产ESBLs肺炎克雷伯菌中整合子和耐消毒剂基因的研究

目的:研究产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌整合子携带耐药基因状况及其对常用消毒剂的耐药性。方法:采用PCR方法检测77株产ESBLs和71株非产ESBLs肺炎克雷伯菌Ⅰ整合酶基因,分析Ⅰ类整合子与耐药性关系,并用耐消毒剂试验对耐消毒剂基因予以证实。结果:产ESBLs和非产ESBLs菌株中Ⅰ类整合酶扩增阳性率分别为66.2%(51/77株)和10.0%(2/20株),两者差异有统计学意义(P<0.05)。整合子阳性株对磺胺类、氨基糖苷类和环丙沙星的耐药率较高,与整合子阴性相比差异具有统计学意义(均P<0.01);耐消毒剂基因阳性株对常用消毒剂耐药能力高于阴性株。结论:Ⅰ类整合子在产ESBLs肺炎克雷伯菌中的分布明显高于非产酶株,并参与产ESBLs株多重耐药性的形成,携带耐消毒剂基因的菌株具有抗常用消毒剂的能力。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因研究

目的研究产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性以及ESBLs的基因表型.方法对500株产ESBLs肺炎克雷伯菌的可疑临床分离株进行ESBLs确证,并采用琼脂稀释法进行药敏试验;采用聚合酶链（PCR）反应分析368株产ESBLs肺炎克雷伯菌株的ESBLs基因（blaTEM、blaSHV和blaCTX-M）,分析产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs的基因表型情况.结果产ESBLs肺炎克雷伯菌筛选试验初步筛出500株,通过进一步确认试验368 （77.2％）株确认为出产ESBLs菌;368株产ESBLs肺炎克雷伯菌株中有158株（40.93％）检测到blasHv,165株（42.75％）检测到blaTEM,173株（44.82％）检测到blacTX-M;除阿米卡星、加替沙星、环丙沙星、左旋氧氟沙星外,产ESBLs肺炎克雷伯菌株和不产ESBLs肺炎克雷伯菌株对其他8种抗生素的耐药率不同（P＜ 0.01）;结论产ESBLs肺炎克雷伯菌其耐药性高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌;我院ESBLs肺炎克雷伯菌blaCTX-M比例略高.     

肺炎克雷伯菌Ⅰ型整合子的检测与鉴定

目的研究Ⅰ型整合子参与肺炎克雷伯菌耐药的分子机制。方法收集2007年至2010年某院临床分离的297株肺炎克雷伯菌,应用K-B纸片扩散法检测耐药性,采用聚合酶链式反应进行I类整合子整合酶基因的检测;整合子可变区扩增、克隆测序,分析I类整合子基因结构。结果 297株肺炎克雷伯菌中,除MEM、IPM外,对其余11种抗菌素,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株的耐药率明显高于Ⅰ类整合酶基因阴性菌株。57.91%(172/297)的菌株I类整合子整合酶基因阳性,共检测出10种不同基因盒。可变区编码耐药基因有aadA2、aadA1、aadA5、aadA3C、aacA4,介导氨基糖苷类抗菌素耐药;dhfrhI、dfrA12、dfrA14、dfrA17、dfrA1、dfrA25、dhfrhI,介导磺胺类抗菌素的耐药;aar-2,介导利福平耐药。结论Ⅰ类整合子在本院临床分离肺炎克雷伯菌中分布较广泛,主要介导氨基糖苷类和磺胺类抗菌素耐药。整合子与肺炎克雷伯菌的耐药有关,在肺炎克雷伯菌耐药性的形成和播散中具有重要作用。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的：了解我院临床分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及耐药性情况，为指导临床用药提供依据。方法：对我院1999—2005年分离的854株大肠埃希菌、300株克雷伯菌用标准纸片扩散确证法检测其ESBLs产生率；采用K-B法进行药敏检测。结果：1999年我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为26．4％和21．9％，2005年的两者检出率分别增长为48．6％和47．7oA。除亚胺培南的耐药率为0％、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星、呋喃妥因的耐药率分别为17．9％和6．2％外，2005年我院产ESBLs菌株对其他抗菌药物耐药率均达74．4％以上，且产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株。结论：医院应重视对产ESBLs菌株的检测，合理选用抗菌药物治疗感染。对于产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的治疗，亚胺培南应作为首选药物。     

广州地区泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和基因分型

目的：了解本地区泌尿系统感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌耐药特征及其基因型分布。方法：收集广州地区13家医院2001年7月～2003年8月间临床分离的尿培养阳性肺炎克雷伯菌130株,采用NCCLs规定的ESBLs初筛和确证试验方法检测ESBLs,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,并应用聚合酶链反应（PCR）方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV、CTX-M基因型检测。结果：产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为41．5％（54株）,其中66．7％（36株）携带CTX-M基因,53．7％（29株）携带SHV型基因,并有20．4％（11株）同时携带CTX-M基因和SHV型基因。产酶株的耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs细菌对青霉素类、环丙沙星及头孢菌素类耐药率较高（高达75．9～99．7％1,加酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦后耐药率有明显下降。结论：广州地区泌尿系统感染的产ESBLs肺炎克雷伯菌具有多重耐药的特点。其中CTX-M型是流行的基因型。     

铜绿假单胞菌I类整合子相关基因的解析和定位

目的对4株铜绿假单胞菌临床菌株携带的I类整合子相关基因进行解析和定位，探讨I类整合子相关基因在细菌耐药性形成和耐药基因播散中的作用。方法采用PCR扩增、DNA测序、DNA序列比对的方法对4株铜绿假单胞菌临床菌株携带的I类整合子相关基因进行解析，采用接合试验对该类整合子进行定位分析。结果4株铜绿假单胞菌I类整合子都含有耐药基因．该耐药基因在相应菌株中发挥耐药作用；该菌整合子位于质粒上。结论I类整合子耐药基因在铜绿假单胞菌耐药性形成和耐药基因的播散中发挥作用。     

Ⅰ类整合子介导大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药机制的初步研究

目的了解临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中I类整合子的分布情况,探讨整合子与细菌耐药之间的关系。方法琼脂平皿稀释法进行药敏试验;双纸片法筛选出产ESBLs的菌株;运用PCR扩增、DNA测序及DNA序列比对等方法对其携带的I类整合子相关耐药基因进行分析。结果 36株大肠埃希菌与46株肺炎克雷伯菌对头孢克肟、头孢克洛、头孢氨苄、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢噻肟钠、阿莫西林纳/舒巴坦钠、氨苄西林钠/舒巴坦钠及头孢哌酮/舒巴坦钠等的耐药率分别为61%、86%、86%、50%、75%、64%、39%、47%、30%与65%、63%、78%、52%、67%、54%、48%、41%、28%;10株细菌检测出产ESBLs,其中大肠埃希菌4株,肺炎克雷伯菌6株,并全部检测出1类整合子,其整合子可变区的耐药基因排列顺序与GenBank登录号为NC010410的菌株达到100%相似,并且皆含有blaVEB-1耐药基因盒。结论Ⅰ类整合子及整合子相关基因盒在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中分布广泛,整合子在细菌耐药中发挥作用。     

产AmpC酶的克雷伯菌药敏结果分析及质粒介导的AmpC和ESBLs耐药基因检测

目的 了解克雷伯菌的耐药性及产AmpC菌株同时产ESBLs药敏的变化。方法 采用Vitek60型和Vitek32型、纸片扩散法（KB法）测定42株产AmpC酶同时产ESBLs克雷伯菌的药敏结果，并与24株产AmpC酶但不产ESBLs克雷伯菌和138株不产AmpC酶但产ESBLs的克雷伯菌药敏结果对比分析；采用PCR分析产AmpC酶但不产ESBLs肺炎克雷伯菌的AmpC基因型。结果 产AmpC不管是否产ESBLs的克雷伯菌对亚胺培南敏感，对其他抗生素均有不同程度的耐药；单纯产ESBLs时，第四代头孢菌素如头孢吡肟对其活性较好，但产AmpC酶同时产ESBLs时，令头孢吡肟几乎失去活性。肺炎克雷伯菌产AmpC酶但不产ESBLs的20株菌中7株检出blaDan基因，占35％，1株检出blaMIR基因，占5％。另外同时产AmpC酶和ESBLs的20株肺炎克雷伯菌中100％检出blaTEM基因，90％检出blacTX-M-1。基因，100%检出blaSHV基因，85％检出blaDHA基因，15％检出blaMIR基因，90％检出不同的氨基糖苷类修饰酶基因。结论 克雷伯菌产AmpC酶和同时产ESBLs的耐药性比单纯产AmpC酶的耐药性更高、更显著；肺炎克雷伯菌产AmpC酶的主要基因型为DHA，对同时存在2～6种不同类型耐药基因的克雷伯菌，碳青霉烯类药物亚胺培南的体外活性最好。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性分析

目的分析产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的耐药性，指导临床合理用药。方法采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验。结果2种细菌ESBLs总阳性检出率为60．2％（153／254）；肺炎克雷伯菌ESBLs为60．2％（53／88）；大肠埃希菌为60．2％（100／166）；产ESBLS菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药，仅对美罗培南非常敏感，产ESBLS菌株对抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株。结论医院及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势以指导临床用药至关重要。     

儿童志贺菌Ⅰ类整合子及与产超广谱β-内酰胺酶基因关系的研究

目的：研究儿童志贺菌Ⅰ类整合子表达及其与产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因的相关性。方法：采用PCR方法检测60株产ESBLs志贺菌基因分型以及检测60株产ESBLs与60株非ESBLs志贺菌Ⅰ类整合酶基因,以分析Ⅰ类整合子与细菌耐药性的关系以及与ESBLs基因的关系。结果：儿童临床产ESBLs志贺菌耐药基因分型以CTX-M型最多见（85.0%）,其次为TEM-1型（50.0%）。产ESBL菌株基因分型分布情况以CTX-M型最多见（56.7%）,其次为TEM-1+CTX-M型（20.0%）和TEM-1型（20.0%）。产ESBLs和非产ESBLs菌株中Ⅰ类整合酶扩增阳性例数分别是55例（91.7%）和15例（25.0%）,两组整合子阳性率比较差异有统计学意义（P<0.01）,同时Ⅰ类整合子表达与ESBLs具有相关性（R=0.67,P<0.01）;Ⅰ类整合子阳性的菌株耐药性明显高于Ⅰ类整合子阴性的菌株,整合子阳性株对环丙沙星、左氧氟沙星以及复方磺胺甲噁唑耐药率较高,依次为84.3%、58.6%和90.0%。结论：儿童产ESBLs志贺菌中Ⅰ类整合子携带率明显高于ESBLs阴性菌株,显示儿童志贺菌Ⅰ类整合子与ESBLs基因之间存在密切相关性。     

医院产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌临床分布及其耐药性的分析

目的：讨论医院产ESBLs （超广谱β-内酰胺酶）大肠埃希菌临床分布情况,并对其进行耐药性分析,为临床医师合理选用抗菌药物提供依据。方法：以某院2012年1月-2015年1月各个临床科室送检的标本中分离724株大肠埃希菌作为研究对象,采用表型确证试验检测ESBLs,并分析其分布及耐药性情况。结果：某院自2012年1月-2015年1月共检出724株大肠埃希菌;感染部位以分泌物来源最为常见,分布的主要科室是呼吸科（含ICU）、普外科及肾内科。共分离得到产ESBLs菌株248株（34.3%）;产ESBLs大肠埃希菌对美罗培南以及亚胺培南均无耐药性,而对于其他抗菌药物,其耐药率则均明显高于不产ESBLs大肠埃希菌。结论：产ESBLs大肠埃希菌具有较强的耐药性,临床应加强对其耐药性及感染率的监测。     

佛山南海地区肺炎克雷伯菌分布及耐药特征

目的了解2012年我院肺炎克雷伯菌的分布及耐药特征,为临床抗感染治疗和合理选择抗菌药物提供依据。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感实验,药敏结果按美国CLS12012版判断标准,WHONET5．4软件及SPSS13．0软件进行数据分析。结果四个季度该菌的构成比分别为9．6％、12：4％、12．4％、12．8％,ESBLs检出率分别为38．2％、24．7％、36．3％、36．9％,产ESBLs菌株耐药率明显高于非产ESBLs菌株,差异具有统计学意义（P〈0．05）。产ESBLs菌株对β-内酰胺加酶抑制剂的复合抗生素的敏感性下降。结论本地区肺炎克雷伯菌呈高分布状态,产ESBLs株高流行,整体呈上升趋势,经验性治疗可首选碳青霉烯类,β-内酰胺加酶抑制剂的复合抗生素也可优先选择。加强细菌耐药监测对抗菌药物的临床合理应用和控制细菌耐药性传播具有重要意义。     

尿路感染病原菌中产超广谱β-内酰胺酶菌的药敏分析

目的研究尿路感染病原菌中产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药状况,为临床合理用药提供参考。方法收集本院2008年1月～2008年12月尿液标本分离出的病原菌326株,用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗菌药物的敏感性实验,ESBLs纸片法筛选和确证试验。操作按NCCLS-2006年标准进行。结果326株病原菌中分离出革兰阴性杆菌223株,其中产ESBLs的有99株,占44．40％,分别为大肠埃希菌73株,肺炎克雷伯菌26株。产ESBLs大肠埃希菌对20种抗菌药的敏感性排在前3位的是美罗培南（100％）、亚胺培南-西司他丁（100％）、阿米卡星（84．9％）。产ESBLs肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的敏感性排在前3位的是芙罗培南（100％）、亚胺培南-西司他丁（100％）、哌拉西林-他唑巴坦（73．1％）。结论本院尿路感染病原菌中分离出的产超广谱β-内酰胺酶菌多重耐药率高,临床应参考药敏结果,合理选用抗菌药物。     

肺炎克雷伯菌428株临床分布及耐药性分析

目的：探讨肺炎克雷伯菌的临床分布及对抗菌药物的耐药情况,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法收集2008年1月至2011年12月该院住院患者各类标本中分离的肺炎克雷伯菌428株,对其临床分布及药敏试验结果进行回顾性分析。结果428株肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌183株（42.76％）。药敏试验结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低,分别为0.00%（0/183）、12.02%（22/183）和18.03%（33/183）;对头孢菌素类和单环β-酰胺类抗菌药物呈现高度耐药性;对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药也存在较高耐药性,其中喹诺酮类的耐药率变化最为显著。结论肺炎克雷伯菌耐药现象严重,特别是产ESBLs肺炎克雷伯菌,临床医生应根据药敏试验结果并结合临床感染情况合理使用抗菌药物,有效控制耐药菌的产生,避免耐药菌株的传播。     

院内产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染临床用药分析

目的:了解院内产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染的临床用药情况。方法:对我院2005年460株产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的药敏情况及抗生素应用情况进行回顾性分析。结果:我院产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染主要集中在呼吸科、重症监护病房及神经外科。经验用药应用最多的是左氧氟沙星,其次为头孢哌酮/舒巴坦;药敏报告后用药主要为碳青霉烯类,其次为左氧氟沙星及头孢哌酮/舒巴坦。药物联用以二联应用为主,最多达六联。结论:我院治疗用药中大部分是有效合理的,但也存在不合理、不规范应用现象,应引起重视。     

辽宁地区沙门菌整合子与耐药相关性研究

摘要：目的 及时掌握辽宁地区沙门菌整合子的分布以及对常用抗菌药物的耐药情况,获取沙门菌整合子与耐药性的相关性,从而为临床用药及治疗提供指导。方法 本文对来源于食品以及病患的149株沙门菌,利用PCR扩增的方法,进行整合子类别的筛选,并将扩增的整合子基因盒进行基因测序,同时通过药敏板测定(耐药性实验)对沙门菌与15种临床常用抗菌药物的耐药相关性进行研究。结果 149株沙门菌中未发现第II类、第III类整合子,检出第I类整合子的菌株50株,I类整合子阳性率为33.6%。50株整合子阳性菌株中25株携带耐药基因盒,片段范围从1500~1800 bp。测序结果表明,其中22株整合子携带dfrA17-aadA5基因盒,2株携带dfrA12-aadA2基因盒,1株首次检出罕见耐药基因盒linG。根据整合子携带情况不同,对15种抗菌药物的耐药率进行对比分析,结果显示整合子阳性菌对9种抗菌药物的耐药率显著高于整合子阴性菌(P<0.01),分别为氨苄西林、四环素、氯霉素、头孢噻肟、头孢唑林、庆大霉素、复方磺胺甲恶唑、阿奇霉素和环丙沙星。辽宁地区沙门菌多重耐药率达50.3%。结论 I类整合子在沙门菌中分布广泛,抗性基因表型与耐药结果相一致,整合子的携带与沙门菌多重耐药率高度相关。沙门菌对亚胺培南和头孢西丁保持高敏感率,可以用于对常规抗菌药物耐药的沙门菌的治疗。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测和耐药性研究

目的 研究汕头地区革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及其耐药特性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 收集汕头地区革兰阴性杆菌共1 445株(大肠埃希菌895株和肺炎克雷伯菌550株),采用Vitek-2全自动细菌鉴定和药敏分析仪进行ESBL检测和药敏实验.结果 69.4%大肠埃希菌和33.6%肺炎克雷伯菌产ESBLs.产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类和单环类抗生素的耐药率极高;产ESBLs菌株存在多重耐药性,而且对多种抗生素的耐药率明显比不产ESBLs菌株高;产ESBLs菌株和不产ESBLs菌株对亚胺培南均未出现耐药.结论 汕头地区革兰阴性杆菌中ESBLs菌株检出率高;产ESBLs菌株耐药性比不产ESBLs菌株高,且耐药表型多样性;亚胺培南是临床治疗产ESBLs菌株感染的首选药物.     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测和耐药性研究

目的 研究汕头地区革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药特性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 收集汕头地区革兰阴性杆菌共1 445株（大肠埃希菌895株和肺炎克雷伯菌550株）,采用Vitek-2全自动细菌鉴定和药敏分析仪进行ESBL检测和药敏实验.结果 69.4%大肠埃希菌和33.6%肺炎克雷伯菌产ESBLs.产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类和单环类抗生素的耐药率极高 产ESBLs菌株存在多重耐药性,而且对多种抗生素的耐药率明显比不产ESBLs菌株高 产ESBLs菌株和不产ESBLs菌株对亚胺培南均未出现耐药.结论 汕头地区革兰阴性杆菌中ESBLs菌株检出率高 产ESBLs菌株耐药性比不产ESBLs菌株高,且耐药表型多样性 亚胺培南是临床治疗产ESBLs菌株感染的首选药物.