脂多糖对巨细胞病毒感染小鼠耳聋的影响

目的 探讨脂多糖(LPS)在小鼠巨细胞病毒(MCMV)全身感染导致听力损伤发病机制中的作用.方法 40只小鼠随机均分为四组,每组10只:A组,腹腔注射MCMV联合脑内注射LPS;B组,腹腔注射MCMV联合脑内注射PBS;C组,腹腔注射PBS联合脑内注射LPS;D组,腹腔和脑内均注射PBS.2周后行听觉脑干诱发电位(ABSEP)检查,取出两侧听泡,分别用于MCMVPCR分析和病理学检查.结果 与B、C、D组相比,A组ABR I波潜伏期延长、波幅降低、阈值升高(P＜0.05),耳蜗内炎症变化明显.结论 LPS可诱导产生MCMV感染引起的听力损伤.     

小鼠巨细胞病毒感染内耳的病理变化

目的 研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染内耳的病理变化,并观察更昔洛韦(GCV)对MCMV感染所致内耳炎症反应的疗效.方法 72只小鼠随机均分为生理盐水(NS)10μl组(A组)、MCMV 10μl组(B组)、MCMV 10 IA+GCV 60 mg·kg-1·d-1(C组),每组均根据脑内、腹腔、耳内(仅左耳接种)注射部位不同进一步分组,每小组各8只.2周后耳蜗取材.结果 B组脑内、耳内感染方式下左耳耳蜗前庭膜增厚伴淋巴细胞浸润、蜗管顶部分泌表皮层纤维化改变;而B组腹腔、耳内感染方式下右耳及C组脑内、耳内感染方式下左耳耳蜗均未见上述病理变化.结论 脑内感染MCMV较腹腔、耳内(左耳)感染更易引起双耳前庭膜和蜗管的炎症反应.应用GCV干预对MCMV感染所引起的内耳炎症反应有一定的治疗作用.     

注射用双黄连对人巨细胞病毒感染致肝损伤模型小鼠的保护作用研究

目的:研究注射用双黄连对人巨细胞病毒(HCMV)感染致肝损伤模型小鼠的保护作用。方法:随机将小鼠分为正常对照组、感染模型组、更昔洛韦组和注射用双黄连(高、中、低剂量)组,除正常对照组外,其余各组均接种HCMV5d建立肝损伤模型,分别给予不同药物;10d后各组取眼眶血测定ALT、AST酶活性;颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏评价其坏死程度并进行病理学观察。结果:正常对照组ALT、AST活性正常,肝脏未见异常改变;与正常对照组比较,感染模型组血清ALT、AST活性显著升高,肝脏的病理损伤明显;与感染模型组比较,注射用双黄连高、中剂量组肝脏ALT、AST活性显著降低,病理损伤明显减轻,而低剂量组血清ALT、AST活性与感染模型组比较无显著性差异;与感染模型组比较,更昔洛韦组ALT、AST活性显著降低;注射用双黄连高、中剂量组ALT、AST活性与更昔洛韦组比较无显著性差异。结论:注射用双黄连对HCMV感染致肝损伤模型小鼠具有保护作用。     

巨细胞病毒感染对染色体畸变率的影响

用 CMV 包涵体法确定个体 CMV 感染,分别在人类生命期的三个不同阶段设CMV 感染阳性和阴性比较组,胚胎期以胚胎绒毛组织滋养层细胞染色体为观察指标;新生儿期和成年人期以外周血淋巴细胞染色体为观察指标,发现胚胎绒毛组织染色体 CA 率在CMV 感染阳性组显著高于阴性组(P<0.01),而在新生儿期和成年人期的外周血染色体 CA率检测中,CMV 阳性组和阴性组比较未发现显著差异。     

施保利通对巨细胞病毒感染小鼠唾液腺病毒滴度的影响

目的:探讨施保利通对巨细胞病毒(CMV)感染小鼠唾液腺中CMV滴度的影响。方法:建立全身播散性鼠巨细胞病毒(MCMV)感染小鼠模型,随机分为模型对照组、施保利通组、更昔洛韦组及联合治疗组,另设正常对照组,每组25只。应用细胞病变效应(CPE)法检测各组小鼠唾液腺MCMV感染性病毒滴度并比较其变化。结果:感染病毒后模型对照组小鼠唾液腺MCMV感染性病毒滴度逐渐升高,第14天达高峰;其他各组先迅速升高,第7天后,施保利通组未再有明显变化,更昔洛韦组及联合治疗组均降低。第14天时施保利通组病毒滴度明显低于模型对照组,但较更昔洛韦组高,两组比较差异有统计学意义(F=117.54,P<0.05),联合治疗组未检测到MCMV。各组峰值比较,施保利通组和更昔洛韦组低于模型对照组,高于联合治疗组,差异均有统计学意义(F=45.06,P<0.01)。结论:施保利通可降低小鼠唾液腺中MCMV感染性病毒滴度,与更昔洛韦联合用药可增加抗病毒疗效,具有协同作用。     

苦参碱对巨细胞病毒感染小鼠肝、肺病毒载量的影响

目的:探讨苦参碱对巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)感染小鼠重要脏器肝、肺组织中鼠巨细胞病毒(MCMV)-DNA载量的影响。方法:建立全身播散性CMV感染小鼠模型,随机分为模型对照组、苦参碱治疗组和更昔洛韦治疗组,另设正常对照组,每组32只。采用荧光定量PCR方法检测各组小鼠肝、肺组织中MCMV-DNA载量并比较其变化。结果:正常对照组小鼠肝、肺组织中MCMV-DNA检测呈阴性,其余三组于接种病毒后第3天可以检测到较高水平MCMV-DNA,第7天达高峰。第14天肝组织病毒载量比较,更昔洛韦治疗组<苦参碱治疗组<模型对照组,差异有统计学意义(F=63.10,P<0.01);肺组织病毒载量变化趋势同肝组织病毒载量,第14天肺组织病毒载量比较,更昔洛韦治疗组<苦参碱治疗组<模型对照组,差异有统计学意义(F=194.88,P<0.01)。结论:苦参碱可以降低CMV感染小鼠肝、肺组织MCMV-DNA载量,具有抗MCMV作用。     

住院患儿巨细胞病毒感染研究

本文随机抽取９３例住患儿进行尿液和唾液ＣＭＶ分离。结果：ＣＭＶ总检出率７８．４％；婴儿肝炎综合征、呼吸道感染、智力低下和／或并存继发性癫痫及其它疾病ＣＭＶ检出率分别为８５．７％、７３．１％、９０％及６６．９唾液标本检出率高于尿液标本。提示本地区半数以上小儿已有ＣＭＶ感染，且随年龄增长，感染率增加。ＣＭＶ感染可累及小儿肝、肺、中枢神经系统等。引起民多种脏器损害；同时要考虑与疾病无关的ＣＭＶ隐性感染的     

双黄连对人巨细胞病毒感染小鼠肝组织病毒DNA载量影响

目的研究双黄连(Shuanghuangliang,SHL)粉针剂对人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的小鼠肝组织病毒DNA载量的影响。方法以HCMV感染小鼠建立小鼠肝炎模型后,用不同剂量双黄连腹腔注射进行治疗。用药10d后,颈椎脱臼处死动物取肝脏,用荧光定量PCR的方法检测小鼠肝组织HCMVDNA载量;HE染色法对肝脏组织作病理检查;眼眶静脉丛采血用于ALT、AST酶活性的测定。结果双黄连大、中剂量治疗组肝组织中HCMVDNA载量平均值分别为8.3261copies/mg、9.1476copies/mg,较感染模型组(载量平均值为3875.4760copies/mg)降低(P<0.01),与更昔洛韦(ganciclovir,DHPG)治疗组(载量平均值为9.3280copies/mg)差异无显著性(P>0.05),双黄连小剂量组(载量平均值为3812.8980copies/mg)与感染模型组差异无显著性(P>0.05);双黄连大、中剂量治疗组肝脏ALT、AST水平较模型组降低,病理损伤明显减轻;小剂量治疗组与感染模型组无差异;双黄连大、中剂量组和更昔洛韦组差异无显著性。结论双黄连能明显降低HCMV感染小鼠肝组织中病毒DNA载量,能减轻HCMV性肝炎模型鼠肝功能损害,改善肝脏病理变化。     

淫羊藿总黄酮对大鼠实验性骨质疏松生化学指标的影响

目的　探讨淫羊藿总黄酮防治大鼠实验性骨质疏松症过程中骨代谢生化指标的变化及其意义。方法　采用维甲酸灌胃造成大鼠实验性骨质疏松症模型 ,检测灌服高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化 ,并与模型组、正常对照组和阳性对照组进行比较。结果　 3个剂量组的血清E2 、T和BGP水平均高于模型组 ,尿Ca/Cr、DPD和血清PTH水平均低于模型组 ,股骨Ca、P和骨密度与正常对照组接近 ,与模型组差异有显著性。结论　淫羊藿总黄酮对维甲酸造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用 ,骨代谢生化指标变化情况与骨密度的变化相一致 ,说明骨代谢生化指标对骨质疏松症的诊断和治疗具有重要意义     

人巨细胞病毒对细胞周期调控靶点-P53的影响

目的了解HCMV对细胞周期调控靶点P53的影响。方法建立体外HCMV感染人胚肺成纤维细胞(HEL)模型,(1)倒置显微镜观察不同时间下各组HEL的病变效应。(2)S-P免疫组化法检测P53蛋白的表达。(3)FQ-PCR法检测HEL细胞内HCMVDNA拷贝数。结果(1)HCMV感染使HEL细胞发生病变,细胞内HCMVDNA拷贝数随时间的延长逐渐增加。(2)S-P免疫组化结果提示HCMV感染使HEL细胞P53蛋白的水平升高。结论HCMV的感染改变了细胞内P53的水平,可能影响其在细胞周期中的正常功能,营造有利于病毒复制的环境。     

加味玉屏风散及单味中药对假丝酵母菌的体外抑菌作用

目的：观察加味玉屏风散及单味中药对假丝酵母菌的体外抑菌效果,旨在寻求中药在抗真菌方面的优势作用。方法用琼脂稀释法观察加味玉屏风散各组和单味中药黄连、茵陈、炙黄芪对104株假丝酵母菌的体外抑菌作用。结果玉屏风散＋黄连、玉屏风散＋黄连＋茵陈、黄连的抑菌效果较好,50％最低抑菌浓度（MIC50）分别为6．25、25．00、1．56 g· L－1,且对热带假丝酵母菌的抑菌效果最好,其次为光滑假丝酵母菌、白假丝酵母菌和葡萄牙假丝酵母菌,对近平滑假丝酵母菌抑菌效果较差。玉屏风散和炙黄芪仅对热带假丝酵母菌有一定抑菌效果,未发现茵陈对假丝酵母菌有抑菌作用。结论黄连及含黄连的加味玉屏风散对各种假丝酵母菌均有抑制作用,尤其是对耐药率较高的非白假丝酵母菌有较强的抑菌功效。这点对临床研究更有价值。     

淫羊藿总黄酮对体外培养骨细胞功能的影响

目的 :观察淫羊藿总黄酮 (HEF)对体外培养成骨细胞以及破骨细胞功能的影响。方法 :分别用酶消化法和体外机械分离法获得新生SD大鼠成骨细胞、破骨细胞 ,在培养液中分别加入不同浓度的HEF ,观察成骨细胞的增殖功能、分化功能和矿化功能。以抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞数目、形态 ,Image ProPlus图像软件分析骨片上骨吸收陷窝的数目和面积。结果 :增殖率测定HEF浓度为 10 - 4mol·L- 1时与对照组比较差异有非常显著意义 (P <0 .0 1) ;碱性磷酸酶活性浓度≥ 10 - 8mol·L- 1,差异有显著意义 ;矿化结节面积/孔HEF 10 - 10mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比均增加(P <0 .0 1)。骨片培养 3d ,吸收陷窝计数的结果显示 ,各浓度对破骨细胞吸收功能均有抑制作用 ,仅10 - 4mol·L- 1组有统计学意义 (P <0 .0 5 )。陷窝面积 10 - 10 mol·L- 1组和 10 - 4mol·L- 1组与对照组相比 ,均无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 :HEF可以通过影响成骨细胞增殖、分化、矿化促进骨形成 ;而在体外减少破骨细胞数目 ,减弱破骨细胞吸收功能。     

还春口服液提取工艺探讨

目的：研究还春口服液提取工艺。方法：采用正交设计法,以高效液相色谱法测定的淫羊藿苷含量为指标,考察(A)提取时间,(B)加水量,(C)煎煮次数三个因素。结果：优化的还春口服液提取工艺为A1B2C2：。结论：提取时间为4小时,加水量为10倍,煎煮次数为2次,可基本提取完全。     

小鼠巨细胞病毒对小鼠体外受精、卵裂和囊胚形成的影响

目的探讨小鼠巨细胞病毒对小鼠成熟卵母细胞体外受精、卵裂和囊胚形成的影响。方法在IVF-30培养液中加入100TCID50、10TCID50、1TCID50小鼠巨细胞病毒，观察小鼠成熟卵母细胞体外受精、卵裂和囊胚形成情况。结果与正常对照组比较．各病毒组的卵母细胞体外受精率、卵裂率以及囊胚形成率差异均无显著性意义。结论小鼠巨细胞病毒对小鼠卵母细胞体外受精、卵裂和囊胚形成无明显影响。     

口服环孢素对鼠巨细胞病毒慢性感染的影响及其机理

长期口服环孢素(cyclosporine,CsA)使感染鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)的小鼠脾和唾液腺中病毒滴度显著增高,而且维持脾中病毒的慢性感染。CsA显著降低血清干扰素(interferon,IFN)水平,但对脾天然杀伤细胞(na-tural killer cell,NK cell)活性无明显影响。被动输入免疫鼠脾细胞可保护小鼠免受MCMV感染,而且该保护依赖T细胞,具有病毒特异性和受H-2组织相容抗原(H-2 histocompatibility antigen)限制。长期使用CsA取消了上述保护作用。本实验结果表明CsA可能通过抑制细胞毒性T淋巴细胞及干扰素诱生使MCMV在脏器中滴度升高,并且维持了病毒的慢性感染。     

黄芪对人成纤维细胞ICAM—1、CD126表达及合成ECM的影响

目的观察黄芪对人成纤维细胞ICAM_1、CD126 表达及合成细胞外基质(ECM)的影响 ,探讨其抗肝纤维化的机制。方法采用细胞培养法 ,于细胞培养液中加入不同浓度的药物 ,通过流式细胞仪观察经分子探针标记的ICAM_1、CD126 阳性细胞数变化 ,用放免法测定培养上清HA、LA含量。结果人成纤维细胞表达ICAM_1、CD126 阳性率分别为(82 63±5.94) %和(77.95±4.68) %,加入黄芪组二者阳性率明显下降。但黄芪对成纤维细胞合成HA无影响 ,对LN影响较小。结论黄芪能抑制成纤维细胞表达ICAM_1和CD126,这可能是其抗肝纤维化机理之一 ,它对合成ECM影响较小。     

黄蓝颗粒体外的抗巨细胞病毒、风疹病毒作用

目的：探讨黄蓝颗粒体外抗巨细胞病毒（HCMV）、风疹病毒（RuV）活性及其作用机制。方法：根据病毒复制周期，设计3种药物抗病毒作用方式来观察黄蓝颗粒对HCMV、RuV的作用。通过观察细胞病变效应（CPE）、噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞存活率，以确定该药物体外抗HCMV、RuV的活性。结果：黄蓝颗粒既不能阻断病毒吸附，亦不能直接杀灭病毒，而是通过抑制病毒生物合成发挥抗病毒活性。黄蓝颗粒对HEL细胞的半数毒性浓度（TC50）为1．71g·L^-1，对HCMV半数抑制质量浓度（IC50）为0．09g·L^-1，治疗指数（TI）为19．0；黄蓝颗粒对Vero细胞的TC50为1．96g·L^-1，对RuV的IC50为0．10g·L^-1，TI为19．6。结论：黄蓝颗粒通过抑制病毒生物合成机制发挥抗HCMV、RuV的作用。     

巨细胞病毒感染对定向干细胞增殖的影响及黄芪的干预作用

目的:探讨巨细胞病毒(CMV)感染对定向干细胞(CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mk及CFU-TL)体外增殖抑制的影响及黄芪的干预作用。方法:采用造血细胞培养技术,培养、观察、计数CMV-AD169感染CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mk及CFU-TL后各祖细胞集落及维持时间;用聚合酶链反应(PCR)和荧光定量PCR技术检测集落细胞内CMV-AD169DNA;根据细胞毒性实验结果,将黄芪作用于CMV感染的CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mk及CFU-TL祖细胞,再分别计数集落、峰期及维持时间。结果:(1)CMV感染组CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mk及CFU-TL集落数较对照组明显减少(P<0.01);集落维持时间CMV感染组较对照组明显缩短;(2)用PCR在感染组集落细胞内检测到HCMV-DNA的存在;(3)黄芪作用于CMV感染的定向干细胞后,与病毒组比较集落数明显提高(P<0.01),集落增殖提高率分别为CFU-GM27.2%;CFU-E45.2%;BFU-E49.1%;CFU-Mk11.9%,CFE-TL55.2%,且集落维持时间明显延长;(4)荧光定量PCR技术检测集落细胞内CMV-DNA复制较CMV感染组明显减少(P<0.01)。结论:CMV-AD169株在体外能明显抑制CFU-Gm、CFU-E、BFU-E、CFU-Mk及CFU-TL集落细胞的增殖;在体外黄芪有明显抗CMV作用,能促进CMV感染的定向干细胞增殖。