高住高练对肥胖大鼠肝脏SREBP-1c表达的影响

目的:探讨高住高练对高脂饮食肥胖大鼠肝脏SREBP-1c表达的影响。方法:出生21天离乳SD雄性大鼠280只,肥胖造模成功后挑选160只,2周适应性训练后筛选130只,随机分为13组:对照组(同时视为低住低练0周组、低氧安静0周组和高住高练0周组),低住低练1、2、3、4周组,低氧安静1、2、3、4周组,高住高练1、2、3、4周组。用水平动物跑台进行有氧耐力运动,低住低练各组在常氧下进行速度为26 m/min、1 h/d、6 d/w的运动,分别持续1～4周;低氧安静各组每天在低氧下(氧浓度为13.6%,约相当于3500 m海拔高度)生活,自由活动,不安排训练,分别持续1～4周;高住高练各组每天在低氧下(氧浓度为13.6%)生活23 h,训练1 h,速度为21 m/min,6 d/w,分别持续1～4周(非训练日生活24 h)。对照组于正式实验开始前、安静组于相应周数后、运动组于最后一次训练后恢复24 h取材。分别采用实时荧光定量PCR技术和Western Blot技术检测大鼠肝脏SREBP-1c基因和蛋白表达。结果:相同训练模式不同周数之间比较,高住高练组大鼠肝脏SREBP-1c mRNA和蛋白表达在第1、2、4周较对照组均变化无统计学意义(P>0.05),第3周mRNA表达降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),第3周蛋白表达下降,与1、2周组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。相同周数不同训练模式之间比较,第1、4周,高住高练组肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白表达与低住低练组和低氧安静组比较差异无统计学意义(P>0.05),第2周高住高练组SREBP-1c蛋白表达高于低住低练组(P<0.01),第3周高住高练组SREBP-1c mRNA和蛋白表达低于低氧安静组(P<0.05)。结论:3周高住高练抑制肥胖大鼠肝脏SREBP-1c mRNA和蛋白表达效果较好。     

马乳粉化学成分和脂肪酸含量测定分析

对新疆地产马乳粉化学成分和脂肪酸含量及组成进行测定.结果表明:马乳粉平均含脂肪13.5%、蛋白质19.7%、乳糖61.2%,和按生马乳化学成分折算的平均值基本相符.马乳粉饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)占总脂肪酸的比例分别为53.73%、20.87%和25.4%,其中亚油酸占4.25%,α-亚麻酸占20.09%,具有较高的生物学价值.     

PI3KP85α在高脂高糖喂养妊娠期大鼠肝脏中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨高糖高脂喂养妊娠大鼠肝脏组织磷脂酰肌醇3激酶p85α（PI3KP85α）mRNA的表达及其对妊娠期胰岛素抵抗的影响。方法健康6周龄雌性SD大鼠40只,分为4组：高糖高脂饮食-孕鼠组（SFP）、高糖高脂饮食-未孕组（SFV）、普通饮食组-孕鼠组（NP）及普通饮食组-未孕鼠（NV）,每组各10只。SFP、NV组大鼠与雄性大鼠配对受孕,在妊娠第20天禁食水12小时后测空腹血糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数;应用RT-PCR测定肝脏组织PI3KP85αmRNA的表达。结果 SFP组胰岛素抵抗指数（11.29±0.28）肝脏组织P13KP85αmRNA的表达量（1.04±0.16）明显高于其他组,差异有统计学意义（F=38.67,P〈0.01;F=36.70,P〈0.01）;SFV组P13KP85αmRNA的表达与胰岛素抵抗指数呈正相关（F=0.81,P〈0.01）。结论高糖高脂喂养妊娠大鼠,肝脏组织PI3KP85αmRNA明显升高,P13KP85α的高表达可能是导致妊娠期胰岛素抵抗进而发生妊娠期糖尿病的原因之一。     

束缚应激后大鼠肝脏PPARβ/δ mRNA和蛋白表达的变化

目的观察束缚应激后大鼠血甘油三脂（TG）、血糖和肝脏过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPAR）β/δmRNA和蛋白的变化,初步探讨应激对糖脂代谢的影响及发生机制。方法健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（C）、束缚1 w组（R1）、束缚2 w组（R2）和束缚4 w组（R4）,分别不给予应激及给予束缚应激1、2和4 w。实验结束后取大鼠血清及肝组织,全自动生化仪测定血TG和血糖水平,分别用RT-PCR和Western blot法检测肝脏PPARβ/δ的mRNA和蛋白表达水平。结果 R1、R2、R4组大鼠血清TG分别为（0.97±0.28）、（0.88±0.16）、（0.94±0.23）mmol/L,均明显高于C组的（0.59±0.09 mmol/L（P〈0.01）;血糖分别为（6.25±0.69）、（6.30±1.10）、（6.12±0.85）mmol/L,均明显高于C组的（5.18±0.54）mmol/L）（P〈0.01）。与C组相比,R1、R2、R4组肝脏PPARβ/δmRNA和蛋白表达均降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论束缚应激后,大鼠血清TG、血糖水平升高,这种变化可能与肝脏PPARβ/δ表达降低有关。     

束缚应激对心脏PPARα、PPARβ和M—CPT—ImRNA表达的影响

目的观察束缚应激对雄性Wistar大鼠心肌过氧化体增殖物激活型受体α（PPARα）、PPARβ和肌型肉碱棕榈酰转移酶-I（M—CPT—I）mRNA表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠,采用束缚应激模型,实验组大鼠每天给予束缚应激2次,每次3h。按照有无应激和应激时问长短分为正常对照组（C）、束缚1W（R1）、束缚2w（R2）和束缚4W组（R4）。采用逆转录酶多聚酶链反应（RT．PCR）检测各组心肌PPARα、PPARβ和M-CPT-I的mRNA表达水平。结果束缚应激1、2、4W大鼠心肌PPARαmRNA和M—CPT—ImRNA水平较正常对照组明显升高（P〈0．01或P〈0．05）;心肌PPARβmRNA水平较正常对照组变化不明显（P〉0．05）。结论束缚应激上调心肌PPARα和M—CPT—ImRNA表达,对PPARβ无明显影响,PPARot可能促进束缚应激大鼠脂肪酸氧化增加。     

血清游离脂肪酸代谢及成分变化与2型糖尿病患者大血管并发症的关系

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)与大血管病变的关系。方法选取河北医科大学第二附属医院2010年12月-2012年1月住院的T2DM患者173例;其中,无大血管病变T2DM 36例[A组,年龄(55.7±5.9)岁],并发1种大血管病变59例[B组,年龄(56.7±9.7)岁],并发2种大血管病变58例[C组,年龄(58.3±7.4)岁],并发3种及3种以上大血管病变20例[D组,年龄(59.8±8.9)岁]及正常对照组41例健康人[N组,年龄(54.2±7.4)岁],采用气相色谱外标定法,进行血清FFA含量和成分的测定。结果 T2DM患者总脂肪酸(total fatty acid,TFA)、饱和脂肪酸(saturated fatty acid,SFA)、多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)均显著升高(P<0.05)。SFA中软脂酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、二十四烷酸(C24:0)在T2DM患者中明显升高(C16:0、C18:0 P<0.01,C24:0 P<0.05)。单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)中油酸(C18:1)显著升高(P<0.05)。PUFA中亚油酸(C18:2)显著升高(P<0.01),二十二碳六烯酸下降明显(P<0.01)。大血管病变组组间脂肪酸成分比较,TFA、MUFA、SFA及C16:0、C18:0、C18:1在A组、B组、C组、D组中随血管病变严重程度显著升高。两两比较:C组和D组的C16:0、C18:0、C18:1及SFA、MUFA、TFA均较A组显著升高(P<0.05);C组的C18:0、D组C18:1和MUFA较B组高(P<0.05)。结论 T2DM患者体内脂肪酸成分的改变是脂代谢紊乱早期指标之一,并参与大血管病变的发生。     

甲氰咪胍对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质过氧化作用的影响

目的：探讨甲氰咪胍对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠脂质过氧化作用的影响。方法：雄性SD大鼠30只，随机分为3组，正常对照组、模型组、甲氰咪胍组，正常组普通饲料喂养，模型组喂高脂饮食，甲氰咪胍组在高脂饮食12w后给予甲氰咪胍灌胃治疗。16w末处死各组大鼠，测定血清转氨酶（ALT、AST）、血脂（TC、TG）、肝匀浆丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时测定细胞色素P450（CYP450）和细胞色素2E1（CYP2E1）含量，光镜下观察肝组织学改变。结果：与正常组比较，模型组大鼠血清TG、TC水平，肝组织脂质过氧化产物MDA含量明显增高，而抗氧化物SOD活性明显降低，肝脏的脂肪变性程度和炎症活动度均显著增高，细胞色素P450和CYP2E1含量显著增高。甲氰咪胍组各项指标较模型组有明显改善（P〈0．05）。结论：甲氰咪胍通过抑制CYP2E1表达与其密切相关的脂质过氧化作用，改善NASH大鼠脂肪变性，减轻炎症反应。     

束缚应激后大鼠心脏PPARβ、M-CPT-I及GLUT-4 mRNA的变化

目的：观察束缚应激后大鼠心肌PPARβ、M-CPT-I和GLUT-4的mRNA表达变化。方法：健康雄性Wister大鼠,分为正常对照组（C）、束缚1周组（R1）、束缚2周组（R2）和束缚4周组（R4）。心肌PPARβ、M-CPT-I和GLUT-4的mR-NA表达水平用RT-PCR方法检测。结果：与正常对照组大鼠相比,束缚应激1、2、4周大鼠心肌M-CPT-I mRNA水平明显升高（R2组P〈0.05,其余P〈0.01）,GLUT-4 mRNA水平明显降低（P〈0.01）,PPARβ变化不明显。结论：束缚应激后可能存在大鼠心肌脂肪酸代谢的增加和葡萄糖代谢降低。PPARβ对束缚应激大鼠心肌能量代谢的影响较小。     

褪黑素对胰岛素抵抗大鼠β细胞的保护作用

研究褪黑素（Mel)对胰岛素抵抗（IR）大鼠β细胞超微结构病变的作用，高糖饲料喂养SD大鼠6周复制IR大鼠模型，成模后用药组予Mel 10mg.kg^-1.d^-1灌胃，用药6周，未用药IR大鼠模型（IR组）为对照，透明电镜观察胰岛β细胞超微结构，与IR组相比，Mel 组大鼠收缩压，血清TG，LDL－c，胰岛素和丙二醛均降低（P＜0．01），胰岛素敏感指数，血清HDL-c和超氧化物歧化酶均升高（P＜0．01），透射电镜观察IR组β细胞可见凋亡早期改变，细胞浆内脂质沉积以及细胞核和细胞器的病理改变，Mel组β细胞超微结构病理变化减轻，未见凋亡的β细胞及胞浆内脂质沉积，研究表明，Mel对高糖膳食诱导的IR大鼠β细胞病理损害具有保护作用。     

n-3多不饱和脂肪酸强化蛋研究状况

n-3多不饱和脂肪酸（n-3PUFAs）主要包括α-亚麻酸、二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），是人类重要的营养源。本文分别讨论了母鸡品种及年龄，日粮的来源、种类、添加水平、添加形式对蛋不饱和脂肪酸的影响，同时对n-6和n-3脂肪酸比例的调控、n-3PUFAs强化蛋的稳定性、风味特性及食用强化蛋的安全性等...     

fat-1基因对结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用

目的 探讨fat-1基因在结肠癌HT-29细胞凋亡、增殖以及细胞周期中所起的作用.方法 构建真核表达载体(pEGFP -fat-1),用脂质体介导的方法转染到结肠癌HT-29细胞,通过荧光显微镜观察及RT-PCR检测fat-1基因的表达,气相色谱分析检测fat-1基因对HT-29细胞n-6/n-3多聚不饱和脂肪酸(PUFAs)比例的影响,MTT法分析fat-1基因对HT-29细胞增殖的影响,流式细胞术检测fat-1基因对HT-29细胞凋亡和细胞周期的影响.结果 成功构建了真核表达载体pEGFP -fat-1,并在HT-29细胞内有效表达.fat-1基因通过降低HT-29细胞内n-6/n-3 PUFAs的比例抑制HT-29细胞的增殖,促进其凋亡,细胞增殖主要被阻滞在S期.结论 fat-1基因改变HT-29细胞n-6/n-3 PUFAs比例后,通过一定的信号转导途径促进大部分HT-29细胞在S期凋亡,抑制了其增殖.     

多不饱和脂肪酸对模拟失重大鼠脂质代谢的影响

目的：研究添加以鱼油为来源的不同剂量的多不饱和脂肪酸（PUFA）对模拟失重大鼠血清红细胞膜微粘度、循环内皮细胞、以及血清总胆固醇、血清甘油三酯等脂质代谢的调节。方法：选用3周龄断乳雄性SD大鼠49只，采用最小体差法分为5组：Ⅰ组悬吊对照，饲喂含10%玉米油饲料；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组悬吊实验组，分别饲喂含0.5%和3.0%鱼油的合成饲料；Ⅴ组地面正常对照组，饲喂含10%玉米油饲料。悬吊时间为30d。结果：血清红细胞膜微粘度Ⅱ、Ⅳ组与Ⅴ组无显著性差异，Ⅲ组红细胞膜流动性有了显著的增加。Ⅱ组较为明显的减轻了模拟失重对循环内皮细胞（CEC）的增加作用，血清总胆固醇（TC）的含量与鱼油的添加量呈负相关，而血清甘油三酯（TG）含量在各剂量组中无显著性差异。Ⅰ组相对Ⅴ组血清冠心病指数（LDL/HDL）有显著升高而各悬吊实验组中LDL/HDL分别比Ⅰ组降低13.9%、11.1%和31.4%。结论：在模拟失重条件下，补充PUFA会减少失重对脂质代谢的不利作用，从而对动脉粥样硬化及冠心病（CHD）的发生起到一定的预防作用。     

降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏TBP-2mRNA表达的影响

目的探讨硫氧还蛋白结合蛋白（TBP-2）与大鼠非酒精性脂肪性肝（NAFLD）的关系,并观察降脂益肝冲剂的疗效,探讨其对肝组织TBP-2mRNA表达的影响。方法72只雄性Wistar大鼠随机分为9组：空白对照组（N组）、实验对照组（M组）,实验干预组（D组）,每组24只,分别设9、13、17周三个时相点。空白对照组给予普通饲料喂养,实验对照组和实验干预组给予高脂饮食喂养。实验干预组分别于0周、9周、13周末开始给予降脂益肝冲剂,同时空白对照组和实验对照组分别给予等量的生活饮用水灌胃,分别于9周、13周、17周末处死各组大鼠。应用半定量逆转录—聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组大鼠肝细胞硫氧还蛋白结合蛋白（TBP-2）mRNA的表达;HE染色观察肝组织病理变化。结果RT-PCR结果发现在单纯性非酒精性脂肪肝期（M1组）TBP-2的mRNA表达（0.63±0.12）较N1组（1.02±0.10）下降明显（P〈0.01）,可能为机体的一种保护性应激,以减少TBP-2对Trx的抑制作用,间接增加了机体的抗氧化能力。当疾病继续进展到非酒精性脂肪性肝炎期（M2组和M3组）,这种保护性应激能力逐渐减少,TBP-2的mRNA表达增加,但仍然少于同期的正常组即空白对照组（N2,N3）（P〈0.01）,提示机体仍可通过下调TBP-2的表达以增加了机体的抗氧化能力;N1,N2,N3组相比TBP-2的mRNA表达统计学上无差异;D2组（0.66±0.79）与M2组（0.89±0.10）,D3组（0.73±0.12）与M3组（0.90±0.88）相比TBP-2的mRNA表达均有所下降（P〈0.01）。药物干预后,肝脏病理改变较实验对照组明显减轻（P〈0.01）。结论TBP-2在单纯性非酒精性脂肪性肝和非酒精性脂肪性肝炎期表达下调,可能是机体的一种保护性应激,参与NAFLD的发生、发展。降脂益肝冲剂对NASLD有很好的防治作用,TBP-2是其可能的作用靶点。     

人参皂苷Rg1对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元保护作用研究

目的研究人参皂苷Rg1（GinsenosideRg1,Rg1）对1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetra—hydropyrldine,MPTP）致帕金森病小鼠黑质（substantla nigra,SN）多巴胺（dopamine,DA）能神经元变性的保护作用及其可能机制。方法C57BL6小鼠随机分为对照组（NS,ip）、MPTP组（30mg·kg^-1×5d,ip）及Rg,（5mg·kg^-1×8d,ip）预处理组。应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）、免疫组织化学染色等技术观察了SN Caspase-3mRNA、Bcl-2 mRNA、Bax mRNA、酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）mRNA的表达水平和黑质致密带（substantia nigra zona compacta,SNzc）TH免疫反应阳性细胞数量等多项指标的变化,用高效液相色谱法检测小鼠纹状体（stfiatum,Str）内DA及其代谢物二羟基苯乙酸（dihydroxyphenylaceti cacid,DOPAC）和高香草酸（homovanillic acid,HVA）含量。结果MPTP组SN内TH阳性细胞数量、Str内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显减少,应用Rg1后可逆转上述改变（P〈0．01）。MPTP组SN Bcl-2、THmRNA的表达明显降低（P〈0．01）;Caspase-3、Bax mRNA的表达明显增加（P〈0．01）。应用Rg1后可逆转上述改变（P〈0．05）。结论Rg1对MPTP致帕金森病小鼠SNDA能神经元具有明显的保护作用,其机制可能与抗凋亡过程有关。     

1,25（OH）2D3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用

目的探讨1,25（OH）2D3（1,25-dihydroxyvitamin D3）对人主动脉血管平滑肌细胞（human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC）果蝇样受体（Toll like receptor 4,TLR4）基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25（OH）2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25（OH）2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25（OH）2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25（OH）2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍（均P〈0.05）。结论 1,25（OH）2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。     

益肺活血复方对人肺动脉内皮细胞分泌功能的影响

目的研究益肺活血复方对人肺动脉内皮细胞分泌功能的影响。方法建立人肺动脉内皮细胞低氧高二氧化碳模型;制备益肺活血复方不同给药剂量（生药10、20、40 g.kg-1）的含药血清及生理氯化钠溶液血清;在细胞培养液中共同孵育12 h后,利用免疫组织化学法测定细胞内低氧诱导因子-1ɑ（HIF-1ɑ）的表达,放射免疫分析法测定各组细胞上清液中内皮素-1（ET-1）的浓度,逆转录多聚酶链反应法测定ET-1mRNA的表达水平。结果低氧高二氧化碳条件下,人肺动脉内皮细胞ET-1的分泌、HIF-1ɑ蛋白和ET-1mRNA的表达明显增强（P〈0.05）;而中、高浓度益肺活血复方能够抑制人肺动脉内皮细胞合成分泌HIF-1ɑ、ET-1mRNA及ET-1（P〈0.05）。结论低氧高二氧化碳导致人肺动脉内皮细胞功能障碍,而中、高浓度的益肺活血复方可减少人肺动脉内皮细胞ET-1的分泌和ET-1mRNA、HIF-1α蛋白的表达,从而减轻人肺动脉内皮细胞功能紊乱的程度,益肺活血复方可能成为治疗低氧高二氧化碳性肺动脉高压的有效药物。