非诺贝特对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的：探讨苯氧乙酸类降血脂药非诺贝特（fenofibrate）对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法：将实验用SD大鼠随机分为正常对照组（C组），糖尿病组（D组），非诺贝特治疗组（F组）。第4、6周分别随机取各组大鼠一半检测血糖、血甘油三酯、血胆固醇、血肌酐、尿白蛋白及肾脏肥大指数。应用免疫组织化学方法检测肾组织转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、层粘连蛋白（LN）、IV型胶原蛋白的表达。用计算机图象分析系统测定肾小球平均体积（MGV）、肾小球平均面积（MGA）。结果：非诺贝特治疗组血甘油三酯、血胆固醇、尿白蛋白排泄率均低于糖尿病组（P<0.05, P<0.01）。第6周时，F组TGF-β₁、LN、IV型胶原蛋白表达低于D组（P<0.05）。结论：非诺贝特对糖尿病肾脏有部分保护作用，其机制可能部分通过降血脂、下调糖尿病大鼠TGF-β₁的表达减少细胞外基质的积聚。     

非诺贝特对糖尿病大鼠肾组织MCP-1、FN表达的影响

目的:探讨非诺贝特对糖尿病大鼠肾组织MCP-1、 FN表达的影响.方法:选择健康雄性SD大鼠36只, 随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DN组)和非诺贝特治疗组(DF组), 每组12只, 模型组及治疗组以链脲佐菌素诱发糖尿病, 治疗组给予非诺贝特灌胃.分别于第4、 8周观察各组大鼠脂代谢、血肌酐及24 h尿蛋白定量.肾组织标本行免疫组化检测肾组织MCP-1、 FN的表达水平.结果:模型组胆固醇、甘油三酯、肌酐及24 h尿蛋白定量水平的表达水平较同期正常组(P＜0.01)和治疗组(P＜0.05)有明显的增加.模型组大鼠肾组织MCP-1、 FN表达较同期正常组(P＜0.001)和治疗组(P＜0.01)有明显的增加.结论:非诺贝特可以下调糖尿病大鼠肾组织MCP-1、 FN表达对试验性糖尿病大鼠具有部分肾保护作用.     

罗格列酮联用非诺贝特治疗2型糖尿病更有效

美国Temple大学医院的Guenther Boden博士及其同事于1月的《糖尿痛》（Diabetes，2007；56：248—255．）杂志上报告，与罗格列酮单药相比，联用罗格列酮（Rosiglitazone）和非诺贝特对2型糖尿病治疗效果更好。     

Decorin 基因转染抑制高糖培养的大鼠肾系膜细胞细胞外基质mRNA表达

目的： 观察核心蛋白聚糖Ⅱ（DCN）基因转染对高糖培养的大鼠肾系膜细胞（RMCs）细胞外基质（ECM）mRNA表达的影响。方法： 用已构建的AD-DCN腺病毒感染高糖环境培养的大鼠肾系膜细胞，采用半定量RT-PCR测定decorin、转化生长因子β₁（TGF-β₁）、纤维粘连蛋白（fibronectin）和IV型胶原（collagen IV） mRNA水平。结果： 高糖培养的RMCs感染AD-DCN后，DCN mRNA水平显著增高，24 h至第7 d，该组DCN mRNA水平始终显著高于高糖组及AD－LacZ感染组(P<0.05)，decorin mRNA水平增高后表现出对TGF-β₁ mRNA 水平的抑制作用，在mRNA水平，AD-DCN感染的RMCs细胞外基质fibronectin和collagen IV随TGF-β₁ mRNA水平下降而下降。结论： DCN重组腺病毒感染大鼠肾系膜细胞后能高效表达目的基因decorin并拮抗 TGF-β₁ 的生物活性，其下调ECM成分 mRNA水平的作用与使用TGF-β抗体的效果相似。     

微粒化非诺贝特治疗高脂血症的临床疗效与安全性

目的 :观察微粒化非诺贝特治疗高脂血症的疗效和安全性。方法 :采用前后比较的方法观察微粒化非诺贝特 2 0 0mg ,1次 /日 ,12周和 2 0 0mg隔日晚口服一次 12周 ,总疗程 2 4周治疗 82例高脂血症患者的调脂疗效和安全性。结果 :治疗 12周末 ,患者的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有显著降低 ,高密度脂蛋白胆固醇显著升高。自第 13周开始隔日晚口服 2 0 0mg至2 4周末时仍能维持 12周末时的血脂水平。结论 :微粒化非诺贝特具有全面的调脂作用 ,且隔日一次口服 2 0 0mg12周仍能维持调脂作用。治疗中未见严重的不良反应 ,耐受性良好     

辛伐他汀联合非诺贝特治疗混合性高脂血症的疗效观察

目的探讨辛伐他汀联合非诺贝特治疗混合性高脂血症的疗效价值。方法选择2008年1月-2010年1月在我院心内科门诊治的混合性高脂血症患者186例。并随机分为辛伐他汀组、非诺贝特组、辛伐他汀联合非诺贝特组（联合用药组）三组,每组各62例。辛伐他汀组采用辛伐他汀20mg,每天一次;非诺贝特组采用非诺贝特200mg,一天一次;联合用药组采用辛伐他汀20mg＋非诺贝特200mg,一天一次,疗程均为3个月。治疗过程中密切观察三组血脂参数变化、疗效评价以及药物主要不良反应。结果三组经过3个月的治疗后血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、甘油三酯（TG）均比治疗有下降,高密度脂蛋白一胆固醇（HDL-C）比治疗前上升,联合用药组TC、LDL—C、TG三项水平下降的幅度及HKL-C升高的幅度均高于单独用药的两组。结论辛伐他汀联合非诺贝特治疗混合性高脂血症较单独用药更有效．更全面地改善各项血脂水平,注意掌握服药方法及适应症,定期监测,具有良好的安全性和耐受性．值得临床大力推广。     

非诺贝特上调血管内皮细胞一氧化氮合酶的表达

目的:观察PPARα激动剂非诺贝特对牛主动脉(BAECs)内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)活性和表达的影响。方法:制备5-9代BAECs,加入不同浓度的非诺贝特(0, 5, 10, 50, 100 μmol/L)后,用NOS Assay Kit测定eNOS活性,RT-PCR法检测eNOS mRNA表达,Western blot分析检测eNOS蛋白质表达。结果: 非诺贝特以浓度和时间依赖的方式增加eNOS活性,非诺贝特浓度10 μmol/L以上时,明显增加eNOS活性。50μmol/L非诺贝特处理48 h时eNOS活性最大(为对照组的2.32±0.47倍,P<0.01)。非诺贝特处理1 h和12 h不增加eNOS活性。RT-PCR分析表明,非诺贝特浓度大于5 μmol/L以上时,明显增加eNOS mRNA水平,在非诺贝特浓度为50 μmol/L时作用最大,为对照组的2.08±0.33倍(P<0.01)。此作用在6 h时出现,持续到48 h。Western blot显示,非诺贝特处理48 h,eNOS蛋白表达明显增加,在浓度为10,50 和100 μmol/L时,eNOS蛋白表达分别为对照组的1.80±0.45, 2.70±0.42 和 2.20±0.32 倍,均P<0.01。在非诺贝特处理12 h后出现,持续到48 h。结论:PPARα激动剂非诺贝特增加BAECs eNOS基因表达,提高eNOS活性及增加蛋白表达。     

氯沙坦、非诺贝特对代谢综合征合并高尿酸血症患者血尿酸的影响

目的观察氯沙坦、非诺贝特降低代谢综合征合并高尿酸血症患者血尿酸的有效性及安全性。方法对于符合入选条件的患者予以氯沙坦、非诺贝特治疗．并在给药前及前三月每月检查一次血尿酸,化验肝、肾功、肌酸激酶及血常规。结果显效：45％,有效：36％,无效：18％。结论氯沙坦、非诺贝特对代谢综合征合并高尿酸血症患者在降低血压、血脂的同时可以安全、有效地降低血尿酸浓度。     

高糖对大鼠肾小球系膜细胞ERK转导通路的影响

目的： 探讨高糖环境下系膜细胞中ERK转导途径的活性变化及其对TGF-β1 mRNA表达的影响。方法： 分离培养大鼠肾脏系膜细胞，调整培养液浓度为以下3组，即正常糖组、高糖组、甘露醇组。分别于干预24 h、48 h、72 h后用免疫细胞化学法和Western blotting法对系膜细胞中磷酸化ERK1/2（pERK1/2）的表达进行定位、定性及半定量分析，用RT-PCR法检测细胞中TGF-β1 mRNA的表达。结果： 高糖组系膜细胞中pERK1/2蛋白的表达明显高于正常糖组，并由胞浆向胞核内转移，随培养时间延长其表达上升(P<0.01)，高糖组TGF-β1mRNA的含量也明显高于正常糖组(P<0.01)，甘露醇组上述指标与正常糖组差异不显著(P>0.05)。结论： 高糖环境下系膜细胞中ERK信号转导通路可被激活，进而使TGF-β1 mRNA表达上调，这可能是糖尿病肾病系膜细胞受损、肾小球硬化的机制之一。     

非诺贝特和吡格列酮对压力过负荷大鼠心室重塑的影响及作用机制

目的： 探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPARs）的配体非诺贝特和吡格列酮对压力过负荷大鼠心功能、心室重塑的影响及其作用机制。方法： 取雄性Wistar大鼠腹主动脉缩窄致压力过负荷模型，术后48 h存活的40只随机分成：手术组（CAA组）、非诺贝特干预组（F组）、吡格列酮干预组（P组）及非诺贝特和吡格列酮联合干预组（F＋P组）。另以10只雄性Wistar大鼠为假手术对照。在给药处理12周后检测血流动力学参数、心室重塑指标、血浆和心肌肾素活性、血管紧张素Ⅱ、醛固酮及心肌的1型血管紧张素Ⅱ受体（AT1）mRNA表达变化。最终36 只大鼠获完整资料，上述各组分别为7、8、7、6和8只。 结果： F组、P组及F＋P组的左室湿重/体重、平均动脉压、左室收缩压、左室舒张末期压及心率低于CAA组，而左室压力上升、下降最大速率（±dp/dtmax）高于CAA组；F组、P组、F＋P组及CAA组间血浆和心肌肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮活性无显著差异。P组和F+P组大鼠心肌AT1 mRNA 的表达水平低于F组。 结论： 尽管PPARα配体（非诺贝特）和PPARγ配体（吡格列酮）对血浆和心肌肾素活性、血管紧张素Ⅱ和醛固酮无明显影响，但PPARs信号通路激活能抑制压力过负荷大鼠心室重塑，降低前后负荷，并提高±dp/dtmax。PPARγ途径激活可抑制心肌AT1 mRNA的表达。     

非诺贝特对血管内皮细胞凝血酶诱导的内皮素-1表达的影响

目的:大量研究表明氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)具有抗炎、抗动脉粥样硬化及扩张血管作用,本研究观察PPARα激动剂非诺贝特对牛主动脉内皮细胞(BAECs)ET-1表达的影响。方法: 制备5-10代BAECs,用凝血酶及不同浓度非诺贝特(10、50、100和500 μmol/L)处理。采用放射免疫方法测定ET-1含量,用RT-PCR法测定ET-1 mRNA表达。结果: 凝血酶明显增加ET-1分泌(22.4±4.7 vs 对照13.2±1.6) nmol/g蛋白质,P<0.01,非诺贝特(100 μmol/L)对基础ET-1分泌无影响。但以剂量依赖的方式抑制凝血酶诱导的ET-1分泌(22.3±4.3、18.5±2.8、13.4±2.7 和11.7±1.6) nmol/g蛋白质,与对照组的(25.6±3.7) nmol/g蛋白质比较,均P<0.01。PT-PCR显示凝血酶明显增加ET-1 mRNA表达,此作用可为非诺贝特(100μmol/L)所抑制。结论: PPARα激动剂非诺贝特抑制BAECs凝血酶诱导的ET-1分泌及ET-1 mRNA水平,提示非诺贝特对凝血酶诱导的ET-1表达的作用发生在转录水平。     

糖尿病大鼠肾皮质细胞表型转化的探讨

目的： 探讨糖尿病大鼠肾皮质中波形蛋白（vimentin）、结蛋白（desmin）和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的变化规律及其相互关系。 方法： 建立STZ诱导的SD大鼠糖尿病模型；用RT-PCR法检测造模成功后第3、7、14、30、60和90 d糖尿病大鼠肾皮质中vimentin、desmin和TGF-β₁ mRNA的表达水平。结果： ①糖尿病大鼠肾皮质TGF-β₁和vimentin mRNA的表达分别从模型建立后第7 d和第14 d起逐渐增多，desmin mRNA的表达从第14 d起逐渐减少，糖尿病大鼠和对照组大鼠相比差异显著（P<0.05,P<0.01）。②糖尿病大鼠肾皮质TGF-β₁和vimentin 的mRNA表达呈显著正相关，TGF-β₁和desmin的mRNA表达却呈显著负相关,desmin和vimentin 的mRNA表达也呈显著负相关。 结论： 糖尿病大鼠TGF-β₁在肾皮质局部表达增多可能促进肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化。     

微粒化非诺贝特对高脂饲养SHR脂毒性及胰岛素敏感性的影响

目的：观察微粒化非诺贝特对高脂饲养自发性高血压大鼠(SHR) 脂毒性及胰岛素敏感性（IS）的影响。方法:将27只SHR随机分为3组，1组给予标准饲料，其余2组分别给予高脂饲料、高脂饲料+非诺贝特100 mg·kg-1·d-1灌胃。3个月后，观察比目鱼肌细胞内脂滴沉积情况，计算脂质沉积指数（LAI）；进行葡萄糖耐量试验及游离脂肪酸测定。结果:(1) 与标准饲料组比较，高脂饲料组SHR体重和血浆甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）水平明显增高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显降低(P＜0.05)，而非诺贝特治疗组与标准饲料组比较血压明显下降，HDL-C明显升高，体重、TG及TC水平无明显差异。(2) 高脂饲料组空腹血糖、游离脂肪酸、葡萄糖曲线下面积明显高于标准饲料组，胰岛素敏感指数显著低于标准饲料组（0.0038±0.0007 vs 0.0053±0.0013, P＜0.05）。非诺贝特组各项指标与标准饲料组无明显差异（P＞0.05）。(3)与标准饲料组相比，高脂饲料组比目鱼肌细胞内有大量脂质沉积（LAI: 6.42±0.59 vs 1.98±0.97, P＜0.05），非诺贝特治疗组比目鱼肌细胞内脂质含量显著减少，与标准饲料组无明显差别（LAI: 3.32±0.77 vs 1.98±0.97, P＞0.05）。经协方差分析排除血糖、血压因素影响后，上述差别仍有意义（F=10.46, P＜0.05）。（4） 骨骼肌脂质沉积指数与胰岛素敏感指数呈负相关（r=-0.58, P＜0.05），与TG、FFA、体重、葡萄糖曲线下面积呈正相关。结论:非诺贝特除了调脂外，还具有降低高脂饲养SHR体重、血压、脂毒性和改善胰岛素敏感性多重效应。     

miR-192在肾脏和糖尿病肾病中的作用机制

本期“Smad交互蛋白1在增生性瘢痕组织中的表达及其对纤维化相关因子的影响”参考文献[12]：糖尿病肾病（DN）的关键特征为细胞外基质蛋白的堆积增加,如胶原Iα1和胶原Ⅱ（Col Iα1和ColⅡ）。转化生长因子β1（TGF-β1）是这些细胞外基质基因的关键调节因子,能够增加糖尿病肾病的系膜细胞（MC）。通过微阵列分析,我们注意到TGF—β1可增加小鼠系膜细胞（MMC）Col Iα2的mRNA表达水平,也能降低E—box阻抑蛋白δEF1的mRNA表达水平。     

肾上腺髓质素在糖尿病肾病中的变化及作用

目的: 探讨肾上腺髓质素(AM)在糖尿病肾病中的变化及作用。方法: 通过体外人肾小球系膜细胞培养实验,观察高糖条件对系膜细胞AM mRNA、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)mRNA表达、分泌及细胞外基质(层粘连蛋白和Ⅳ型胶原)含量的影响及肾上腺髓质素干预对高糖不良作用的影响。结果: 在高糖条件下培养的人肾小球系膜细胞AMmRNA、TGF-β₁mRNA表达和AM、TGF-β₁分泌较低糖对照组分别增加1.01倍、0.59倍和3.49倍、1.61倍;细胞外基质蛋白LN和Ⅳ型胶原含量分别升高0.95倍和1.13倍。用不同浓度AM(10^-7、10^-8和10^-9 mol/L)干预后,TGF-β₁mRNA表达分别下降50%、28%和16.2%,TGF-β₁含量分别下降39%、26%和11%;LN含量分别下降53%、45%和18%,Ⅳ型胶原含量分别下降29%、26%和20%。结论: 葡萄糖水平升高是AM表达分泌的剌激因子之一。AM的肾脏保护作用可能与抑制TGF-β₁的表达与分泌,进而减少基质蛋白和胶原的过度积聚相关。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠血浆resistin的影响及对肾小球硬化的干预研究

目的： 研究罗格列酮对糖尿病大鼠血清巨噬细胞因子resistin水平的影响,探讨该药物对糖尿病肾小球硬化的干预及可能的作用机制。方法： 20只10周龄Wistar大鼠随机分为糖尿病肾病（DN）模型组和罗格列酮干预组(DN+RSG),另取10只Wistar大鼠作为正常对照组(NC)。DN和罗格列酮干预组大鼠右肾切除后经过阴茎背静脉注射35 mg/kg链脲菌素（STZ）,罗格列酮组按照10 mg·kg-1·d-1的剂量给予罗格列酮灌胃,DN组及正常对照组喂饲普通饮食。STZ注射20周后留取静脉血和24h尿,后处死大鼠并取肾组织。ELISA法检测血浆白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及resistin水平,免疫比浊法测定高敏C反应蛋白(hs-CRP),并测定24 h尿微量白蛋白、空腹血糖及肾功能水平。光镜下观察肾组织的病理改变情况,免疫组化检测肾小球转化生长因子-β1(TGF-β1) 的表达,Western blotting检测Smad2磷酸化水平。 结果： 与NC组比较,DN组大鼠血浆炎症因子IL-1、TNF-α、hs-CRP及resistin的水平均显著升高;罗格列酮干预后血浆中上述指标含量均显著低于模型组。与DN组比较,罗格列酮干预组的空腹血糖无明显变化,但24 h尿微量白蛋白定量及肾功能水平均明显下降。罗格列酮干预后肾小球内TGF-β1蛋白表达及Smad2磷酸化水平较DN组显著降低,并且其肾小球系膜增生程度也较DN组明显减轻。结论： 罗格列酮具有延缓及改善糖尿病肾小球硬化的作用,该作用可能与其降低resistin及其它炎症相关因子的表达有关。针对炎症有望控制DN的发生发展。     

TGFβ1基因对血管内皮细胞细胞外基质表达及与基质黏附的影响

了解TGFβ1基因对血管内皮细胞表达细胞外基质蛋白及与基质黏附力的影响。用DOTAP脂质体转染p MAMneo TGFβ1于原代培养的脐静脉内皮细胞,经G4 18筛选,TGFβ1表达经免疫荧光鉴定。Western blot确定 型胶原、纤黏连蛋白的表达,微管吸吮系统确定内皮细胞与基质的黏附力。结果表明生理情况下的内皮细胞能表达少量的TGFβ1及胶原、纤黏连蛋白。经G4 18筛选,外源性TGFβ1在血管内皮细胞中稳定表达,能显著提高胶原、纤黏连蛋白纤维的表达及细胞与基质的黏附。说明TGFβ1在血管组织工程中促进内皮细胞的黏附具有一定的应用价值。     

高甘油三酯血症对血小板CD40L表达的影响及非诺贝特的作用

目的:观察高甘油三酯(triglyce ride,TG)血对体内及体外血小板CD40L表达的影响及非诺贝特的作用。方法:以TG正常的健康对象为对照,通过流式细胞仪及ELISA法检测高TG患者服用非诺贝特前后血小板膜CD40L表达阳性率及血浆sCD40L表达;然后通过高TG血浆体外孵育健康血小板并用过氧化物酶体增殖活化受体α(PPARα)激动剂WY14643干预,流式细胞仪及Westen blotting法检测血小板膜CD40L表达阳性率及血小板总CD40L蛋白含量。结果:高TG患者CD40L及sCD40L表达显著升高(2.65±0.75vs1.53±0.66,3.72±0.94vs2.27±0.72),服用非诺贝特1个月后随TG浓度降低,血小板膜CD40L表达阳性率及血浆sCD40L浓度均有不同程度降低(1.89±0.56vs2.65±0.75,2.85±0.74vs3.72±0.94);体外高TG血浆较TG正常血浆更能促进血小板膜CD40L的表达(2.81±0.48vs1.89±0.41),且血小板总CD40L蛋白含量也一定程度升高(1.79±0.13vs1.51±0.15,P0.05);但WY14643对体外血小板膜CD40L表达阳性率及CD40L含量均无显著影响。结论:高浓度的TG血浆体内体外均能够促进血小板CD40L的表达;PPARα激动剂非诺贝特在降低体内TG浓度的同时,也抑制了血小板CD40L的表达;但PPARα激动剂Wy14643体外无直接改变血小板CD40L表达的作用。     

非诺贝特通过调节Th1/Th2细胞因子的平衡改善自身免疫性心肌炎

目的探讨非诺贝特(fenofibrate)对自身免疫性心肌炎(EAM)大鼠的治疗作用。方法将提纯精制后的猪心室肌球蛋白加等体积含灭活的结核杆菌的完全弗氏免疫佐剂充分混匀后,于Lewis大鼠双后足皮下注射制作大鼠EAM模型。于第0天免疫后,非诺贝特组给予非诺贝特灌胃,EAM组给予生理盐水灌胃。免疫后的第17天,超声检测大鼠心功能,处死大鼠取心脏评估心肌炎的严重程度及心体质量比,HE染色,应用实时定量PCR检测心脏的IFN-γ,IL-2,IL-4和IL-10的mRNA表达水平,并进一步通过ELISA检测血清中IFN-γ和IL-4的表达水平。结果非诺贝特组大鼠的心功能指标与EAM组相比得到了显著改善。非诺贝特治疗组的心体质量比和心肌的炎症浸润程度也比EAM模型组有明显的降低。另外,非诺贝特治疗组降低了Th1的细胞因子(IFN-γ,IL-2)的表达并增加了Th2细胞因子(IL-4,IL-10)的表达。ELISA的结果也显示非诺贝特治疗组血清中IFN-γ的水平降低而IL-4的水平升高。结论非诺贝特治疗可能通过调节Th1/Th2细胞因子的平衡改善自身免疫性心肌炎。