病理变化。模型组造模后6、12、24h时AQP1、AQP5mRNA及蛋白表达较同时点假手术组、空白对照组均降低（P均〈O．01）;iS模后6、12、24b时AQPl、AQP5mRNA及蛋白表达较同组3h均降低（P均〈0．01）。结论AQP．1、AQP．5表达降低在大鼠脓毒症急性肺损伤过程中可能发挥重要作用。     

卡托普利对大潮气量机械通气大鼠肺组织小窝蛋白-1表达的影响

目的通过观察血管紧张素转换酶抑制剂-卡托普利干预后大鼠肺组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及小窝蛋白-1（Cav-1）表达量的变化,探讨卡托普利对大潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤的防治作用。方法24只健康雄性sD大鼠,随机分为对照组、大潮气量通气组（H—VT）和卡托普利干预组（CAP）,每组8只。光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变,测定肺组织湿干重比值（W／D）和支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白含量（TP）。采用ELISA法检测肺组织AngU含量,免疫组织化学法（SABC）测定大鼠肺组织Cav-1的表达水平。结果H—VT组大鼠肺组织病理损伤程度,肺组织W／D比值、BALF中TP含量和肺组织AngⅡ含量均明显高于对照组和CAP组（均P〈0．01）,CAP组和对照组相比较,除AngⅡ含量差异无统计学意义外（P〉0．05）,其余指标均增高（均P〈0．01）;H—VT组大鼠肺组织Cav-1表达水平明显低于对照组和CAP组（均P〈0．01）,且CAP组该指标明显低于对照组（P〈0．01）;各组大鼠肺组织Cav-1与AngⅡ含量之间呈负相关（r=-0．821,P〈0．01）。结论大潮气量机械通气通过诱导大鼠肺组织AngⅡ高表达导致Cav-1表达水平降低,可能是呼吸机所致肺损伤（VILI）发病的重要因素之-。卡托普利可通过抑制肺组织AngⅡ生成,上调Car-1表达水平,对VILI起一定保护作用。     

山姜素对急性重症胰腺炎大鼠肺损伤中水通道蛋白-1表达的影响

目的探讨山姜素对急性重症胰腺炎(SAP)肺损伤的保护作用是否与水通道蛋白(AQP)-1表达相关。方法选取60只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(Control组),假手术组(Sham组)、模型组(SAP组)、山姜素治疗组(Alpinetin组)每组15只。以逆行注入15 g/L熊去氧胆酸钠(1 ml/kg)30 s注射制作SAP模型。各组均于造模8 h后剖杀,提取肺组织。检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、湿/干重比及对肺脏进行病理学评分;取材测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;RT-PCR检测肺组织AQP-1 mRNA的表达,免疫组化法检测肺组织AQP-1的表达。结果 SAP组与Sham组相比,SAP组肺组织损害程度明显升高(P0.01),血清TNF-α,MPO活性明显增加(P0.05)。AQP-1 mRNA与AQP-1蛋白表达显著下调(P0.05)。Alpinetin组与SAP组相比,Alpinetin组肺干/湿比值、肺组织病理损害程度、血清TNF-α明显降低(P0.05),AQP-1 mRNA和AQP-1蛋白表达则明显升高(P0.05),AQP-1表达水平与TNF-α呈负相关。结论应用山姜素能够对SAP肺损伤起到明显的保护作用,其机制可能与抑制肺组织分泌TNF-α和上调AOP-1水平有关。     

急性胰腺炎大鼠肺组织中水通道蛋白-1的表达及功能

目的:研究水通道蛋白-1(AQP-1)在急性胰腺炎大鼠肺组织中的表达及其功能,探讨其表达与肺损伤的关系.方法:将Wistar大鼠分为假手术组(n=24)、肺损伤组(n=24)、地塞米松治疗组(n=24).采用逆行胰胆管注射15 g/L去氧胆酸诱发大鼠急性胰腺炎肺损伤模型,地塞米松组于造模后立即于尾静脉注射地塞米松2 mg/kg.每组分别于造模后4,8,12 h剖杀,取血及肺组织.通过检测血淀粉酶、血气、肺干/湿比值和肺组织病理切片判断胰腺炎及肺损伤的严重程度,放免法测血清TNF-α水平,RT-PCR检测肺组织AQP-1 mRNA的表达,免疫组化法检测肺组织AQP-1的表达.结果:与假手术组相比,胰腺炎肺损伤组血清淀粉酶、肺干/湿比值、TNF-α、肺组织病理损害程度明显升高,血氧、AQP-1mRNA(4 h:0.403±0.018 vs 0.794±0.015,P＜0.01;8 h:0.382±0.025 vs 0.812±0.032,P＜0.01;12 h:0.361±0.016 vs 198±5,P＜0.01)和AQP-1蛋白(4 h:104±4 vs 193±8,P＜0.01;8 h:96±5 vs 201±7,P＜0.01;12 h:94±3 vs198±5,P＜0.01)表达显著下调.与肺损伤组相比,地塞米松组血清淀粉酶、TNF-α、肺干/湿比值、肺组织病理损害程度明显降低,血氧、AQP-1 mRNA(4 h:0.681±0.031 vs 0.403±0.018,P＜0.05;8 h:0.763±0.013 vs 0.382±0.025,P＜0.05;12 h:0.784±0.032 vs 0.361±0.016,P＜0.05)和AQP-1的蛋白(4 h:145±6 vs104±4,P＜0.05;8 h:152±8 vs 96±5,P＜0.05;12 h:154±4 vs 94±3,P＜0.05)表达则明显升高,且与TNF-α的水平呈负相关性.结论:水通道蛋白-1表达与急性胰腺炎的肺损伤密切相关,其表达可能与TNF-α有关,地塞米松可上调其表达而减轻肺水肿.     

人脐带间充质干细胞对ALI治疗作用的研究

目的探讨输入人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMscs）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠ALI的治疗作用。方法将30只Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组、ALI模型组和HUMSCs移植组,每组10只。健康大鼠LPS气管滴入方法建立ALI模型,尾静脉输入HUMSCs。输入7h后,处死各组大鼠,取肺组织行病理学观察,测定肺湿／干重比（W／D）,ELISA法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-1β的含量。结果肺组织病理学显示：ALI模型组大鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、水肿、出血,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;HUMSCs移植组大鼠肺组织损伤程度明显减轻。与正常对照组比较,ALI模型组W／D、TNF-α和IL-1β含量明显升高（P〈0．05）。与Au模型组比较,HUMSCs移植组W／D、TNF-α和IL-1β含量明显降低（P〈0．05）。结论输入HUMSCs能减轻ALI,并能降低肺W／D和肺组织TNF-α及IL-1β含量。     

糖尿病大鼠肾脏髓质水通道蛋白2的表达和意义

目的 检测链脲佐菌素诱导的糖尿病（DM）大鼠。肾脏髓质集合管水通道蛋白2（AQP-2）的变化。方法 实验大鼠分为正常对照组（Con组）和糖尿病组（DM组）。在成模12周后，分别用光学显微镜、电子显微镜等方法观察。肾脏形态变化，用免疫组织化学、核酸原位杂交和逆转录PCR方法检测DM大鼠肾髓质集合管AQP-2的表达。结果 （1）实验初DM组与Con组之间血糖、体重差异无统计学意义（P〉0．05），但12周时DM组血糖明显升高（P〈0．01），尿量高于Con组（P〈0．01），体重明显低于Con组（P〈0．01），DM组相对。肾重高于Con组（P〈0．01），二组间血肌酐无明显变化（P〉0．05）。（2）DM组尿渗透压低于Con组（P〈0．05），血渗透压高于Con组（P〈0．05）。（3）DM组大鼠血浆加压素水平比Con组明显升高（P〈0．05）。（4）光镜下。肾脏结构未见明显改变，电镜下可见。肾脏髓质集合管亮细胞和暗细胞结构改变。（5）DM大鼠肾脏髓质集合管AQP-2mRNA及蛋白质的表达增加。结论 DM大鼠肾脏髓质AQP-2mRNA及蛋白质的表达增加，并伴有早期。肾脏病理改变。尿AQP-2有望作为糖尿病。肾病早期诊断指标。     

1，6-二磷酸果糖对LPS急性肺损伤大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2表达的影响

目的：观察1,6-二磷酸果糖（FDP）预先给药对内毒素性急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）表达的影响,探讨FDP可能的保护机制。方法：静脉注射脂多糖（LPS）5mg／kg,复制大鼠ALL模型。雄性SD大鼠30只随机分为3组,对照组、LPS组和LPS＋FDP组,其中LPS＋FDP组于静脉注射LPS前1h腹腔内注射FDP（250mg／kg）。3组于注射LPS或生理盐水后6h颈动脉取血测血气分析,并测定肺组织湿、干重量,计算湿／干重量比（W／D）,RT—PCR法测定肺组织MIP-2mRNA的表达;ELISA法测定肺组织TNF-a和IL-1β的含量。结果：与对照组相比,LPS组和LPS＋FDP组MIP-2mRNA表达增加,肺组织W／D、TNF-a和IL-1β含量上升（P〈0．05）;与LPS组相比,LPS＋FDP组MIP-2mRNA表达降低,肺组织W／D、TNF-a和IL-10含量降低（P〈0．05）。结论：FDP通过下调大鼠LPS诱导的MIP2表达,降低TNF-a和IL-1β的释放,减轻ALI大鼠肺部的炎症反应,保护肺组织。

Abstract：

Objective： To investigate the effects of fructose-1, 6 diphosphate （FDP） pretreatment on the expression of macrophage inflammatory protein 2 （MIP 2） in rats with acute lung injury （ALI） induced by lipopolysaccha ride （LPS）, and to explore its possible protective mechanism. Methods.. The rat models with acute lung injury were established via femoral vein injection of lipopolysaccharide （LPS, 5mg/kg）. Thirty male SD rats were randomly divided into 3 groups （n = 10） ： control group, LPS group and LPS ＋ FDP group. Rats in LPS ＋ FDP group pretreated with FDP （250 mg/kg） intrapentoneally 1 hour before LPS injection. Artery blood gases were analyzed 6 hours after LPS or normal saline administration. Samples of lung tissue were sent for the lung wet-to-dry weight ratio determination. The expression of MIP-2mRNA was detected by the method of RT-PCR; and content of TNF-a and IL-1β were detected by the method of ELISA. Results： Compared with those of control group, the expression of MIP- 2mRNA in the cytoplasm and the levels of TNF-a, IL-1β and D/W in the lung tissue were increased in LPS group and LPS＋ FDP group （P〈0. 05） ; while they were decreased in LPS ＋ FDP group compared with those of I.PS group （P〈0. 05）. Conclusions： FDP may decrease the contents of TNFa and IL-1β and alleviate the inflammation of acute lung injury in rat by down-regulating the expression of MIP-2 induced by LPS.     

阿托伐他汀对大鼠动脉粥样硬化血红素氧合酶-1表达的影响

目的:建立大鼠动脉粥样硬化模型,探讨阿托伐他汀对大鼠动脉粥样硬化血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法:36只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=10,普通饮食)、模型对照组〔n=13,维生素D3(VD3)+高脂饮食〕和阿托伐他汀治疗组(n=13,VD3+高脂饮食和阿托伐他汀)。14周后处死大鼠,取血测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;HE染色观察主动脉壁病理组织学变化;免疫组织化学法、逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测斑块内HO-1及mRNA的表达。结果:模型对照组和阿托伐他汀治疗组血清脂质水平差异无统计学意义(P>0.05),均显著高于正常对照组(P<0.05);阿托伐他汀治疗组和模型对照组斑块内HO-1阳性细胞面积/扫描面积明显高于正常对照组[(6.16±2.05)(P<0.05)],阿托伐他汀治疗组(24.26±3.04)显著高于模型对照组[(16.20±2.33)(P<0.05)];模型对照组HO-1 mRNA的表达(0.998±0.019)较正常对照组(0.478±0.018)明显升高(P<0.05),阿托伐他汀治疗组(2.572±0.015)较模型对照组进一步升高(P<0.05)。结论:阿托伐他汀可能通过上调HO-1的表达而发挥其抗动脉粥样硬化的保护作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

PIAS1对重症急性胰腺炎继发急性肺损伤血气屏障影响的研究

背景:研究发现STAT活化抑制蛋白1(PIAS1)可抑制急性坏死性胰腺炎(ANP)继发急性肺损伤,但机制尚不明确。目的:探讨PIAS1对ANP大鼠继发急性肺损伤血气屏障的作用及其机制。方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-Null质粒。以3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导大鼠ANP模型,并于造模前1 d分别经阴茎静脉注射Ad5/F35-PIAS1、Ad5/F35-Null和PBS液,设立假手术组作为对照。造模16 h后处死大鼠。观察胰腺和肺组织的病理学变化和超微结构改变。测定支气管肺泡灌洗液炎性细胞计数和肺组织湿/干重系数,以免疫组化法检测RECK定位表达,蛋白质印迹法检测肺组织RECK、MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达。结果:与ANP组和Ad5/F35-Null组相比,Ad5/F35-PIAS1组胰腺和肺组织病理学明显改善,肺组织病理学评分显著降低(P<0.01),超微结构示肺泡毛细血管间血气屏障结构破坏减轻;支气管肺泡灌洗液中性粒细胞和巨噬细胞计数、湿/干重系数均显著降低(P<0.01);肺组织RECK蛋白表达显著升高(P<0.01),MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达显著下调(P<0.01);Ad5/F35-PIAS1组上述指标与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。结论:PIAS1可能通过增强RECK蛋白表达、抑制MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达,降低血气屏障通透性,抑制炎性细胞外渗,进而改善ANP继发急性肺损伤的炎症程度。     

水通道蛋白-1在结核性胸腔积液大鼠胸膜上的表达

目的探讨胸膜上水通道蛋白-1(AQP-1)的表达与结核性胸腔积液大鼠胸液形成之间的关系。方法 48只健康Wistar大鼠随机分为结核性胸腔积液1d组,3d组,5d组和生理盐水对照组(每组各12只),实验组胸膜腔内注射标准人型结核分枝杆菌。应用免疫组织化学检测AQP-1在大鼠胸膜上的分布及蛋白质的表达。实时荧光定量RT-PCR及westernblot方法检测各组大鼠AQP-1在结核性胸腔积液形成前后胸膜上mRNA及蛋白表达的变化。结果大鼠胸腔内注射结核杆菌5d内均有双侧胸腔积液,胸腔积液量于第3d最多(4.4±1.2ml),结核性胸腔积液1d组,3d组和5d组脏壁层胸膜AQP-1mRNA和蛋白表达均高于生理盐水对照组,P均0.05。结论结核性胸腔积液大鼠胸膜的AQP-1表达增多,AQP-1的增多可能与结核性胸腔积液的形成有关。     

肺泡表面活性物质相关蛋白A在慢性心源性肺水肿大鼠肺组织中的表达

目的观察慢性心源性肺水肿大鼠肺组织病理形态学改变,研究其肺泡表面活性物质相关蛋白A及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,阐述它们在慢性心源性肺水肿发病机制中的作用。方法 14只自发性高血压大鼠高脂饮食饲养1年,建立慢性心源性肺水肿模型,14只血压正常大鼠以正常饮食饲养1年,为正常对照组,分别以免疫组织化学染色检测各组大鼠肺组织中SP-A的表达。RT-PCR法检测各组大鼠肺组织SP-A mRNA的表达,ELISA法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平。结果试验组肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SP-A mRNA表达与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关(r=0.612、r=0.702、r=0.824,P<0.05)。结论慢性心源性肺水肿大鼠的肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调,且与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关。SP-A及TNF-α、IL-1、IL-6均与慢性心源性肺水肿的发生发展过程密切相关,但因果关系不明。     

气管内滴入核仁素shRNA表达载体对脂多糖肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞活化的影响

目的建立气管内滴人核仁素shRNA表达载体的实验模型,观察其对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡巨噬细胞（AM）活化的影响,探讨AM膜核仁素在LPS致大鼠ALI中的作用及机制。方法选择健康雄性SD大鼠40只,随机分为A组（空白对照组）,B组（ALI组）,C组（转染重组质粒pBS-U6-C23shRNA并ALI组）,D组（转染对照质粒pBS-U6-ControlshRNA并ALI组）。大鼠经尾静脉注射LPS以建立Au模型,气管内滴人法转染重组质粒pBS-U6-C23shRNA表达载体,免疫印迹（Westernblot）检测AM膜核仁素蛋白表达;核酸电泳迁移率实验（EMSA）检测AM中核因子（NF-κB）活性;酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）表达。结果转染pBS-U6-C23shRNA表达载体后可以显著下调AM膜核仁素蛋白表达;减轻肺病理损伤;降低NF-κB的活性以及肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的含量。与A组相比,B组及D组的大鼠AM膜核仁素蛋白表达显著增加,组间有统计学差异（P〈0．01）;C组大鼠AM膜核仁素蛋白表达明显下调,与B组相比,组间差异有统计学意义（P〈0．01）;而D组与B组中的大鼠AM膜核仁素蛋白表达组间没有统计学差异（P〉0．05）。经LPS处理后,各组大鼠AM中NF-κB活性显著增加,与A组相比,组间差异非常明显（P〈0．01）。c组大鼠AM中NF-κB活性明显降低,与B组比较,差异显著（P〈0．05）;而D组与B组比较,组间无明显差异（P〉0．05）。经LPS诱导肺损伤后,显著增加了大鼠BALF中促炎因子TNF-α和IL-6的表达,各组和A组相比差异显著（P〈0．01）;C组大鼠BALF中TNF-α和IL-6的含量显著降低,与B组相比差异显著（P〈0．01）;而D组与B组相比,组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论气管内滴入法可以安全有效转染核仁素shRNA表达载体,抑制AM活化,减轻肺损伤,AM膜核仁素参与了LPs致大鼠ALI的发病过程。     

急性肺损伤大鼠肺水通道蛋白1和5的表达及功能的实验研究

目的观察脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL1β)对大鼠肺微血管内皮细胞(LMECs)水通道蛋白1(AQP1)表达和功能的影响;同时在LPS诱发的大鼠急性肺损伤(ALI)模型观察AQP1、AQP5表达的变化。方法(1)体外实验:将第3代LMECs随机分为LPS组、TNFα组、IL1β组和DMEM对照组,实验组分别给予LPS、TNFα、IL1β刺激,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定AQP1mRNA的表达以及免疫组化测定AQP1蛋白表达,同时采用放射性核素示踪法测定LMECs内氚水(3H2O)的放射强度。(2)体内实验:40只雄性Wistar大鼠随机分为LPS2h组、LPS4h组、LPS6h组、LPS8h组和对照组,LPS各组制成ALI模型,采用RTPCR测定ALI大鼠AQP1、AQP5mRNA表达以及免疫组化观察AQP1、AQP5蛋白表达。结果(1)体外实验:LPS、TNFα、IL1β组LMECsAQP1mRNA和蛋白表达显著低于DMEM对照组(mRNA表达分别为0.428±0.026、0.446±0.029、0.454±0.023和0.793±0.035,蛋白表达分别为0.366±0.009、0.374±0.014、0.377±0.007和0.660±0.013,P均<0.01);且LMECs内3H2O掺入量[(726±58)、(738±45)、(774±44)脉冲数/min]也显著低于DMEM对照组[(1148±70)脉冲数/min,P均<0.01]。(2)体内实验:ALI大鼠肺组织AQP1、AQP5mRNA表达(LPS2h组0.409±0.018、0.421±0.020,LPS4h组0.421±0.023、0.412±0.023,LPS6h组0.435±0.020、0.388±0.031,LPS8h组0.438±0.016、0.386±0.019)也显著低于对照组(0.794±0.015、0.787±0.022,P均<0.01)。结论AQP1、AQP5可能参与ALI/ARDS液体的异常转运,可能与肺水肿的发病机制有关。     

苦碟子对脂多糖所致急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-a的影响

目的探讨痰热清联合阿奇霉素治疗小儿肺炎的临床疗效及其对血清c反应蛋白（CRP）水平的影响。方法选取2012年1月-2013年4月我院收治的肺炎患儿94例,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,各47例。对照组采用阿奇霉素序贯疗法治疗,观察组在对照组治疗基础上加用痰热清注射液,均治疗两周。观察两组患儿疗效及治疗前后CRP水平变化。结果观察组患儿总有效率为97．9％（46／47）,高于对照组的74．5％（35／47）（P〈0．05）。治疗前,两组患儿CRP水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗后,观察组患儿CRP水平低于对照组（P〈0．05）。结论痰热清联合阿奇霉素治疗小儿肺炎效果显著,同时能够有效调节患儿血清CRP水平。